G蛋白偶联雌激素受体研究进展及在食品功能评价中的应用

大量研究结果证明,尽管植物化学物、中草药和植物雌激素类化合物都具有丰富性、多样性,但是在结构和功能上却显示出很多共性——几乎都具有雌激素类功能。研究还发现,大多数植物雌激素类化合物均能与雌激素受体（estrogen receptors,ERs）,特别是ERα和ERβ相识别,进一步与核受体超家族形成互作网络,调节细胞核中基因的表达、修饰,从而控制机体的营养和能量代谢以及表观遗传适应。但一个关键的问题是,这些植物雌激素类化合物不仅可以控制慢速的以转录为基础的信号途径,还可以调节快速的以钙离子通道为基础的神经与内分泌信号途径,而后者需要依赖于G蛋白偶联受体（G-protein coupled receptors,GPCRs）。近年来的研究结果发现,GPR30/G蛋白偶联雌激素受体（G-protein coupled estrogen receptor,GPER）就是构成两条信号途径的关键节点,本文将围绕GPER的研究进展及其在食品功能评价等方面的应用进行综述、分析和展望。     

长期槲皮素膳食暴露对小鼠乳腺发育的影响

目的：槲皮素等植物雌激素早期不当摄入的负面影响已逐渐为人们所关注。本研究以围青春期雌性小鼠为模型,以成年后个体乳腺组织生殖内分泌激素受体表达水平及增殖能力为指标,考察幼年期槲皮素暴露对于乳腺发育的影响。方法：以高效液相色谱四极杆飞行时间串联质谱法检测槲皮素相关代谢产物在血浆及乳腺组织局部分布状况,以免疫组织化学方法检测乳腺上皮细胞内雌、孕激素受体以及增殖相关标志性分子增殖细胞核抗原的表达水平。结果：槲皮素相应代谢产物在乳腺内含量显著高于血浆,存在典型的组织局部富集的现象;在5 mg/（kg·d）剂量下,槲皮素可显著上调乳腺上皮细胞雌激素受体（estrogen receptor,ER）α及ERβ的表达比值,并抑制孕激素受体的表达。结论：乳腺组织对于槲皮素的暴露十分敏感,围青春期槲皮素的不当摄入极有可能通过改变相应激素受体表达谱进而提高个体成年后罹患乳腺相关疾病的风险。     

牛初乳对子代雌鼠子宫结构及雌激素受体表达的影响

目的 研究妊娠期和哺乳期通过SD母鼠暴露于牛初乳及断乳后继续食用牛初乳对成年子代雌鼠子宫发育及雌激素受体(ERα和ERβ3)表达的影响.方法 将母鼠随机分成2组,牛初乳组和空白对照组.牛初乳组母鼠在交配前期、妊娠期和哺乳期食用含有牛初乳的饲料,仔鼠3周断乳后食用对应于母鼠的饲料至成年.空白组母鼠和仔鼠食用普通饲料.仔鼠成年后处死,取其血液,剥离子宫和卵巢称重,检测血清激素,子宫病理学检查;利用免疫组化法检测子鼠子宫内雌激素受体(ERα和ERβ)的表达.结果 牛初乳组子代雌鼠体重、卵巢和子宫脏体比与空白组相比差异无统计学意义(P＞0.05),血清中催乳素(PRL)含量显著高于对照组,差异有统计学意义(p＜0.05),其余激素含量两组间差异无统计学意义(P＞0.05),子宫组织结构无异常表现,子宫内雌激素受体ERα表达量高于空白组,ERβ表达量与空白组相近,但与空白组相比差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 妊娠期和哺乳期暴露于子代的牛初乳不会对子代雌鼠子宫发育和雌激素受体表达产生不利影响.     

