大孔树脂D392对莱鲍迪苷A和甜菊苷吸附作用的研究

根据莱鲍迪苷A(RA)比甜菊苷(S)多一个葡萄糖基的特点,针对性地选择了14种工业树脂,分别考察了它们对RA和S的吸附能力和吸附选择性。在此基础上,研究了吸附选择性较高的大孔树脂D392的吸附动力学和吸附热力学,并考察了温度、甜菊糖苷水溶液浓度、pH、溶剂对D392吸附选择性的影响规律。结果表明,D392在水相中对S的吸附能力大于对RA的吸附能力,吸附为放热过程,且在较低温度下吸附选择性较好。在298.15K,pH7.0,混合糖苷(RA/S=1∶1)浓度为5g/L时,经D392吸附6h,吸附残液中RA/S达到最大值。进一步以RA含量70.3%的甜菊糖苷作供试液,经D392吸附6h,吸附残液中RA含量可提高到88.4%,RA保留率为68.0%。      

重组β-环糊精糖基转移酶对莱鲍迪苷A的改性研究

为改善莱鲍迪苷A的口感,利用一种重组β-环糊精糖基转移酶对莱鲍迪苷A进行结构修饰,分析了不同糖基供体对催化衍生物的影响,对以尿苷二磷酸葡萄糖(U-DPG)为糖基供体形成的莱鲍迪苷A衍生物的结构进行了表征,同时优化了其催化工艺条件。结果表明,以U-DPG为糖基供体,重组β-环糊精糖基转移酶可以特异性地在莱鲍迪苷A的C19上以α-1,4糖苷键连接2个葡萄糖基;该酶在60℃、p H8.0条件下催化活性最佳,显示出较好的耐热性和耐碱性。正交实验结果表明在50℃、p H9.0和U-DPG/RA比例为7.5:1的条件下,莱鲍迪苷A衍生物的得率可达到56.3%;此外,与莱鲍迪苷A相比,形成的衍生物在后苦味上相对较弱。研究结果证明了重组β-环糊精糖基转移酶可用于改善莱鲍迪苷A的口感和提升甜菊糖苷产品的品质。     

新型天然高倍甜味剂—莱鲍迪苷A

综述了莱鲍迪苷A的物化性质、制备、检测方法和应用等方面的研究进展,并对莱鲍迪苷A在食品工业中的应用和前景进行了分析及阐述。     

β-呋喃果糖苷酶催化甜菊糖的改性研究

本文用β-呋喃果糖苷酶催化甜菊糖的分子改性,采用蔗糖和甜菊糖的混合反应体系,优化的催化反应条件为:pH 6.5,反应温度40℃,甜菊苷和甜菊双糖A苷与蔗糖的摩尔比为0.007和0.003,加酶量15 U/mL,反应时间15 h.在优化的反应条件下,甜菊苷和甜菊双糖A苷的转化率分别为63.6%和63%.     

新型甜味剂莱鲍迪苷D和莱鲍迪苷M的生物转化进展

来源于植物甜叶菊的天然甜味剂莱鲍迪苷D(rebaudioside D,Reb D)和莱鲍迪苷M(rebaudioside M,Reb M)具有高甜度、无热量和近似于蔗糖的口感,被认为是高热量糖的理想替代品,其在食品领域具有广阔的应用前景。文章综述了Reb D和Reb M的结构、口感、水溶性、安全性以及合成相关的糖基转移酶的研究进展,并重点介绍了Reb D和Reb M合成相关的糖基转移酶的蛋白质结构、催化机制以及蛋白质理性改造的研究进展,以期为Reb D和Reb M的开发和应用提供参考。     

高效液相色谱法测定蜜饯中的莱鲍迪苷A的含量

甜菊糖苷是一种混合天然甜味剂,其中以莱鲍迪苷A甜度最高,在食品中应用最广。本试验建立了蜜饯中莱鲍迪苷A(RA)含量测定的高效液相色谱(HPLC)方法,分析采用Kromasil NH2色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以75%的乙腈水为流动相,通过二极管阵列紫外检测器进行检测。该方法在0.025 0.50mg/mL范围内线性关系良好,相关系数r=0.99991,最低检出限为0.011g/kg,相对标准偏差RSD为0.41%(n=8),加标回收率在92.7%110%之间。本方法回收率高、灵敏度高,且更高效快捷,适用于蜜饯中甜菊糖苷类添加剂的检测,可以为食品安全国家标准的有效实施提供技术保障。     

高效液相色谱-蒸发光散射测定甜菊糖中甜菊糖苷和莱鲍迪苷A的含量

建立了高效液相色谱-蒸发光散射分离与检测甜菊糖中甜菊糖苷和莱鲍迪苷A的实验方法。色谱分离使用Kromasil NH2 柱(250mm×4.6mm,i.d.,5μm),流动相为85%乙腈水溶液,柱流出物采用蒸发光散射检测器检测,漂移管温度为85℃,空气做载气,流速为2.4L/min。甜菊糖苷和莱鲍迪苷A的线性范围分别为0.05～3.0、0.05～3.7mg/mL,平均加标回收率分别为97.63%、99.25%,相对标准偏差分别为1.04%、1.27%。该方法简单、快速、准确、重现性好,适用于甜菊糖中甜菊糖苷和莱鲍迪苷A的定量分析。     

