美味牛肝菌胞外多糖高产菌株的诱变选育

对美味牛肝菌胞外多糖的高产菌株进行了诱变选育。结果表明,美味牛肝菌原生质体制备的最佳条件是56 h菌龄的菌丝体,酶解温度31~35℃,酶解时间2 h,2%纤维素酶和蜗牛酶体积比1∶1,稳渗剂0.010 92 g/mL的甘露醇;原生质体产量是3.71×105个/mL,再生率是7.32%;15 W紫外灯30 cm处照射时间6 min,对原生质体进行诱变处理。选育出一株胞外多糖产量比原始菌株高30.40%的菌株。     

海洋细菌胞外多糖高产菌株的复合诱变选育及培养条件研究

采用紫外线、氯化锂复合诱变海洋细菌B1108,筛选出1株产胞外多糖较高的突变株B1108-1.该菌株产胞外多糖最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为酵母膏.通过培养条件优化,菌株B1108-1产胞外多糖达到498.87mg/100mL,较始发菌株提高2倍以上.     

原生质体紫外诱变选育多糖高产菌株

采用紫外诱变选育多糖高产菌株,通过对原生质体形成条件及诱变条件的研究,探索出了原生质体形成和诱变的最优条件:菌龄为52h,酶解浓度为0.02g/mL,酶解时间为2h,酶解温度为25℃~29℃,0.6mol/L的甘露醇做稳渗剂。通过实验并确定了紫外诱变最佳条件为15W紫外灯30cm处照射时间为10m in,通过初筛和复筛,最终选育出5株遗传性状稳定的多糖高产诱变株,多糖产量分别提高了21.7%、13.5%、12.2%、37.4%、24.0%。     

复合诱变原生质体选育高产中性蛋白酶菌株

为进一步提高菌株产中性蛋白酶能力,在原生质体最佳形成条件下制备得到Bacillus subtilis UN9原生质体,并对其进行紫外线与亚硝基胍复合诱变,通过摇瓶复筛,得到高产、稳定的突变株Bacillus subtilis Promax NTG14,产酶能力相比出发菌株提高了近24%,中性蛋白酶活力达4286.09 U/mL.试验结果表明,复合诱变原生质体是一种快速、有效的优良产酶菌株选育途径.     

高产胞外多糖干酪乳杆菌的太空诱变选育

为了提高干酪乳杆菌G5的胞外多糖产生能力,采用太空诱变技术对其进行选育,从中筛选出高产胞外多糖菌株。通过富集培养、平板筛选、脱脂乳发酵和遗传稳定性实验,最终得到两株高产胞外多糖且遗传稳定性较好的突变株EPS-33和EPS-43。突变株EPS-33和EPS-43在25℃发酵脱脂乳,发酵结束时胞外多糖的产量分别220.42和198.49mg/L,为出发菌株的1.9倍和1.7倍。2个突变菌株与出发菌株产胞外多糖的变化趋势基本相同,但产量大幅增加。     

原生质体诱变筛选香菇多糖高产菌株

对香菇原生质体进行诱变,以期望得到香菇多糖高产菌株.选择合适剂量的60Coγ射线,根据香菇多糖的产量,筛选出高产香菇多糖的菌株.选择剂晕为600Gy的,0coy射线对香菇原生质体进行诱变,得到香菇多糖产量比出发菌株提高了20.6%的突变菌株,传代8代后,其产香菇多糖遗传稳定性保持良好.通过对香菇原生质体进行60Coγ射线诱变,可以得到能提高香菇多糖产量的菌株,为香菇的良种选育和香菇多糖的开发提供参考.     

原生质体紫外诱变选育纳豆激酶高产菌株

以纳豆菌B．N．K为出发菌株，在适宜条件下制备和再生原生质体，并结合紫外线诱变筛选纳豆激酶高产菌株。经过原生质体紫外诱变的重复处理、摇瓶复筛和遗传稳定性试验，最终得出5株高产菌株即DU104、DU115、DU120、DU212、DU223，酶活分别为383．65、400．74、327．15、347．16、378．98IU／ml，比出发菌株B．N．K分别提高了67．1％、74．5％、42．5％、51．2％和65．0％。     

