邻苯二酚对酿酒酵母理化特性的影响

邻苯二酚是木质纤维素水解液中一种主要的细胞生长抑制物,毒性作用较强,能抑制后续酒精发酵过程中酿酒酵母的生长和发酵性能。本文研究邻苯二酚对酿酒酵母GGSF16理化特性的影响,结果表明,邻苯二酚质量浓度为1.2 g/L时,明显抑制酿酒酵母细胞的生长和代谢,导致消耗葡萄糖的时间变慢和乙醇发酵周期变长,降低乙醇生成率;明显改变酵母细胞的膜通透性,使胞内核酸和蛋白质发生内漏,含量分别是对照组的2.50,2.01倍;细胞内的应激代谢物海藻糖含量显著升高2.89倍;此外,为了抵抗细胞的氧化损伤,胞内GSH含量显著降低70.63%。扫描电子显微镜显示：用邻苯二酚处理后,表面光滑、饱满的酵母细胞的细胞壁和细胞膜被破坏,出现空洞、大量撕裂碎片和彼此之间粘黏等现象,细胞失去保护作用而死亡。本研究初步明确了酚类物质对酿酒酵母的损伤和毒性机制,为进一步揭示木质纤维素水解液对酿酒酵母的抑制作用提供参考。     

酿酒酵母中线粒体活性对甲酸处理下细胞死亡率的影响

已知甲酸可抑制线粒体呼吸链末端的细胞色素氧化酶,低浓度的甲酸可导致细胞内线粒体活性氧的快速爆发并进一步杀死酵母细胞。因此,对可能影响酿酒酵母细胞线粒体产生活性氧的因素进行了研究,分析了菌龄、低温预处理、还原剂、线粒体ATP酶基因突变等对甲酸毒性的影响。结果表明,酿酒酵母对甲酸的抗性与线粒体活性密切相关,通过线粒体突变降低线粒体活性可增强酿酒酵母对甲酸的抗性。     

丁香醛对酿酒酵母乙醇发酵过程和理化特性的影响

为探究甘蔗糖蜜中丁香醛对酿酒酵母细胞的毒性机理,该研究以蔗糖模拟糖蜜中的可发酵性糖(250 g/L)作为发酵体系,采用摇瓶发酵法,外源添加不同质量浓度的丁香醛(0、0.5、1、1.2、1.4、1.6、1.8、2 g/L),探究其对酿酒酵母细胞生长的影响;进一步系统的研究1.4 g/L丁香醛对酵母细胞生长和产乙醇发酵能力的影响,并结合扫描电镜、傅里叶红外光谱和细胞膜通透性、细胞氧化损伤实验分析发酵过程中丁香醛对酵母细胞的毒性机理。结果表明,随着丁香醛浓度的增加,酿酒酵母细胞生长受抑制程度逐渐增加;其中1.4 g/L丁香醛会抑制酿酒酵母细胞的生长与代谢,使乙醇生成浓度与总糖发酵效率分别降低18.65%、17.64%;酵母细胞壁与细胞膜受到损伤,能明显看到细胞产生空洞、胞间粘连现象;细胞膜成分脂肪酸、多糖和蛋白质部分基团发生变化;与对照组相比,胞内核酸与蛋白质外泄量分别增加56.39%、58.29%,胞内丙二醛含量显著增加75.79%。综上,丁香醛会通过破坏细胞膜的完整性使部分酵母菌体受损伤甚至死亡,从而导致糖和乙醇的代谢缓慢,该文为揭示丁香醛对酿酒酵母细胞的毒性机理,实现甘蔗糖蜜高浓度乙醇...     

