乳酸链球菌L16对感染金黄色葡萄球菌小鼠肠道菌群的调节作用

为研究乳酸链球菌L16对金黄色葡萄球菌感染小鼠肠道菌群结构的恢复情况,采用高通量测序技术,构建小鼠肠道微生物的16S rRNA基因测序文库,通过菌群结构图、等级丰度分布曲线、热图、稀释性曲线图、维恩图等,分析预防组、治疗组、正常组和模型组小鼠的肠道菌群组成和生物多样性。结果:模型组中脱铁杆菌门(12.67%)显著升高,菌群结构异常。预防组中厚壁菌门(49.03%)和拟杆菌门(43.15%)的相对丰度接近正常组(44.75%;42.08%)。结论:乳酸链球菌L16能预防金黄色葡萄球菌感染小鼠肠道,调节肠道菌群结构。     

发酵大豆膳食纤维对母猪肠道菌群的调节作用

为表征酱油渣来源的发酵大豆膳食纤维对母猪肠道菌群及其产物短链脂肪酸的调节作用。以含5%该发酵大豆膳食纤维（该研究所述发酵大豆膳食纤维为一种酱油渣来源的低盐、低油、无异味的食品级膳食纤维）的饲料喂食的母猪作为实验组（DF）,空白对照组（CK）喂食普通饲料（相同的饲料没有发酵大豆膳食纤维）。分别收集两组的母猪粪便样品,通过16S rDNA测序技术研究母猪肠道菌群结构的变化,并通过GC-MS测定粪便中短链脂肪酸含量,采用Spearman相关性分析进行属水平上肠道菌群与短链脂肪酸之间的相关性研究。Welch’s t-test差异分析结果表明,喂食发酵大豆膳食纤维后母猪肠道菌群中史雷克氏菌属（Slackia）的丰度较空白对照组显著增大（p<0.05）;LEfSe结果发现Clostridium IV和δ-变形菌纲（Deltaproteobacteri）为实验组中丰度较高的两个差异物种。喂食发酵大豆膳食纤维后,粪便中各短链脂肪酸含量均有不同程度的提高,尤其是丁酸含量显著增多（p<0.05）。结果表明,饲料中添加发酵大豆膳食纤维在一定程度上使母猪的肠道菌群结构发生改变,促进了肠道中产短链脂肪酸的菌群的富集,从而提高了肠道中的短链脂肪酸尤其是丁酸的含量。     

益生菌发酵番茄汁对小鼠抗疲劳和肠道菌群的调节作用

为研究益生菌发酵番茄汁（probiotic fermented tomato juice,PFTJ）的抗疲劳和肠道菌群调节作用,将40 只雄性ICR 小鼠随机分成4 组,分别为空白对照组、阳性对照组（0.06 g/kg）、PFTJ 低剂量组（5 mg/kg）和PFTJ 高剂量组（15 mg/kg）。通过测定各组小鼠负重力竭游泳时间、生化指标及与能量代谢相关基因的表达,评价PFTJ 抗疲劳作用,并分析其对肠道菌群的影响。结果表明,与空白对照组相比,高剂量PFTJ 能明显延长小鼠负重力竭游泳时间,降低尿素氮、乳酸和丙二醛含量,提高肌糖原的含量、超氧化物歧化酶活性和谷胱甘肽还原酶活性,并能显著提高小鼠骨骼肌中AMPK 和PGC-1α 的mRNA 表达水平。PFTJ 可以增加肠道菌群多样性,上调乳酸杆菌属、norɑnk_f_Muribɑculɑceɑes 属相对丰度,下调丹毒丝菌科菌群的相对丰度。PFTJ 具有潜在的抗疲劳能力,这与减少代谢物质积累、抑制糖原消耗、抗氧化、激活AMPK/PGC-1α 通路直接相关,并可能通过调节小鼠肠道菌群群落结构间接实现其抗疲劳效果。     