植物雌激素研究概况(Ⅱ)——生理功能进展

综述了植物雌激素（包括大豆异黄酮、木酚素以及二苯乙烯）的作用机制：（1）雌激素受体（ER）相关作用，主要表现为雌激素或抗雌激素效果；（2）与一些合成性类甾醇的主要酶相互作用（间接显示雌激素活性）；（3）其它非荷尔蒙作用。还综述了植物雌激素对人类健康的潜在效果，包括调节月经周期、预防并抑制许多癌症、预防心血管疾病以及骨疏松症，还有抗氧化效果以及女性美容效果。     

王不留行对奶牛乳腺上皮细胞磷酸化雌激素受体的影响

通过研究王不留行对奶牛乳腺上皮细胞中磷酸化ERα的影响揭示王不留行促进乳腺泌乳的分子机制。应用Western blot和实时荧光RT-PCR检测P-ERα的变化;免疫荧光观察P-ERα定位表达变化。结果表明,中药王不留行增乳活性成分可通过调控奶牛乳腺上皮细胞雌激素信号转导途径中P-ERα的表达来增强其泌乳功能,但详细机制尚需进一步研究。     

应用雌激素受体β抑制剂建立肠道屏障受损的便秘动物模型

该文旨在构建靶向女性便秘的动物模型,用于靶向筛选适合女性便秘的药物或益生菌。前期研究发现激素尤其是雌二醇和/或其受体在女性便秘中发挥着重要的作用。基于此,该文主要探讨激素受体,特别是雌二醇受体对便秘的影响。通过灌胃雌激素受体β抑制剂枸橼酸他莫昔芬片7 d,分析雌激素受体β的下调对便秘的影响,以及对肠神经密度和肠屏障的影响情况。以传统便秘造模药物阿片受体抑制剂洛哌丁胺作为阳性对照药物,进而阐明雌激素受体β影响便秘的途径。结果显示雌激素受体β的缺失会造成结肠肠神经受损及肠屏障损伤。主要表现为肠神经胶质细胞密度下降、杯状细胞减少,P物质减少,肠道菌群丰度、结构改变。     

蜂王浆对雌性大鼠生长发育的影响

目的：探讨高剂量蜂王浆对雌性大鼠生长发育的影响。方法：实验组大鼠按3 g/（200 g·d）（以体质量计,下同）灌胃新鲜的蜂王浆溶液,对照组按3 mL/（200 g·d）灌胃生理盐水,4 周后,停止灌胃,继续饲养2 周。每两周解剖一批大鼠,称质量计算心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、子宫、卵巢脏器系数,用放射免疫技术检测血清雌二醇（estradiol,E2）、促卵泡素（follicle stimulating hormone,FSH）、促黄体素（luteinizing hormone,LH）、孕激素（progestrone,P）含量,实时定量聚合酶链式反应（real-timepolymerase chain reaction,real-time PCR）检测卵巢和子宫中雌激素受体α（estrogen receptor α,ERα）、雌激素受体β（estrogen receptor β,ERβ）、促卵泡素受体（follicle stimulating hormone receptor,FSHR）、促黄体素受体（luteinizing hormone recepter,LHR）、孕激素受体（progestrone receptor,PR）mRNA表达量。结果：灌胃2 周,实验组大鼠体质量、主要脏器系数、血清主要性激素含量及其卵巢和子宫中受体表达量与对照组相比均无显著差异;灌胃4 周,实验组大鼠体质量显著低于对照组,实验组血清E2显著高于对照组,实验组卵巢PR mRNA表达量显著高于对照组,实验组子宫中ERα、ERβ、PR mRNA表达量显著高于对照组。实验组与对照组脏器系数无显著差异;停止灌胃2 周后,实验组大鼠体质量、主要脏器系数、血清主要性激素含量与对照组相比均无显著差异,实验组卵巢中FSHR、ERβ、PR mRNA表达量显著高于对照组,实验组子宫中ERα、ERβ、FSHR和PR mRNA表达量显著高于对照组。结论：高剂量的蜂王浆在一定程度上影响雌性大鼠的生长发育。     

