二氢杨梅素的抑菌活性及其影响因素

目的:研究二氢杨梅素的抑菌活性及其影响因素,为其作为天然食品防腐剂提供参考。方法:采用纸片扩散法和稀释法,探讨二氢杨梅素对几种常见致病菌的抑菌活性及其影响因素。结果:二氢杨梅素对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)为0.06 mg/m L;对福氏志贺菌、奇异变形杆菌和铜绿假单胞菌的MIC为0.12 mg/m L;对大肠杆菌、乙型副伤寒沙门氏菌和肺炎克雷伯菌的MIC为0.24 mg/m L;枯草芽孢杆菌的MIC为0.95 mg/m L;在酸性和中性环境中抑菌活性较强;在无菌水中随时间延长及温度升高,二氢杨梅素易发生氧化而降低抑菌效果;Na~+和Ca~(2+)-的存在对二氢杨梅素的抑菌活性均有减弱作用;与常见食品防腐剂(山梨酸钾和苯甲酸钠)和食品抗氧化剂(TBHQ和BHT)复配,可适当增强二氢杨梅素的抑菌活性。结论:二氢杨梅素有较强的抑菌活性,且抑菌谱较广,可作为一种天然高效的防腐剂应用于食品加工。     

二氢杨梅素抗菌活性研究

使用滤纸片法和试管二倍稀释法测定二氢杨梅素对几种常见食品微生物的抗菌效果.结果表明:二氢杨梅素对细菌有很强的抑制活性,对真菌抑制效果不明显;对供试菌种的最低抑菌浓度(MIC)不超过1.76 g/L;对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最低杀菌浓度(MBC)分别是1.76 g/L和0.88 g/L,对链球菌和枯草芽孢杆菌的最低杀菌浓度高于3.52 g/L;抑菌活性在pH3～4的酸性环境中最强;二氢杨梅素在一定温度处理后仍具有良好的抑菌效果.     

二氢杨梅素-镍配合物的合成及抗菌活性的研究

以黄酮类二氢杨梅素和乙酸镍盐为原料,合成二氢杨梅素-镍配合物,通过红外光谱、紫外光谱、差热-热重分析对配合物进行表征.采用试管二倍稀释法研究配体二氢杨梅素及其镍配合物的抗菌活性.结果表明合成的产物确证为二氢杨梅素-镍配合物,配合物表现出较强的抑菌和杀菌作用,对白假丝酵母菌MIC为6.25～12.5μg/mL、MBC为6.25～25μg/mL.其抗酵母菌能力明显强于配体二氢杨梅素,但对细菌抑制效果不明显.     

壳寡糖对腐败真菌的抑菌活性及其机理

为研究壳寡糖(COS)对黑曲霉、赭曲霉、杂色曲霉的抑菌活性及其机制,通过最低抑菌浓度(MIC)、菌丝生长抑制率和孢子萌发抑制率揭示COS对腐败真菌的抑菌活性,试验结果表明:COS能够显著抑制腐败真菌的生长,对供试菌的MIC范围在15.6～31.2 mg/mL。经COS处理后,腐败真菌细胞膜产生凹陷褶,细胞通透性增大,细胞成分大量泄漏,细胞膜受损;COS还剂量依赖性地减少几丁质的产生,增强几丁质酶活性,同时使可溶性蛋白质大量外渗。结论 :COS主要通过细胞壁、细胞膜和细胞代谢3个方面对腐败真菌的活性产生抑制作用,其可作为一种有效的抗真菌天然化合物广泛应用于食品工业中。     