酿酒酵母的发酵优化与动力学研究

研究了酿酒酵母在游离生长条件下细胞生长、乙醇生成和葡萄糖消耗动力学.通过耐高温酿酒活性干酵母在35℃的复合培养基中不通风生长的三水平正交实验,用Gauss-Newton非线性最小二乘法拟合了发酵动力学参数.当发酵液中的葡萄糖浓度远大于饱和生长系数Ks时,酵母细胞的生长代谢规律受葡萄糖的影响很小.乙醇总是减缓酿酒酵母的生长代谢速率,当乙醇浓度达到完全抑制值KP时细胞就停止生长.酵母细胞的自由生长存在极限浓度Kx,而在细胞浓度为Kx/2处获得最大细胞增长率.当发酵液中乙醇浓度低于KP[1-β/(αμmax)]时,在细胞浓度为Kx[1-β/(αμmax)]/2处获得最大乙醇发产率.而高于此乙醇浓度时,乙醇产率随细胞浓度单调增加.在发酵动力学方程的基础上,可根据发酵目标对发酵条件进行优化.     

铜对葡萄酒酿酒酵母生长活性的影响

以模拟葡萄汁为培养基,添加CuSO4设置0、0.05 mM、0.10 mM、0.20 mM、0.50 mM和1.00 mM 6个不同的Cu2+浓度,研究铜胁迫对葡萄酒酿酒酵母生长活性的影响.结果表明,铜胁迫能够延缓酿酒酵母的生长,降低酿酒酵母的存活率,导致细胞呼吸缺陷型形成频率的增加.0.05 mM Cu2+对酿酒酵母的生长活性基本没有影响.但是1.00 mM Cu2+对3株酿酒酵母的生长活性均产生了显著影响.通过试验比较发现,铜对酵母生长活性的影响可能与菌株对铜离子的吸附能力有关.     

补料分批发酵生产谷胱甘肽的研究

考察5L 发酵罐中分批补加葡萄糖对发酵生产谷胱甘肽(GSH)的影响。采用20g/L 初糖质量浓度,在发酵12h 至27h 每隔3h 分别补加22、24、24、24、24g/L 和22g/L 葡萄糖,可以使酿酒酵母在发酵33h 时GSH 质量浓度达到72.49mg/L,细胞干质量浓度达到28.52g/L,分别为初糖20g/L 分批培养方式的2.86 倍和4.93 倍。补料分批发酵可以明显促进酿酒酵母生长和提高GSH 的合成。     

酵母与芽孢杆菌在小麦粉基质中共培养的生长规律

微生物间的影响是多菌种纯种发酵研究的重要内容。本研究在恒定的初始碳源和持续供给碳源条件下,分析了酿酒酵母、毕赤酵母、汉逊酵母和鲁氏酵母分别与枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌混合发酵过程中的相互作用。结果显示,营养物浓度对酵母的生长能力起主要作用,同时,枯草芽孢杆菌对酵母有生长抑制效应,而地衣芽孢杆菌则没有。与枯草芽孢杆菌混合培养时,汉逊酵母(MAX=5.30×10~8±0.54×10~8CFU/m L)和毕赤酵母(MAX=6.73×10~7±0.70×10~7CFU/m L)都能保持一段生长增殖阶段,而酿酒酵母和鲁氏酵母细胞数都持续减少;与地衣芽孢杆菌混合培养下,除汉逊酵母有明显的生长增殖过程(MAX=14.70×10~8±3.00×10~8CFU/m L)外,毕赤酵母和酿酒酵母表现维持生长,其细胞数分别在0.22×10~8CFU/m L和0.70×10~8CFU/m L左右小幅波动,而鲁氏接合酵母细胞数呈持续下降。总体而言,除汉逊酵母与地衣芽孢杆菌的混酵过程以酵母细胞增殖为主,其他培养过程均以芽孢杆菌增殖为主。同时,酵母与芽孢杆菌的适配性顺序为汉逊酵母毕赤酵母酿酒酵母鲁氏酵母。     

