1株树莓果实采后病原真菌的rDNA ITS序列及碳源代谢指纹图谱分析

为增强对树莓果实采后病害防治的针对性,从采后贮藏期间自然发病的"泼鲁德"树莓果实中分离到1株真菌菌株079#。通过形态学观察以及rDNA ITS序列分析确定为桃吉尔霉(Gilbertellapersicaria)。通过Biolog FF Micro Plate分析桃吉尔霉对95种碳源的代谢指纹图谱,发现培养168 h时其最适碳源有蔗糖、D-核糖、阿拉伯糖、D-木糖、D-葡萄糖醛酸、γ-氨基丁酸、D-苹果酸,癸二酸、琥珀酰胺酸、D-山梨醇、木糖醇、N-乙酰-D-半乳糖胺、L-天冬氨酸、L-丙氨酸、L-谷氨酸等64种,而不可利用碳源主要有N-乙酰-D-葡萄糖胺、N-乙酰-β-D-甘露糖胺、核糖醇、D-阿拉伯糖醇、D-纤维二糖、环式糊精、D-果糖、L-海藻糖、D-半乳糖、D-半乳糖醛酸、龙胆二糖、葡糖醛酰胺、m-肌醇、麦芽糖、β-甲基-D-半乳糖苷、D-阿洛酮糖等19种。     

功能性寡糖研究及其在食品中的应用进展

功能性寡糖是一种新型低热值甜味剂及功能性食品重要的添加剂,具有多种有益人体健康的生理功能。本文介绍了食品中应用较多的几类功能性寡糖——低聚木糖、低聚果糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖、几丁寡糖等的理化性质及生理功能,详细综述了其制备、检测方法及其近年来在食品中的应用和未来的开发前景。     

自然发酵乳中嗜热链球菌糖代谢特征与功能基因分析

嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)在发酵乳生产过程中应用广泛，通过对该菌种糖代谢相关功能基因的研究，可为优良工业菌种的筛选提供理论依据。该研究以27株分离自自然发酵乳的嗜热链球菌为试验菌株，利用碳水化合物鉴定生化试剂条，来对比分离株的糖类代谢情况，并通过基因组重测序和相关性分析，挖掘与菌株优良特性相关的基因。通过表型实验，将嗜热链球菌归纳为两组，其中一组仅可利用葡萄糖、乳糖、蔗糖，另一组还可以利用除上述糖类外的核糖、半乳糖、果糖、甘露糖、N-乙酰葡萄糖胺、苦杏仁苷、熊果苷、水杨苷、纤维二糖、麦芽糖、海藻糖、龙胆二糖等。两组间在多糖代谢基因和碳水化合物活性酶GT8差异显著(P<0.05);相关性分析结果显示，几丁质、N-乙酰葡萄糖氨基编码基因与菊粉、D-松三糖、木糖的利用显著正相关(P<0.05),淀粉的利用与碳水化合物活性酶家族GH13＿14和CE2具有显著正相关(P<0.05)。研究通过分析嗜热链球菌中参与碳水化合物代谢的基因，发现部分糖代谢表型与基因间差异相匹配，为发酵乳菌株的开发和利用奠定理论基础。     

益生元对益生菌生长代谢的研究

益生元是一种理想的人体膳食补充剂,可促进益生菌的生长代谢.本试验从活菌数、产酸能力、胞外多糖产量和双乙酰产量4个方面,研究了多种益生元,如低聚果糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖、低聚木糖、聚葡萄糖、抗性糊精和菊粉对复合益生菌(干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌)发酵代谢的影响.结果表明,低聚木糖对活菌数和产酸能力具有明显提升作用;抗...     

几种功能性低聚糖的综述

低聚糖,或称寡糖,是由3到9个单糖经过糖苷键连接而成的低度聚合糖。由于人体肠胃道内没有水解这些低聚糖的酶系统,因此它们不被消化吸收而直接进入大肠内,优先被双歧杆菌利用,是双歧杆菌的增殖因子。功能性低聚糖通常包括低聚异麦芽糖、低聚果糖、低聚半乳糖、低聚乳果糖、耦合糖、低聚木糖、低聚壳聚糖、低聚龙胆糖、棉籽糖、水苏糖等。本文对集中低聚糖的甜度、稳定性、功能性进行了比较。     

