云芝菌丝体超氧化物歧化酶的分离纯化及性质研究

从云芝菌丝体中分离纯化超氧化物歧化酶(SOD),并对其性质进行了研究。结果表明,SOD粗酶液经膜过滤、硫酸铵分级盐析、SephadexG-75凝胶柱层析分离后,SOD纯化了12.6倍,总回收率为50.6%,获得SOD酶比活为4.61U/mg蛋白。提纯SOD在257nm处有特征吸收峰,其活性受氯仿-乙醇影响不明显,但受到H2O2明显抑制,酶活在50℃以下较稳定,超过50℃以上,活性随温度升高而降低。说明云芝菌丝体SOD以Cu,Zn离子为辅基,并具有较好的热稳定性。     

云芝菌丝体超氧化物歧化酶的分离纯化及性质研究

从云芝菌丝体中分离纯化超氧化物歧化酶（SOD）,并对其性质进行了研究。结果表明,SOD粗酶液经膜过滤、硫酸铵分级盐析、SephadexG-75凝胶柱层析分离后,SOD纯化了12.6倍,总回收率为50.6%,获得SOD酶比活为4.61U/mg蛋白。提纯SOD在257nm处有特征吸收峰,其活性受氯仿-乙醇影响不明显,但受到H2O2明显抑制,酶活在50℃以下较稳定,超过50℃以上,活性随温度升高而降低。说明云芝菌丝体SOD以Cu,Zn离子为辅基,并具有较好的热稳定性。      

大麦虫超氧化物歧化酶分离纯化及性质研究

目的：探讨大麦虫超氧化物歧化酶(SOD)分离纯化条件及其性质,为大麦虫利用提供科学依据。方法：以大麦虫为原料,经盐析沉淀、DEAE-Sepharose FF阴离子交换柱层析和Sephadex G-75凝胶过滤层析等纯化, 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法对蛋白质的组分进行分离并确定其分子质量,原子吸收光谱仪鉴定酶的类型。结果：获得了一种酶比活力较高的大麦虫SOD,酶的纯化倍数为68.54倍,分子质量为37.30kD,属于含铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD),且在278nm波长处有紫外吸收峰,稳定性较好,最适温度为40℃,最适pH值为6.0,对H2O2、β-巯基乙醇试剂十分敏感,受氯仿-乙醇混合液(3:5,V/V)的影响较小。结论：大麦虫SOD具有较高的酶比活力,稳定性好,具有较高的利用价值。     

猪血中超氧化物歧化酶的分离与纯化

超氧化物歧化酶(Superoxide dismu-taae,简称SOD)属金属酶,是一种重要的氧自由基清除剂。SOD作为一种在医疗上有广泛应用前景的药用酶,被证明在医疗自身免疫性疾病、心肌缺血与缺血再灌注综合症、某些心血管疾病以及抗衰老等方面功效显著。SOD亦可作为化妆品和食品的添加剂,它在农业上的巨大应用潜力也日益引起广泛的关注。 SOD自从1969年发现其活力以来,人们进行了深入研究,它已成为少数几种研究     

钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶分离纯化技术研究

为研究从螺旋藻中分离纯化SOD的最优化方法,采用细胞破碎方法、最佳丙酮用量、最佳硫酸铵饱和度和DEAE-52离子交换层析技术分离纯化螺旋藻中的SOD并作比较分析。结果表明:从螺旋藻中分离纯化的SOD的比活高达2179U/mL,提纯倍数24.2;纯化的SOD经SDS-PAGE分析,呈现的谱带均一且对H2O2非常敏感,推断为Fe-SOD。因此采用优化技术可以从螺旋藻中分离纯化获得高纯度和高比活的SOD。     

鹅红细胞Cu,Zn-SOD分离纯化及部分性质的研究

经氯仿-乙醇分级分离，丙酮沉淀及DE-32纤维素柱层析的方法，从鹅红细胞中得到纯化的Cu，Zn-SOD。结果表明此酶的比活力为10656．14U／mg，提纯倍数为354．73，聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白带与活性带相对应。相对分了量约为32000，相对亚基分子量约为16000。最大紫外吸收波长为258nm，列KCN和H202敏感，最适pH为6～9，热稳定性在60℃以下。     

玉米超氧化物歧化酶的纯化及性质研究

从玉米胚芽提取得到的SOD粗酶液,经硫酸铵分级沉淀、DE-52纤维素柱层析和Sephadex G-75层析法分离纯化,得到纯的玉米SOD,比活为3 583.3 U/mg蛋白,纯化倍数为61.4.经鉴定,玉米SOD为Cu,Zn-SOD,Cu和Zn离子含量之比约为1∶5,在260nm处有最大吸收峰.用SDS-PAGE测得SOD亚基分子量为18 800,玉米SOD分子量为37 600.实验表明,玉米SOD在50℃以下热稳定性较好,在pH 7～8较稳定.     

