黄芪对人成纤维细胞ICAM-1 、CD126 表达及合成ECM 的影响

目的 观察黄芪对人成纤维细胞ICAM-1、CD126 表达及合成细胞外基质(ECM)的影响,探讨其抗肝纤维化的机制。方法 采用细胞培养法, 于细胞培养液中加入不同浓度的药物, 通过流式细胞仪观察经分子探针标记的ICAM-1 、CD126 阳性细胞数变化, 用放免法测定培养上清HA 、LA 含量。结果 人成纤维细胞表达ICAM-1 、CD 126 阳性率分别为(82.63±5.94)%和(77.95±4.68)%, 加入黄芪组二者阳性率明显下降。但黄芪对成纤维细胞合成HA 无影响, 对LN 影响较小。结论 黄芪能抑制成纤维细胞表达ICAM-1 和CD126, 这可能是其抗肝纤维化机理之一, 它对合成ECM 影响较小。     

γ-干扰素对肝纤维化大鼠I、III 型胶原表达的影响

目的:探讨γ-干扰素抗肝纤维化的治疗机制。方法:17 只正常雄性Wistar 大鼠分成3 组, 除正常对照组外, 余2 组大鼠肝纤维化造模均采用腹腔注射猪血清(每周2 次, 每次0.5 ml) 。γ-干扰素治疗组在造模第9 周每天皮下注射10 万单位的干扰素。模型组和正常对照组给等量的生理盐水灌胃。12 周处死大鼠, HE 和Masson 染色观察肝纤维化的形成, RT-PCR 检测肝组织中I、III 型胶原mRNA 的表达, 免疫组化法观察I、III 型胶原蛋白的表达。结果:γ-干扰素显著逆转了猪血清诱导的肝纤维化, 与模型组比较, γ-干扰素治疗组能明显降解纤维化大鼠肝中的胶原(P<0.05) 。PT-PCR 分析可见I、III型胶原mRNA 的表达在γ-干扰素治疗组均明显减少。I、III 型胶原蛋白的表达在γ-干扰素治疗组均明显减少。结论:γ-干扰素能逆转免疫引起的肝纤维化, 这是由于其能促进肝脏胶原的降解作用, 最终导致肝纤维化的逆转。     

苦参素对实验性肝纤维化的防治作用及对MMP-2 表达的影响

目的: 观察苦参素预防及治疗大鼠肝纤维化的疗效并探讨其作用机制。方法: 采用CCl₄ 诱导大鼠肝纤维化模型, SD 大鼠28 只, 随机分为4 组:正常对照组、模型对照组、苦参素预防组、苦参素治疗组。实验10 周末, 测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT) 、天冬氨酸氨基转移酶(AST) 、总胆汁酸(TBA)及谷氨酸转移酶(GGT); 光镜、电镜观察肝细胞结构和肝纤维化程度;RT-PCR 和蛋白酶谱法检测肝组织中MMP-2 mRNA 、MMP-2 蛋白的表达。结果: 苦参素预防与治疗给药均能明显降低CCl₄ 诱导的肝纤维化大鼠血清ALT 、AST 、TBA 及GGT 水平(P<0. 05,P<0. 01) 。苦参素预防组、治疗组大鼠胶原纤维沉积明显减轻, 假小叶结构明显减少。苦参素预防组、治疗组肝细胞结构接近正常, Disse 间隙、肝细胞内胶原纤维明显减少, 且苦参素预防组肝纤维化程度轻于治疗组。苦参素预防组、治疗组肝组织中MMP-2mRNA 、MMP-2 活性蛋白的表达显著低于模型组(P<0. 05, P<0. 01) 。结论: 苦参素对CCl₄ 诱导的肝纤维化有预防及治疗作用, 其部分机制为通过减少MMP-2mRNA 、MMP-2 活性蛋白的表达, 促进细胞外基质(ECM) 的降解, 抑制ECM 沉积, 从而减轻或逆转肝纤维化。     