母乳源乳酸菌的低聚糖利用特性研究

为探究母乳源乳酸菌对不同低聚糖的利用特性,比较了8株不同种属的乳酸菌在6种低聚糖及复配低聚糖培养基中的生长能力。结果表明,低聚果糖和菊粉对4株副干酪乳杆菌均具有促生长作用(生长量大于葡萄糖);低聚果糖和低聚半乳糖能明显促进植物乳杆菌M113的增长;鼠李糖乳杆菌M53对低聚半乳糖的利用情况优于其他低聚糖;2株双歧杆菌对低聚半乳糖和水苏糖的利用较强。所测母乳源乳酸菌均不能较好利用低聚木糖人乳中常见的2′-岩藻糖基乳糖。8株母乳来源的乳酸菌对低聚糖的利用具有菌株特异性。菌株在混合低聚糖中的生长能力取决于其偏爱低聚糖的含量。该实验结果能够为婴幼儿配方奶粉中益生菌和低聚糖的筛选提供数据支持。     

酵母发酵法在分离提纯低聚异麦芽糖中应用的研究

利用某些酵母菌对不同碳源的利用能力和速度不同的原理,对酵母菌进行筛选试验,选出1株只利用葡萄糖、麦芽糖而不利用低聚异麦芽糖的优良酵母菌14号,并对该菌的特性进行了研究。利用该菌株的生长和发酵过程,可全部除去低纯度低聚异麦芽糖产品中的葡萄糖和麦芽糖,使最终低聚异麦芽糖产品纯度达99%以上。     

酵母发酵法在分离提纯低聚异麦芽糖中应用的研究

本文利用某些酵母菌对不同碳源利用能力和速度不同的原理,对酵母菌进行筛选试验,选出一株只利用葡萄糖、麦芽糖而不利用低聚异麦芽糖的优良酵母菌14号,并对该菌的特性进行了研究。利用该菌株的生长和发酵过程,可全部除去低纯度低聚异麦芽糖产品中的葡萄糖和麦芽糖,使最终低聚异麦芽糖产品纯度达99%以上。     

功能性低聚糖酶法制备研究进展

功能性低聚糖由于能够调节肠道微生态系统,促进健康,因而成为近年来的研究热点。文中综述了酶法制备低聚异麦芽糖、海藻糖、低聚果糖、低聚半乳糖、低聚乳果糖及低聚木糖的研究进展,介绍了酶法制备中影响目标产物的主要因素,不同来源酶的应用方式及效果,同时展望了未来酶制剂和酶技术在该领域的发展方向。     

浅谈我国功能糖市场发展分析

功能糖其实是指功能性低聚糖、功能性膳食纤维、功能性糖醇等几种具有特殊生理功效的物质的统称.这其中,功能性低聚糖属于寡糖,主要包括水苏糖、棉籽糖、乳酮糖、低聚果糖、低聚木糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖、低聚龙胆糖、大豆低聚糖、壳聚糖等.由于人体胃肠道内没有水解它们的酶系统,因而它们不被消化吸收而直接进入大肠内.这种特性使得它们可以优先为双歧杆菌所利用,是双歧杆菌的增殖因子.本文阐述了我国功能糖领域主要产品相关现状,及其对市场发展做详细论述.     

长双歧杆菌BBMN68微胶囊的制备及其应用性评价

长双歧杆菌BBMN68分离自广西巴马长寿老人粪便,已证明其具有双歧杆菌普遍的生理功能。为解决其不耐酸、不耐氧的缺点,本实验采用微胶囊包埋技术,以海藻酸钠、乳清蛋白以及VE为壁材,在氮气体系中采用挤压法包埋该双歧杆菌活菌体制备湿微胶囊和冻干微胶囊。结果表明：海藻酸钠、乳清蛋白和VE质量分数分别为2%、3%和10%条件下制备的湿微胶囊在酸奶中保存21 d仍能保持106 CFU/g以上的活菌数,耐胃酸实验2.0 h时活菌数仍高达3.16×107 CFU/g,肠溶实验中微胶囊在2.0 h实现完全崩解;海藻酸钠和乳清蛋白质量分数为2%和3%,氮气环境下制备的冻干微胶囊通过恒温加速实验测定可在室温条件下贮藏长达75 d。通过微胶囊包埋技术较好地解决了长双歧杆菌BBMN68不耐酸、不耐氧的缺点,同时也提供一种新型有效的补充肠道益生菌的形式。     

氧气胁迫对长双歧杆菌葡萄糖代谢关键酶基因表达的影响

双歧杆菌对氧气敏感．耐氧性成为其重要的性状及研究内容之一。实验采用半定量RT-PCR法对在4％氧气条件下培养的长双歧杆菌BBMN68的葡萄糖代谢中关键酶基因mRNA表达水平进行了比较和分析;、结果表明,随着氧气浓度增加,长双歧杆菌BBMN68的生长逐渐受到抑制,在4％浓度胁迫条件下,葡萄糖磷酸变位酶、葡萄糖-6-磷酸异构酶、磷酸酮醇酶、转酮醇酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶在氧胁迫30min时的mRNA表达明显下降,60rain及120min后,xfp和gap酶的mRNA表达量恢复到厌氧条件下的水平。研究了长双歧杆菌在氧气胁迫下菌体生长以及葡萄糖代谢中关键酶基因mRNA的变化情况,这些可能是细胞受到氧气胁迫的应激反应之一,推测葡萄糖代谢酶与长双歧杆菌耐氧性有一定关联。     