从大蒜细胞中分离纯化出超氧化物歧化酶

对从大蒜细胞中提取超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)的工艺过程进行了研究。通过对热变性法、等电点法、丙酮分级沉淀法和硫酸铵盐析法等几种方法的实验分析比较,找出一套操作简便SOD总收率高的分离纯化工艺。     

大蒜细胞溶质中超氧化物歧化酶的分离纯化

采用热变性、聚乙二醇 (PEG) 60 0 0沉淀作用和DEAE 纤维素柱层析 3种方法对大蒜细胞溶质中的超氧化物歧化酶进行分离纯化。经过 3步分离纯化 ,从 5 0 0 g大蒜中得到15 6mg产品 ,比活为 314 5 5U/mg。酶的类型是Cu·Zn SOD ,在紫外区的最大吸收峰是 2 5 8nm。     

鸡红细胞Cu,Zn- SOD的纯化及部分性质研究

目的:从鸡红细胞分离铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD),并对其部分性质进行研究.方法:用氯仿-乙醇除杂蛋白、丙酮沉淀、热变性、DEAE-32柱色谱等方法,对鸡红细胞Cu,Zn-SOD进行分离纯化.结果:得到Cu,Zn-SOD干粉5.9mg,比活10196.27U/mg蛋白,活力回收70.43%,纯化倍数为125.82.理化性质分析表明:该酶的最大紫外吸收波长264nm,相对分子量约为31000D,相对亚基分子量约为16500D,pH在6～9范围内稳定性很好,在40～60 ℃内保温30min酶活基本不变,2mmol/L SDS对此酶没有明显的抑制,该酶对H2O2和KCN敏感.结论:鸡红细胞含有丰富的Cu,Zn-SOD.     

猪肝超氧化物歧化酶的分离纯化与初步表征

研究猪肝SOD的分离提取、纯化以及初步表征。以猪肝为原料,通过抽提液加热、丙酮沉淀和Sephadex G-200层析柱色谱提取、纯化Cu,Zn-SOD;在单因素试验的基础上,采用L(934)设计对提取工艺进行系统优化。结果表明:经过热变性,可以除去大部分杂蛋白,提高了SOD的比活力;最佳的提取条件是:在1.4%的盐浓度下,于70℃水浴中热变性10 min,然后加1.6倍体积的丙酮获得SOD粗沉淀;溶解后的粗酶液经Sephadex G-200层析柱纯化后,经SDS-PAGE电泳检测为单一条带,HPLC检测显示为单一对称峰,均表明最终得到了高纯度的SOD;紫外-可见吸收光谱和ICP-MS分析结果均表明得到的是含铜、锌的SOD,即Cu,Zn-SOD;以邻苯三酚为底物,该酶的Km值为1.574,Vmax为0.268。     

牛血铜锌超氧化物歧化酶分离提取新工艺

在传统制备超氧化物歧化酶的基础上,进行工艺改进。直接用血块,采用机械破碎法破膜,热变性及两次乙醇-氯仿沉淀除杂蛋白,然后丙酮沉淀,按照此工艺分离提取获得高纯度的Cu,Zn-SOD,比活达到6988U/mg•pro。     

越橘叶超氧化物歧化酶的分离纯化与定性研究

采用超声波辅助提取越橘叶超氧化物歧化酶得粗酶液,经选择性热变性、Sephadex G-75柱层析、透析、冷冻干燥,得到纯度较高的越橘叶超氧化物歧化酶。聚丙烯酰胺凝胶电泳显示在32kD和42kD左右有2条清晰条带;紫外-可见光谱扫描在波长258nm和280nm处有吸收峰;原子吸收光谱也测定出越橘叶超氧化物歧化酶中含有铁、锰、锌离子。结果表明越橘叶超氧化物歧化酶有3种类型:Fe-SOD、Mn-SOD和Cu/Zn-SOD。     

大蒜细胞溶质中超氧化物歧化酶的性质研究

利用热变性、等电点沉淀和DEAE -纤维素柱层析分离纯化大蒜细胞溶质中的超氧化物歧化酶 ,并对其性质进行了研究。结果表明 ,温度 40～ 6 0℃、pH4～ 9范围内酶的活性稳定 ,对KCN和H2 O2 敏感 ,紫外光区的吸收峰在 2 5 8nm ,可见光区的吸收峰在 6 80nm ,表明酶的类型为Cu·Zn SOD。     

大蒜细胞溶质中超氧化物歧化酶的性质研究

利用热变性、等电点沉淀和DEAE-纤维素柱层析分离纯化大蒜细胞溶质中的超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD),并对其性质进行了研究。结果表明:温度40～60℃、pH4～9范围内酶的活性稳定对KCN和H2O2敏感紫外光区的吸收峰在258nm,可见光区的吸收峰在680nm,表明酶的类型可能是Cu·Zn-SOD。     

玉米超氧化物歧化酶的提取与纯化工艺

为优化玉米超氧化物歧化酶(SOD)提取与纯化工艺。研究不同浸提条件及沉淀分离工艺对玉米SOD提取及纯化效果的影响。最佳诱导和浸提的原料与缓冲液配比分别为1∶1.5~1∶3、1∶2,最佳诱导和浸提时间分别为25 h~30 h、1.5 h。采用50、60℃分别处理15、10 min两次热变性除杂蛋白、丙酮沉淀SOD的纯化效果最好。DEAE-纤维素柱层析纯化后,SOD比活为1 699.7 U/mg,回收率为31%,纯化倍数为30.7。该方法高效且低毒污染少,适于工业化生产。