盐酸小檗碱抑制指状青霉的作用机制

本实验主要对盐酸小檗碱(berberine hydrochloride,BH)抑制指状青霉(Penicillium digitatum)生长的活性以及可能的作用机制进行探讨.结果表明,BH抑制指状青霉生长的最低抑菌质量浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌质量浓度(m...     

乳酸菌产苯乳酸对指状青霉的抑菌活性及作用机理

为探究乳酸菌Lactobacillus plantarum CKXP13和L. plantarum CWXP24产苯乳酸的能力以及苯乳酸对柑橘绿霉病的控制效果及其抑菌机理,本实验使用高效液相色谱法测定这两株乳酸菌的苯乳酸产量,并通过研究苯乳酸处理后指状青霉的孢子存活率、菌落直径、菌丝形态、胞外电导率来探究其抑菌机理,最后以柑橘果实绿霉病干预实验探究苯乳酸对绿霉病的控制效果。结果表明,L. plantarum CKXP13、L. plantarum CWXP24均能产生苯乳酸,产量分别为42.4 mg/L和91.9 mg/L,苯乳酸质量浓度为2.5、5.0、10.0 mg/mL条件下,指状青霉的孢子存活率、菌落直径随苯乳酸质量浓度上升而显著降低（P<0.05）,菌丝也随苯乳酸质量浓度升高出现表面粗糙、相互缠绕、形成塌陷或树瘤状凸起的情况,同时乳酸菌还能增强病原菌细胞膜的通透性,促进细胞内容物泄漏,导致病原菌死亡。果实绿霉病干预实验证明,10、20 mg/mL苯乳酸都能有效控制柑橘果实绿霉病。综上所述,苯乳酸作为天然杀菌剂在控制柑橘采后绿霉病方面具有良好的应用潜力和开发前景。     

柠檬醛对指状青霉菌丝体膜脂过氧化的影响

探讨柠檬醛对指状青霉菌丝体膜脂过氧化的影响。研究发现,经最小抑菌浓度（minimal inhibitoryconcentration,MIC,2.0 μL/mL）和最小杀菌浓度（minimal fungicidal concentration,MFC,4.0 μL/mL）柠檬醛处理后,指状青霉菌丝体发生扭曲变形且表面出现明显褶皱,表明细胞完整性遭到破坏。不同质量浓度柠檬醛处理指状青霉后,其胞外电导率及K＋泄漏量均显著增加,而总脂质含量降低,说明柠檬醛处理能增加指状青霉细胞膜通透性,导致细胞膜结构遭受破坏。进一步研究发现,MIC、MFC柠檬醛处理促使指状青霉总丙二醛含量、过氧化氢含量和脂氧合酶、过氧化物酶活性升高。本研究结果表明：柠檬醛处理可诱导指状青霉菌丝体发生严重的膜脂过氧化损伤,损伤细胞膜结构,从而抑制指状青霉菌丝体生长。     

不同发育期椪柑精油对意大利青霉和指状青霉的抑制作用

对不同发育期(7、8、9和10月)的椪柑(Citrus reticulata Blanco)果皮精油进行GC-MS分析,共鉴定出柠檬烯(47.28％ ～58.40％)、γ-松油烯(8.27％ ～13.23％)、β-芳樟醇(3.48％ ～7.86％)、β-月桂烯(6.24％ ～7.50％)、α-蒎烯(5.07％～6.05％)、β-蒎烯(2.30％～3.45％)和辛醛(2.04％ ～2.48％)等50种萜烯类化合物.椪柑果皮精油及其所含的6种潜在抑菌组分(柠檬醛、辛醛、壬醛、癸醛、β-芳樟醇和α-松油醇)的体外抑菌实验结果表明:不同发育期椪柑果皮精油对意大利青霉(Penicillium italicum)的抑制作用要强于指状青霉(P.digitatum);潜在抑菌组分中柠檬醛和辛醛对意大利青霉的抑菌效果最好,壬醛和辛醛对指状青霉的抑菌效果最好.柠檬醛和辛醛对意大利青霉的最小抑菌浓度(MIC)、壬醛和辛醛对指状青霉的MIC均为0.50μL/mL;β-芳樟醇和α-松油醇对意大利青霉和指状青霉的MIC均为2.00μL/mL.     

椪柑精油对指状青霉的抑制作用

采用水蒸气蒸馏法提取椪柑(Citrus reticulate Blanco)果皮精油,并用GC-MS对其成分进行分析,共鉴定出39种成分,主要包括柠檬烯(12.18%)、β-芳樟醇(10.88%)、γ-松油烯(9.37%)、5-亚乙基-1-甲基-环庚烯(9.37%)、β-月桂烯(9.36%)、β-蒎烯(8.12%)、2-蒈烯(7.8%)、α-蒎烯(6.74%)、辛醛(5.14%)、α-侧柏烯(3.99%)和β-水芹烯(3.31%)等。并测定不同体积分数椪柑精油对指状青霉孢子萌发和菌丝体生长的影响。结果表明：当体积分数不高于0.25%时,椪柑精油对孢子萌发和菌丝体生长均有促进作用;精油体积分数高于5%时,对孢子萌发和菌丝体生长表现出抑制作用。本实验表明椪柑精油对指状青霉生长具有明显抑制作用。     