青钱柳多糖抑菌活性及及作用机理

为研究青钱柳多糖的抑菌活性和作用机制，用不同质量浓度的青钱柳多糖处理细菌，通过最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration, MIC）、抑菌生长曲线分析青钱柳多糖对细菌的抑菌效果，并从抑制效果最佳的受试菌菌体电导率、细胞蛋白和核酸含量、还原糖的释放、呼吸链脱氢酶活性、脂质过氧化程度、细胞内ATP含量、细胞外碱性磷酸酶活力的角度来揭示其抑菌机理。结果表明，青钱柳多糖对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大肠杆菌（Escherichia coil）、单增李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）和鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）有明显的抑制作用，MIC分别为2、4、6、6 mg/mL，对枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）的抑菌性不明显；对指示菌的电导率、蛋白质和核酸渗漏、还原糖释放、呼吸链脱氢酶活性、细菌脂质过氧化程度、菌体胞内ATP和胞外碱性磷酸酶（AKP）含量均有影响。以上现象表明，青钱柳多糖的抑菌性主要是破坏菌体细胞壁和细胞膜完整性，改变其通透性，使得胞内大小分子物质外泄，抑制了细胞的呼吸代谢和引起氧化损失，进而影响细胞的生长代谢或造成细胞死亡，达到抑菌效果。     

脱氢乙酸钠抑制指状青霉的作用机制

脱氢乙酸钠（sodium dehydroacetate,SD）可有效抑制指状青霉（Penicillium digitatum）的生长,但其作用机制尚不清楚。本实验通过分析不同质量浓度SD（0（对照）、1/2最小抑菌质量浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）、MIC）对P. digitatum菌丝体细胞结构和功能（细胞壁、细胞膜和线粒体）的影响,研究SD的抑菌机制。结果表明,SD处理菌丝体30 min时已通过主动运输进入细胞内,且在整个处理期间能维持胞内较高的SD质量浓度;SD处理的菌丝体细胞壁荧光强度和胞外碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,AKP）活力与对照无明显差异;而碘化丙啶染色实验结果表明,SD引起菌丝体荧光强度显著增加（P＜0.05）;此外,SD处理能够降低菌丝体总脂质含量,并提升胞外pH值,表明SD处理对菌丝体细胞膜造成损伤而未对细胞壁造成损伤。此外,SD处理降低了菌丝体线粒体膜电位和能荷水平,增加了Na＋/K＋-ATPase活力,干扰了细胞能量代谢。SD对金柑果实绿霉病干预实验结果表明,SD处理有效抑制了金柑果实绿霉病的发生,且呈质量浓度依赖效应。综上,SD可通过破坏P. digitatum菌丝体细胞膜和线粒体的结构和功能发挥其抑菌活性,从而降低金柑采后绿霉病的发生。研究结果可为SD应用于金柑采后病害绿色防控提供理论依据。     

原儿茶酸对副溶血弧菌的抑菌和减毒作用

该研究旨在探讨原儿茶酸对副溶血弧菌的抑菌活性和减毒作用,揭示原儿茶酸抑菌的作用机制。通过测定最小抑菌浓度（Minimal Inhibitory Concentration,MIC）、生长曲线、核酸与蛋白质泄漏量、丙二醛（MDA）含量,利用扫描电镜观察副溶血弧菌形态的变化,来评估原儿茶酸对副溶血弧菌的抑菌活性及其对细胞膜完整性和通透性的影响。同时,通过检测亚抑菌浓度（Sub-inhibitory Concentrations,SICs）下原儿茶酸对副溶血弧菌毒力因子合成的影响,研究原儿茶酸对副溶血弧菌的毒力衰减作用。实验结果表明,原儿茶酸的MIC为2 mg/mL,经MIC浓度原儿茶酸处理后,副溶血弧菌发生严重内陷和破裂,上清液中核酸、蛋白质、MDA含量分别是对照组的2.65倍、1.94倍和10.05倍。此外,原儿茶酸在浓度为1/4 MIC时对胞外多糖、胞外蛋白酶、生物被膜的抑制率分别为40.57%、19.79%和26.04%,在浓度为1/2 MIC时的抑制率分别为52.85%、28.38%和34.69%。原儿茶酸主要作用于细胞膜,通过影响细胞膜的完整性和通透性抑制副溶血弧菌的生长,在亚抑菌浓度下便可有效减弱副溶血弧菌毒力。     

