文蛤肉复合酶酶解技术研究

为开发高品质的文蛤肉蛋白水解液,采用单因素试验方法确定胰蛋白酶和精制中性蛋白酶的复合比例.采用二次正交旋转组合试验设计,探讨复合酶酶解文蛤肉的技术条件.结果表明,胰蛋白酶与精制中性蛋白酶的复合酶组合比例为3:1的酶解效果较好,复合酶酶解文蛤肉的最优生产工艺参数为加酶总量4 500U/g原料,酶解温度50℃,酶解时间3印min,pH(7.50±0.05),液固比3:1.在此条件下得到的酶解液的总氨基氮含量达296.24mg/100mL,酶解得率85.14%,风味评分值为209.51.建立了文蛤肉酶解液中总氨基氮含量Y1、酶解得率Y2、风味评分值Y3与加酶量X1、酶解温度X2、酶解时间X3的数学回归模型,置信度99%.     

蛋白酶复合水解文蛤肉制备海鲜香料的工艺

以感官评分为指标,比较了不同种类蛋白酶和用酶量对文蛤肉水解液风味的影响,并采用正交实验优化了文蛤肉二段法复合酶解工艺条件:复合蛋白酶75 U/g,中性蛋白酶75 U/g,在45℃、自然pH下水解3 h;然后加入风味蛋白酶50 U/g,在50℃、自然pH下水解1 h。最终获得的水解液色泽为棕黄色,具有咸鲜滋味和明显蛤类特征香气,感官评分为5.5分,味精当量EUC高达53.25 g/L,氨基氮含量为4.16 g/L,水解度为35.3%,水解得率为36.4%,多肽含量为21.8 g/L。     

复合酶水解巴非蛤肉工艺研究

以巴非蛤肉为原料,选择木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和中性蛋白酶分步水解制备水解液.通过时水解条件的研究,确定木瓜蛋白酶最适酶解条件为:酶用量6000U/g原料、料水比1:8(w/v)、50℃、pH6.5下酶解4h,水解度为35.84%.分步酶解的工艺条件为:在料水比1:8(w/v)、pH6.5、温度50℃条件下,用木瓜蛋白酶先水解4h,菠萝蛋白酶、中性蛋白酶再依次水解4h,水解度达到48.35%.复合酶水解液的氨基酸分析结果表明,游离氨基酸含量丰富,约为866.4mg/100mL(色氨酸未计),其中必需氨基酸占32.6%,尤其是谷氨酸、天门冬氨酸、甘氨酸等呈味氨基酸含量丰富.结果为巴非蛤肉复合水解液作为疗效营养剂或高级调味料提供了依据.     

复合酶水解巴非蛤肉工艺研究

以巴非蛤肉为原料,选择木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和中性蛋白酶分步水解制备水解液。通过对水解条件的研究,确定木瓜蛋白酶最适酶解条件为:酶用量6000U/g原料、料水比1∶8(w/v)、50℃、pH6.5下酶解4h,水解度为35.84%。分步酶解的工艺条件为:在料水比1∶8(w/v)、pH6.5、温度50℃条件下,用木瓜蛋白酶先水解4h,菠萝蛋白酶、中性蛋白酶再依次水解4h,水解度达到48.35%。复合酶水解液的氨基酸分析结果表明,游离氨基酸含量丰富,约为866.4mg/100mL(色氨酸未计),其中必需氨基酸占32.6%,尤其是谷氨酸、天门冬氨酸、甘氨酸等呈味氨基酸含量丰富。结果为巴非蛤肉复合水解液作为疗效营养剂或高级调味料提供了依据。      

文蛤肉复合酶分步酶解工艺的研究

本实验探讨了中性蛋白酶和胰蛋白酶的复合酶与风味蛋白酶分步酶解文蛤肉的技术。 通过q检验法确定中性蛋白酶和胰蛋白酶最佳的复合比例,再通过正交试验探讨复合酶与风味蛋白酶二段酶解的最佳工艺参数,并以水解度、水解得率及风味评分值为指标对分步酶解工艺的最佳条件进行比较验证。结果表明,胰蛋白酶与中性蛋白酶的最佳复合比例为3:1,风味蛋白酶二段酶解的最优工艺参数为水解温度55℃、水解时间5.0h、加酶量1000 U/g(原料)、pH值(5.00±0.05),所得文蛤肉水解液中水解度、水解得率及风味评分值分别为55.97%、87.14%及230.98。     