紫外-等离子体复合诱变红曲霉产胞外多糖

以红曲霉ZL307为出发菌株,采用紫外结合常压室温等离子体的复合诱变方法对其进行诱变。紫外诱变条件为:照射距离15 cm,功率15 W,时间90 s。等离子体诱变条件为:照射距离3 mm,注入气体氦气,气流量10 L/min,功率200 W,时间180 s。筛选得到具有良好遗传稳定性的菌株ZJ307-3,与原始菌株相比,发酵周期没有发生明显的改变,7 d时多糖产量达到550.07 mg/L,提高61.18%。复合诱变菌株多糖产量较单紫外诱变菌株提高27.58%,较单等离子体诱变菌株提高12.55%。     

高产胞外多糖的嗜酸乳杆菌诱变筛选

嗜酸乳杆菌所产生的胞外多糖不仅对于酸乳的质地结构有影响,同时其还具有多种生物活性.研究主要是在市售酸奶中分离得到嗜酸乳杆菌、通过化学诱变的方法选取具有高产胞外多糖性能的嗜酸乳杆菌,其产量能够达到6.458g/L,遗传稳定性发现胞外多糖产量降幅在10%以内.     

复合诱变选育茁霉多糖高产菌株

茁霉多糖具有许多优良的化学性质,可以作为中间体合成多种有经济价值的工业用化合物,是一种潜在的重要化工平台产品.以出芽短梗霉Y为出发菌株,通过紫外2轮、亚硝基胍3轮复合诱变,高蔗糖浓度(20％)平板筛选得到6株高产突变株,其中菌株N3茁霉多糖产量质量浓度达到37.84g/L,比出发菌株产量提高71.22％.     

氯化锂诱变赤灵芝原生质体选育高锗菌株的研究

采用化学诱变剂氯化锂诱变赤灵芝原生质体,对高锗含量的菌株进行了筛选。结果表明:经0.3%氯化锂诱变后,致死率为72.8%。此时诱变菌株第4代锗含量达到最高,为174.88μg/g,比原发菌株提高了269.02%,第3代比第1、2代锗含量分别提高3.33%、0.80%,较原发菌株提高了281.30%,诱变菌株遗传稳定性良好。     

氯化锂诱变赤灵芝原生质体选育高产三萜类菌株

采用化学诱变剂氯化锂诱变赤灵芝原生质体,对高产三萜类菌株进行筛选。结果表明:经0.3%氯化锂诱变后,原生质体致死率为72.8%,胞内、胞外三萜类产量达到最高,分别为55.33mg/g和14.88×10-2mg/mL,比原菌株分别提高了461.72%和136.57%。第2代、第3代诱变菌株比原菌株胞内三萜类产量分别提高了483.05%和496.04%,胞外三萜类产量分别提高了158.66%和171.38%,诱变菌株遗传稳定性良好。     

灵芝多糖不同提取方式的比较研究

目的 比较5种不同提取方式所得灵芝粗多糖的提取得率、理化性质、抗氧化活性, 确定最优提取方式。方法 采用热水浸提法、超声清洗辅助提取法、超声破碎提取法、微波辅助提取法、酶辅助提取法提取灵芝粗多糖, 可分别表示为H-GLP、U1-GLP、U2-GLP、M-GLP、E-GLP, 苯酚-硫酸法测定总糖含量、二硝基水杨酸(dinitrosalicylic acid, DNS)法测定还原糖含量, 比较对2,2-二(4-叔辛基苯基)-1-苦肼基自由基(DPPH?)清除活性, 羟自由基(?OH)清除活性和还原力大小, 分析抗氧化活性, 以傅里叶红外光谱仪(fourier transform infrared spectrometer, FT-IR)和高效阴离子交换色谱(high performance anion exchange chromatography, HPAEC-PAD)进行结构表征。结果 5种提取方式提取得率的大小排列顺序为: M-GLP>E-GLP>U2-GLP> H-GLP>U1-GLP, 其中M-GLP的提取得率最高为3.98%, 其多糖含量为46.80%, 还原糖含量为5.36%。5种方式提取所得粗多糖都体现出一定的抗氧化活性, M-GLP具有较强DPPH?清除活性, U2-GLP具有较强的羟自由基清除活性, 十分接近阳性对照。结论 微波辅助提取法在提取得率和抗氧化活性都优于其他提取方式, 值得进一步开发与利用。     

