应用C30-HPLC-PDA分离与鉴定番茄红素几何异构体

在装备了二极管阵列检测器(PDA)的高压液相色谱(HPLC)上,应用C30柱,番茄红素几何异构体获得了良好的分离。色谱条件为:WatersYMCCarotenoidS-5(4.6×250mm)柱;乙腈-甲醇-三乙胺(75∶25∶0.05,V/V)为流动相A,甲基叔丁基醚-三乙胺(100∶0.05,V/V)为流动相B,流动相B在8min内由0%线性增至55%,而后维持恒定至35min;流速:1.0mL/min;PDA波长范围:260～700nm;进样量:20μL。根据各组分的色谱行为、光谱特征和在碘催化下发生几何异构的产物分析,13,13'-顺式番茄红素、11,11'-顺式番茄红素、9,9'-顺式番茄红素和全反式番茄红素4个组分被鉴定。本项研究的结果奠定了应用C30-HPLC-PDA定量检测番茄红素几何异构体的基础。     

C30-HPLC-PDA分离与鉴定β,β-胡萝卜素几何异构体

在装备了二极管阵列(PDA)检测器的HPLC上,应用C30固定相,β,β-胡萝卜素的几何异构体获得了良好的分离。分离条件为:固定相=YMCCarotenoidS-5(4.6×250mm)柱;流动相A=乙腈:甲醇:三乙胺(75:25:0.05,V/V);流动相B=甲基叔丁基醚(MTBE)-三乙胺(100:0.05,V/V);线性梯度:B在20min内由0%增至80%;流速=1.0ml/min;PDA波长范围=260～700nm;进样量=20μl。根据各组分的色谱行为、光谱特征和在碘催化下发生几何异构的产物分析,13,13’-、11,11’-、9,9’-顺式和全反式异构体被鉴定。本项研究的结果奠定了应用C30-HPLC-PDA定量检测β,β-胡萝卜素的几何异构体的基础。     

叶黄素、β-隐黄质及其异构体检测方法的研究

应用C30-HPLC-DAD技术,建立一种同时分离全反式叶黄素、全反式β-隐黄质及其异构体的检测方法。采用APCI-MS和光谱技术对分离出化合物进行定性分析。最佳色谱条件:1.5%乙酸铵水-甲基叔丁基醚(MTBE)-甲醇(5:25:70,V/V/V)为流动相A,1.5%乙酸铵水-甲基叔丁基醚(MTBE)-甲醇(5:85:10,V/V/V)为流动相B,线性梯度洗脱;流速:0.6 m L/min;洗脱时间:24min;进样量:20μL;柱温:25℃。混合物中的全反式叶黄素及其15-顺式、13/13’-顺式、9-顺式、9’-顺式异构体,全反式β-隐黄质及其15-顺式、13-和13’-顺式、9-顺式、9’-顺式异构体均得到较好分离。全反式叶黄素、全反式β-隐黄质分别在2~150 ng和5~250 ng范围内峰面积与进样量呈良好线性关系。该方法能够快速、准确地同时分离全反式叶黄素、全反式β-隐黄质及它们的异构体,可用于果蔬中全反式叶黄素和全反式β-隐黄质及其异构体混合物的定性定量分析。     

