不同菌株固态生料发酵棉籽粕的研究

研究了微生物固态生料发酵对棉籽粕中游离棉酚和蛋白质含量变化的影响。利用12株菌固态生料发酵棉籽粕筛选出高效脱除棉酚菌株和产蛋白酶能力最佳的菌株,在此基础上进行菌株复配发酵棉籽粕。结果表明:单菌棉籽粕固态发酵实验中地衣芽孢杆菌Bl2脱毒效果最佳,脱毒率为42.7%,水溶性蛋白含量8.2%,小肽含量4.19%;产蛋白酶能力较强菌株为Bs1和Bs3,蛋白酶酶活力分别为43.8 U/mL和43.6 U/mL;混菌组合发酵中,从脱毒率和营养价值改善考虑,Bl2+Cu1为最佳组合,其脱毒率为50.03%,水溶性蛋白含量为9.11%,小肽含量为6.98%。混菌发酵效果优于单菌发酵。     

复合发酵棉籽粕营养价值及活性产物分析研究

旨在研究复合固态发酵(两株酵母和一株霉菌)对棉籽粕脱毒效果及营养价值的影响,同时分析测定发酵底物中的活性产物。结果表明:复合发酵可极显著降低棉籽粕底物游离棉酚含量(P0.01),降解率达71.90%;棉籽粕底物粗蛋白、总氨基酸和必需氨基酸含量分别提高28.96%、8.83%、7.58%;发酵54~60 h时底物中蛋白酶活力最高(酸性蛋白酶活力为931.58 U/g,中性蛋白酶活力为1 097.79 U/g,碱性蛋白酶活力为798.62 U/g),纤维素酶活力最高(滤纸酶活力为1 601.66 U/g,Cx酶活力为3 590.02 U/g,C1酶活力为1 685.35 U/g),淀粉酶活力最高为578.05 U/g;同时发酵过程产生了一定量的有机酸。     

核桃粕发酵乳菌种筛选及发酵条件优化研究

该试验对乳酸菌发酵核桃粕乳的不同菌株进行筛选,通过pH值、酸度及感官评定分析,从9株乳酸菌中筛选出嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)两株优良菌种。研究两株乳酸菌的复配比例,并与传统发酵剂发酵的核桃粕乳进行品质对比。结果表明,以嗜酸乳杆菌:植物乳杆菌(1∶1)接种发酵后得到的发酵核桃粕发酵乳综合品质最佳,其感官评分90分,氨基酸态氮含量57.0 mg/L,活菌总数7.35×107 CFU/mL,经发酵后的营养价值明显优于传统发酵剂发酵的核桃粕乳。     

复合固体发酵对棉籽饼脱毒效果的影响研究

通过测定发酵底物中游离棉酚(FG)、粗蛋白质(CP)含量,体外法测定饲料蛋白质消失率等方法研究热带假丝酵母ZD-3(Candida tropicalisZD-3)与黑曲霉ZD-8(Aspergillus nigerZD-8)复合固体发酵对棉籽饼粕脱毒效果的影响;碳酸钠以及矿物质处理对棉籽饼复合发酵脱毒效果的影响。试验结果表明:复合发酵可极显著(P<0.01)地降低棉籽饼底物游离棉酚含量,脱毒率为91.64%;棉籽饼底物粗蛋白含量提高27.83%;粗蛋白体外消化率提高20.90%。结果表明,复合发酵效果明显优于单菌发酵棉籽饼底物的效果,不但达到棉酚脱毒的目的,而且发酵饲料营养价值显著提高。底物中添加碳酸钠及复合矿物质可促进棉籽饼的发酵脱毒效率。     