不同发育期椪柑精油对意大利青霉和指状青霉的抑制作用

对不同发育期（7、8、9和10月）的椪柑（CitrusreticulataBlanco）果皮精油进行GC-MS分析,共鉴定出柠檬烯（47.28%～58.40%）、γ-松油烯（8.27%～13.23%）、β-芳樟醇（3.48%～7.86%）、β-月桂烯（6.24%～7.50%）、α-蒎烯（5.07%～6.05%）、β-蒎烯（2.30%～3.45%）和辛醛（2.04%～2.48%）等50种萜烯类化合物。椪柑果皮精油及其所含的6种潜在抑菌组分（柠檬醛、辛醛、壬醛、癸醛、β-芳樟醇和α-松油醇）的体外抑菌实验结果表明:不同发育期椪柑果皮精油对意大利青霉（Penicillium italicum）的抑制作用要强于指状青霉（P.digitatum）;潜在抑菌组分中柠檬醛和辛醛对意大利青霉的抑菌效果最好,壬醛和辛醛对指状青霉的抑菌效果最好。柠檬醛和辛醛对意大利青霉的最小抑菌浓度（MIC）、壬醛和辛醛对指状青霉的MIC均为0.50μL/mL;β-芳樟醇和α-松油醇对意大利青霉和指状青霉的MIC均为2.00μL/mL。      

柠檬醛对指状青霉糖酵解的影响

本研究测定了不同浓度柠檬醛对指状青霉呼吸代谢及糖酵解途径相关指标的影响。结果表明,柠檬醛能明显抑制指状青霉的呼吸代谢,1.0μL/m L浓度下柠檬醛与糖酵解途径、三羧酸循环途径以及磷酸戊糖途径典型抑制剂(碘乙酸,丙二酸,磷酸钠)的叠加率分别为15.00%、12.60%和30.70%,且此结果显示糖酵解途径受到了柠檬醛的影响。经最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC,2.0μL/m L)和最小杀菌浓度(minimal fungicidal concentration,MFC,4.0μL/m L)柠檬醛处理后,指状青霉糖酵解途径重要的中间产物葡萄糖和丙酮酸的含量显著增加,己糖激酶(Hexokinase,HK)的活性下降,6-磷酸果糖激酶(Phosphofructokinase,PFK)和丙酮酸激酶(Pyruvate kinase,PK)的活性增加。本研究表明柠檬醛能够抑制指状青霉的呼吸代谢,改变指状青霉糖酵解途径关键酶的活性和重要中间产物的含量。     

α-松油醇对指状青霉抑霉唑抗性菌株Pdw03的抑制作用

本研究探讨了α-松油醇对指状青霉抑霉唑抗性菌株Pdw03的抑制作用及其抑菌机理。体外实验结果表明α-松油醇抑制Pdw03生长的最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）和最小杀菌浓度（minimal fungicidal concentration,MFC）均为4.00 μL/mL;体内实验研究发现MFC和5 MFC α-松油醇可明显降低接种Pdw03椪柑果实的绿霉病发病率和发病直径;碘化丙啶（propidium iodide,PI）染色实验发现,经1/2 MIC α-松油醇处理后,Pdw03的细胞膜完整性降低,麦角固醇含量显著降低（P＜0.05）,麦角固醇合成相关基因ERG9表达量显著下调（P＜0.05）。综上,α-松油醇通过抑制ERG9基因的表达影响菌株Pdw03的生长,可作为采后柑橘病害防治的有效替代品。     

砂糖橘精油化学组成及对指状青霉的抑菌活

采用水蒸气蒸馏法提取砂糖橘(Citrus reticulate Blanco)果皮精油,并用GC-MS对其成分进行分析,共鉴定出17种成分,主要包括柠檬烯(77.99%)、β-月桂烯(3.74%)、β-水芹烯(2.78%)、罗勒烯(2.64%)、β-芳樟醇(2.35%)、α-蒎烯(1.60%)、正辛醇(1.54%)、癸醛(1.24%)、4-松油醇(1.10%)和4-十一烯(1.04%)等。测定不同添加量(0.16、0.31、0.63、1.25、2.50、5.00、10.00μL/mL)砂糖橘精油对指状青霉孢子萌发和菌丝体生长的作用。结果表明：低添加量(＜2.5μL/mL)砂糖橘精油对指状青霉孢子萌发无影响甚至有促进作用,对指状青霉菌丝体生长有轻微的抑制;而高添加量(10μL/mL)则显著抑制孢子萌发和菌丝体生长(P＜0.05)。本实验表明砂糖橘精油在防治指状青霉具有一定作用。     