石竹烯对热杀索丝菌的抑菌机理

本实验研究石竹烯对热杀索丝菌的抑菌效果及其作用机理。通过石竹烯对热杀索丝菌的最小抑菌浓度(minimum inhibition concentration,MIC)和生长曲线的测定考察其抑制活性;通过观察扫描电子显微镜和碱性磷酸酶的泄漏判定石竹烯对细胞形态和细胞壁结构的破坏程度;通过钾离子、二乙酸荧光素分子和蛋白质的泄漏考察其对细胞膜的影响;通过苹果酸脱氢酶以及丙酮酸激酶活力的测定探究其对细胞代谢的影响;通过荧光光谱扫描法研究石竹烯与细菌DNA的结合能力。结果表明,石竹烯对热杀索丝菌的MIC值为4.51 mg/mL,1×MIC和2×MIC石竹烯能够破坏细胞的形态、结构以及细胞膜的通透性,影响细胞代谢,导致苹果酸脱氢酶、丙酮酸激酶活力显著降低(P0.05),同时对基因组DNA构象和结构造成破坏。     

茶多酚-肉桂精油复合保鲜剂抗氧化活性及抑菌作用

为了研究茶多酚-肉桂精油复合保鲜剂抗氧化活性和对金黄色葡萄球菌的抑菌作用。采用体外抗氧化法测定了复合保鲜剂抗氧化能力。通过抑菌圈大小确定抑菌效果和最小抑菌浓度(MIC),结合抑菌活力、细菌生长曲线、细胞壁完整性和细胞膜通透性,综合评价复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的影响。结果表明,复合保鲜剂清除DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的IC50分别为4.02μg/m L、9.15μg/m L、0.61 mg/m L。复合保鲜剂能够有效抑制金黄色葡萄球菌的生长,MIC为0.5 mg/m L,且能够破坏细胞壁和细胞膜。综上所述复合保鲜剂具有很强的抗氧化活性,对金黄色葡萄球菌有很好的抑菌效果,其可能的抑菌机理是破坏细胞壁,影响细胞膜的通透性。     

茶槲寄生“螃蟹脚”醇提正丁醇萃取相对金黄色葡萄球菌抑菌机理的研究

本文研究了茶槲寄生“螃蟹脚”醇提各萃取相的抑菌作用及正丁醇萃取相（NVBEs）对金黄色葡萄球菌的抑菌机理。采用滤纸片扩散法测定抑菌圈直径（DIZ）的大小,对倍稀释法测定最小抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）,来评价“螃蟹脚”醇提各萃取相对金黄色葡萄球菌（S. aureus）、大肠杆菌（E. coli）、鼠伤寒沙门氏菌（S. typhimurium）、单核细胞增生李斯特菌（L. monocytogenes）4种食源性腐败菌的抑制性;通过光学显微镜和扫描电镜观察、胞膜通透性、胞壁完整性和酶活性等实验,研究了NVBEs抑菌机理。结果表明,“螃蟹脚”醇提各萃取相对S. aureus、E. coli、S. typhimurium和L. monocytogenes均有明显抑制效果,其中NVBEs抑菌活性较好,对S. aureus抑制效果最好,DIZ为9.84±0.57 mm,MIC为3.52 mg/mL,MBC为7.04 mg/mL。抑菌机理结果表明：NVBEs可增加S. aureus细胞壁及细胞膜的通透性,破坏菌体细胞结构,引起细胞内含物如核酸和蛋白质等外泄;引起遗传物质DNA的改变,使菌体细胞形态结构出现异常;影响菌体酶的代谢活动,从而抑制细菌的生长。     

2-Hydroxy-4-methoxybenzaldehyde inhibits the growth of Aspergillus flavus via damaging cell wall,cell membrane,manipulating respiration thus creating a promising antifungal effect on corn kernels