利用体外发酵模型研究叶绿素对儿童肠道菌群的影响

通过不同年龄儿童粪便的体外发酵,研究叶绿素的生物代谢及对肠道菌群的影响,探明其生物活性,明确摄入绿叶蔬菜的健康意义。体外发酵试验菌群测序分析结果表明:叶绿素降低了儿童肠道菌群的多样性,添加叶绿素体外发酵24 h后,2岁儿童菌群多样性指数由2.6～3.2降至2.4～2.7,5岁儿童菌群多样性指数由2.5～2.8降至1.8～2.4。属水平上,柯林斯菌属、双岐菌属相对丰度降低,乳酸菌属的相对丰度升高。菌群代谢物检测结果表明,叶绿素促进同年龄儿童粪便代谢物乳酸、乙酸水平的增加,说明叶绿素具有一定的生物活性,影响肠道菌群组成及其代谢产物含量的变化。     

外源肠道菌和玉米抗性淀粉对小鼠结肠菌群发酵产酸的影响

在37℃、厌氧条件下,通过向营养肉汤培养基中添加小鼠结肠内容物悬液模拟结肠环境。通过在模拟结肠环境中添加玉米抗性淀粉、单一及混合外源肠道菌及其组合,研究玉米抗性淀粉体外发酵产酸的特性及外源肠道菌对其的影响。结果表明:相对于未添加抗性淀粉或仅添加单一外源菌的组,添加3%(相对于营养肉汤培养基干基)玉米抗性淀粉后,乙酸、丙酸和丁酸的含量在发酵过程中(6、12、18、24、30 h)能够极显著(P0.01)地提升。在含有抗性淀粉的培养基中添加单一外源菌,嗜酸乳杆菌能够促进发酵产乙酸,青春双歧杆菌和粪肠球菌能够促进发酵产丙酸和丁酸,而大肠埃希氏菌会抑制产丙酸和丁酸。在含有抗性淀粉的培养基中添加混合外源菌,嗜酸乳杆菌和青春双歧杆菌能够协同发酵产乙酸、丙酸和丁酸,粪肠球菌与青春双歧杆菌组合发酵时,能够提升丙酸和丁酸产量,而大肠埃希氏菌则会不同程度地抑制其他3种菌发酵抗性淀粉产乙酸、丙酸和丁酸。     

凝固型苦荞酸奶对小鼠肠道菌群的调节作用

通过动物实验,利用实时荧光定量聚合酶链式反应方法、气相色谱-质谱、Illumina高通量测序技术,对小鼠肠道菌群数量和种类,以及主要代谢产物——短链脂肪酸（乙酸、丙酸、丁酸、乳酸）的含量进行分析,探究凝固型苦荞酸奶对小鼠肠道菌群的调节作用。结果表明：与对照组相比,凝固型苦荞酸奶使肠道中3 种有益菌（乳酸杆菌、双歧杆菌、柔嫩梭菌）的数量分别增加了523.81、911.01、12.18 倍,3 种有害菌（肠杆菌、肠球菌、拟杆菌）的数量分别减少了99.89%、97.31%、99.02%。同时,凝固型苦荞酸奶组小鼠粪便中的乙酸、丙酸、丁酸、乳酸的含量分别增加了36.87%、75.59%、56.26%、92.36%,且效果优于普通酸奶组。高通量测序结果表明,凝固型苦荞酸奶较普通酸奶可以显著增加小鼠肠道菌群多样性,在门水平上显著降低厚壁菌门和疣微菌门的丰度,显著提高拟杆菌门的丰度（P＜0.05）;且在属水平上显著提高norank_f__Bacteroidales_S24-7_group、Faecalibaculum菌属的相对丰度,显著降低Ruminococcaceae_UCG-014、unclassified_f__Lachnospiraceae、Lachnospiraceae_UCG-006菌属的相对丰度（P＜0.05）,提高肠道菌群优势菌属的地位。综上所述,凝固型苦荞酸奶相较于普通酸奶,可以更好地促进小鼠肠道内有益菌的增殖并抑制有害菌的增殖,促进短链脂肪酸的生成,增加肠道菌群多样性,优化菌群结构。     

