不同破壁方法提取酵母总RNA的比较

选择液氮碾磨、反复冻融、超声波、加玻璃珠漩涡振荡和蜗牛酶酶解5种方法破碎酵母菌细胞壁,再使用Trizol法提取酵母菌总RNA,通过对总RNA进行质量浓度和纯度分析,比较不同破壁方法对酵母菌总RNA提取的影响。结果表明：在使用Trizol法提取酵母菌总RNA的实验中,反复冻融和液氮碾磨是较为有效且简便的酵母菌细胞壁破碎方法。     

酵母破壁酶和蜗牛酶辅助TRIzol试剂法提取酿酒酵母总RNA

该研究以酵母破壁酶、蜗牛酶破碎酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）细胞壁,再使用总核糖核酸（RNA）提取试剂（TRIzol）法提取酵母总RNA,通过对总RNA进行浓度与纯度的分析,比较酶处理对RNA提取的影响。结果表明,酵母破壁酶的最佳提取条件为加酶量37.5 μL,提取温度27 ℃,提取时间15 min。在此最佳提取条件下,提取RNA质量浓度为1 079.05 ng/μL,A260 nm/A280 nm为2.10,A260 nm/ A230 nm为2.15;蜗牛酶的最佳提取条件为加酶量30 mg/mL,提取温度37 ℃,提取时间30 min。在此最佳提取条件下,提取RNA质量浓度为1 673.39 ng/μL,A260 nm/A280 nm为1.99,A260 nm/A230 nm为1.81。结果显示,酵母破壁酶的提取效果优于蜗牛酶。     

红酵母类胡萝卜提取方法研究

对红酵母ＲＹ－９８１细胞壁破碎及其类胡萝卜浸提的方法进行了较详细的筛选和条件优化研究。结果表明：酸热法是红酵母破壁较理想的方法,其最优条件组合为盐酸浓度２ｍｏｌ／ｌ、盐酸用量１２ｍｌ／ｇ菌体、盐酸浸泡时间４０ｍｉｎ和沸水浴处理４ｍｉｎ;丙酮是从红酵母细胞碎片浸提类胡萝卜素较优越的有机溶剂,其参考用量为２０ｍｌ／ｇ菌体。在此破壁和浸提条件下,红酵母ＲＹ－９８１类胡萝卜素提取率可达３０７．９μｇ／ｇ菌体。     

一种RNA提取试剂盒--TRIZOL的使用方法初探

以酿酒酵母为原料，利用TRIZOL试剂快速提取法，得到的总RNA不完整，只有5s rRNA一条条带，经过对该试剂盒的改进后提取的总RNA呈现28s rRNA，18s rRNA和5s rRNA三条清晰的条带，很少有降解，其A260／A280值可达1．946，A260／A230值为2．070，具有很高的纯度。     

不同破壁方法对提取废啤酒酵母RNA的影响

从啤酒酵母中提取核酸的方法有很多,常用的是盐法和碱法.本研究对这两种方法提取核酸效果进行了比较,实验说明结果碱法对酵母破壁效果好于盐法,但是核酸提取的综合效果却不如盐法.     

盐法提取啤酒废酵母RNA的研究

采用正交设计试验法对盐法提取啤酒废酵母RNA工艺过程中的酵母浓度、NaCl浓度、抽提温度和抽提时间等因素进行了研究。用方差分析处理，实验结果表明：酵母浓度8％，NaCl 6％，抽提温度95℃，抽提时间6h是提取啤酒废酵母RNA的适宜条件，并将其用于啤酒厂废酵母泥的RNA提取试验，得率为3．23％。     

15种常见食(药)用菌的3种总DNA提取方法比较研究

本文研究了15种主要食(药)用菌共16个样品的3种总DNA提取方法之比较，它们分别是CTAB法、食品DNA提取试剂盒法和QIAGEN试剂盒法。提取结果分别经过核酸蛋白分析仪、电泳以及RAPD检测。紫外检测结果表明3种方法提取到的总DNA质量均不理想，电泳结果表明3种方法均能提取出小平菇、红菇、香菇、双孢蘑菇、竹荪、黑木耳、姬松茸等7种食(药)用菌总DNA，RAPD检测结果表明CTAB法适用于所有15种食(药)用菌提取用于PCR的总DNA。根据以上结果，我们认为可以选用CTAB法作为在检测这些食(药)用菌的转基因成分时的总DNA提取方法。     

红酵母类胡萝卜素提取方法研究

对红酵母RY-98细胞壁破碎及其类胡萝卜素浸提的方法进行了较详细的筛选和条件优化研究。结果表明:酸热法是红酵母破壁较理想的方法,其最优条件组合为盐酸浓度2 mol/L、盐酸用量12mL/g菌体、盐酸浸泡时间40 min和沸水浴处理4 min;丙酮是从红酵母细胞碎片浸提类胡萝卜素较好的有机溶刺,其参考用量为20 ml/g菌体。在此破壁和浸提条件下,红酵母RY-98类胡萝卜素提取率可达450.2μg/g菌体,比优化前提高37.1％。     

