酶解拟黑多刺蚁制备抗氧化活性肽

分别采用Alcalase2.4L、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、胰酶水解拟黑多刺蚁,利用超氧自由基、DPPH自由基、羟基自由基清除能力、还原力、铁离子螯合能力、亚油酸自氧化抑制能力6个指标衡量水解物的抗氧化能力,并结合水解度(DH)、蛋白质利用率、多肽含量等理化指标筛选最适蛋白酶。结果表明,酶解物具有良好的体外抗氧化活性,其抗氧化活性与抗氧化肽的剂量呈正相关,其中Alcalase2.4L水解能力、酶解液抗氧化能力最强。还研究了热处理、超声、均质等预处理方式对水解能力、抗氧化能力的影响,发现均质对酶解产物的影响最大。     

云南松花粉酶解肽的抗氧化作用研究

目的探讨云南松花粉酶解肽的抗氧化作用。方法采用连苯三酚自氧化法、Fenton法、DPPH自由基清除法检测云南松花粉酶解肽对超氧阴离子、羟自由基和DPPH自由基的清除作用。结果用3种方法检测云南松花粉酶解肽均具有一定清除自由基的作用,浓度7．5mg／mL时超氧阴离子自由基清除率达到64．45％,浓度30mg／mL时羟自由基清除率达到72．99％,浓度3mg／mL时DPPH自由基清除率为42．48％。结论云南松花粉酶解肽具有显著的抗氧化作用。     

斑鰶鱼蛋白控制酶解及其酶解物抗氧化活性研究

以斑鰶鱼(Clupanodom punchtatus)为原料,采用食品级的风味蛋白酶、复合蛋白酶、碱性蛋白酶、胰酶和木瓜蛋白酶酶解斑鰶鱼蛋白,制备具有DPPH自由基清除活性的富肽酶解物;对酶解物在化学反应体系和亚油酸氧化体系中的抗氧化活性进行综合评价。研究结果表明:碱性蛋白酶为斑鰶鱼蛋白制备抗氧化肽的最适酶,最优制备条件是:温度55℃,酶解时间5h,料水比1∶3,加酶量0.2%,pH 7.5,此时酶解物(蛋白质量浓度10 mg/mL)DPPH自由基清除率为89.54%;在化学反应体系中,酶解物的DPPH自由基清除能力、还原力和亚铁离子螯合力都随着蛋白质量浓度的增加而增强。在蛋白质量浓度为5 mg/mL的条件下,DPPH自由基清除率为78.26%;酶解物的还原力为0.372(低于抗坏血酸);亚铁离子螯合率为46.81%。在亚油酸氧化体系中,酶解物(蛋白质量浓度10 mg/mL)对亚油酸过氧化物的抑制率为59.61%。     

牛骨股原蛋百肽体外清除自由基活性的研究

对经碱性蛋白酶Alcalase 2.4L水解的牛骨胶原蛋白肽清除自由基活性进行了研究。根据对羟基自由基、超氧阴离子自由基、二苯代苦味酰基自由清除能力的测定,以及还原能力、脂质抗氧化能力等抗氧化活性指标的测定,确定了水解度为7.9%左右的胶原蛋白肽清除自由基的综合效果最好,此时酶解产物的平均分子量为2025Da,含15个左右的氨基酸。在此条件下,超氧阴离子(O2-·)的清除率为63.86%,羟基自由基(·OH)的清除率为99.55%,二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)的清除率为27.03%,对大豆卵磷脂过氧化作用的抑制率为74.78%。     

牛骨胶原蛋白肽体外清除自由基活性的研究

对经碱性蛋白酶Alcalase 2.4L水解的牛骨胶原蛋白肽清除自由基活性进行了研究。根据对羟基自由基、超氧阴离子自由基、二苯代苦味酰基自由清除能力的测定,以及还原能力、脂质抗氧化能力等抗氧化活性指标的测定,确定了水解度为7.9%左右的胶原蛋白肽清除自由基的综合效果最好,此时酶解产物的平均分子量为2025Da,含15个左右的氨基酸。在此条件下,超氧阴离子(O2-·)的清除率为63.86%,羟基自由基(·OH)的清除率为99.55%,二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)的清除率为27.03%,对大豆卵磷脂过氧化作用的抑制率为74.78%。     