大豆异黄酮对新生儿期大鼠子宫发育和雌激素受体表达的影响

目的研究母鼠暴露于大豆异黄酮对新生儿期大鼠子宫发育及雌激素受体表达的影响。方法将母鼠及其仔鼠随机分至6组,母鼠的大豆异黄酮暴露剂量分别为0、10、50、100、150、200mg/kgBW（i.g.）,暴露时间为产后第5至10天（PND5~10）。在PND11处死雌性仔鼠,称量子宫重量并进行病理学检查,利用ELISA方法测定血清雌二醇（E2）和孕酮（P）浓度,利用RT-PCR方法测定子宫中雌激素受体（ER）mRNA的表达。结果与对照组比较,大豆异黄酮150、200mg/kgBW剂量组仔鼠的子宫/体重比显著增加,子宫内膜增厚的差异有统计学意义（P〈0.05）;血清E2浓度明显高于对照组,SIF150组升高幅度最大,但各处理组血清P浓度呈下降趋势;100、150、200mg/kgBW剂量组仔鼠的子宫ERmRNA表达降低的差异有统计学意义（P〈0.05）。结论大豆异黄酮经母鼠暴露,可刺激雌性仔鼠的子宫发育,这种雌激素样效应至少与该物质对血液性激素和子宫ERmRNA表达的调节作用有关。     

催乳素、雌激素和胰岛素对奶牛乳腺上皮细胞中瘦素及其受体的影响

以荷斯坦奶牛为实验材料,通过体外培养奶牛乳腺上皮细胞,添加催乳素、雌激素和胰岛素运用激光扫描共聚焦显微技术、Western Blot Analysis、Real-Time PCR等技术来观察乳腺上皮细胞中瘦素表达和泌乳功能的变化规律。结果表明,应用Western Blotting方法对泌乳期奶牛乳腺上皮细胞中瘦素和瘦素受体的蛋白表达量进行研究,催乳素、雌激素能显著提高瘦素及其受体的分泌,且催乳素高于雌激素,胰岛素影响不显著。荧光定量RT-PCR结果表明,催乳素和雌激素能提高瘦素及其受体mRNA表达量,胰岛素没有明显影响。     

大豆异黄酮和双酚A联合暴露对雌性大鼠不同组织雌激素受体表达的影响

目的研究大豆异黄酮和双酚A哺乳期联合暴露对SD雌性大鼠的子宫增生效应及其对下丘脑-垂体-卵巢轴雌激素受体(ERα和ERβ)表达的影响。方法将母鼠及其仔鼠随机分至4组,即阴性对照组、大豆异黄酮组(每公斤体重150mg,i.g.)、双酚A组(每公斤体重150mg,i.g.)、联合暴露组(每公斤体重150mg大豆异黄酮 每公斤体重150mg双酚A,i.g.)。母鼠在产后第5至11天给予受试物,仔鼠在出生后5至11d(PND5-PND11)通过母乳暴露受试物。在PND12处死部分雌性仔鼠。剩余雌性仔鼠观察阴门开口时间和动情周期,并于PND70处死。剥离子宫并称重,病理学检查;利用Westernblot方法测定下丘脑、垂体、卵巢和子宫的ERα和ERβ表达。结果与阴性对照组比较,PND12时,大豆异黄酮组和双酚A组大鼠子宫体重比显著增加(P<0.05),联合暴露组子宫体重比亦显著增加(P<0.05),但其幅度略低于大豆异黄酮组和双酚A组。PND70时,各组大鼠的子宫体重比差异无统计学意义(P>0.05)。大豆异黄酮组、双酚A组和联合暴露组的阴门开口时间和动情周期与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。在PND12和PND70时,大豆异黄酮组、双酚A组和联合暴露组大鼠下丘脑、垂体、卵巢和子宫的ERα和ERβ表达有部分增强或减弱。结论哺乳期大鼠大豆异黄酮和双酚A联合暴露时,可促进雌性仔鼠的子宫发育,但两者并未表现出协同作用;这种子宫增生效应在生命后期消失。大豆异黄酮和双酚A的子宫效应可能与对下丘脑-垂体-卵巢轴和子宫组织中ERα和ERβ表达的调节有关。     