This study investigated the antifungal activity and the potential antifungal mechanisms of 2-hydroxy-4-methoxybenzaldehyde (HMB) against Aspergillus flavus (A. flavus). The minimum inhibitory concentration (MIC) of HMB in preventing spore germination was 70 μg mL⁻¹. HMB at MIC disrupted cell wall integrity by reducing the number of septa by 86.66% (P < 0.05) in mycelia and increased cell membrane permeability by about 14-fold (P < 0.05) evidenced by propidium iodide (PI) staining. Furthermore, HMB at MIC inhibited respiration by 33.33%. These results revealed that the antifungal activity of HMB against A. flavus could be attributed to the damaged cell wall integrity, cell membrane permeability and respiration metabolism. What’s more, A. flavus was completely restrained in corn kernels due to HMB. Therefore, HMB could be applied as an effective antifungal agent.     

山苍子精油抑制黄曲霉菌的生长和产毒作用研究

山苍子精油是一种纯天然植物精油,本文研究了其对黄曲霉生长、代谢和毒素产生的抑制作用,探讨了山苍子精油对黄曲霉菌的抑菌能力和作用机理。本研究将花生放置于自然环境染菌并分离纯化目标菌,采用形态学并结合ITS序列法进行菌株分类鉴定;结合抑菌圈、抑菌率和最低抑菌浓度(MIC)的测定探讨山苍子精油对黄曲霉菌的抑制能力;进行了山苍子精油影响黄曲霉孢子萌发率、生长曲线和黄曲霉毒素B1产生的实验研究;从细胞膜渗透性、细胞酶活性的变化探讨了山苍子精油抑制黄曲霉的作用机理。实验结果表明:从腐败花生中分离筛选出菌株HB₂,经ITS序列法鉴定为黄曲霉(Aspergillus flavus);黄曲霉素测定结果显示其含有黄曲霉素B1(AFB1),质量浓度为3.4×10³μg·kg^-1(纯湿菌体);抑菌圈随精油浓度的增大明显变大,对黄曲霉的最低抑菌体积分数(MIC)为0.800μL·mL^-1;孢子萌发率、牙管长度、黄曲霉菌体的生长量和AFB1的浓度随培养液中精油浓度的增大呈显著下降趋势,当山苍子精油浓度为0.100μL·mL     

江香薷活性成分香芹酚对指状青霉的抑菌作用

以指状青霉菌(Penicillium digitatum)为供试菌,研究江香薷活性成分香芹酚的抑菌活性及其抑菌机理。本文采用二倍稀释法测定其最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MFC),以此评价香芹酚对指状青霉菌的抑菌效果;并通过研究香芹酚对指状青霉的菌丝形态变化、孢子萌发率、细胞膜渗透性和菌体内可溶性糖含量,阐述香芹酚对指状青霉菌的抑菌机理。结果表明:香芹酚对指状青霉菌的MIC、MFC分别为0.125 mg/mL和0.25 mg/mL;经不同浓度香芹酚处理后的指状青霉,菌丝形态发生明显改变,孢子萌发率显著降低,细胞膜渗透性增强,菌体内可溶性糖含量降低。说明香芹酚能有效抑制指状青霉菌的孢子萌发,破坏细胞膜结构完整性,内含物外渗,降低营养物质含量,影响病原菌正常生长发育,从而发挥抑菌效果。     

香叶醇对柑橘酸腐病菌的抑菌机制

为研究香叶醇对柑橘酸腐病菌（Geotrichum citri-aurantii）的抑菌机制,用不同质量浓度的香叶醇处理柑橘酸腐病菌,通过生理生化分析及微观结构观察研究其对酸腐病菌孢子和菌丝体的影响。结果表明,香叶醇对柑橘酸腐病菌的最小抑菌质量浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）和最小杀菌质量浓度（minimal fungicidal concentration,MFC）均为0.500 g/L;MIC香叶醇处理酸腐病菌12 h后其孢子萌发率仅为（3.28±1.28）%,显著低于对照组的（92.17±1.88）%(P<0.05)。透射电子显微镜观察发现,香叶醇处理破坏了酸腐病菌细胞的完整性,细胞壁与细胞膜发生质壁分离,细胞器无法分辨,呈现空泡化。细胞通透性发生改变,碱性磷酸酶和核酸发生外泄,相对电导率升高,膜脂质过氧化反应增强,活性氧积累。综上所述,香叶醇通过抑制柑橘酸腐病菌孢子萌发和菌丝生长、破坏细胞结构、促进脂质过氧化和活性氧积累从而影响其正常生理功能,本实验可为有效防治柑橘酸腐病提供新思路。     