酿酒酵母中表达神经肉毒素A及其功能研究

肉毒神经毒素(BoNT)是肉毒梭菌产生的神经毒素,是最强大的毒素之一。为了研究肉毒神经毒素A在酵母中的活性及功能,在酿酒酵母细胞中表达BoNT/A LC,观察其对酵母生长影响以及通过蛋白免疫印迹方法研究其在酵母中蛋白表达水平。结果表明:BoNT/A抑制野生型酵母的生长;在酿酒酵母细胞中BoNT/A具有水解酶活性,当其活性位点突变后,BoNT/A突变体的表达不会抑制酿酒酵母的生长;过量表达酵母的SNAP25同源基因SEC9可以回补BoNT/A轻链过表达的酵母的生长。在BoNT/A轻链表达的酵母细胞中,其催化活性可以通过酵母的生长来检测。因此,这类特殊的酵母细胞可以用来分析BoNT/A。     

培养基中各营养组分对酿酒酵母发酵的影响

酿酒酵母常被用于乙醇发酵,作为能量和营养的来源,培养基的组分对于酿酒酵母的生长以及耐酒精能力有很大的影响,使用Plackett-Burman设计方法,通过对酿酒酵母发酵培养基中的各个组分进行分析研究,发现各个组分的影响力大小为:酵母膏>蛋白胨>MgSO4>CaCl2>(NH4)2SO4>KH2PO4。通过单独对酵母膏和蛋白胨在酵母细胞生长及耐酒精性能方面的研究,发现提高其含量,可以在发酵的各个阶段提高酵母细胞的细胞密度、乙醇耐受性及发酵能力。     

阿片肽酿酒酵母工程菌摇瓶发酵工艺

研究了发酵培养基成分、补加方式及外源氨基酸对酿酒酵母发酵和表达的影响．结果表明，发酵前在液体发酵培养基中一次性补加酵母抽提物（YE）有利于目的产物的表达，发酵过程中补加YE不利于目的产物的表达，发酵中后期补加适量的葡萄糖有利于阿片肽的表达．添加外源氨基酸对酿酒酵母工程菌的生长有一定的促进作用，而且可以明显地影响阿片肽的表达．通过正交实验对酿酒酵母生长和表达条件进行优化，确定最优工艺参数为：培养基中酵母抽提物质量浓度为25g／L，C：N比2．8，培养基初始PH5．0，摇床转速220r／min．在最优条件下研究了酿酒酵母表达目的产物的情况，总蛋白质质量浓度为614．50mg／L．SDS-PAGE电泳和双波长凝胶扫描结果表明：目的阿片肽约占总分泌蛋白质的5％，其表达量为30．7mg／L，是优化前的1．49倍。     

基于非靶向代谢组学分析酿酒酵母甲酸胁迫的响应和耐受性机制

采用液相色谱-质谱联用(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MC)的非靶向代谢组学,探究酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)响应甲酸胁迫的代谢机制.主成分分析和正交偏最小二乘判别分析等多元统计结果表明,甲酸处理后酿酒酵母中发生显著变化(P＜0.0...     

硫酸二乙酯化学诱变选育高核糖核酸酿酒酵母及培养基组成优化

该研究以酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）BY23为出发菌株,采用硫酸二乙酯（DES）对其进行化学诱变,筛选出一株生长性能好、胞内核糖核酸（RNA）含量高的突变株BY23-195,并以胞内RNA含量为评价指标,通过单因素及正交试验对其糖蜜培养基成分进行优化。结果表明：突变株BY23-195生长性能较好,在酵母浸出粉胨葡萄糖（YEPD）培养基中,RNA含量较出发菌株BY23提高了18.85%。最优糖蜜培养基组分为糖蜜（糖度调至12 °Bx）、酵母浸粉5%、硫酸铵0.05%、磷酸二氢钾0.05%、硫酸亚铁0.05%、硫酸锌0.10%。在此最优培养基组成下,突变株BY23-195胞内其RNA含量达到16.01%,较优化前（13.66%）提高了17.20%。     

