高产EPS乳酸菌株的筛选及在农家干酪中的应用

从16株乳酸菌中筛选出三株高产胞外多糖菌种,分别为嗜热链球菌S7和保加利亚乳杆菌L6及LTM,应用苯酚—硫酸法测定其胞外多糖的产量分别为56.25、51.53、51.48mg/L,产量相对较高且稳定。利用菌株S7、L6和LTM制作农家干酪的研究表明,以感官评定值为主指标,结合农家干酪的含水量、蛋白质含量和硬度进行分析,确定当稀奶油添加量为5.2%、72℃热处理15min、氯化钙添加量为0.01%时,生产的农家干酪品质最佳。      

甲硫氨酸氨肽酶高通量微型化检测方法的建立

采用甲硫氨酸对硝基苯胺底物检测甲硫氨酸氨肽酶酶活,通过优化甲硫氨酸氨肽酶检测条件提高检测方法的准确性和灵敏性,并在此基础上建立了微型化的检测方法———酶标板法,适应微型化高通量发酵培养对高通量酶活检测的要求,以实现氨肽酶产生菌真正意义上的高通量筛选。优化后的甲硫氨酸氨肽酶酶活微型化检测条件为:氨-氯化铵缓冲液40 mmol/L、pH 8.0、甲硫氨酸对硝基苯胺浓度6 mmol/L、温度60℃、酶反应时间10 min,于380nm波长比色测定。     

耐低温乳酸菌在盐渍发酵青菜中的应用研究

将耐低温乳酸菌以1‰的接种量用于盐渍青菜原料,食用盐含量为5-7%,经一个月盐渍处理,总酸含量均为0.6%以上,亚硝酸盐含量为1mg/kg以下。     

一株抑制真菌乳酸菌的筛选及初步鉴定

乳酸菌广泛应用于乳、肉、果蔬的发酵型食品的生产中.为了获得具有抑制真菌作用的乳酸菌,以采用传统发酵方法生产的酸菜为材料,通过MRS选择性培养基进行分离,得到2株乳酸菌疑似菌株R1、R2.通过生理生化鉴定,R1、R2分别为植物乳杆菌和玉米乳杆菌.以酵母菌作为真菌指示菌,采用牛津杯琼脂扩散法,通过抑菌实验得出植物乳杆菌R1...     

一株高产EPS乳酸杆菌的筛选及合成量优化

实验从8种复合菌株中筛选出一株保加利亚乳杆菌,作为优化EPS合成的优良菌株,对EPS合成培养基中的碳源和氮源、培养条件进行了系统的研究。      

一株荔枝生物保鲜乳酸菌的筛选及鉴定

本文旨在从荔枝果实发酵液中筛选具抑菌活性的拮抗菌,并研究其对荔枝霜疫霉菌、炭疽菌、多酚氧化酶和过氧化物酶的抑制作用。采用平板培养法筛选出拮抗菌后,采用改良的琼脂扩散法和平板对峙法研究其对炭疽菌和荔枝霜疫霉菌的影响;分别以邻苯二酚、愈创木酚为底物测定其对多酚氧化酶、过氧化物酶的抑制作用。结果显示,带菌体发酵液对荔枝霜疫病菌抑菌半径可达1.5cm,对荔枝炭疽病菌抑菌半径约为0.75 cm;代谢产物粗品对荔枝果皮多酚氧化酶的抑制率接近60%,破碎菌体、代谢产物粗品对过氧化物酶的抑制率为分别为58.8%和51.4%。根据菌株的形态特征、培养特征、生理生化特征结合16S rDNA基因序列分析、系统发育树构建来鉴定菌株,最终确定从荔枝果实发酵液中筛选到的乳酸菌是植物乳杆菌,其在荔枝生物保鲜上具有良好的应用前景。     

几株应用于发酵肉制品的乳酸菌的筛选

为了筛选出符合发酵肉制品优质乳酸菌发酵剂,对不同乳酸菌发酵性能进行研究,通过实验筛选出耐盐、耐亚硝酸盐、不分解蛋白质和脂肪、适于肉类发酵的优质乳酸菌。试验表明,植物乳杆菌、发酵乳杆菌和乳酸乳球菌三株乳酸菌均能在6%食盐溶液和1.5×10-4亚硝酸盐溶液下能够很好生长,因而这三种乳酸菌可耐受食盐和亚硝酸盐,并且均不分解蛋白质和脂肪。得出结论,植物乳杆菌、发酵乳杆菌、干酪乳杆菌和德氏乳杆菌均为适宜于使用在发酵肉制品中的发酵剂。     