体外化学模拟体系中苹果多酚抗氧化及清除亚硝酸根离子活性的研究

通过测定苹果多酚对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基、亚硝酸根离子的清除作用,对脂质过氧化和β-胡萝卜素/亚油酸自氧化体系的抑制作用,以及还原能力等实验,研究了苹果多酚的体外抗氧化活性,并与VC进行了对比。实验结果表明,苹果多酚对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基、亚硝酸根离子均有不同程度的清除作用,对脂质过氧化和β-胡萝卜素/亚油酸自氧化体系有一定的抑制作用,对Fe3＋具有良好的还原能力。因此,苹果多酚是一种良好的天然抗氧化及清除亚硝酸根离子的活性物质。     

蛋清蛋白肽体外抗氧化作用模式的研究

目的 研究蛋清蛋白肽抗氧化作用模式。方法 利用超滤技术分离蛋清蛋白木瓜蛋白酶酶解产物; 采用Fenton体系、邻苯三酚自氧化体系和亚油酸自氧化体系分别测定超滤各组分清除羟自由基、超氧阴离子及抑制脂质过氧化的能力, 同时测定各组分对二苯代苦味肼基自由基清除能力(DPPH自由基)、还原能力及对猪胎儿成纤维细胞(porcine embryonic fibroblast, PEF)过氧化损伤的保护作用。结果 超滤各组分中分子量小于3 kDa组分(蛋清蛋白酶解产物-Ⅲ, egg white protein hydrolysate, EWPH-Ⅲ)占蛋清蛋白酶解产物(EWPHs)总量的50.06%。EWPH的抗氧化活性随分子量的降低而增强(P<0.05), 其中EWPH-Ⅲ在浓度为5 mg/mL时, 对羟自由基、超氧阴离子、DPPH自由基的清除率分别为52.86%、35.05%和78.74%, 对亚油酸氧化的抑制率为74.57%。在浓度为2.5 mg/mL时, PEF细胞存活率达到70.06%。结论 蛋清蛋白肽具有较强的抗氧化活性且分子量越小, 抗氧化活性越强, 可以作为氢供体、自由基稳定剂和金属离子螯合剂来抑制过氧化作用。     

膨大剂处理对猕猴桃多酚含量及抗氧化活性的影响

以猕猴桃为研究对象,测定对照组和不同膨大处理(CPPU、TDZ)的猕猴桃总酚、以及总还原能力、羟基自由基清除率、超氧自由基清除率和ABTS自由基清除率,分析不同膨大处理对总酚和抗氧化活性的影响,筛选出影响较大的膨大处理组;并研究其不同残留量对总酚含量和抗氧化活性的影响,作为膨大剂允许残留量影响抗氧化活性的参考。结果表明:膨大处理TDZ显著降低总酚含量和抗氧化活性,对总还原能力、羟基自由基清除率、超氧自由基清除率的影响较大,对ABTS自由基清除率的影响较小。研究不同TDZ残留量的影响,表明残留量为0.04 mg/kg可显著降低总酚含量,TDZ残留量大于0.02 mg/kg时即可显著降低总还原能力和羟基自由基清除能力,TDZ残留量大于0.04 mg/kg才显著降低对ABTS自由基和超氧自由基的清除能力。TDZ对总还原能力和羟基自由基清除能力的影响较大,对ABTS自由基和超氧自由基的清除能力影响较小。     

槲树叶黄酮的抗氧化特性研究

以槲树叶为原料,从DPPH自由基清除能力﹑总还原力、羟基自由基清除能力﹑抗亚油酸氧化能力及超氧阴离子清除能力五个方面研究槲树叶黄酮的抗氧化活性,同时与VC﹑BHT进行比较。结果表明:在实验条件下,槲树叶黄酮的抗氧化能力随浓度的升高而增大,对DPPH自由基清除能力和总还原力强于VC、BHT。对羟基自由基清除能力和抗亚油酸氧化能力弱于VC和BHT。对超氧阴离子清除能力在高浓度时优于VC和BHT。     