高效降解游离棉酚菌株的鉴定、安全性评价及发酵工艺研究

本实验利用芽孢杆菌发酵棉籽粕,研究对棉粕中游离棉酚降解率的影响,及对发酵前后饲料营养成分如活菌数、中性蛋白酶酶活和酸溶蛋白等的影响,并对发酵效果较好的菌株进行菌株鉴定、安全性分析及发酵工艺探索。研究发现:可高效降解棉籽粕中游离棉酚含量及改善营养品质的芽孢杆菌为BLCC1-0039,游离棉酚的测定方法确定为高效液相色谱法;菌株形态观察和生理生化鉴定并结合其16S rDNA序列,初步确定其为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);枯草芽孢杆菌杆菌BLCC1-0039的体内安全性评价,发现未对实验小鼠造成形态和活动异常,也未观察到脏器器官病变,初步确定了枯草芽孢杆菌杆菌BLCC1-0039的体内安全性;枯草芽孢杆菌BLCC1-0039发酵棉籽粕提高发酵料的酸溶蛋白含量和中性蛋白酶活性并有效降低游离棉酚含量:发酵48 h时,发酵棉籽粕酸溶蛋白为26.96%,中性蛋白酶活性为3897 U/g,游离棉酚降解率为97.81%。     

生物发酵法改善菜粕品质的研究

通过生物发酵的措施来改善菜粕的营养价值。采用枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、植物乳杆菌、酿酒酵母、黑曲霉、芬氏纤维微菌以及从土壤中筛选的三株菌(命名为T-1、T-2、T-3)分别对菜粕进行单菌固态发酵,以降低硫苷、单宁、粗纤维和提高酸溶蛋白、蛋白质溶解度为目标筛选出高效菌株,将这些高效菌株以不同比例进行混合,获得最优组合并优化其发酵条件,将发酵菜粕替代基础饲粮中25%、50%、75%、100%的未发酵菜粕,通过肉鸡饲养试验验证发酵菜粕的使用效果。结果表明:1)单菌发酵以地衣芽孢杆菌、T-1、芬氏纤维微菌的效果最优,其中地衣芽孢杆菌能显著降低硫苷、单宁的含量(P0.05),T-1能显著提高酸溶蛋白和蛋白质溶解度(P0.05),芬氏纤维微菌能显著降低粗纤维的含量(P0.05);2)混菌发酵以地衣芽孢杆菌、芬氏纤维微菌、T-1按1:2:2的比例混合时效果最优,在混合菌液总有效菌数为10~9 CFU/mL、接种量为10%、料水比为1:0.6、发酵温度为37℃的条件下,发酵48 h时,硫苷降解率达89.4%(P0.05),单宁降解率为28.6%(P0.05),粗纤维含量由10.0%降至8.6%(P0.05),酸溶蛋白提高了254.0%(P0.05),蛋白质溶解度提高了31.6%(P0.05);3)使用发酵菜粕替代未发酵菜粕后,显著提高了肉鸡1~21日龄的平均日增重(P0.05),显著降低了肉鸡1~21日龄的料重比(P0.05)。通过生物发酵能有效降低菜粕中的抗营养因子,提高其营养价值,发酵菜粕能改善肉鸡生长性能。     

普洱茶发酵产茶多糖菌株的筛选与鉴定

以不同阶段的普洱茶发酵样为实验材料进行真菌的分离纯化,将分离纯化出的优势真菌在理想条件下和自然状态下分别进行茶叶接种发酵,筛选出产茶多糖的优势菌。结果表明,在普洱渥堆发酵中共分离纯化出22株菌株,其中5株菌株在渥堆发酵的不同阶段频繁检出,可用于接种发酵实验。在接种发酵中,茶多糖均有显著增加(p0.05)。其中PEZJ-1菌株提高茶多糖含量最为显著,在理想条件下和自然状态下的接种发酵中茶多糖含量分别达到23.57%和27.85%。通过菌落形态、分生孢子显微特征、18S r DNA序列,对PEZJ-1进行鉴定,确定该菌株为Aspergillus niger(Gen Bank登录号为JX863374),属于曲霉属。在普洱茶渥堆发酵中接种外源微生物能显著提高茶多糖含量,Aspergillus niger能大幅度提高茶多糖含量,为茶多糖的开发应用提供了微生物菌种。     