高产胞外多糖乳酸菌的筛选及其发酵条件优化

从新疆酸马奶中分离到的7株乳酸菌中筛选到1株产胞外多糖能力较强的乳酸菌RB2,以苯酚-浓硫酸法测得其胞外多糖的产量为491.03μg/m L,经生理生化和16S r DNA序列分析法鉴定为发酵乳杆菌。通过正交试验确定该菌株产胞外多糖的最适发酵条件是:发酵温度34℃,接种量1%,发酵时间12 h,此时胞外多糖的产量为511μg/m L。     

2株风味乳酸菌的筛选及其生长特性的研究

从自然发酵食品中分离出346株乳酸菌,从中筛选出2株优质乳酸菌,并命名为Lb-JAUⅠ和Ld-JAUⅡ。通过对2株菌在脱脂乳中37℃培养48h的pH值、滴定酸度、乙醛和丁二酮产量等生长特性的研究和生理生化鉴定结果表明:Lb-JAUⅠ为保加利亚乳杆菌(Lactobacillusbulgaricus),产酸量高(2.59%),乙醛产量高(42.90×10-6g);Ld-JAUⅡ为丁二酮乳链球菌(L.diactylacis),产酸量低(0.76%),丁二酮产量高(11.45×10-6g)。     

一株产GABA的植物乳酸菌的筛选及鉴定

本研究从酸奶、泡菜中分离得到1株高产GABA的乳酸菌株,经生理生化实验鉴定为植物乳杆菌.利用HPLC法检测出该乳酸菌发酵产物中GABA含量达0.527 g/L.     

重组枯草芽孢杆菌高产氨肽酶策略与提取工艺优化

研究不同的产酶促进剂(渗透压调节剂、表面活性剂、有机酸盐)对重组枯草芽孢杆菌产氨肽酶的影响,并对氨肽酶的提取工艺进行优化。获得产酶促进剂优化组合为:氯化钾0.1 mol/L、吐温802.4μL/m L、L-谷氨酸钠0.6%、酒石酸钾0.7%;优化培养条件为:装液量60 m L/250 m L、初始p H 7.5、接种体积分数5%、转速220 r/min、培养时间36 h。在上述优化条件下,该重组菌株产氨肽酶酶活达232.5 U/m L,是优化前的3.32倍。该重组氨肽酶发酵液经低速离心、双水相萃取、超滤浓缩提取后,回收率达67.23%,纯化倍数为8.29。     

耐热赖氨酸氨肽酶菌株筛选、鉴定及基因克隆

从土壤中筛选得到一株氨肽酶产生菌,经生理生化和分子生物学鉴定被命名为铜绿假单胞杆菌NJ-814(Pseudomonas aeruginosa NJ-814)。在已考察知其所产氨肽酶是一种耐热赖氨酸氨肽酶的基础上,运用PCR技术从基因组中克隆获得该氨肽酶基因(kap),构建其表达载体pET-28a-kap,并最终实现在大肠杆菌BL21(DE3)中部分融合表达。kap基因全长1 500 bp,编码499个氨基酸。氨基酸序列同源性分析发现,其与脱叶链霉菌和糖多孢红霉菌的同源性较高。通过生物信息学方法对其理化性质和功能分析以及kap在大肠杆菌中实现异源表达,将为进一步研究该氨肽酶的耐热机制及功能创造基础。     

一株产GABA的植物乳酸菌的筛选及鉴定

γ-氨基丁酸是哺乳动物体内的一种抑制性神经递质,具有降血压的功能.本研究从酸奶、泡菜中分离得到1 株高产GABA 的乳酸菌株,经生理生化实验鉴定为植物乳杆菌.利用HPLC法检测出该乳酸菌发酵产物中GABA含量达到0.527g/L.     