低分子量硫酸软骨素体外酵解特征及其对肠道菌群的调节作用

硫酸软骨素（Chondroitinsulfate,CS）具有调节肠道微生物的作用,但不同分子量对其益生活性的影响鲜有报道。该研究比较了硫酸软骨素（80 ku）及其光催化降解产物（Low Molecular Weight Chondroitin Sulfate,LWCS,4 ku）体外酵解特征及其对肠道代谢物的影响。通过化学法、气相色谱质谱联用、高通量测序等方法测定了不同时间发酵液中p H值、CS和LWCS含量、还原糖含量、短链脂肪酸浓度以及肠道微生物的变化。结果显示,在发酵48 h内,CS、LWCS以及还原糖含量均显著降低（P<0.05）,说明肠道微生物能够降解利用硫酸软骨素及其降解产物。且降解后的硫酸软骨素更显著地增加了拟杆菌门和副杆菌属等有益菌的丰度（P<0.05）,更明显的抑制了潜在致病菌型埃希氏-志贺氏菌属（P<0.05）。此外,LWCS发酵能维持24 h的酸性环境,并产生更多的乙酸、丙酸和总短链脂肪酸（分别增加1.15、1.03和1.09倍）。以上结果表明,光催化降解后的硫酸软骨素具有更强的肠道益生作用,该研究为硫酸软骨素的开发应用提供了科学依据。     

基于体外肠道模拟系统探究全豆豆浆对肠道菌群的影响

大豆富含多种营养物质,传统豆浆在制浆过程中会产生大量的豆渣,而除渣后导致大豆中营养成分的流失。目前,全豆豆浆工艺可以最大限度地保留大豆的全部营养成分。为了进一步探究全豆豆浆中未被胃肠消化吸收的大分子物质及其与人体肠道菌群的关系,该文以全豆豆浆为研究对象,通过体外胃、小肠消化以及升结肠、横结肠和降结肠发酵后,对不同肠段发酵液进行16S rDNA测序分析,并测定其中短链脂肪酸含量,探究全豆豆浆对肠道菌群的调控作用。结果表明,全豆豆浆经过胃肠消化,并在体外结肠模拟系统中发酵7 d后,α多样性分析得出,微生物群落丰度和物种多样性显著增高;β多样性分析得出,全豆豆浆也能够改变人体肠道菌群的结构;在门水平上,相比于发酵前,Proteobacteria和Synergistetes的相对丰度升高,而Bacteroidetes、Firmicutes、Fusobacteria和Actinobacteria的相对丰度降低;在属水平上,相比于发酵前,Enterobacter、Megasphaera、Pyramidobacter、Acinetobacter和Phascolarctobacterium的相对丰度升...     

葡萄蒸馏酒对高尿酸血症模型小鼠肠道菌群的调节作用

为了探讨葡萄蒸馏酒与高尿酸血症模型小鼠肠道菌群的关系,将6周龄SPF级雄性小鼠随机分为52%葡萄蒸馏酒低剂量组、中剂量组、高剂量组、空白对照组、模型组和乙醇组,连续灌胃7 d后测定小鼠粪便中的短链脂肪酸和肠道微生物。利用Illumina MiSeq平台进行高通量测序,检测小鼠粪便16S rDNA基因,分析小鼠肠道菌群的变化,并使用气相色谱-质谱联用仪检测小鼠粪便中短链脂肪酸的含量变化。研究发现,低、中剂量葡萄蒸馏酒能提高高尿酸血症模型小鼠肠道微生物的多样性,显著增加拟杆菌门(Bacteroidota)的相对丰度(P<0.05),显著降低厚壁菌门(Firmicutes)的相对丰度(P<0.05),改善高尿酸血症模型小鼠的菌群失调及厚壁菌门与拟杆菌门比值的升高,并增加了肠道有益菌如丁蓖麻球菌、瘤胃球菌、罗氏菌、厌氧棍状菌、梭菌等的相对丰度;葡萄蒸馏酒中剂量组的乙酸、丙酸和正丁酸含量显著高于模型组和乙醇组(P<0.05)。结论：每日摄入52%葡萄蒸馏酒1 mL/kg m_b或2 mL/kg m_b可以改善高尿酸血症模型小鼠肠道菌群失调...     