基于酿酒酵母体系的人参皂苷抗衰老活性筛选及评价

以酿酒酵母作为模式生物对人参皂苷进行抗衰老活性筛选并对其活性展开初步探讨。基于模式菌酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae BY4742）的生长曲线筛选出人参皂苷的最适给药浓度,在此基础上,根据酵母的生长曲线和超氧化物歧化酶SOD活性筛选八种人参皂苷单体Rb1、Rb2、Rg1、Rg2、Rg3、Rh1、Rh2、Rd的抗衰老作用,找出效果最佳的一种单体皂苷,再通过抗氧化指标检测及细胞形态变化分析,初步探究人参皂苷的抗衰老作用。同时提取酿酒酵母蛋白进行蛋白组学分析,确定具有显著差异的蛋白,结合GO富集分析相关生物学分析,对差异蛋白的功能通路、属性和代谢通路等进行分析研究。结果表明,人参皂苷的最适给药浓度是180 μg/mL,常用的八种单体皂苷中人参皂苷Rg1具有明显的抗衰老作用,能延缓酵母进入衰亡期。人参皂苷Rg1可以不同程度提高酵母细胞内的抗氧化酶:超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和过氧化物酶（POD）活性,减少活性氧（ROS）含量和丙二醛（MDA）含量。蛋白组学分析结果显示人参皂苷延缓酿酒酵母衰老可能与14个显著差异蛋白有关,同时与细胞代谢有密切关系。     

不同酿酒酵母对芒果白兰地香气的影响

为研究不同酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）对芒果白兰地香气及挥发性物质的影响,以桂七芒果为原料,6种酿酒酵母（M型、P型、A型、R型、E型、C型）为发酵剂制备原芒果白兰地,使用感官品评、气相色谱（GC）法结合主成分分析（PCA）法对其进行分析。结果表明,C型酵母酿造的芒果白兰地香气浓郁且清香、口感清冽,而其他酵母具有异味,口感不协调,酒体粗糙、粗劣等问题。通过气相色谱分析得知,C型酵母产生的酸类物质含量较高,M型酵母产生的醇类、醛酮类物质含量较高,P型酵母产生的酯类物质含量较高,R型酵母产生的芳香类物质含量较高,A型酵母与E型酵母产生的各类挥发性化合物不突出。主成分分析结果表明,C型酵母酿制的白兰地风味物质组成明显区别于其他组,对其影响较大的风味物质主要是乙酸和甲酸乙酯。     

不同酵母提升霞多丽葡萄酒品质的对比分析

本文研究了CEC01、EC1118、Str不同酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)对霞多丽酿酒葡萄品质的影响。霞多丽酿酒葡萄经过采摘、分选、除梗、压榨、成分调整、静置、活化酵母(CEC01、EC1118、Str)、酒精发酵、分离倒罐、澄清、密闭储存传统酿造工艺酿造,进行感官评价,检测分析常规理化指标、香气物质。结果表明,酿酒酵母CEC01酿造葡萄酒感官质量总分82.00分高于酿酒酵母EC1118、Str总分。说明CEC01酿造的葡萄酒感官质量较佳。酿酒酵母CEC01酿造的霞多丽干白葡萄酒的残糖为1.50g/L低于酿酒酵母EC1118、Str残糖,酒精度为12.90%vol高于酿酒酵母EC1118、Str酒精度。酿酒酵母CEC01发酵过程中平均总酸、平均总酚含量呈降低趋势,说明其在降酸方面发挥着重要作用。酿酒酵母CEC01酿造葡萄酒醇类香气物质相对含量为62.83%,酸类香气物质相对含量为1.45%,酯类香气物质相对含量为35.68%。酿酒酵母EC1118、Str酿造葡萄酒醇类香气物质相对含量为75.48%、78.62%,酸类香气物质相对含量为2.33%、1.58%,酯类香气物质相对含量为22.17%、19.73%,CEC01葡萄酒感官质量最佳。     