北苍术固态发酵菌株的筛选、鉴定及发酵工艺优化

为筛选出适合北苍术固体发酵的菌株,以菌落数和粗多糖得率为筛选指标,获得适合北苍术发酵的乳酸菌,以含水量、接种量和发酵时间为因素,在单因素试验基础上,利用响应面法对发酵工艺进行优化。结果表明,从保存的菌株中共筛选出3株适合北苍术发酵的乳酸菌,通过生理生化试验以及16S rDNA测序确定该3株菌分别为乳酸片球菌（Pediococcus acidilactici）和戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）。北苍术固态发酵的最佳条件为含水量50%、接种量5.5%、发酵时间2 d。在此条件下,北苍术粗多糖得率达到10.10%,相比未发酵组提高了37.45%。抗氧化试验表明,发酵能够显著提高北苍术粗多糖的DPPH自由基清除率和羟自由基清除率（P<0.05）。     

高效降解棉籽粕中游离棉酚菌株的筛选及复配发酵方式的优化

利用酵母菌和乳酸菌发酵棉籽粕,研究其对棉籽粕中游离棉酚降解率的影响,并对发酵前后棉籽粕的营养指标如活菌数、酸溶蛋白、pH和游离棉酚含量等进行比较。筛选出了可高效降解游离棉酚的酵母菌BLCC4-0327,可改善发酵风味的乳酸菌BLCC2-0092。并对筛选出的酵母菌和乳酸菌复配发酵进行了初步研究,结果表明,最优复配发酵组为BLCC4-0327+BLCC2-0092(1:1),30℃厌氧发酵。与空白对照组相比,最优复配发酵组各发酵阶段的发酵棉籽粕的pH均显著降低(P0. 05),发酵24 h时pH降至5. 73;酸溶蛋白含量显著提高(P 0.05),发酵24 h时酸溶蛋白质量分数达到14.61%,发酵48 h时酸溶蛋白质量分数达到17.61%;游离棉酚含量显著降低(P0. 05),发酵24 h时游离棉酚降解率达到70. 99%,发酵48 h时游离棉酚降解率达到73. 44%。由此可知,酵母菌BLCC4-0327与乳酸菌BLCC2-0092复配发酵可有效降低发酵棉籽粕中的游离棉酚含量并改善其营养品质。     

棉酚降解菌的筛选、鉴定及棉粕固态发酵效果研究

目的:筛选分离出棉酚降解菌株,研究其生长降解特性和对棉粕中棉酚脱毒效果,为深入研究微生物降解棉酚的机制提供依据。方法:从山东棉花产地采集土壤样本,以醋酸棉酚为唯一碳源,稀释涂布法分离筛选出一株具有棉酚降解能力的菌株,通过16S rRNA基因序列系统发育分析以及生理生化特征对菌株进行初步鉴定,确定菌属。用高效液相色谱测定其对棉酚的降解和棉粕固态发酵脱毒效果。结果:筛选到一株可以降解棉酚的细菌,命名为YL01,初步鉴定为拉乌尔菌属Raoultella sp.。该菌株除利用棉酚外,还可以邻苯二酚、原儿茶酸和对苯醌为唯一碳源生长。YL01在以棉酚为唯一碳源的无机盐液体培养基中生长10 d后,棉酚的降解率为48%;接种该菌株到棉粕中,通过固态发酵,8 d内棉粕中棉酚含量下降43%,蛋白含量增加10%。结论:本研究分离筛选到一株棉酚降解菌Raoultella sp. YL01,为进一步深入研究棉酚的微生物降解机制奠定了基础,其对运用生物处理技术消除棉粕中棉酚具有潜在的应用前景。     