不同单糖组成的低聚糖对人肠道菌群的调节作用

目的:通过高通量测序技术研究不同单糖组成的低聚糖对人肠道菌群的调节作用。方法:以人结肠内菌群为研究对象,采用人体胃、肠道模拟系统,比较研究了分别由葡萄糖、半乳糖和甘露糖构成的聚葡萄糖、聚半乳糖和聚甘露糖对人肠道菌群的调节以及被微生物代谢产生短链脂肪酸的情况。结果:3种聚糖分别被肠道微生物代谢产生短链脂肪酸,其中聚半乳糖代谢产生的短链脂肪酸含量最高,聚葡萄糖次之,聚甘露糖产生短链脂肪酸的量最少。由半乳糖构成的聚半乳糖更有利于代谢产生的乙酸和丙酸,抑制有害菌布劳特氏菌属和多雷亚菌属。由葡萄糖构成聚葡萄糖更有利代谢产丁酸和戊酸,抑制柯林斯菌属生长,促进双歧杆菌属、副拟杆菌属和链球菌属增殖。由甘露糖构成的聚甘露糖更有利于抑制瘤胃球菌属的生长。结论:3种聚糖均可调节肠道菌群,被肠道微生物发酵产生短链脂肪酸,促进有益菌增殖,抑制有害菌生长。     

金黄色葡萄球菌污染牛奶后的代谢产物研究

为解决食品安全中存在的隐患,作者构建了气相色谱-质谱（GC-MS）结合顶空固相微萃取（HS/SPME）技术用于探究金黄色葡萄球菌的挥发性代谢产物,并结合代谢组学和基因组学分析牛奶中金黄色葡萄球菌的差异性代谢产物及其代谢途径。结果表明,金黄色葡萄球菌的差异性代谢物包括N-甲硫基甲酰胺、1-丁醇、乙酸、乙苯、均三甲苯、辛酸、苯甲酸、正癸酸、十二烷酸、乙醇、苯酚和丙二醇。之后对其进行基因组学分析得到金黄色葡萄球菌主要是以基础的生命代谢为主,明确了代谢网络中参与代谢的物质（乙醇、乙酸、1-丁醇）的代谢途径和相关基因。本研究为金黄色葡萄球菌的生物标志物研究提供了理论基础。     

茶树精油对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物被膜的影响

本文研究了茶树精油对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)生物被膜的影响及其作用机制.首先测定了茶树精油对1株MRSA标准菌株及12株金黄色葡萄球菌分离菌株的MIC值为0.08％～0.32％.结晶紫半定量染色实验发现0.16％的茶树精...     

Contamination of infant powdered milk in use with enterotoxigenic Staphylococcus aureus

One-hundred and ten of the 114 samples of infant milk formulae collected from nursing mothers contained viable staphylococci, with the highest mean count of 1·0 × 10² cfu g⁻¹, from samples collected the day the tin was opened. The highest mean total aerobic plate count was 2·6 × 10³ cfu g⁻¹. Titratable acidity and pH of the reconstituted milk ranged from 0·06 to 0·8 and 6·40 to 6·52 respectively. 52·0% of the 123 isolates were S. aureus, 49·6% produced β-hemolysin and 17·1% produced α-hemolysin. Enterotoxin A was produced by 6·5%, B by 1·6%, C by 2·4%, D by 1·6% and E by 0·8% of the isolates. The total staphylococcal and aerobic plate counts were not affected by either the period elapsed from the opening of tin to sampling or the brand of milk.     