参附对大鼠肾缺血再灌注损伤NF-κB、细胞黏附分子-1、TNF-α表达的影响

目的:观察参附注射液(shenfu injection, SF)对大鼠肾缺血再灌注损伤细胞黏附分子-1(ICAM-1)、NF-κB、TNF-α表达的影响。方法:采用切除右肾, 无创动脉夹夹闭左肾动脉45 min, 再灌注2 h制作在体肾缺血再灌注损伤模型。36 只SD 大鼠随机分为缺血再灌注组、假手术对照组、参附预处理组(10 mL/kg), 每组12 只。免疫组化法检测肾组织中NF-κB、ICAM-1 蛋白含量, 酶联免疫吸附实验(ELISA) 检测血清、肾组织中TNF-α的表达。结果:缺血再灌注组NF-κB、ICAM-1 表达和TNF-α含量明显高于假手术对照组(P<0.01) 。与缺血再灌注组相比, 参附预处理组NF-κB、ICAM-1 表达和TNF-α含量明显降低(P<0.01) 。结论:参附通过抑制NF-κB 的表达, 从而下调其下游的TNF-α、ICAM-1 的表达, 发挥其肾脏保护作用。     

三七总皂苷对肝纤维化大鼠肝脏保护作用的实验研究

目的:观察三七总皂苷(PNS)对肝纤维化大鼠的保护作用。方法:SD大鼠随机分成正常组、模型组、PNS(50、100、200 mg/kg)组和秋水仙碱(Col,0.1 mg/kg)组。除正常组外,其余各组采用皮下注射50%四氯化碳(CCl₄),每周2次,连续18周的方法诱导肝纤维化大鼠模型。于造模第9周起,给药组分别灌胃给予相应的受试药物,正常组和模型组给予等量溶媒,每天1次,连续10周。实验结束后,比色法测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)的水平;同时取固定部位肝脏组织,HE染色观察肝纤维化程度;免疫组织化学法检测肝组织胶原I(Collagen I)蛋白的表达,RT-PCR技术测定Collagen I mRNA的表达。结果:与模型组相比,PNS(100,200 mg/kg)不仅可减轻大鼠肝纤维化程度,降低MDA含量,升高SOD、GSH水平,还可抑制肝纤维化大鼠肝组织中Collagen I的表达。结论:PNS对大鼠肝纤维化具有一定的保护作用。     

苦参素胶囊联合复方丹参滴丸治疗乙肝后肝纤维化的临床研究

目的: 观察苦参素胶囊联合复方丹参滴丸对慢性乙肝肝纤维化的治疗效果。方法: 54 例慢性乙肝肝纤维化患者随机分为对照组和联合治疗组, 观察治疗前、后肝功能、肝纤维化指标和 HBV 标志物的变化。结果: 治疗后联合治疗组各项指标均较治疗前及对照组有明显改善(P<0.05 或 P<0.01)。结论: 苦参素胶囊联合复方丹参滴丸可明显控制乙肝患者的肝脏炎症, 显著提高抗肝纤维化作用, 可抑制HBV 复制且无严重不良反应。     

姜黄素衍生物对四氯化碳诱导肝纤维化的治疗作用

目的: 探讨姜黄素衍生物(Curc-OEG)对四氯化碳诱导肝纤维化的治疗效果。方法: 以四氯化碳诱导形成大鼠肝实质损伤性肝纤维化模型。大鼠分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、低剂量组(C组)、中剂量组(D组)、高剂量组(E组)、秋水仙碱组(F组)。除A组外,各组给予四氯化碳和橄榄油混合液皮下注射,2次/周,4周后B组给予生理盐水尾静脉注射,C、D、E组分别给予25、50、100 mg·kg^-1·d^-1的Curc-OEG尾静脉注射,F组给予0.1 mg·kg^-1·d^-1秋水仙碱灌胃。10周后测定肝功能及肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量;做肝脏HE和天狼星红染色;定量PCR法测金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)、金属蛋白酶-13(MMP-13)基因的表达,Western Blot法测CollagenⅠ蛋白的表达。结果: 与模型组比较,中、高剂量组ALT、AST明显降低(P<0.05),羟脯氨酸及CollagenⅠ蛋白表达明显降低(P<0.05),MMP-13 mRNA明显上调(P<0.05),以及TIMP-1 mRNA明显下调(P<0.05),并且HE及天狼星红染色结果也观察到肝脏炎症及纤维化程度明显减轻。结论: Curc-OEG能减轻四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化。     