食品中雌激素的生物学检测方法研究进展

雌激素是一种类固醇物质,对人体心血管系统、神经系统等具有一定的保护作用,但摄入过量的雌激素会增加乳腺癌、自身免疫疾病的发病率,加剧哮喘等炎症症状。研究表明,牛奶、大豆、肉制品以及食品包装中均存在雌激素。由于雌激素具有高度的稳定性,能够在食品原料中积蓄并通过食物链传递进入人体,从而干扰人体固有的内分泌系统,产生不良影响。因此,发展针对食品中雌激素的检测方法愈发重要。目前,传统的雌激素仪器检测方法具有局限性,无法满足特异性、快速的检测需求。该文就食品中基于雌激素效应通路的生物学检测方法进行综述,并对雌激素检测的发展方向进行展望。在未来发展中,可利用雌激素对细胞的毒性效应,结合分子检测以及数字化的检测设备,对食品中的雌激素进行评估。     

牛奶及奶制品中雌激素残留和检测的研究

牛奶在人类日常饮食结构中占有重要位置。近年来随着对环境雌激素研究的深入,牛奶中的雌激素问题越来越引起人们的关注。有研究表明,现代商业牛奶中雌激素含量显著上升。本文阐述了雌激素的分类及应用,并对牛奶和奶制品中雌激素残留状况,可能危害及检测方法进行了综述。     

益生菌对雌激素代谢及相关疾病的影响

近年来,因雌激素代谢紊乱引起的女性健康问题受到国内外学者的广泛关注。有研究发现肠道微生物及其多样性对女性雌激素代谢及其代谢产物有重要影响,而经过益生菌干预后可改善肠道菌群结构,促进有益菌生长,进而改善机体雌激素代谢。此外,益生菌能够调节有机体内血液循环及内分泌循环系统,从而改善因雌激素代谢紊乱而诱发的一系列疾病。本文对国内外益生菌与雌激素相关疾病的研究现状进行综述,并列举了益生菌对改善雌激素代谢紊乱在临床治疗中的应用,为雌激素代谢紊乱及相关疾病的防治提供一定参考。     

Estrogen content of dairy and swine wastes

Naturally occurring estrogens in animal wastes may cause negative environmental impacts, yet their abundance in animal waste treatment and storage structures is poorly documented. To better quantify estrogen concentrations in animal wastes, multiple waste samples were collected from treatment and storage structures at dairy and swine facilities and analyzed for concentrations of 17beta-estradiol (E2), estrone (E1), and 17alpha-estradiol by gas chromatography-mass spectroscopy and by enzyme linked immunosorbent assay (E2 only). Mass ratios of each estrogen to the macronutrients nitrogen, phosphorus, and potassium were also determined. Because manure application rates are typically macronutrient-based, estrogen to macronutrient ratios are proportional to areal mass application rates of estrogen to fields. Swine farrowing waste (from farrowing sows and piglets) had the highest ratios of E2 to macronutrients. Mean ratios in swine farrowing waste were roughly twice those in swine finishing waste (from growing male and nonpregnant female animals) and more than four times higher than those in dairy waste (from lactating cows in various stages of their reproductive cycles); these differences were statistically significant (alpha = 0.05). Estrone followed a similar trend. In contrast, ratios of 17alpha-estradiol to macronutrients were highest in dairy operations. These results can be used to better predict estrogen loading rates on fields receiving swine and dairy wastes.     