The effect of oil on the heat resistance of Staphylococcus aureus

Staphylococcus aureus survived for longer periods in fish and oil than in water at temperatures up to 95°C. Heat resistance varied between strains (NCTC 10652 and 68-7895) and was affected by the age of culture prior to use.The introduction of cells in a dried state to oil increased their heat resistance. This increase was related to the growth medium and methods of heating and recovery for cells dried onto sand. An example of the highest heat resistance found was when cells taken from growth on nutrient agar, dried with sand and heated in oil at 120°C, were recovered using a filtration technique and exhibited a D value of 3 to 6 min.The increased heat resistance obtained in these experiments may be due to encapsulation of the bacteria in the oil, which protects the cells from thermal injury.     

自然发酵腌制冬瓜主要发酵菌种及风味物质鉴定

为了科学认识自然发酵腌制的冬瓜(即臭冬瓜),改进其发酵工艺,运用微生物学及分析化学方法,对自然发酵的臭冬瓜进行茵种分离鉴定和亚硝酸盐含量检测,并鉴定了产品的主要风味物质.结果显示,其发酵过程中的6株典型茵株为:短小芽孢杆菌、极小棒杆菌、腐败希瓦菌、汉逊酵母、酿酒酵母和植物乳杆茵:发酵过程中最高亚硝酸盐含量为8.8mg/kg,发酵末期其含量小于0.2mg/kg,两值均低于GB 15198-94中腌渍品20mg/kg的限量标准;产品中挥发性风味物质主要包括丁酸、己酸、戊酸、辛酸、2-甲基丁酸、4-甲基苯酚等,大多数物质具有不愉快的气味;乳酸茵发酵体系中常见的乳酸、乙酸、柠檬酸等.在臭冬瓜中含量很少.以上试验表明.臭冬瓜不存在食用安全隐患.     

白玉菇多糖发酵乳对小鼠肠道微生物的影响及抗氧化作用

在发酵乳中添加白玉菇水提多糖（WHN）和酶提多糖（WHE）,研究白玉菇多糖发酵乳对小鼠肠道的保护作用,对肠道菌群的调节和抗氧化作用。结果表明：白玉菇多糖发酵乳增加了小鼠粪便含水量,白玉菇酶提多糖高剂量组小鼠结肠指数为1.62,结肠长度为9.59 cm,相比于空白组显著增加,白玉菇酶提多糖高剂量组结肠内容物中短链脂肪酸含量为26.45mmol/L,是空白组的1.38倍,其中还原糖和单糖的含量显著增加。Alpha多样性指数分析表明,白玉菇水提多糖高剂量发酵乳组小鼠肠道菌群物种丰度最高,从门水平和属水平分析,增加了拟杆菌门、放线菌门以及乳酸菌属丰度。白玉菇酶提多糖高剂量组小鼠的抗高血脂和抗氧化效果最好,提高了小鼠T-AOC、SOD、CAT活性,同时降低了MDA含量。白玉菇多糖发酵乳通过改善小鼠肠道生理状况来调节肠道菌群结构,增强抗氧化能力,其中WHE发酵乳组效果优于WHN发酵乳组,有一定的剂量依赖性。     