节杆菌β-呋喃果糖苷酶的纯化及性质研究

采用硫酸铵盐析、透析脱盐、Sepharose 6B凝胶色谱等分离纯化技术，从节杆菌培养液分离纯化了β-呋喃果糖苷酶，纯化倍数为18．29，回收率为44．81％，经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳后有一条明显的蛋白质谱带。相对分子量为55800~，该酶的最适pH为6．5，最适温度为30℃2，pH6．0～8．0之间和45℃以下稳定，Ag 和Cu^2 对该酶有较强烈的抑制作用，EDTA和镁离子对酶活的影响较小。     

节杆菌β-呋喃果糖苷酶的纯化及性质研究

采用硫酸铵盐析、透析脱盐、Sepharose 6B凝胶色谱等分离纯化技术，从节杆菌培养液分离纯化了β-呋喃果糖苷酶，纯化倍数为18．29，回收率为44．81％，经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳后有一条明显的蛋白质谱带。相对分子量为55800左右，该酶的最适pH为6．5，最适温度为30℃，在pH6．0-8．0之间和45℃以下稳定，Ag^ 和Cu^2 对该酶有较强烈的抑制作用，EDTA和镁离子对酶活的影响较小。     

产β-呋喃果糖苷酶黑曲霉的固定化研究

对β－呋喃果糖苷酶的黑曲霉采用海藻酸钠包埋的方法。直接制成固定化菌丝生产ＦＯＳ（Ｆｒｕｃｔｏｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｖｉｄｅｓ）的试验,采用两。因素二次饱和Ｄ－最优设计方案,对破碎菌体与海藻酸钠溶液的混合最佳比例以及海藻酸钠溶液的最佳浓度进行研究,并计算其半衰期,结果为：菌体与海藻酸钠溶液混合比为１：１,海藻酸钠溶液浓度定为２％,半衰期为２７３．５ｈ进行研究,并计算其半衰期。结果为：菌体与海藻酸钠溶     

莱鲍迪苷A复配甜味剂在蛋糕中的应用

通过感官评定的方法研究莱鲍迪苷A在蛋糕中替代蔗糖的应用效果。在此基础上研究莱鲍迪苷A复配甜味剂对蛋糕感官品质和质构的影响,确定复配甜味剂的最优配方。结果表明,莱鲍迪苷A在蛋糕中替代蔗糖的最大替代量为30%。莱鲍迪苷A复配甜味剂的加入对蛋糕的内聚性、粘度影响不大,对蛋糕硬度、弹性、胶着性、咀嚼性的影响显著。添加适当比例的复配甜味剂可以使蛋糕的弹性、胶着性有所增加,同时改善了蛋糕的咀嚼性,使蛋糕的口感更加绵软,甜味更加柔和,保湿性也得到明显改善。蛋糕的最优配方为:面粉100g,鸡蛋150g,色拉油20g,泡打粉2g,蔗糖10g,莱鲍迪苷A 0.1g,木糖醇45g,聚葡萄糖30g。     

莱鲍迪苷A甜味剂在功能性酸奶中的应用研究

用莱鲍迪苷A替代蔗糖后,酸奶的色泽较对照组更白,凝乳状态基本没有发生变化,酸奶凝乳好,表面光滑。但酸奶的持水性能明显下降,在酸奶的表面均出现乳清析出。随着莱鲍迪苷A替代量的增加,酸奶的酸味评分先增加后下降,但普遍低于对照组。同时,酸奶的甜味、苦味和柔和感评分与对照组相比都有所下降。相反地,酸奶的乳香味评分有所上升。当莱鲍迪苷A替代蔗糖后酸奶的各项感官品质普遍下降,综合分析可知莱鲍迪苷A的最优替代量为50%。但是,当替代量为50%时,酸奶的乳清析出比较明显,而且酸甜不和谐,口感不够柔和,如果要用莱鲍迪苷A制作无糖酸奶还需要对其进行复配。在单因素试验的基础上以莱鲍迪苷A、赤藓糖醇、低聚异麦芽糖用量为自变量,酸奶感官、pH、硬度、稠度、黏附性、持水力为响应值,对酸奶复合甜味剂配方进行响应面优化。优化后无糖酸奶的最优配方为:复原乳100mL,莱鲍迪苷A 0.02 g,赤藓糖醇1.809 g,低聚异麦芽糖2.908 g,稳定剂0.1 g,CaCl20.02 g,接种量4 mL。用该配方制作的无糖酸奶色泽洁白,结构均匀细腻,酸甜适宜,口感柔和。     