含水量对不同原料发酵参数的影响

试验旨在研究含水量对不同饲料原料发酵品质的影响,采用分组对照实验设计,以乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌分别固态发酵玉米、豆粕和棉籽粕,设30%、40%、50%、60%四个含水量,以感官评价、pH和发酵后益生存留量为发酵品质评定指标。结果表明：随发酵时间延长,pH表现二次曲线的规律（P<0.01）;含水量显著影响玉米、豆粕和棉籽粕的发酵（P<0.05）,不影响原料初始pH（P>0.05）;pH达到稳定时,50%含水量的玉米、豆粕和棉籽粕的乳酸菌、枯草芽孢杆菌数量高于其它处理（P<0.05）。本试验条件下,乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌分别发酵玉米,最佳含水量为50%;乳酸菌、枯草芽孢杆菌分别发酵豆粕和棉籽粕,最佳含水量为60%;酵母菌发酵豆粕和棉籽粕,最佳含水量为50%。     

假丝酵母ZD-3与黑曲霉ZD-8复合固体发酵对棉籽饼脱毒及营养价值的影响研究

研究目的为研究热带假丝酵母ZD-3与黑曲霉ZD-8复合固体发酵对棉籽饼粕脱毒效果、蛋白质营养价值及显微形态结构等的影响。利用热带假丝酵母ZD-3和黑曲霉ZD-8对棉籽饼进行单菌及复合固体发酵，然后测定发酵底物中游离棉酚（FG）、氨基酸含量，体外法测定饲料蛋白质氨基酸消失率，用环境扫描电镜拍摄底物发酵后的显微形态结构变化等。试验结果：复合发酵可极显著（P〈0．01）地降低棉籽饼底物游离棉酚含量，脱毒率为91．64％；棉籽饼底物粗蛋白、总氨基酸、必需氨基酸含量分别提高27．83％、18．15％、19、18％；提高粗蛋白、总氨基酸及必需氨基酸体外消化率分别为20．90％、26．16％、24．47％，赖氨酸和蛋氨酸分别增加20．24％、66．29％。环境扫描电镜图片表明，复合发酵处理棉籽饼底物后，黑曲霉形态结构发生变化，其菌丝变细，未观察到抱子头，只见光秃秃的顶囊。酵母菌形态未发现有明显变化。试验结果表明，复合发酵效果明显优于单菌发酵棉籽饼底物的效果，不但达到棉酚脱毒的目的，而且发酵饲料营养价值显著提高。复合发酵时，热带假丝酵母ZD-3对黑曲霉ZD-8的形态变化有显著影响。     

微生物固态发酵法提升冷榨菜籽饼粕营养价值的研究

为了得到高品质的饲用菜籽饼粕,利用混合菌种(白地霉:产朊假丝酵母:植物乳杆菌=2:1:2,接种量8%)作为发酵菌株,采用固态发酵方式处理冷榨菜籽饼粕。对发酵温度、时间、pH、水料比进行单因素实验和正交实验优化,结果表明,当水料比为2.2:1,培养基用水pH为2时,在34℃发酵64h,菜籽饼粕中硫甙降解率达77.29%,体外消化率提升率高达99.91%,其营养价值得到明显提高。     

棉粕脱毒工艺及游离棉酚对蛋鸡性能影响的研究进展

我国棉粕资源丰富,棉粕是优良的植物性蛋白饲料,粗蛋白含量高,基本都在40%以上,氨基酸种类丰富,但是棉粕中的游离棉酚(FG)严重限制了棉粕的利用。长期饲喂棉粕日粮会引起蛋鸡一系列的不良反应。对FG的毒性机理和脱除方法进行了阐述,总结了FG对产蛋性能、蛋品质的影响以及在体内各组织的残留规律,为棉粕的利用提供参考,并进一步指出棉粕在畜禽生产应用中需要解决的问题。     