酵母细胞液处理对白鲢鱼鱼糜脂肪氧化和风味的影响

研究酵母细胞液脱除鲢鱼肉的腥味,以水洗鱼糜为对照,采用化学分析、感官评定、气相色谱- 质谱-嗅闻(GC-MS-O)研究酵母细胞液对白鲢鱼鱼糜脂肪氧化和风味的影响。结果表明：葡萄酒酵母细胞液能显著抑制鱼肉脂肪氧化,并快速消除鱼肉的硫代巴比妥酸反应物(TBARS),在2h 内从2.4 mg/kg 降低到0.8mg/kg,速率约为0.8mg/(kg·h) (25℃)。水洗鱼糜鱼腥味残留较重,葡萄酒酵母细胞液处理鱼糜的鱼腥味大部分被脱除。鱼糜中具有鱼腥味的2- 葵烯醛、2, 4- 葵二烯醛在经葡萄酒酵母细胞液处理后已检测不到,而水洗鱼糜中有部分2- 葵烯醛残留(0.48mg/kg)。所以,葡萄酒酵母细胞液对白鲢鱼鱼糜具有很好的脱腥效果。     

绿原酸对酿酒酵母发酵特性的影响

以模拟苹果汁为发酵体系,添加质量浓度为0（对照组）、0.01、0.1、1.0 g/L的绿原酸,通过考察发酵过程中酿酒酵母CICC31084的生物量、葡萄糖消耗、CO2释放、发酵液乙醇生成以及发酵液关键香气物质变化,研究发酵过程中绿原酸对酿酒酵母发酵特性的影响。结果表明：高质量浓度绿原酸能够促进酵母细胞生长,加快CO2释放和糖代谢速率,延缓发酵前期乙醇生成速率,高质量浓度（1.0 g/L）绿原酸对酿酒酵母发酵特性的影响更加显著,能够缩短整个发酵周期2～3 d。绿原酸作用下,发酵末期香气物质苯乙醇、乙酸乙酯、乙酸异戊酯含量增加,正己酸乙酯、癸酸乙酯含量降低,而辛酸乙酯含量差异不大。     

活性干酵母活化时间与级数对葡萄酒发酵的影响

研究活性干酵母活化方式对葡萄酒发酵的影响。 分别将活性干酵母进行不同时间（25 min、3 h 15 min、24 h 15 min）和不同级 数（两级和三级）的活化,将等量的酵母种子活化液接种到24 °Bx模拟葡萄汁中,24 ℃条件下发酵18 d。 结果表明,活化3 h 15 min的酿 酒酵母生长代谢能力强,在葡萄汁中生长繁殖迅速,耗糖快;产乙醇较多（60.88 g/L）;产乙酸较少（0.77 g/L）。 进行三级3 h 15 min活化 的酵母活性高,活酵母菌浓度较大（最高4.53×107 个/mL）,不同级数活化的酵母在发酵过程中还原糖含量差异显著（P＜0.05）,CO2生 成量、乙醇和乙酸含量无显著差别（P＞0.05）。     

Effect of overexpression of LAS17 on stress tolerance and the stability of extrachromosomal DNA in Saccharomyces cerevisiae

The effects of the overexpression of LAS17/BEE1, which encodes a yeast protein exhibiting sequence homology to the Wiscott-Aldrich syndrome protein, on the cell growth of Saccharomyces cerevisiae were examined. Sake yeast strain UT-1 grows at a faster rate as a result of the overexpression of LAS17 than control cultures under various stresses such as high temperature, high ethanol concentration, and oxidative stress, and the tolerance to these stresses was increased compared with the control. Moreover, a high cell survival rate was attained with overexpression of LAS17, when cells in the stationary phase of the growth cycle were subjected to heat killing (48 degrees C) or ethanol killing (20% v/v). In addition, the rate of induction of rho- was markedly reduced by overexpression of LAS17 when serine, tyrosine, and aspartic acid were used as N sources and the yeast was cultured at 35 degrees C, while rho- strains in control cultures were induced at a high frequency. After the incubation of cells harboring a multicopy vector in YPD or synthetic complete medium, almost all of the cells inherited the vector at about 15 copies per cell as a result of the overexpression of LAS17, whereas the cells harboring the control vector accounted for only 15% of the total number of cells. These results suggest that Las17p might be a multifunctional protein involved in cell growth regulation, extrachromosomal DNA transportation and stress responses.