产β-呋喃果糖苷酶菌株的筛选及发酵条件初探

以蔗糖为碳源,对几种日本曲霉、米曲霉、黑曲霉菌株产β-呋喃果糖苷酶能力进行比较研究,其中日本曲霉1产酶能力最强。研究了其β-呋喃果糖苷酶的产生条件:以蔗糖为碳源,酵母膏为氮源时,菌种产酶最高。该菌种产酶在温度30℃,转速200r/min,pH6.0,培养时间为96h时,β-呋喃果糖苷酶酶活达到最高值,Ut为3.10U/mL,Uh为0.86U/mL,Ut/Uh为3.60U/mL。      

黑曲霉产β-呋喃果糖苷酶酶学性质研究

对来源于黑曲霉的β-D-呋喃果糖苷酶的酶学特性进行了研究。结果表明,β-D-呋喃果糖苷酶的最适pH值为5．0,最适温度为50％。在40℃～60℃、pH值5．0～7．0其具有较好的稳定性。金属离子对β-呋喃果糖苷酶活性有影响。Mn^2＋和Ca^2＋能明显增强酶活,而Cu^2＋和Ag^2＋能抑制酶活。     

产β-呋喃果糖苷酶菌株的筛选及发酵条件初探

以蔗糖为碳源,对几种日本曲霉、米曲霉、黑曲霉菌株产β-呋喃果糖苷酶能力进行比较研究,其中日本曲霉1产酶能力最强。研究了其β-呋喃果糖苷酶的产生条件:以蔗糖为碳源,酵母膏为氮源时,菌种产酶最高。该菌种产酶在温度30℃,转速200r/min,pH6.0,培养时间为96h时,β-呋喃果糖苷酶酶活达到最高值,Ut为3.10U/mL,Uh为0.86U/mL,Ut/Uh为3.60U/mL。     

莱鲍迪苷A的甜味特性和改良及其在食品中应用进展

莱鲍迪A苷是甜菊糖苷混合物中的一种糖苷成分,与甜叶菊中其他糖苷相比,莱鲍迪A苷的甜度最高,也较稳定,并且口感也是最接近蔗糖的天然甜味剂,而且保持了原有甜菊糖的其他优点,可作为一种理想的天然甜味剂产品。莱鲍迪苷A具有甜度高,口感好,安全稳定的优点,符合当前食品添加剂和甜味剂安全、健康、高效的发展趋势,将在食品工业中得到广泛的应用。本文综述了莱鲍迪苷A的甜味特性及及其在食品中应用进展,对其甜味特性及其特性的几种改良方法进行了分别阐述。     

β-呋喃果糖苷酶合成低聚乳果糖的工艺研究

以蔗糖和乳糖为底物,利用节杆菌β-呋喃果糖苷酶合成低聚乳果糖,通过单因素和正交实验获得酶反应的最佳工艺条件为:酶反应体系的pH为6.5,反应温度37℃,酶用量1500U/g蔗糖,酶反应时间12h,反应体系的固形物含量为40%,蔗糖和乳糖的比例为1∶1,该条件下低聚乳果糖的最大转化率为160.83mg/mL。      

日本曲霉β-呋喃果糖苷酶基因克隆及在酿酒酵母中的表达

通过反转录PCR法成功地扩增出日本曲霉β-呋喃果糖苷酶基因，基因片断长度为1917bp，编码638个氨基酸。将所得片断定向克隆到pYX212载体上，并转化至酿酒酵母中，通过酵母菌落PCR检验后，确定该基因在酿酒酵母中获得表达，转化子平均酶活为26．4U／mg。     

莱鲍迪苷A的制备色谱法分离纯化研究

本文从制备色谱填料入手,探讨采用中压制备色谱法一次分离得到高纯度莱鲍迪苷A（RA）的可行性。以羧酸改性15μm单分散PS-DVB基球填料为分离介质,装填入规格为12.6×2.66cm的flash色谱柱中,以RA单体的纯度、产率、回收率为考察指标,研究了不同的流动相比例、上样浓度、上样体积以及流动相流速对分离纯化过程的影响。建立了合适的操作条件:流动相为乙腈/水=80/20（v/v）,上样浓度为280mg/mL,上样体积为0.4mL,流速为4mL/min。在最佳的操作条件下,分离得到的RA单体纯度为90.22%,回收率79%。该方法具有分离效率高,产品质量好,生产周期短,操作方便等特点,为从低含量甜菊糖结晶母液中纯化RA单体的工业化生产提供了一种有效的途径。      

莱鲍迪苷A在甲醇-水体系中溶解度与超溶解度的测定

测定了莱鲍迪苷A在甲醇溶液中的溶解度和超溶解度曲线,并用数学模型进行了拟合,同时还测定了温度、降温速率、搅拌速率对甲醇溶液中莱鲍迪苷A介稳区宽度的影响。结果表明,莱鲍迪苷A在甲醇溶液中的溶解度随着温度的升高而增加,而介稳区宽度随着温度的升高而减小,随着降温速率的增加而增大,随着搅拌速率的增加先减小后增大。