海参酶解液的体外抗氧化活性研究

分别选用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶和菠萝蛋白酶水解海参体壁,以DPPH·清除能力、O2-·清除能力、Fe2+螯合力和还原力为抗氧化指标,研究不同海参酶解液体外抗氧化活性的差异。结果表明,随着水解时间的增加,5种酶解液基本上均表现出酶解液的抗氧化能力先增加后下降的趋势。菠萝蛋白酶和碱性蛋白酶酶解液的DPPH·清除能力和O2-·清除能力较强;胰蛋白酶酶解液的Fe2+螯合能力最强;而木瓜蛋白酶酶解液的还原力最大。从清除自由基角度上,菠萝蛋白酶和碱性蛋白酶可作为开发海参抗氧化肽的优选工具酶。     

鸭肉蛋白酶解产物的抗氧化特性

为了解酶解时间、蛋白酶种类对鸭肉蛋白酶解产物抗氧化特性的影响,分别用复合蛋白酶、风味蛋白酶和胰酶对鸭肉进行单酶酶解和双酶分步酶解（胰酶＋复合蛋白酶、胰酶＋风味蛋白酶）,制备不同时间段的酶解产物,并对其自由基清除能力（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、羟自由基（hydroxyl radical,·OH）和超氧阴离子自由基（superoxide radical,O2－·））和总还原力进行分析。结果表明：各鸭肉蛋白酶解产物的DPPH自由基清除率随着酶解时间的延长而增加,但·OH和O2－·清除率及总还原力随着酶解时间的延长先增加后降低（P＜0.05）。在5 种鸭肉蛋白酶解产物中,复合蛋白酶酶解物表现出最强的DPPH自由基清除能力（75.70±1.54）%、·OH清除能力（59.41±1.24）%和O2－·清除能力（98.50±4.51）%,但用双酶分步酶解得到的酶解产物表现出最强的总还原力（0.330±0.017）。因此鸭肉蛋白酶解产物的抗氧化特性受酶解时间和蛋白酶种类的影响,复合蛋白酶是制备鸭肉蛋白源抗氧化肽的最适蛋白酶。     

复合蛋白酶水解玉米谷蛋白产物的抗氧化活性研究

以玉米谷蛋白为原料,利用复合蛋白酶对其进行限制水解,探讨不同水解时间所获得的谷蛋白酶解物的分子量分布和抗氧化活性。结果表明:不同水解时间获得的酶解物分子量分布差异较大。水解时间为120min的酶解物中,分子量分布为6 511.51~307.32Da的肽段占94.36%,此时获得的酶解物的抗氧化活性最高,其对DPPH自由基、O-2·、·OH的清除率分别为58.86%,82.64%,37.21%;还原力为0.236;与亚铁离子的螯合能力为29.92%。     

Changes in free-radical scavenging ability of kombucha tea during fermentation

Kombucha tea is a fermented tea beverage produced by fermenting sugared black tea with tea fungus (kombucha). Free-radical scavenging abilities of kombucha tea prepared from green tea (GTK), black tea (BTK) and tea waste material (TWK) along with pH, phenolic compounds and reducing power were investigated during fermentation period. Phenolic compounds, scavenging activity on DPPH radical, superoxide radical (xanthine–xanthine oxidase system) and inhibitory activity against hydroxyl radical mediated linoleic acid oxidation (ammonium thiocyanate assay) were increased during fermentation period, whereas pH, reducing power, hydroxyl radical scavenging ability (ascorbic acid–iron EDTA) and anti-lipid peroxidation ability (thiobarbituric assay) were decreased. From the present study, it is obvious that there might be some chances of structural modification of components in tea due to enzymes liberated by bacteria and yeast during kombucha fermentation which results in better scavenging performance on nitrogen and superoxide radicals, and poor scavenging performance on hydroxyl radicals.     