一株Bifidobacterium longum CCFM760的生理特性、安全性评价和基因分析

长双歧杆菌(Bifidobacterium longum CCFM760)是一株从江苏省无锡市滨湖区两岁健康幼女粪便分离筛选得到的具有良好缓解便秘功效的益生菌。作者对其生长产酸能力、人工模拟肠胃液耐受性、抑菌能力、低聚糖利用能力、抗生素耐受能力和总超氧化物歧化酶(SOD)活性进行了检测。该菌具有良好的生长产酸能力和人工模拟肠胃液耐受性,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用,能显著利用7种低聚糖,对14种抗生素敏感,培养液中总SOD活性达到(99.14±9.91)U/mL。此外,对该菌进行基因组草图测序,并从基因组角度解析了其低聚糖代谢能力、抗生素敏感性以及抗氧化能力。以上结果表明,B.longum CCFM760是一株安全的、具有实际应用潜力的益生菌。     

海洋寡糖益生菌微胶囊的制备和体外评估及其对动物肠道菌群的调节作用

为解决益生菌不耐低pH值、不耐氧的缺点,采用微胶囊包埋技术,以海藻酸钠为壁材用乳化法制备长双歧杆菌藻酸盐微胶囊。将基础藻酸盐微胶囊外包壳寡糖（chitosan oligosaccharides,COS）或在藻酸盐壁材中添加藻酸盐寡糖（alginate oligosaccharides,AOS）分别制备两种海洋寡糖微胶囊：COS-微胶囊和AOS-COS-微胶囊。体外实验表明：两种海洋寡糖微胶囊均可以显著提高长双歧杆菌在模拟消化液处理后或在4 ℃贮藏期内的存活率。AOS-COS-微胶囊在模拟胃液处理后仍能保持106 CFU/g以上的活菌数。在连续的模拟消化液处理后,AOS-COS-微胶囊中的活菌量达到基础微胶囊中的约1 000 倍。两种海洋寡糖微胶囊在4 ℃贮藏28 d后仍均能保持108 CFU/g以上的活菌数。体内实验表明：相比较未包埋的长双歧杆菌或基础微胶囊,海洋寡糖微胶囊可以显著提高动物肠道菌群中益生菌的含量,同时降低条件致病菌的含量,具有最佳的调节肠道菌群效果。因此,海洋寡糖益生菌微胶囊产品将是一种有巨大应用前景的新型功能性益生菌食品。     

Construction, characterization and exemplificative application of bioluminescent Bifidobacterium longum biovar longum

The aim of this work was to construct a bifidobacterial biosensor that could be used to analyze the metabolic state of cells. We transformed by electroporation the human intestinal bacterium Bifidobacterium longum biovar longum with a vector (pGBL8b) containing the insect luciferase gene from a click beetle (Pyrophorus plagiophthalamus) and studied the basic parameters affecting light production in the bioluminescent phenotype. We detected a minimum of 4000 cells, which indicates that the insect luciferase expression in Bifidobacterium longum is extremely good, and a measurement requires only a few minutes of incubation in ambient oxygen conditions. A pH of 7.0 was optimal for incorporating the substrate d-luciferin, and the substrate saturation effect occurred at 125 microM. We employed bioluminescent B. longum for a quick test of the efficacy of different carbohydrates to preserve cell physiology under acidic conditions. The prebiotic compounds Actilight and lactulose were the most active in preventing loss of intracellular ATP during incubation at pH 3. Glucose and inulin were less active, though still effective. In sum, our results show that bioluminescent B. longum, transformed with the pGBL8b plasmid, is a valuable tool for rapidly studying the physiological state of anaerobic bacterial cells under different environmental conditions.     

响应面法优化长双歧杆菌增殖培养基

为了提高长双歧杆菌发酵液中的活菌数,对其增殖培养基进行响应面优化。通过单因素试验筛选出长双歧杆菌的最佳碳源为乳糖,并发现低聚木糖、菊糖、低聚异麦芽糖、低聚果糖、苯丙氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、谷氨酸及赖氨酸均能显著促进长双歧杆菌的生长。利用Design Expert 8.06软件设计Plackett-Burman 试验筛选出影响长双歧杆菌生长的3个最重要因子,通过Box-Behnken试验及响应面分析确定3个因子的最佳添加量为：低聚木糖1.7g/L、菊糖3.6g/L、脯氨酸0.4g/L,用优化后的增殖培养基培养长双歧杆菌,18h后其活菌数达(1.75±0.02)×109CFU/mL,比优化前提高了95.64%。     