固态发酵玉米黄粉饲料复合菌种的筛选

运用平板点种法、点种刺激圈法和多菌种固体发酵法3种主要方法,筛选发酵玉米黄粉饲料的复合菌株。结果表明,枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）、凝结芽孢杆菌（Bacilluscoagulans）和地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）3种菌株以1∶1∶1的比例混合,按5% 的接种量接入发酵培养基,发酵效果较好,于30 ℃条件下发酵120 h,玉米黄粉饲料中可溶性蛋白含量由3.78%提高到14.26%。     

油菜秸秆基料对4种常见食用菌产量和活性成分的影响

为了评价油菜秸秆栽培食用菌的可行性,分别以油菜秸秆、油菜秸秆和棉籽壳比例4:6(w/w)、棉籽壳为基料栽培4种常见食用菌,分析油菜秸秆对食用菌的鲜重、生长期、多糖含量、葡糖糖醛酸含量和粗多糖分子量分布的影响。结果显示:当基料中油菜秸秆和棉籽壳比例4:6时,香菇、平菇和黑木耳的鲜重最高,分别为480.18、485.26和430.16 g;同时其生长期最短,分别为24.64、19.73和18.64 d,这表明在传统棉籽壳基料中适当增加油菜秸秆有利于提高该3种食用菌产量,相对于单独棉籽壳基料,香菇、平菇和黑木耳的多糖含量显著性提高了11.09%、24.86%和14.26%(P<0.05),葡萄糖醛酸含量也均有所提高,特别是在香菇中存在显著性差异(P<0.05)且其粗多糖分子量分布无明显差异,这表明油菜秸秆的适当添加也有利于提高该3种食用菌活性成分。但在金针菇栽培中,油菜秸秆的添加使其产量和活性成分均显著性地降低(P<0.05),说明油菜秸秆仅在部分食用菌的栽培中具有较高的应用价值。     

粪肠球菌发酵生棉粕的工艺条件优化

为降低棉粕中游离棉酚含量,对粪肠球菌固态发酵生棉粕降解游离棉酚工艺条件进行了优化。首先对影响粪肠球菌固态发酵棉粕降解游离棉酚的料水比、初始pH、发酵时间、接种量、发酵温度进行单因素研究,确定对结果有较大影响的料水比、初始pH和发酵时间3个因素。然后利用Box-Behnken设计,对其进行优化。结果表明,料水比、初始pH和发酵时间的最佳条件分别是1∶0.53、6.57和3.06d。按照优化的条件发酵棉粕后游离棉酚含量降为231.68 mg/kg,降解率达67.85%。     

In vitro degradation of choline from selected feedstuffs and choline supplements

The objective of this experiment was to determine the extent of in vitro degradation of choline from barley, corn, corn gluten meal, cottonseed meal, fish meal, soybean meal, alfalfa hay, timothy hay, choline chloride, and choline stearate. During four individual fermentation runs, samples were incubated in vitro for .25, 1, 3, 6, 12, 18, 24, 36, and 48 h with an inoculum mixture containing rumen fluid obtained from a rumen-fistulated dairy cow fed 17.5% corn silage and 28.7% grass silage and 53.8% concentrate diet. Because of their low choline content (less than .68 mg/g) corn, corn gluten meal, alfalfa hay, and timothy hay gave erratic values for choline disappearance for different fermentation runs and times of incubation although disappearance tended to increase with time. Data for the rest of the feeds and choline supplements were analyzed using nonlinear regression procedure to obtain estimates of potentially degradable choline, rapidly degradable choline, and the rate of choline degradation in vitro. The mean estimates of rumen degradable choline (%) were 79.4, 84.7, 82.9, 83.8, 98.0, and 98.6 for barley, cottonseed meal, fish meal, soybean meal, choline stearate, and choline chloride, respectively. The results suggest that incorporating choline-rich feedstuffs in diets can only marginally increase the postruminal flow of choline in dairy cows.