从啤酒酵母中提取RNA新工艺的研究

研究了从啤酒酵母中提取RNA的新生产工艺,即在均质法和氨解法的基础上,将两者结合为均质-　氨解法。得出最佳工艺条件:酵母浓度10%,均质破壁循环2次,氨浓度0.6%,三氯乙酸浓度4%,提取30min。将上清液循环回用,RNA平均净得率>3%,第3次循环时净得率最高。     

不同酿酒酵母发酵特性及抗氧化特性的比较

该文比较了不同来源的5株葡萄酒酿酒酵母(2株野生酿酒酵母CC17、SC5,2株实验室常用工程菌株BY4743、INVSC1,以及1株工业酿酒酵母菌株CICC1450)的生长曲线、泡沫产生能力、H2S产生能力、CO2产生能力,结果表明该实验室分离得到的野生酿酒酵母CC17具有良好的发酵特性.经不同浓度的氧化性物质H2O2和甲萘醌分别处理后得知,CC17在抗氧化性能上具有明显优势,说明该菌株在实际生产中具有开发利用的潜力.     

An improved method for whole protein extraction from yeast Saccharomyces cerevisiae

A new method for protein extraction from yeast Saccharomyces cerevisiae cells is described. This method involves the use of LiAc and NaOH to enhance the permeability of yeast cell wall prior to protein extraction with SDS-PAGE sample buffer. It was safe and efficient compared to other methods reported so far in the literature. The proteins extracted with this new method retained their immunoreactive properties and are suitable for most applications in molecular biology studies.     

富含核糖核酸酿酒酵母的选育及其高密度发酵工艺

该研究首先以酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）J-5为出发菌株进行诱变选育,筛选出一株核糖核酸（RNA）含量优于菌株J-5的诱变菌株J-5-9,其RNA含量在摇瓶中达到了13.12%,比出发菌株提高了10.62%。选取糖蜜为碳源,应用正交试验优化菌株J-5-9发酵培养基组成为：糖蜜3%,酵母浸粉2%,磷酸二氢钾0.01%,谷氨酸钠0.2%,硫酸亚铁0.1%。最后利用优化发酵培养基和碳源、氮源和磷源的流加补料工艺,在10 L发酵罐中培养诱变菌株J-5-9,RNA含量达到8.11%,比优化前提高了18.22%,同时细胞生物量达到188 g/L（湿质量）,实现了酿酒酵母高产RNA的高密度发酵。这说明诱变菌株J-5-9是一株很有潜力的工业化生产菌株。     

酿酒酵母温度敏感性突变株的选育

为获得酵母胞内产物的高效分泌,以酿酒酵母二倍体(2n)及单倍体(n)为出发菌,经紫外诱变处理,筛选获得5株可能具有温度敏感性的突变株。为进一步鉴定,以野生菌Y_1为对照菌,测定其胞外核酸、蛋白质及果糖-1,6-二磷酸(FDP)的含量,发现突变菌株Ts_4(2n)自溶程度最高,其核酸、蛋白质渗透率达1.709,1.483,胞外FDP浓度为38μg/mL,较Y_1(2n)提高了24.1%。此外突变株Ts~*_2(n)、Ts~*_3(n)也会发生一定程度的自溶。因此,该试验共获得温度敏感性突变株3株,即Ts_4(2n)、Ts~*_2(n)和Ts~*_3(n)。     

Purification of isocitrate lyase from Saccharomyces cerevisiae

Isocitrate lyase purified to homogeneity from Saccharomyces cerevisiae was composed of four identical subunits with a molecular mass of 75 kDa. The enzyme was most active at pH 7.0 in the presence of 5 mM-Mg2+. The Km value for threo-Ds-isocitrate was 1.4 mM. Isocitrate lyase was shown to be thermostable at 50 degrees C for 60 min at a high salt concentration, but rapidly lost activity at -20 degrees C or by dialysis.     

Bioconversion of heptanal to heptanol by Saccharomyces cerevisiae

Saccharomyces cerevisiae is widely known for its catalytic activity on substrates such as aldehyde and ketone. Interestingly, the activity of S. cerevisiae on heptanal (C₆H₁₃CHO), in spite of its being a very common aldehyde, has not been explored. The main objective of this study was therefore to investigate the bioconversion of heptanal, using a strain of the yeast S. cerevisiae. Bioconversion parameters such as incubation period, pH, concentration of substrate, yeast and maltose were also optimized. The study revealed heptanol as the major product. The optimum conditions for biotransformation were found to be: 3 days incubation; pH 7.0; heptanal concentration 0.15 ml/100 ml medium; and S. cerevisiae concentration of 0.15 g/100 ml medium. Reduction in maltose content (to 0.3 g maltose/100 ml medium) showed increased conversion of heptanal. Heptanoic acid and 2‐hydroxyheptanoic acid were obtained as two minor co‐products. The overall study showed that S. cerevisiae converted heptanal to heptanol by a yield of 68.9 ± 1.1% w/w under optimum conditions. Copyright © 2010 John Wiley & Sons, Ltd.