番茄及其制品中全反式番茄红素及bate-胡萝卜素含量的C30-HPLC内标法定量分析

目的：建立C30-HPLC 内标法对番茄及其制品中全反式番茄红素和β- 胡萝卜素进行同步定量检测方法。方法：色谱条件：固定相：YMC Carotenoid column C30 色谱柱 (4.6mm × 250mm,5μm);流动相A：乙腈:甲醇(3:1,V/V);流动相B：甲基叔丁基醚(MTBE);流动相A 与B 中分别添加体积分数0.05% 的三乙胺;洗脱条件：B 在0～10min 内保持30%,在10～20min 内,B 由30% 线性增至90%,20～30min 内B 维持在90%;流速：1mL/min;色谱图检测波长470nm 和450nm;进样量：20μL;柱温：室温。内标物为全反式-8'- 阿朴-8'-β- 胡萝卜素醛。结果：此方法的最小定量限为0.01μg/mL。在0.3～0.6μg 范围内,内标物对全反式番茄红素和β-胡萝卜素的相对校正因子分别为1.36 和1.22,重复性RSD 分别为小于0.50%和0.70%,加样回收率均在99.00% 以上。结论：应用本方法可对番茄及其制品中的全反式番茄红素和β- 胡萝卜素进行定量分析。     

番茄果实中全反式番茄红素的C30-HPLC外标法定量检测

为建立一种在C30-HPLC 上使用外标法对番茄红素全反式异构体进行定量检测的方法,采用色谱条件：固定相：YMC Carotenoid columu C30 色谱柱(4.6mm × 250mm,SOD-5μm,Waters);流动相A：乙腈- 甲醇(3:1,V/V);流动相B：甲基叔丁基醚(MTBE);流动相A 与B 中分别添加0.05%(V/V)的三乙胺;线性梯度洗脱：B 在20min 内由0 增至80%,20～35min 内B 维持在80%;流速：1mL/min;色谱图检测波长470nm;进样量：20μL;柱温：室温。结果表明：此方法的最小定量限为0.10μg/mL,在10～100μg/mL 范围内质量浓度与组分峰面积的线性回归方程为y=212181x,R2=0.9738。相对标准偏差为4.04%。外标加样回收率为97.34%(RSD 为0.904%)。应用本方法可对番茄果实中的全反式番茄红素进行定量分析。     

C30柱分离万寿菊花中的叶黄素类化合物初探

应用C30-HPLC-PDA,万寿菊花萃取物中的叶黄素类化合物获得了良好的分离,包括:叶黄素酯的分离和单体几何异构体的分离。色谱条件为:WatersYMCCarotenoidS-5(4.6×250mm)柱;乙腈-甲醇(75:25,V/V)为流动相A,甲基叔丁基醚为流动相B,线性梯度洗脱;流速:1.0ml/min;PDA波长范围:300～600nm;进样量:20μl。根据各组分的色谱行为、光谱特征和在碘催化下发生几何异构的产物分析对各组分进行初步鉴定。实验结果显示:C30固定相在分离万寿菊花萃取物中的叶黄素类化合物的应用中有良好的前景。     

高效液相色谱法测定马铃薯薯肉中类胡萝卜素

本实验研究了用高效液相色谱法测定马铃薯薯肉中叶黄素和玉米黄素.采用丙酮:石油醚(1:1,含0.1%BHT)混合液直接提取,用ZOBAX C18(4.6×250mm,5μm)色谱柱,乙腈:甲醇:二氯甲烷(75:20:5,含0.1%BHT)为流动相,进样量为5μ1,流速为1ml/min,柱温为25℃,在450nm下检测类胡萝卜素.研究结果表明,该法可以快速、准确地分离测定马铃薯薯肉中叶黄素和玉米黄素的含量,具有良好的线性(相关系数分别为0.9997和0.9987)和重复性,叶黄素和玉米黄素回收率分别达到92.87%和95.68%.而且本方法可有效防止类胡萝卜素氧化,因而非常适用于大批量样品的分析检测.     