植物乳杆菌KFY02发酵柠檬汁对高脂饮食小鼠肥胖的抑制作用及肠道菌群调节作用

本研究旨在观察植物乳杆菌KFY02发酵柠檬汁的减脂的作用及其对肠道菌群调节作用。本研究通过高脂饮食引起小鼠肥胖,将实验小鼠分为正常组、模型组、植物乳杆菌KFY02组、未发酵柠檬汁组和发酵柠檬汁组,采用生化试剂盒、切片观察和定量PCR实验检测小鼠血清、组织相关指标并通过检测粪便中微生物的表达观察肠道微生物组成。实验结果显示,植物乳杆菌KFY02、未发酵柠檬汁和发酵柠檬汁均能够有效减轻肥胖小鼠体重,降低肝脏和附睾脂肪组织的器官指数,降低血清和肝脏组织的丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（AKP）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平和提高高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平,增加小鼠粪便中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和总蛋白（TP）的含量。H&E病理学观察发现,植物乳杆菌KFY02、未发酵柠檬汁和发酵柠檬汁还能够减轻肥胖造成的肝组织病变和脂肪细胞增大和堆积。qPCR实验结果显示,植物乳杆菌KFY02、未发酵柠檬汁和发酵柠檬汁能够上调高脂饮食引起的肥胖小鼠肝组织的PPAR-α、CPT-1、LPL、CYP7A1的mRNA表达和下调C/EBPα、PPAR-γ表达;同时还可以上调拟杆菌门、乳酸杆菌、双歧杆菌微生物的表达和下调厚壁菌门表达。这些结果表明,植物乳杆菌KFY02、未发酵柠檬汁和发酵柠檬汁均能够起到对小鼠的减脂作用,且发酵柠檬汁的效果最好,发酵柠檬汁对小鼠的减脂作用与其调节小鼠肠道功能和微生物组成有直接关系。由此可以看出,植物乳杆菌KFY02发酵柠檬汁对肥胖小鼠具有良好的减脂作用和肠道调节作用。     

四株ST9型耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的全基因组序列分析

目的 了解不同来源ST9耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的全基因组特征。方法 对收集的4株分离自猪胴体和屠宰工作人员的ST9 MRSA菌株进行全基因组序列测序,分析ST9 MRSA的基因特征、耐药基因和毒力基因携带情况,利用比较基因组学筛选单核苷酸多态性（SNP）,并与NCBI收录的11株不同ST型的MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌菌株进行核心基因分析,构建系统发育树。结果 4株不同来源ST9 MRSA全基因组序列全长约为2.6 Mbp,共含有2 122~2 494个基因,基因组的平均GC含量为32.8%。不同来源菌株基因组中均含有26~31种耐药基因、44~56种毒力基因。4株ST9 MRSA与欧洲主要流行的ST398代表性菌株比较,核苷酸同源性高,菌株之间SNP数量少于300个。系统进化发育树分析结果显示ST9和ST398 MRSA在分子进化过程中分成了不同独立进化分支,家畜和人来源的MRSA菌株在分子进化中没有明显相关性。结论 本研究获得了不同来源ST9 MRSA全基因组基本特征的背景材料,了解了不同ST型MRSA分子进化溯源关系,为后续ST9 MRSA的分子流行病学和致病性机制研究提供科学指导。     

我国食源性金黄色葡萄球菌耐药及遗传特征情况研究

目的 探究我国2020年食源性金黄色葡萄球菌的耐药性、毒力因子及分子分型特征。方法 采用微量肉汤稀释法对菌株进行药物敏感性试验,基于全基因序列分析多位点序列分型及重要耐药基因（mecA）和毒力基因。结果 224株食源性金黄色葡萄球菌对12类抗菌药物的整体耐药率为87.9%（197/224）,对青霉素的耐药率最高为82.6%（185/224）。多重耐药率为23.2%（52/224）,多重耐药菌中ST398占比最高为26.9%（14/52）,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出率为8.0%（18/224）。葡萄球菌肠毒素基因整体携带率为52.2%（117/224）,其中sea的携带率最高为24.6%（55/224）,携带肠毒素基因种类最多的ST型为ST1。共检测到31种ST型,其中ST7最多（12.9%,29/224）,ST398次之（10.7%,24/224）。中毒性休克综合征毒素编码基因（tsst-1）和杀白细胞素编码基因（lukF-PV和lukS-PV）的携带率分别为6.3%（14/224）和4.5%（10/224）。结论 我国食源性金黄色葡萄球菌耐药率和肠毒素携带率均较高,且检出了临床感染中重要的毒力基因,提示食品中金黄色葡萄球菌的潜在危害不容忽视。ST型与食品类别、耐药性和致病性存在一定相关性,可为了解我国食源性金黄色葡萄球菌的流行特征和风险防控提供数据支撑。