人参须对四氯化碳致小鼠肝纤维化的保护作用

目的: 观察人参须对四氯化碳致小鼠肝纤维化的影响。方法: 运用皮下多次注射四氯化碳(CCl₄)致小鼠慢性肝损伤模型, 观察人参须对小鼠肝组织病理变化、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT/GPT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST/GOT)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)和白蛋白/球蛋白(A/G)的比值以及内脏器官重量的影响。结果: 人参须能够显著降低由CCl₄ 引起的肝、脾重量增加及血清ALT 、TP 的升高, 明显减轻CCl₄ 引起的肝坏死病变, 与秋水仙碱无差别。结论: 人参须对四氯化碳致小鼠肝纤维化有保护作用。     

参附注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤的防治作用

目的: 观察参附注射液(shenfuinjection,SF)对肾缺血再灌注损伤大鼠P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响,并探讨其肾脏保护作用的可能机理。方法: 动物随机分为假手术对照组、缺血再灌注组、参附预处理组3组。免疫组化法检测肾组织P38MAPK、ICAM-1蛋白含量,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测肾组织和血浆TNF-α的表达。结果: 缺血再灌注组P38MAPK、ICAM-1表达和TNF-α含量明显高于假手术对照组(P<0.01)。与缺血再灌注组相比,参附组P38MAPK、ICAM-1表达和TNF-α含量明显降低(P<0.01)。结论: SF可能通过抑制P38MAPK的表达,从而下调TNF-α、ICAM-1的表达,发挥其肾脏保护作用。     

黄芪总提物对大鼠肝星状细胞增殖及产生胶原的影响

目的 研究黄芪总提物(TEA) 对体外肝星状细胞增殖和产生胶原的影响。方法 采用IV 型胶原酶灌流分离大鼠肝星状细胞进行原代培养, 用CCl₄急性损伤的大鼠肝枯否细胞条件培养基(KCCM)刺激肝星状细胞, 用³H-TdR 和³H-Proline 的掺入法分别检测肝星状细胞的增殖和胶原的产生。结果 TEA (5 ~ 40 mg·L^-1) 可明显降低由KCCM 刺激的肝星状细胞的增殖和胶原的产生。结论 TEA对体外激活的肝星状细胞的增殖和产生胶原有明显抑制作用, 该作用可能是TEA 抗肝纤维化的机理之一。     

氟伐他汀对高脂血症兔心肌缺血再灌注损伤心肌局部细胞间粘附分子-1的影响

目的: 研究氟伐他汀对高脂血症兔心肌缺血再灌注损伤心肌局部细胞间粘附分子-l(ICAM-l)表达的影响。方法: 30只高脂喂养的日本大耳白兔随机分为3组(n=10):缺血再灌注组;氟伐他汀组,缺血再灌注前3 h,氟伐他汀10 mg·kg^-1 口服给药;假手术组。实验中监测心电图及心功能,实验完毕取心肌组织,Evans蓝及氯化三苯基四氮唑（TTC)染色测心肌梗死程度,逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR)测心肌局部ICAM-1 mRNA表达。结果: 缺血再灌注后,与缺血再灌注组相比,氟伐他汀组心肌局部ICAM-ImRNA表达降低（P <0.01),心肌梗死程度降低（P <0.01),心功能显著改善。结论: ICAM-1mRNA表达增高是心肌缺血再灌注损伤的重要因素,氟伐他汀短期预治疗可降低ICAM-1 mRNA表达,降低心肌梗死程度,改善心功能。     