波纹巴非蛤肉复合酶水解肽的抗疲劳效果

目的:观察巴非蛤肉复合酶水解肽的抗疲劳效果。方法:昆明种小鼠随机分为对照组,低、中、高剂量组,对照组以6.0mL/(kg体重.d)的生理盐水灌胃,低、中、高剂量复合酶水解肽组分别以3.0、6.0、9.0mL/(kg体重.d)的复合酶水解肽溶液灌胃,1次/d。连续灌胃30d后,测定小鼠负重游泳时间、低压耐缺氧能力及抗疲劳相关生化指标,判断抗疲劳效果。结果:巴非蛤肉复合酶水解肽高剂量组小鼠低压耐缺氧能力明显增强(P<0.05),负重游泳时间明显延长(P<0.05),肝糖原含量、肝脏组织及血红细胞(Hb)中超氧化物歧化酶活力均明显升高(P<0.05),运动后血清尿素氮含量明显降低(P<0.05),而血乳酸含量降低极明显(P<0.01)。结论:巴非蛤肉复合酶水解肽具有较好的抗疲劳效果。     

复合酶水解牛肉的研究

研究了以牛肉为原料，选择复合蛋白酶(Protamex)和复合风味酶(Flavourzyme)分步水解牛肉蛋白。通过对影响牛肉水解因素的考察，得出Protamex酶的最适水解条件为：前处理加热温度90℃，加热时间10min，加酶量2％，反应温度55℃；，pH值6．0，固液比1：5，反应时间为6h，此条件下的水解度为12．57％。为了提高牛肉的水解度，采用双酶水解，其工艺条件为1先用Protamex水解6h，然后用Flavourzyme再水解6h，Flavourzyme的水解条件为加酶量6．0％，反应温度50℃，其它条件与Protamex相同，在此条件下水解度可达24.62％。     

复合酶水解猪血液工艺条件的研究

为了探索出经济实用的酶解猪血的方法，对两种不同来源的蛋白酶其采用单一和复合酶水解鲜猪血的酶解效果进行了比较。结果表明：复合法酶解鲜猪血水解效果最好。复合酶最适水解工艺条件为：最初pH为7-8，温度为50～55℃，酶底物浓度比(E／S)为6000-8000μ/g，底物浓度为8％，水解时间为8h。     

复合酶水解猪血液工艺条件的研究

为了探索出经济实用的酶解猪血的方法,对两种不同来源的蛋白酶其采用单一和复合酶水解鲜猪血的酶解效果进行了比较。结果表明:复合法酶解鲜猪血水解效果最好。复合酶最适水解工艺条件为最初pH7～8、温度50℃、酶底物浓度比(E/S)为6000U/g、底物浓度8%、水解时间8h。     

复合酶水解乳鸽肉的研究

以乳鸽脯肉为原料 ,选择复合蛋白酶 (Protamex)和复合风味酶 (Flavourzyme)分步水解制备乳鸽肉水解液。通过对水解条件的研究确定Protamex酶最适酶解条件为 :固液比为 1∶2 ,反应温度为 5 5℃ ,pH值 7 5 ,酶用量 0 2 % ,酶解时间 5h ;在此反应条件下 ,单一酶酶解液最高水解度为 2 5 %左右 ;分步酶解的工艺条件是 :Protamex酶反应进行 2h后 ,加入 0 5 %Flavuorzyme酶 ,5 0℃下酶解时间 14h ,酶解液水解度达 40 % ,复合水解液呈亮黄色 ,味道鲜美。氨基酸分析结果表明 ,游离氨基酸含量约 46 41mg/mL (色氨酸未计 ) ,必需氨基酸2 8 3 8mg/mL ,占 61 2 %。尤其是亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苏氨酸等支链氨基酸含量以及谷氨酸、天门冬氨酸、甘氨酸等呈味氨基酸含量丰富。结果为乳鸽肉复合水解液作为疗效营养剂或高级调味料提供了依据。     