Bifidobacterial growth–promoting effect of yak milk κ‐casein hydrolysates produced with different proteases

The growth‐promoting effects of κ‐casein hydrolysates produced by four different proteases (trypsin, alcalase, papain and chymosin) on bifidobacteria (Bb12 and BBMN68) viability were evaluated. Results showed that the obtained κ‐casein hydrolysates possessed better property for improving the viability of Bb12 and BBMN68 than native κ‐casein. The bifidobacterium viability and pH drop were dependent on the added hydrolysates. The addition of κ‐casein hydrolysates improved the viability of Bb12 and BBMN68 to a variable extent. The κ‐casein hydrolysate produced with papain (KCHP) is the best for Bb12 and κ‐casein hydrolysate produced with trypsin (KCHT) is the best for BBMN68. Proper amino acid profiles improved the viability of Bb12 and BBMN68. The bifidobacterial growth‐promoting capacity of κ‐casein hydrolysate may be due to its high content of Ala, Met, Tyr, Phe and Arg residues, especially Tyr which is richer in para‐κ‐casein than in casein glycomacropeptide (GMP). In addition, the sialic acid content of κ‐casein hydrolysate produced with the tested proteases did not show a direct relationship with its bifidobacterial growth–promoting effect. The obtained peptides possessed growth‐promoting activity for Bb12 and BBMN68 existed in para‐κ‐casein.     

婴儿粪便长双歧杆菌的分离与多样性分析

本研究旨在分析婴儿粪便长双歧杆菌的多样性,采用改良MRS培养基从哈尔滨地区健康婴儿粪便中分离双歧杆菌,采用生理生化实验结合16S rDNA和热应激蛋白60基因(heat-shock protein 60,hsp60)同源性分析鉴定分离株,利用同源性分析及随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphism DNA,RAPD)、多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术进一步分析长双歧杆菌多态性。实验从11个婴儿体内分离得到18株厌氧的细菌菌株,经形态学分析、生理生化实验、16S rDNA测序及hsp60测序实验发现,其中7株为长双歧杆菌长亚种,3株为长双歧杆菌婴儿亚种。RAPD和MLST结果表明:7株长双歧杆菌长亚种为6个基因型,3株长双歧杆菌婴儿亚种为2个基因型,上述结果说明不同人源婴儿粪便长双歧杆菌基因型差异较大。     

长双歧杆菌BBMN68 对便秘模型小鼠的通便作用

目的：研究长双歧杆菌活菌BBMN68 活菌液对便秘模型小鼠的润肠通便作用。方法：将Balb/c 雄性小鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组和3 个剂量的给药组。给药组分别经口给予低、中、高剂量(1 × 107、1 × 108、1 × 109CFU/mL)的长双歧杆菌BBMB68 活菌液0.1mL/(kg·d)(以体质量计);空白组和模型组给予0.1mL/(kg·d)的质量分数10% 的脱脂奶溶液;阳性对照组给予1 × 108CFU/mL 动物双歧杆菌菌悬液0.1mL/(kg·d)。用复方地芬诺酯制造小鼠便秘模型,建模后各组分别给药,观察各组小鼠的首次排黑便时间、5h 内排便粒数和质量,测定粪便含水量和小肠墨汁推进率。结果：长双歧杆菌BBMN68 给药7d,可明显改善便秘小鼠首次排黑便时间、增加排黑便粒数和质量;长双歧杆菌BBMN68 给药15d 可显著提高便秘小鼠小肠墨汁推进率。表明长双歧杆菌BBMN68 具有润肠通便功能。     

Bifidobacterium carbohydrases-their role in breakdown and synthesis of (potential) prebiotics

There is an increasing interest to positively influence the human intestinal microbiota through the diet by the use of prebiotics and/or probiotics. It is anticipated that this will balance the microbial composition in the gastrointestinal tract in favor of health promoting genera such as Bifidobacterium and Lactobacillus. Carbohydrates like non-digestible oligosaccharides are potential prebiotics. To understand how these bacteria can grow on these carbon sources, knowledge of the carbohydrate-modifying enzymes is needed. Little is known about the carbohydrate-modifying enzymes of bifidobacteria. The genome sequence of Bifidobacterium adolescentis and Bifidobacterium longum biotype longum has been completed and it was observed that for B. longum biotype longum more than 8% of the annotated genes were involved in carbohydrate metabolism. In addition more sequence data of individual carbohydrases from other Bifidobacterium spp. became available. Besides the degradation of (potential) prebiotics by bifidobacterial glycoside hydrolases, we will focus in this review on the possibilities to produce new classes of non-digestible oligosaccharides by showing the presence and (transglycosylation) activity of the most important carbohydrate modifying enzymes in bifidobacteria. Approaches to use and improve carbohydrate-modifying enzymes in prebiotic design will be discussed.