橙子果皮诱导抗病组分对意大利青霉的抑菌活性及作用机制

对前期研究发现的毛霉诱导脐橙果皮产生的抗病性红色物质组分进行分离纯化,并分析其对柑橘意大利青霉的抑菌活性及作用机制。结果表明,在50～200 μg/mL质量浓度下,红色物质组分对意大利青霉孢子萌发、芽管伸长、菌落生长和菌丝生物量增加表现出很强的剂量依赖型抑制作用。进一步研究表明：红色物质处理改变了菌丝细胞壁几丁质结构与分布,降低了几丁质含量;破坏了细胞膜通透性,降低了细胞膜总脂质含量和麦角固醇含量,影响了细胞膜的正常功能。说明红色物质作为替代化学杀菌剂的新型柑橘采后安全保鲜剂具有良好的研究和开发前景。     

Aqueous extracts of Tulbaghia violacea inhibit germination of Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus conidia

Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus are important plant pathogens and causal agents of pre- and postharvest rots of corn, peanuts, and tree nuts. These fungal pathogens cause significant crop losses and produce aflatoxins, which contaminate many food products and contribute to liver cancer worldwide. Aqueous preparations of Tulbaghia violacea (wild garlic) were antifungal and at 10 mg/ml resulted in sustained growth inhibition of greater than 50% for both A. flavus and A. parasiticus. Light microscopy revealed that the plant extract inhibited conidial germination in a dose-dependent manner. When exposed to T. violacea extract concentrations of 10 mg/ml and above, A. parasiticus conidia began germinating earlier and germination was completed before that of A. flavus, indicating that A. parasiticus conidia were more resistant to the antifungal effects of T. violacea than were A. flavus conidia. At a subinhibitory extract dose of 15 mg/ml, hyphae of both fungal species exhibited increased granulation and vesicle formation, possibly due to increased reactivity between hyphal cellular components and T. violacea extract. These hyphal changes were not seen when hyphae were formed in the absence of the extract. Transmission electron microscopy revealed thickening of conidial cell walls in both fungal species when grown in the presence of the plant extract. Cell walls of A. flavus also became considerably thicker than those of A. parasiticus, indicating differential response to the extract. Aqueous preparations of T. violacea can be used as antifungal treatments for the control of A. flavus and A. parasiticus. Because the extract exhibited a more pronounced effect on A. flavus than on A. parasiticus, higher doses may be needed for control of A. parasiticus infections.     

白黄链霉菌TD-1产帕马霉素对黄曲霉2219等霉菌的抑制作用

为研究微生物及其次级代谢产物对黄曲霉2219等霉菌的抑制机理,以分离于土壤中的白黄链霉菌(Streptomyces alboflavus)TD-1为研究对象,利用薄层色谱、硅胶柱层析、高效液相色谱和液相-质谱联用技术对其代谢产生的活性物质——帕马霉素进行分离。利用扫描电子显微镜、荧光显微镜和高效液相色谱方法研究帕马霉素对黄曲霉2219等霉菌生长的抑制效果及抑制机理。结果表明,白黄链霉菌TD-1上清液和菌丝体中活性物质的分子式预测为C₃₅H₆₁NO₇,为帕马霉素及其同系物,相对分子质量为593、607、621、635、649。通过扫描电子显微镜观察帕马霉素处理后的霉菌细胞形态,其孢子和菌丝体会发生不同程度畸变。帕马霉素对桔青霉的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)为0.125mg/mL,对灰霉的MIC为0.500mg/mL,对黄曲霉2219、黑曲霉、哈茨木霉和米曲霉的 MIC 均为1.000mg/mL。帕马霉素对霉菌的作用靶点为其细胞膜的麦角甾醇,抑制机制是破坏细胞壁的完整性,改变细胞膜的通透性,影响线粒体的能量代谢,抑制菌丝细胞膜中麦角甾醇的生物合成。帕马霉素对黄曲霉2219产生黄曲霉毒素B₁的抑制率达到98.3%。因此,可利用白黄链霉菌 TD-1及其代谢产物帕马霉素对食品原料中的产毒真菌污染进行生物防治。     