Antioxidant Activities of Rapeseed Protein Hydrolysates

Rapeseed protein hydrolysates (RPH) were obtained by enzymatic hydrolysis of rapeseed protein using Alcalase 2.4 L FG. The degree of hydrolysis (DH) of RPH was about 25% using pH-stat method. The antioxidant activities of RPH were investigated by employing several in vitro assay, including the 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH)/superoxide/hydroxyl radical scavenging assays, and reducing power assay. RPH showed scavenging activity against free radicals such as DPPH, superoxide, and hydroxyl radicals. The radical scavenging effect was in a dose-dependent manner, and the EC₅₀ values for DPPH, superoxide, and hydroxyl radicals were found to be 0.71, 1.05, and 4.92 mg/mL, respectively. In addition, the RPH also exhibited notable reducing power, which was 0.51 at 2.00 mg/mL. The data obtained by in vitro systems obviously established the antioxidant potency of RPH. Combined with the results of the amino acid profiles, RPH were believed to have high nutritive value in addition to antioxidant activities.     

石斑鱼肉肽的酶法制备工艺及其抗氧化性

以冰鲜石斑鱼肉为原料,采用碱性蛋白酶酶解的方法制备蛋白肽。以水解度和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除率为评价指标,在单因素试验的基础上,运用正交试验设计优化肽的制备工艺;利用DPPH自由基法、2,2’-联氮双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（2,2’-azinobis（3-ethylbenzothi azoline-6-sulfonic acid）ammonium salt,ABTS）自由基法、羟自由基（·OH）法和铁氰化钾还原法评价酶解物的抗氧化性。结果表明：石斑鱼肉肽的最佳制备条件为：酶解温度55 ℃、酶解pH 9、酶用量5 000 U/g、底物质量浓度8 g/100 mL、酶解时间5 h;石斑鱼肉肽酶解物具有较强的抗氧化性,清除DPPH自由基能力、ABTS+·能力、·OH能力和总还原力均随酶解物质量浓度的增加而增强;酶解物清除DPPH自由基、ABTS+·、·OH的半抑制浓度（IC50）值分别为（1.18±0.26）、（0.89±0.05） mg/mL和（0.35±0.02） mg/mL。     

体外消化对金瓜籽抗氧化肽抗氧化活性的影响

本实验以金瓜籽为原料,以还原力、羟自由基清除率、DPPH自由基清除率为考察指标,采用响应面试验探讨了制备金瓜籽抗氧化肽的工艺参数,并研究了其经体外模拟人体胃肠道消化后的游离氨基酸组成、分子质量分布及抗氧化活性变化。结果表明：制备金瓜籽抗氧化肽的最优工艺条件为底物（金瓜籽粕）质量分数为6%、添加碱性蛋白酶3%、在pH?8.5的体系中55?℃酶解90?min,此条件下所得羟自由基清除率、DPPH自由基清除率、还原力分别为（58.19±0.80）%、（60.27±1.73）%和0.49±0.01;分子质量小于3?kDa、3～5?kDa及大于5?kDa的抗氧化肽经体外模拟胃肠道消化后分别含游离氨基酸41.72%、36.94%和33.93%,其主要为分子质量小于500?Da的肽段,占比分别为73.50%、60.15%和53.30%;与消化前相比,消化产物对羟自由基的清除能力分别提高了26.04%、29.06%和34.43%,还原力分别提高了50.98%、64.53%、67.35%。该研究可为金瓜籽抗氧化肽作为功能性抗氧化剂的生产和应用提供参考。     

山羊乳酪蛋白酶解物制备及体外抗氧化活性研究

以自由基清除能力、金属离子螯合能力和抗脂质过氧化能力为指标,采用均匀试验研究山羊乳酪蛋白酶解物的制备及其体外抗氧化活性,并且比较自由基清除能力的方法。结果表明：山羊乳酪蛋白适宜的酶解工艺为在60g/kg的底物浓度下,中性蛋白酶和碱性蛋白酶的添加量分别为4000U/g和250U/g,45℃、pH7.5条件下酶解24h。山羊乳酪蛋白经酶解后其体外抗氧化活性显著增强。山羊乳酪蛋白酶解物 ·OH清除率的EC50值是其蛋白的3.59倍,ABTS＋ ·的清除能力是其蛋白的158.72倍,螯合Fe2＋的能力是其蛋白的5.44倍;在亚油酸体系中抗脂质过氧化能力强于TBHQ,与VE相当。清除 ·OH、DPPH自由基、O2－ ·和ABTS＋ ·的方法不能相互替代。     