食品中虾青素的C18-HPLC-PDA分离与鉴定

在装备了二极管阵列检测器(PDA)的高压液相色谱(HPLC)上,应用C18柱,冰凉花和虾中的主要酮基类胡萝卜素-虾青素可以被分离。分离条件为:色谱柱为DiamonsilTM(5μm,4.6mm×25cm,DikmaTechnology);流动相A为乙腈-水(90∶10,V/V),用磷酸调pH3.0;流动相B为乙酸乙酯;线性梯度洗脱:B在15min内由0%增加至70%;15～25min内B维持在70%;流速=1.0mL/min;检测波长=480nm;PDA波长范围=280～580nm;进样量=20mL。根据其与参比样品的色谱行为和光谱特征比较,样品中的虾青素可被鉴定。它在C18-HPLC-PDA上的定量亦成为可能。     

叶黄素及其顺式异构体的快速检测

为了建立分离度好、分离效率高的叶黄素顺、反异构体检测方法。通过对检测波长、流动相、流动相比例和流速等色谱条件的摸索和优化,确定最佳色谱条件,并采用光谱、高效液相色谱、质谱等方法对叶黄素顺、反异构体进行定性定量分析。结果表明：该方法流动相为二氯甲烷-乙腈-甲醇（20∶30∶50,V/V）,流速为1.0 mL/min,叶黄素热异构化样品中各物质在12 min内达到有效分离,无拖尾现象,峰形较好;在叶黄素热异构化样品中鉴定出15-顺式、13/13′-顺式和9/9′-顺式叶黄素顺式异构体及全反式叶黄素,全反式叶黄素在4～260 ng范围内峰面积与进样量呈良好线形性关系,回收率在95%以上,精密度和稳定性相对标准偏差均小于2%。该方法分离度好、准确性高、重现性好。     

姜黄中姜黄素的C30-HPLC-PDA分离

在装备了PDA检测器的HPLC上,应用C30柱,姜黄乙醇萃取物中的类姜黄素(curcuminoids)组分获得了良好的分离。分离条件为:固定相为YMCTMCarotenoidS-5(4.6×250mm)柱;流动相A为乙腈:水(80:20,V/V),用磷酸调至pH2.5;流动相B为乙腈:水(95:5,V/V),用磷酸调至pH2.5;线性梯度:B在15min内由0%增至100%;流速=1.0ml/min;PDA波长范围为300～550nm;检测波长为430nm;进样量为20μl。根据各组分的色谱行为和光谱特征分析,3种类姜黄素同系物--姜黄素(curcumin)、去甲氧基姜黄素(demethoxycurcumin)及去二甲氧基姜黄素(Bisdemethoxycurcumin)被鉴定。本研究的结果奠定了应用C30-HPLC-PDA定量检测类姜黄素同系物的基础。     

番茄及其制品中番茄红素含量的C18-HPLC-PDA定量分析

目的:建立一种可靠的测定番茄及其制品中番茄红素含量的C18-HPLC-PDA方法。色谱条件:固定相为DIAMONSILTM柱(Dikma Technologies,250×4.6mm,5μm);流动相A为乙腈:水(9:1);流动相B为乙酸乙酯;线性梯度洗脱:在15min内,流动相B由0%增为100%(V/V),随后5min,流动相B保持100%;流速1.0ml/min,PDA波长范围260～600nm;色谱图检测波长471nm;进样量20μl;柱温=室温。结果:此方法的定量限为0.10μg/ml,质量浓度在0.10～25.60μg/ml范围内浓度与组分峰面积的线性相关系数为0.9994,RSD为2.6%,回收率为99.3%。结论:这是一种番茄及其制品中番茄红素含量测定的可靠方法。     

海带中岩藻黄质的C18-HPLC-PDA检测

目的:研究海带中岩藻黄质的C18-HPLC-PDA检测方法。方法:在C18-HPLCPDA上,海带中的岩藻黄质可获得良好的分离。色谱条件:DiamonsilTM C18(4.6mm×250mm,5μm)柱;流动相A:乙腈-水(9∶1,V/V);流动相B:乙酸乙酯;线性梯度洗脱:B在20min内由0增至100%;流速:1.0mL/min;PDA波长范围:250～600nm;进样量:20μL。根据其色谱行为和光谱特征,使用外标法可对岩藻黄质组分定性、定量。     