臭豆腐乳酸菌多样性及耐酸乳酸菌的筛选分离

对采集的8个不同地区的臭豆腐样品中的乳酸菌多样性分析表明,臭豆腐中乳酸菌数量在6.8×104cfu/g～2.9×106cfu/g,优势乳酸菌包括乳杆菌、乳球菌和肠球菌.通过乳酸菌耐酸特性比较,表明不同来源样品中乳酸菌耐酸差异性不明显,而不同种类乳酸菌的耐酸差异性较明显,肠球菌耐酸性比例高,乳杆菌其次,乳球菌最低.经筛选获得pH 3.0、37℃培养6 h后存活率超过30%的菌株6株,对其中2株耐酸最强的杆菌和球菌进行鉴定,分别为植物乳杆菌和屎肠球菌.     

酸乳制品中乳酸菌分离筛选方法研究

保加利亚乳酸杆菌和嗜热链球在七种固体培养基上的生长情况进行比较，结果表明，酸化ＭＲＳ和Ｍ１７培养基分别是该两菌的较好的分离培养基。菌种的筛选应进行酸风味和组织状态的综合比较，两菌不同组合菌株的选应结合不同发酵条件进行。通过该方法分离筛选到不同风味类型的两组混菌。     

产超氧化物歧化酶乳酸菌的筛选及发酵条件优化

从不同地区的传统发酵食品中筛选出104株菌落形态各异的乳酸菌,通过过氧化氢抗性试验筛选出20株具有抗氧化能力的乳酸菌,并测定其产SOD的能力。结果表明,20株乳酸菌中C8的SOD活性最高,达349.62 U/mg。通过革兰氏染色、过氧化氢酶试验和16S rRNA基因序列分析,构建系统发育树,根据同源性分析确定C8为乳酸乳球菌。为提高菌株产SOD的能力,通过单因素实验探究培养温度、初始接种量、初始pH值和灌装量对乳酸乳球菌产SOD的影响,并通过正交试验进一步优化菌株的发酵条件。最终确定最佳发酵条件为:发酵温度37℃,初始接种量3%,初始pH 7.5,灌装量75mL。在此培养条件下,乳酸乳球菌的SOD活性达93.95 U/mL,与优化前相比提高了2.2倍,为后期乳酸乳球菌在发酵产业的应用奠定基础。     

亮氨酸氨肽酶产生菌筛选与特性的研究

为了促进氨肽酶的生产与应用,开展了从豆豉中筛选氨肽酶产生菌的研究。经平板筛选与摇瓶发酵筛选,获得一株氨肽酶产生菌YBPE-4,该菌株被鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。通过发酵试验,确定菌株YBPE-4产氨肽酶的最佳碳源、氮源分别是玉米淀粉、酵母粉,确定产酶的最佳培养温度为37 ℃、初始pH值为7.5、转速为200 r/min、培养时间为84 h。在最佳的条件下,发酵液的氨肽酶活力为6 164 U/mL。     

优良乳酸菌株的筛选

通过分析4株嗜热链球菌、6株保加利亚乳杆菌的相互关系,获得6对具有共生特性的菌株组合,即L1+S1、L2+S1、L3+S1、L4+S1、L5+S1和L6+S1,并对上述菌株组合制备的酸乳的酸度、黏度、乙醛、氨基酸、活菌数等指标进行了测定,获得2对适宜酸乳生产的发酵剂,即L1+S1和L2+S1。     

一株具有抑制麦芽糖酶活性的乳酸菌的筛选与鉴定

以抑制麦芽糖酶为目的,采用α-葡萄糖苷酶抑制剂的体外筛选模型,筛选出具有较好麦芽糖酶抑制效果的乳酸菌菌株JH28。菌株JH28的MRS发酵上清及无细胞提取物均对麦芽糖酶有抑制作用。将该菌株的无细胞提取物经透析膜（截留分子量1000Da,去离子水为透析液）透析后取透析液冻干,测定不同浓度冻干物对麦芽糖酶的抑制效果,最高抑制率可达67.19%,经计算其IC为4.12mg/mL。菌株经16SrDNA鉴定为干酪乳杆菌,具有潜在的工业应用价值。      

一株降胆固醇乳酸菌的筛选及其降解条件的研究

从酸奶中筛选得到高效降解胆固醇的乳酸菌株La-3,并对其胆固醇降解能力进行研究。通过单因素和正交实验,得到胆固醇降解最佳条件为培养时间72 h、胆固醇浓度1.5 mg/mL、接种量4%,胆固醇降解率达到51.2%。