不同环境因子对扩展青霉和指状青霉生长和产酸的影响

扩展青霉 (Penicillium expansum)和指状青霉(Penicillium digitatum)是两种典型采后致病菌,其中扩展青霉能够引起苹果、梨、猕猴桃、樱桃等水果的采后贮藏期腐烂,指状青霉则是引起柑橘类水果采后及贮藏期间腐烂的主要致病菌之一。为明确两株青霉菌生长及产酸的适宜环境条件,本试验对不同营养、温度、pH值、光照等条件下青霉菌的生长情况进行了研究。结果表明,在实验给定的条件下,最适宜扩展青霉生长和产酸的培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基,温度分别为25℃和20℃,pH分别为4和10,均为黑暗环境;最适宜指状青霉生长和产酸的培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基,温度均为20℃,pH分别为4和8,均为黑暗环境。这为后续对两株菌株产酸及致病性的探究提供科学依据。     

柠檬醛和辛醛混合物对指状青霉的抑制作用

本研究采用琼脂稀释培养法测定柠檬醛、辛醛以及柠檬醛+辛醛混合物(V/V,4:1)对指状青霉菌丝体生长的影响,并对柠檬醛+辛醛混合物抑菌机制进行初步探讨。结果表明,柠檬醛+辛醛混合物(V/V,4:1)能明显抑制指状青霉菌丝体生长,最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimal fungicidal concentration,MFC)均为2.50μL/m L,而柠檬醛的MIC和MFC分别为2.50μL/m L和5.00μL/m L,辛醛的MIC和MFC分别为0.63μL/m L和2.50μL/m L。扫描电镜结果显示,经MIC(MFC)的柠檬醛+辛醛混合物处理后,指状青霉菌丝体表面发生严重塌陷和多重褶皱,菌丝结构发生不规则扭曲,表明细胞完整性遭到严重破坏。此外,指状青霉菌丝体胞外p H、胞外电导率以及260 nm处的吸光度值均随柠檬醛+辛醛混合物(V/V,4:1)浓度增加显著增加。本研究结果表明,柠檬醛+辛醛混合物(V/V,4:1)能破坏指状青霉细胞结构的完整性,增加细胞膜通透性,导致细胞内物质泄漏,从而导致菌丝体死亡。     

指状青霉V-ATP酶H亚基蛋白的功能

目的:通过基因干扰和过表达技术,研究V-ATP酶H亚基(V-ATPase membrane subunit H,VMAH)蛋白在柑橘绿霉病菌指状青霉生长中的生理功能,及其作为抗柑橘绿霉病药物作用靶点的可行性.方法:采用菌丝生长法和孢子萌发法,研究沉默和过表达VMAH基因对正常和胁迫条件下指状青霉细胞生长特性的影响.结果...     

壳聚糖对柑橘青、绿霉病病原菌的抑菌效果研究

应用PDA培养基多次分离并纯化培养得到柑橘青霉病病原菌、绿霉病病原菌,加入不同浓度壳聚糖的PDA培养基对两种病原菌进行接种培养并观察抑菌效果。结果表明:壳聚糖对两种病原菌有一定的抑制能力,其中对青霉病病原菌的抑制能力强。壳聚糖浓度为1.3%时抑制率最高,在第2d时对青、绿霉病病原菌的抑制率分别达到71.5%、46.37%。     

橙子果皮诱导抗病组分对意大利青霉的抑菌活性及作用机制

对前期研究发现的毛霉诱导脐橙果皮产生的抗病性红色物质组分进行分离纯化,并分析其对柑橘意大利青霉的抑菌活性及作用机制。结果表明,在50～200 μg/mL质量浓度下,红色物质组分对意大利青霉孢子萌发、芽管伸长、菌落生长和菌丝生物量增加表现出很强的剂量依赖型抑制作用。进一步研究表明：红色物质处理改变了菌丝细胞壁几丁质结构与分布,降低了几丁质含量;破坏了细胞膜通透性,降低了细胞膜总脂质含量和麦角固醇含量,影响了细胞膜的正常功能。说明红色物质作为替代化学杀菌剂的新型柑橘采后安全保鲜剂具有良好的研究和开发前景。     

江香薷活性成分香芹酚对指状青霉的抑菌作用

以指状青霉菌(Penicillium digitatum)为供试菌,研究江香薷活性成分香芹酚的抑菌活性及其抑菌机理。本文采用二倍稀释法测定其最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MFC),以此评价香芹酚对指状青霉菌的抑菌效果;并通过研究香芹酚对指状青霉的菌丝形态变化、孢子萌发率、细胞膜渗透性和菌体内可溶性糖含量,阐述香芹酚对指状青霉菌的抑菌机理。结果表明:香芹酚对指状青霉菌的MIC、MFC分别为0.125 mg/mL和0.25 mg/mL;经不同浓度香芹酚处理后的指状青霉,菌丝形态发生明显改变,孢子萌发率显著降低,细胞膜渗透性增强,菌体内可溶性糖含量降低。说明香芹酚能有效抑制指状青霉菌的孢子萌发,破坏细胞膜结构完整性,内含物外渗,降低营养物质含量,影响病原菌正常生长发育,从而发挥抑菌效果。