Determination of benzimidazole anthelmintics in livestock foods by HPLC

A simple and rapid liquid chromatographic method was developed for the simultaneous determination of twelve benzimidazole anthelmintics in livestock foods using reversed-phase high-performance liquid chromatography with photodiode array detection (PDA). A sample was homogenized with acetonitrile and n-hexane, and centrifuged. The acetonitrile phase was isolated and evaporated. The residue was dissolved in 0.1 mol/L carbonate buffer solution (pH = 9.1), sonicated, and then subjected to clean-up on a Bond Elut LRC-C18 cartridge. The benzimidazole compounds were separated isocratically on a Capcell Pak C18 UG 120 (5 microns, 150 x 4.6 mm i.d.) column and detected by PDA at 295 and 313 nm. Mixtures of acetonitrile and 0.05 mol/L ammonium acetate in mixing ratios of (20:80) and (40:60) were used as the mobile phase, and the flow-rate was 1.0 mL/min at 40 degrees C. The mean recoveries (n = 3) from 0.1-0.5 microgram/g added samples were 72.6-97.2% with coefficients of variation of 0.3-8.5%. The detection limits were 0.01-0.05 microgram/g.     

高效液相色谱法快速测定降血压肽的血管紧张素转换酶抑制活性

建立了体外快速测定降血压肽的血管紧张素转换酶抑制活性的高效液相色谱分析方法。以马尿酰组氨酰亮氨酸(HHL)为反应底物,血管紧张素转换酶(ACE)为催化剂,反应所生成的马尿酸为测定指标,未加酶抑制剂的反应为空白对照。使用Symmetry C18分析型色谱柱(5μm 3.9×150 mm,),柱温25℃,流动相A为乙腈(含0.05%三氟乙酸),流动相B为超纯水(含0.05%三氟乙酸),采用梯度洗脱方式,流速0.8 mL/min,检测波长228 nm。在马尿酸浓度为12.5～200μg/mL时,马尿酸浓度与其峰面积呈良好的线性关系(R~2=0.9999);该方法具有良好的准确性和重现性,对马尿酸的回收率为93.23%～100.25%。高效液相色谱法和紫外比色法对血管紧张素转换酶抑制活性无显善差异(P>0.05)。结果显示,高效液相色谱法具有检测快速、操作简便、灵敏度高等优点,为降血压产品的研制提供了简便可靠的检测手段。     

HPLC检测火腿肠中大豆分离蛋白的方法研究

利用高效液相色谱(HPLC)法测定火腿肠中大豆分离蛋白的含量。色谱条件为:Xb ridgeBEH300 C4色谱柱;蒸发光散射检测器;梯度洗脱;流动相A:0.05%三氟乙酸-HPLC级水溶液,B:0.05%三氟乙酸四氢呋喃溶液;流速1.0 mL/min;检测波长254 nm;柱温30℃;进样量20μL。大豆分离蛋白在1%～9%含量范围内与特征峰面积呈良好的线性关系,回归方程为Y=2 923.1 X-970.85,相关系数R=0.994 2,平均回收率为99.30%,RSD为2.04%。HPLC法准确度、精密度、稳定性、重现性良好,为火腿肠中大豆分离蛋白的定量检测提供了可选择的方法。     

Analysis of main pigments and other ingredients in lac color product

The contents of the main pigments and other ingredients in commercial lac color products were determined by HPLC using an RP-18 column with 0.1 mol/L citric acid buffer solution-methanol (16:5) as the mobile phase, and a photodiode array (PDA) detector set at 280 nm and 490 nm. The main pigments were confirmed by PDA and electrospray ionization mass spectrometry. Laccaic acids A, B, C and E were detected in all lac color products, and the ratio of content of laccaic acid A in all products was over 50%. The total contents of laccaic acids A, B and C in lac color food additive products and reagent products were 775-858, 797 and 779 g/kg, respectively. As for the contents of ingredients except pigments in commercial food additive products, the maximum moisture content was about 10%, and ether-soluble substances amounted to 0.5-3.6%.