灵芝菌丝体深层发酵工业化生产的研究

目的:采用生物发酵工程技术进行灵芝菌丝体多糖扩大生产;方法:利用农副产品(如玉米粉、豆粕粉)作培养基,在发酵罐中,根据其控制参数(如接种量、总糖量、还原糖、pH值、通风量、罐压、温度、生长因子),进行灵芝菌丝体多糖工业化扩大生产。结果:经过20批容积为10m3,定容为7.5m3发酵罐正常试验,生产周期平均为150h;pH值从6.5降至3.5;放罐后灵芝菌丝体经均质和喷雾干燥后其干粉平均每罐重量为66.1kg,干粉平均收率为8.76kg/m3,干粉中纯多糖含量为68.5g/kg,每罐纯多糖重量为4.225kg。镜检菌丝壁上无明显“芽头与锁状联合”,并有少量菌丝体自溶,无杂菌。结论:试验证明本工艺方案是成功的,是值得推广的新工艺。     

赤芝胞外三萜体外抑制几种细菌生长的研究

采用管碟法实验了赤芝发酵液中胞外三萜对大肠杆菌(G-)、金黄色葡萄球菌(G+),以及枯草芽孢杆菌的体外抑菌作用。结果表明,赤芝胞外三萜组分对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长有较明显的抑制作用,而对枯草芽孢杆菌的抑制作用相对较弱;该赤芝胞外三萜对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为40mg/mL;而对枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度为80mg/mL。此外,该赤芝胞外三萜的抑菌成分在40℃和60℃下(处理2h)较稳定,但在80℃和100℃温度下,热稳定性较差。     

发酵灵芝胞外多糖硫酸化修饰

发酵灵芝胞外多糖表现出微弱的抗肿瘤活性,硫酸化是改善多糖抑癌活性的重要途径,而多糖的硫酸化取代度与其生物活性密切相关。为了了解硫酸化取代度与硫酸化条件之间的关系,以获取不同取代度的产品,对发酵灵芝胞外多糖的硫酸化试剂以及硫酸化反应条件与取代度之间的关系进行了较深入研究。实验结果表明,氨基磺酸比氯磺酸的硫酸化过程更加缓和,尿素的加入也有利于缓和反应条件,提高取代度。     

灵芝多糖的研究进展

灵芝多糖是灵芝的主要活性成分,近年来以其独特的保健功能成为研究的热点。灵芝多糖结构如分子量、单糖组成和糖苷键类型等,对其活性影响很大,本文列举了灵芝多糖结构通用的检测方法。已有实验证实,灵芝多糖的生物保健功能主要体现在降血糖、降血脂、抗肿瘤、提高免疫力和抗氧化方面,由于固态栽培灵芝有诸多因素的制约,液体发酵培养成为获取灵芝多糖的主要手段,而液态发酵条件的优化研究主要集中于种子的培养、碳源氮源的选择及微量微量元素的添加。传统提取灵芝多糖的方法如热水浸提法、碱提取法,有提取时间长、提取效率不高的缺点,而利用超声波辅助提取多糖受到人们的关注,并和传统提取方法做了比较,显示了这种方法的广阔应用前景。     

超声波法提取灵芝袋泡茶多糖的实验研究

应用超声波技术对灵芝袋泡茶多糖的提取工艺进行多因素研究,改进了原灵芝袋泡茶用水煮酒沉的生产工艺。通过多因素考察超声波法提取灵芝袋泡茶多糖的实验条件,结果显示灵芝袋泡茶在pH2.0的条件下超声波提取0.5～1h得到的灵芝多糖的含量最多,与未处理多糖含量相比,超声波在0.5～1h的粗多糖增加10%～20%。     

灵芝多糖树脂法脱色工艺优化

利用大孔树脂对灵芝多糖进行脱色。比较10种大孔树脂在脱色方面的性能,以灵芝多糖的脱色率和多糖保留率为考察指标,结果发现D303树脂的脱色效果最佳,通过单因素试验和正交试验对D303树脂的灵芝多糖脱色各种工艺参数进行优化,得到D303树脂静态脱色的最佳参数为在样品上样质量浓度15mg/mL、pH6、脱色温度50℃、脱色时间7h条件下,灵芝多糖溶液的脱色率可达91.89%,多糖保留率75.28%;D303树脂动态脱色的最佳参数为上样流速3BV/h、每毫升树脂上样量150mg,此条件下灵芝多糖溶液的脱色率可达92.01%,多糖保留率71.85%。研究表明D303树脂适合应用于灵芝多糖的脱色工艺。     

优化发酵条件提高灵芝多糖产率的研究

通过不同的灵芝菌种、培养基的组成和不同的培养条件对灵芝进行深层发酵试验,利用优化实验条件确定灵芝深层发酵的最佳培养条件。在此条件下灵芝菌丝体干质量可达15.2g/L,胞外多糖含量为3.7g/L,为灵芝多糖的工业化发酵生产奠定了基础。