气质联用法检测养殖虾中的5种雌激素残留

建立一种加速溶剂萃取-气质联用检测养殖虾中的5种雌激素(雌二醇、己烯雌酚、雌酮、炔雌醇、雌三醇)残留的分析方法。采用加速溶剂萃取仪对养殖虾进行提取、净化,选用乙酸乙酯进行洗脱,氮吹仪浓缩至近干,硅烷化试剂N-甲基三甲基硅基三氟乙酰胺(MSTFA)-三甲基硅烷(TMCS)(99︰1,V/V)衍生后进样气相色谱质谱仪定性定量检测。结果显示,5种雌激素质量浓度在0.01~1.0μg/mL范围内呈良好的线性关系,相关系数(R2)均大于0.995;5种雌激素检出限在0.09~0.14μg/kg之间,低(1μg/kg)、中(5μg/kg)、高加标量(10μg/kg)三个不同浓度水平下的加标率在80.6%~93.9%之间,相对标准偏差(RSD)在1.67%~4.72%之间(n=6)。该方法操作简单,灵敏度与准确度高,适用于养殖虾中雌激素的检测。     

Conjugated Linoleic Acid and Postmenopausal Women's Health

Declined estrogen levels in women after menopause can cause a number of significant health issues, and various estrogen receptor ligands have been clinically evaluated for postmenopausal treatment. Conjugated linoleic acid (CLA) has been shown to display protective effects against menopausal symptoms such as bone loss and metabolic dysfunctions in both animals and humans. In particular, it inhibits the proliferations of breast and endometrial cancer cells through estrogen receptor α‐mediated mechanism(s). These findings suggest that CLA may provide beneficial effects on menopausal symptoms, while protecting the endometrium and breast from estrogen stimulation. Thus, understanding the effects of CLA on menopausal disorders and ER metabolism is important in development of novel therapeutic options for use in postmenopausal women with or without conventional estrogen therapy. In this report, we review literature regarding the impact of CLA on menopausal symptoms in cell lines, rodents, and humans, along with potential mechanism(s). We also discuss safety consideration for CLA use in humans.     

Role of estrogen in induction of penile dysmorphogenesis: a review

In this review, we report permanent dysmorphogenesis of the penis and loss of fertility in adult rats treated neonatally with estrogen. Specifically, we report replacement of smooth muscle cells and cavernous spaces by fat cells in the corpus cavernosum penis, but not in the adjoining corpus spongiosum. Induction of these novel, region-specific phenotypes is dose-dependent, requires a critical window of exposure and associated with decreased testosterone and up-regulation of estrogen receptor alpha (ER alpha). The resistance of ER alpha knockout mice to develop these abnormalities implies an unequivocal role for ER alpha in mediating maldevelopment of the penis. Additionally, the prevention of estrogen-inducible penile abnormalities by ER antagonist ICI 182 780 implies that a functional ER-mediated pathway is essential for inducing penile abnormalities. Likewise, the ability of testosterone or dihydrotestosterone to negate these abnormalities suggests a role for an androgen receptor (AR)-mediated pathway. Taken together, these observations led us to hypothesize that neonatal estrogen exposure, via an ER-mediated pathway (direct action) or an AR-mediated pathway (indirect action through decreased testosterone) or both pathways, up-regulates ER alpha expression in stromal cells of the penis, which are then reprogrammed such that their differentiation into smooth muscle cells is inhibited and their differentiation into adipocytes is stimulated.     

3种鲎试验在乳品内毒素活性定量检测中的应用评价

目的 比较3种内毒素活性定量检测方法在乳品中的应用情况。方法 采用2种传统东方鲎(Tachypleus amebocyte lysate, TAL)试验(动态浊度法/动态显色法)和1种便携式内毒素检测仪(portable test system, PTS)对牛奶、酸奶和奶粉产品内毒素活性进行检测, 评估3种方法在乳品内毒素活性检测中的应用情况。结果 3种方法用于乳品内毒素活性检测的加标回收率为50%~200%, 符合药典要求。对比动态浊度法, 动态显色法检测乳品内毒素活性的加标回收率范围更加接近100%。PTS方法的内毒素活性检测值分别与2种传统TAL试验的检测值有较好的线性关系。结论 3种方法均适用于乳品内毒素活性的检测, 但动态显色法更加适合乳品内毒素的检测。