粘附分子在中性粒细胞-脐静脉内皮细胞粘附中作用机制的研究

目的: 探讨 PMN 及血管内皮表面粘附分子在中性粒细胞-脐静脉内皮细胞(PMN-EC) 粘附中的作用。方法: 实验分5 组 :正常对照组;LPS 处理组(将PMN及 HUVEC 用 100 μg°L^-1LPS 处理不同时间);LPS +CD11b 单抗处理组;LPS +ICAM-1 单抗处理组;LPS+CD11b+ICAM-1 单抗处理组。用^99mTc-HM-PAO 标记 PMNs, 加入到 HUVECs 作用一段时间,PMN-EC 粘附率 =溶解液放射值 加入液放射值 ×100。结果: 与对照组相比, 经 LPS 刺激后 15 minPMN-EC 粘 附性 明显 上升 (37.45% ±3.92% vs11.03%±4.15%, P<0.05), 于 4 h 处达到峰值(73. 50%±6.39%)。CD11b 单抗和 ICAM-1 单抗可明显抑制这种粘附(P<0.05)。合用两种单抗有叠加效应。结论: 在 PMN 与内皮细胞粘附的过程中,粘附分子 CD11b 与 ICAM-1 起着举足轻重的作用,用单抗封闭粘附分子的作用可明显削弱细胞间的粘附。     

川芎嗪对鼠肺纤维化组织钙含量及钙调素活性的影响1

目的: 观察川芎嗪对博莱霉素所致鼠肺纤维化组织钙含量及钙调素活性的影响, 探讨川芎嗪防治肺纤维化的机制。方法: 将 32 只 SD 大鼠一次性气管内注入博莱霉素 A 5 制备肺纤维化模型, 随机分为2 组:模型组(n=16) 及川芎嗪组(n=16), 分析测定各组给药后 d 14、d 28 肺组织钙含量及钙调素活性, 并与正常对照组(n=8) 比较。 结果: 模型组肺组织钙含量及钙调素活性较正常组明显增高(P<0.01), 川芎嗪组各期钙含量及钙调素活性均低于模型组(P<0.05), 同时组织病理学显示肺泡炎及肺纤维化程度均较模型组明显减轻。 结论: 川芎嗪防治鼠肺纤维化的机制可能与降低肺组织钙含量及钙调素活性有关。     

CO2气腹压力对胃癌细胞侵袭黏附分子表达的影响

目的: 探讨不同压强CO₂气腹对胃癌细胞侵袭黏附能力的影响。方法: 建立体外CO₂气腹模型,选胃中分化腺癌株SGC-7901,分别暴露在6、9、12、15 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)和常规细胞培养环境下各3 h。Real-time PCR法检测胃癌细胞中黏附侵袭分子E-cadherin、细胞黏附侵袭分子-1(ICAM-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和细胞黏附分子CD44v6的表达水平;Western-blot检测胃癌细胞中E-cadherin、ICAM-1、MMP-2和CD44v6蛋白的表达水平。结果: 随着CO₂压强升高,在 15 mm Hg 时,E-cadherin的mRNA相对表达水平较对照组明显下降(P<0.05);MMP-2和CD44v6的mRNA相对表达水平较对照组明显上升(P<0.05);而ICAM-1 mRNA的相对表达水平也有上调趋势,但各组与对照组比较均无统计学差异。Western-blot检测结果显示蛋白的表达水平与基因检测结果一致。压强为 15 mm Hg时,CD44v6和MMP-2的表达上调,E-cadherin 的表达下调,具有统计学差异。结论: 在压强不高于 12 mm Hg 时,不同压强的CO₂气腹对胃癌细胞株的黏附侵袭能力无明显影响,并不增加肿瘤的转移几率。