盐酸小檗碱抑制指状青霉的作用机制

本实验主要对盐酸小檗碱(berberine hydrochloride,BH)抑制指状青霉(Penicillium digitatum)生长的活性以及可能的作用机制进行探讨.结果表明,BH抑制指状青霉生长的最低抑菌质量浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌质量浓度(m...     

复配精油对粮油中霉菌防治的增效作用及机理研究

开发新型天然防霉剂控制粮食霉变是保障粮食质量安全的重要途径之一。为研究复配植物精油对粮油储藏过程中常见霉菌赭曲霉(Aspergillus ochrator)、黄曲霉(Aspergillus flavus)和黑曲霉(Aspergillus niger)的防霉效果,挑选活性较强的植物精油进行复配并对联合防霉效果进行评价。通过复配植物精油对霉菌孢子萌发、菌丝干重和细胞完整性的影响,对其防霉机理进行初步探究。结果显示,牛至精油对赭曲霉和黑曲霉的防霉效果最好,抑菌圈直径分别为（27.83±0.58 ）、（15.33±0.29）mm,肉桂醛对黄曲霉的防霉效果最好,抑菌圈直径为（18.50±0.87 ）mm;山苍子精油与牛至精油、肉桂醛与牛至精油复配体积比为2：8时对3种霉菌的防霉效果较优;通过对部分抑菌浓度指数判读,两组植物精油复配对黑曲霉和赭曲霉的防治效果为协同作用,对黄曲霉的防治效果为相加作用;山苍子精油与牛至精油按体积比2：8复配可抑制霉菌孢子萌发和菌丝生长、破坏细胞的完整性、改变孢子和菌丝结构;山苍子精油和牛至精油按体积比2：8复配施用于含黄曲霉的玉米上,可有效降低玉米中黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素的含量。本研究为山苍子精油与牛至精油复配作为防霉剂提供理论支持。     

Antifungal activity of radicicol against Mucor flavus IFO 9560

The antifungal activity of radicicol against Mucor flavus IFO 9560 was investigated. Radicicol induced bursting of spores during germination and morphological changes of the mycelial tip such as overbranching and swelling during exponential growth. In addition, radicicol showed a dose-dependent inhibitory effect on spore germination. Radicicol also inhibited the incorporation of radioactive precursors into DNA, RNA, protein, and chitin fractions by 20-30%, but not into the lipid fraction. There were no inhibitory effects on either endogenous or exogenous cellular respiration. Moreover, leakage of UV-absorbing, phenol sulfate-positive, or folin reagent-positive materials from the mycelia was not observed at an early stage of growth inhibition. On the other hand, kinetic studies of chitin synthase in the untreated mycelia revealed that radicicol noncompetitively inhibited the enzyme at Ki of 87 microM. Furthermore, upon incubation of the normal mycelia with radicicol in 50 mM KH2PO4-NaOH buffer (pH 6.5) containing 10 mM MgCl2, chitin synthase from the mycelia was inactivated gradually at first, and completely after 24-h incubation. These results suggested that radicicol exhibits the antifungal activity by disturbing cell wall biosynthesis through the inactivation of chitin synthase. However, at an early stage of growth inhibition, radicicol was thought to affect cellular function including nucleic acid and protein syntheses, in addition to the reversible noncompetitive inhibition of chitin synthase.