青蛤酶解多肽对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用

研究酶解法制备的青蛤多肽（Cyclina sinensis peptides,CSP）对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用。以RAW264.7巨噬细胞相对增殖率为指标,选用胃蛋白酶对青蛤肉进行酶解,酶解液经超滤、冷冻干燥后,采用噻唑蓝（methyl thiazolyltetrazolium,MTT）法筛选出增殖活性最高的组分进行免疫调节作用研究。采用MTT细胞增殖实验、倒置显微镜观察、中性红吞噬实验、硝酸根还原酶法及酶联免疫吸附检测法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）测定CSP-5对RAW264.7巨噬细胞的生长与增殖、细胞形态、吞噬能力、一氧化氮（nitric oxide,NO）分泌能力及细胞因子白介素（interleukin,IL）-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）分泌能力的影响;同时还研究了CSP-5对巨噬细胞各周期分布的影响。结果表明,分子质量小于3 kDa的CSP-5对RAW264.7细胞的生长与增殖具有明显的促进作用,且主要作用于G0/G1期,对细胞吞噬能力、NO分泌能力和细胞因子分泌能力的提高具有显著的促进效果;形态学观察结果显示经CSP-5作用后巨噬细胞体积变大且长出较多伪足。由此可知,CSP-5具有激活巨噬细胞增强机体免疫力的潜在作用。     

青蛤多肽的酶法制备及对前列腺癌DU-145细胞的抑制活性

探讨青蛤多肽的制备工艺及体外抗前列腺癌DU-145细胞的活性。以氨基氮含量为检测指标,筛选最优酶种类并进行正交试验以获取最佳酶解青蛤内脏酶解工艺。经超滤截留、琼脂糖凝胶层析、高效液相色谱分离纯化及噻唑蓝（3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT）活性筛选得到含有5 个氨基酸的多肽（Ile-Leu-Tyr-Met-Pro）。对所得多肽采用MTT法测定DU-145细胞增殖抑制率;采用倒置显微镜、Hoechst 33258染色及透射电子显微镜技术观察细胞形态学变化;采用荧光法检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平;采用线粒体膜电位检测DU-145细胞凋亡情况;采用免疫组织化学法检测非转移性克隆23型（nm23H1）蛋白的表达。结果表明：制备青蛤多肽最佳酶是木瓜蛋白酶,最佳酶解条件是料液比1:4、pH 7.0、加酶量1 500 U/g、温度45.0 ℃、酶解时间4 h;所得多肽对DU-145细胞的增殖具有明显的抑制作用,且呈时间与剂量依赖性;处理后的DU-145细胞出现凋亡的形态学特征;其质量浓度和细胞内ROS的表达量呈正相关关系;线粒体膜电位降低率从4.22%提高到25.07%;免疫组织化学法结果显示nm23H1蛋白的表达量增加。青蛤多肽能明显抑制DU-145细胞的增殖,并通过诱导其发生凋亡而发挥作用。     

青蛤多糖的提取工艺优化及其抗氧化活性

研究热水浸提青蛤多糖的提取工艺并测定青蛤多糖的体外抗氧化活性。采用单因素试验和正交试验设计优化提取工艺,优化的提取工艺为:提取温度95℃,提取时间为4 h,液料比10∶1(m L/g),提取次数2次,青蛤多糖的得率为(3.41±0.04)%。对脱蛋白后的青蛤多糖体外抗氧化活性研究表明,其具有较强的和浓度依赖的还原能力和总抗氧化能力,对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除活性均随浓度升高而增大,显示青蛤多糖具有显著的体外抗氧化活性。     

青蛤与文蛤的营养成分分析与评价

对海州湾冬季养殖池塘中成体青蛤与文蛤营养成分进行测定,结果表明：青蛤和文蛤这两种海洋埋栖蛤类的贝肉水分含量(77.23、76.39g/100g mf)、总糖含量(4.45、4.14g/100g mf)均较为接近,而灰分、粗脂肪以及粗蛋白含量均有显著差异(P ＜ 0.05)。文蛤粗蛋白含量高达15.54g/100g mf,而青蛤为11.55g/100g mf;青蛤的灰分及粗脂肪含量分别高达4.91g/100g mf 和1.86g/100g mf,显著高于文蛤含量(2.86g/100g mf 和1.07g/100g mf)。在Cd、Cr、Cu、Ni、Pb 和Zn 这6 种重金属中Zn 含量最高,青蛤的含量仅12.77μg/g,文蛤则高达252.59μg/g,除Pb 在青蛤略超标外,其余均未超标。这两种贝肉均含有18 种编码氨基酸,其中含有人体所需的全部10 种必需氨基酸。青蛤与文蛤的第一限制氨基酸均为缬氨酸,氨基酸评分分别为50.8 和53.0,第二限制氨基酸均为苯丙氨酸+ 酪氨酸,氨基酸评分分别为55.0 和53.5。谷氨酸的含量最高,在青蛤和文蛤中分别高达116.5mg/g 和111.5mg/g,这远高于其他17 种氨基酸。呈味氨基酸在总氨基酸中所占的比例均高达42% 以上,适宜作为食用或开发呈味物质;青蛤与文蛤的必需氨基酸指数IEAA 相近,分别为50.0 和50.3。必需氨基酸占总氨酸的比例则十分接近,均在45% 左右,远高于WHO/FAO 推荐的模式35.38%,这说明青蛤和文蛤是比较理想的蛋白源。     