响应面法优化珍珠龙胆石斑鱼肉肽的酶法制备工艺及酶解产物的抗氧化活性

以珍珠龙胆石斑鱼肉为原料,利用蛋白酶酶解制备生物活性肽。以水解度和DPPH自由基清除率为指标,在单因素实验的基础上采用响应面分析法优化制备工艺。并采用超滤法对酶解产物进行分离纯化,同时进行抗氧化活性探究。结果表明:珍珠龙胆石斑鱼肉酶解工艺条件为:采用风味蛋白酶,酶添加量1050 U/g,在pH7.0、53℃、料水比1:3.5条件下酶解5.5 h,水解度为9.99%±0.39%。酶解产物与超滤组分均具有较强DPPH自由基清除能力,其IC₅₀值在0.63~0.88 mg/mL之间;EH-2(5~8 kDa)和EH-3(3~5 kDa)有较强的羟基自由基清除能力,其IC₅₀值分别为16.94和16.38 mg/mL;酶解产物与超滤组分均具有还原能力,且酶解产物还原能力最佳。优化的珍珠龙胆石斑鱼肉肽的酶法制备工艺合理且可行,其酶解产物与超滤组分具有较强的抗氧化性,可作为功能食品的基料应用。     

Functional Properties and Bioactivities of Pine Nut (Pinus gerardiana) Protein Isolates and Its Enzymatic Hydrolysates

The functional properties and bioactivities of the pine nut protein isolates (PPI) and its enzymatic hydrolysates (PPH) prepared with Alcalase at 5 %, 10 %, 15 % and 25 % degree of hydrolysis (DH) were studied. The solubility of PPH significantly increased (p?<?0.05) with the increase of the DH, while the foaming capacity of PPH was only improved at a low DH. However, enzymatic hydrolysis reduced the emulsifying capacity of PPH. The DPPH radical scavenging and inhibition of linoleic acid oxidation activities of PPH were significantly improved by a low DH (5 %) compared with those of PPH with a higher DH and the original PPI (p?<?0.05). The reducing power of PPH at all DH decreased in comparison to that of the original PPI. Potent angiotensin-converting enzyme (ACE) inhibitory peptides could be generated by hydrolysis with Alcalase, and the ACE inhibitory activity of PPH increased (p?<?0.05) with the DH. These results revealed that a low degree of enzymatic hydrolysis was appropriate to obtain PPH with improved functional properties and good antioxidant activities, while a high degree of hydrolysis was essential to obtain highly potent ACE inhibitory peptides from PPI. These results suggest that the control of the DH may be an effective strategy to modify specific functional and bioactive properties of PPH, and PPH has potential as a functional food ingredient for related functional and health benefits.     

酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽的分离与稳定性研究

目的：研究酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽的分离和稳定性,为其开发应用提供基础数据。方法：超滤分离酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽,比色法测定其抗氧化能力。结果：超滤分级后得到分子质量为200～3 000 D的酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽对O2－•、•OH、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基的IC50分别为18.85 mg/mL、3.13 mg/mL、35.23 μg/mL。该抗氧化肽经过4 h胃蛋白酶+胰蛋白酶处理前后对DPPH自由基清除率分别为81.05%、82.26%;在pH 4、8条件下处理1 h,对DPPH自由基清除率分别为98.02%、11.80%（100 μg/mL）;在温度95 ℃条件下处理1 h,对DPPH自由基清除率为87.11%（100 μg/mL）;用浓度为1.0 mol/L的NaCl处理6 h,相比对照组,对DPPH自由基清除率由51.58%下降到22.68%（60 μg/mL）。结论：超滤后得到的分子质量为200～3 000 D的酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽的抗氧化能力比酶解原液有一定提高;且在酸性、高温、脱盐处理后对DPPH自由基的清除能力保持较好;胃肠道消化酶对其DPPH自由基清除能力的影响不显著（P＞0.05）。