秀珍菇鲜味菇液酶解制备工艺优化

以秀珍菇等4种干燥食用菌为原料,研究了不同酶解条件对制备秀珍菇鲜味菇液的影响,并采用响应面方法优化酶解工艺。结果表明:酶解法制取秀珍菇鲜味菇液最优条件为蛋白酶酶解温度42℃、蛋白酶pH 7.30、纤维素酶量0.10%,该条件下水解度为18.510%。     

酶解法制备菌菇酱工艺优化

目的：以香菇、杏鲍菇、双孢菇为原料,采用纤维素酶对其进行酶解处理制备菌菇酱。方法：采用酶解法,以氨基酸态氮含量为指标,通过响应面法优化菌菇酱的最佳酶解工艺。结果：菌菇酱的最佳酶解工艺条件为酶添加量0.6%、pH 6、酶解温度50 ℃、料液比1∶30 （g/mL）,此工艺条件下,实测菌菇酱的氨基酸态氮含量为0.418 μg/100 g。结论：该菌菇酱的感官评定及营养成分指标均达到或优于国标标准,表明该工艺切实可行,具有一定的推广应用价值。     

白鲢鱼头蛋白酶解工艺研究

以白鲢鱼下脚料中最为重要的鱼头为原料,以水解液中氨基氮含量为指标,比较了木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶5种酶的水解效果,从中选出最佳水解酶,在单因素实验基础上对其水解工艺进行正交实验优化,并对其水解产物中游离氨基酸组成进行分析。结果表明:胰蛋白酶对鱼头蛋白的水解效果最佳,最佳工艺条件为水解温度55℃,pH8.0,料水比1∶3(g/m L),加酶量80 U/g,在此条件下水解液中游离氨基氮含量为63.69 mg,水解液中游离氨基酸含量较高。      

利用低值鱼生产氨基酸调味基料工艺的研究

介绍以低值鱼为原料,用生物酶解方法制备氨基酸调味基料的生产工艺。在实验过程中分别对酶用量、反应温度、反应时间等影响酶解的因素进行了研究,确定了酶解的最佳反应条件。     

牡蛎肉双酶复合水解和酸水解工艺

以牡蛎肉为原料,采用中性蛋白酶和菠萝蛋白酶同时水解技术和酸水解的方法,对牡蛎肉进行水解,通过对水解条件的研究确定双酶酶解的条件为:在料水比1∶8(g/mL)、pH7.0、温度50℃的条件下,先用中性蛋白酶(每克原料)2.3×10-5Kat水解4 h;然后依次用菠萝蛋白酶(每克原料)1.7×10-4Kat连续水解4 h。氨基酸分析结果表明:牡蛎肉中含有17种氨基酸,其中包括人体必需的7种氨基酸。     

河蟹肉酶解产物的氨基酸组成分析

以邻苯二甲醛为衍生剂,采用反向高效液相色谱、二级阵列检测器测定河蟹肉酶解蛋白粉的水解氨基酸及游离氨基酸组成。结果表明,河蟹肉中含有48.5%的呈味氨基酸和35.2%的必需氨基酸。与碱性蛋白酶和胰蛋白酶解粉相比,河蟹肉蛋白酶解粉中木瓜蛋白酶解粉氨基酸组成均衡,呈味和必需氨基酸含量较高,与FAO/WHO推荐的成人、学龄儿童必需氨基酸需求量模式相比,其第一限制氨基酸均是亮氨酸,氨基酸分分别达116.74和50.41。