大蒜SOD最佳提取条件确定及其生长过程中SOD活力变化研究

采用热变性法、磷酸缓冲液提取法、热变性法+磷酸缓冲液提取法、氯仿-乙醇沉淀法、丙酮沉淀法5种方法对大蒜细胞溶质中超氧化物歧化酶(SOD)进行了粗提、分离纯化.实验结果表明热变性法+磷酸缓冲液混合法所得的SOD的粗提物活性较高;丙酮沉淀法是SOD纯化的最好方法;不同的丙酮加入量与搅拌时间会影响SOD的纯化结果,其最佳条件是加入0.6倍体积的丙酮,搅拌15 min.在此优化条件的基础上,研究不同生长阶段大蒜SOD酶活力,大蒜中SOD酶活力随生长过程,总体成上升趋势.在第五周以后趋于稳定,SOD酶活力达到最高1.210.     

红树莓超氧化物歧化酶(SOD)的提取工艺

通过对红树莓SOD抽提缓冲液的pH、抽提体积和抽提次数进行优化探讨红树莓SOD的最佳提取工艺，并采用（NH4）2S0。盐析沉淀法对红树莓SOD实现初步的分级分离。结果表明：抽提缓冲液的pH为7．8，抽提体积为1．5倍，抽提次数为2次时，得到红树莓SOD的最大提取活力。（NH4）2SO4饱和度为50％～90％时，红树莓SOD能够达到相对最大酶活。     

曹州木瓜超氧化物歧化酶(SOD)粗酶的提取工艺

本课题以曹州光皮木瓜为原料,以细胞破壁处理,溶解SOD,去除杂蛋白,沉淀SOD为基本工艺程序,对木瓜超声处理的条件、SOD的提取工艺进行单因素实验及三因素三水平正交试验研究,同时对超声处理后溶出的蛋白质含量、提取SOD比活的检测结果进行比较。最终得出的结论为,从木瓜中提取SOD粗酶的最佳工艺条件:温度为25~30℃,p H值为7.8,50 mmol/L磷酸缓冲液与木瓜的比例为2∶1,用2.5倍体积的氯仿-乙醇混合液去杂蛋白,加入1.5倍体积冷丙酮沉淀SOD。     

茶叶中茶多糖茶多酚茶咖啡碱的高压脉冲电场快速提取

以10倍质量的0．001MEDTA缓冲液为提取液，应用高压脉冲电场（PEF）技术成功从等外绿茶中提取功能成分茶多糖、茶多酚和咖啡碱，并与水提法的提取率进行了比较。结果表明：在缓冲液pH9．5，场强度为25kV／cm，脉冲数为10的条件下，茶多糖有最大提取率，PEF法提取率是水提法的1．91倍；在缓冲液pH9．5，脉冲电场强度为25kV／cm，脉冲数为12时，茶多酚有最大提取率，提取率是水提法的1．11倍；在缓冲液pH4．0，脉冲电场强度为25kV／cm，脉冲数为10时，咖啡碱有最大提取率，是水提法的1．05倍。     

发芽和提取条件对玉米胚芽中超氧化物歧化酶的诱导作用

为提高玉米超氧化物歧化酶(SOD)的活力和提取率,在不同条件下对玉米进行发芽处理,从发芽玉米中剥离胚芽,并在磷酸缓冲液中浸泡,再提取SOD,并测定SOD总活力。结果表明：玉米在30℃、有光照条件下发芽4d,剥离的40g胚芽在0.05mol/L 200mL磷酸缓冲液中浸泡36h,通过胶体磨研磨浸提1h,60℃热沉淀15min,用1.5倍－20℃的丙酮沉淀SOD,经Cellulose-DE-52层析,再经SephadexG-75层析,得到的玉米SOD比活力最高,为4487.28U/mg pro,比未发芽的玉米胚芽提取的SOD的比活力(924.18U/mg pro)提高了3.86倍。     

蛹虫草固体培养残基中SOD的提取研究

以酶总活力为指标对蛹虫草培养残基中的超氧化物歧化酶(SOD)提取条件进行研究,通过对培养残基与磷酸缓冲液的用量比即料液比、磷酸缓冲液pH值、提取温度、固体(NH4)2SO4饱和度这4个因素进行单因素试验与L9(34)多因素正交试验,发现料液比对SOD的提取效果影响最明显,其次为固体(NH4)2SO4饱和度和提取温度,而缓冲液pH值的影响相对较小.确定蛹虫草培养残基中SOD的最佳提取条件:料液比为1:20,提取温度为50℃,缓冲液pH值为7.6,固体(NH4)2SO4饱和度为40%,在这样的提取条件下测出的酶总活力最高,提取效果最好.     

荔枝果肉过氧化物酶提取与初步纯化

酶促褐变是影响荔枝果肉加工和贮藏的重要问题,过氧化物酶(POD)被认为是参与酶促褐变的重要酶类.用丙酮粉磷酸缓冲液提取荔枝果肉中的过氧化物酶,提取液最佳离子浓度为0.3mol/L、最适pH为7、最佳提取时间为30min,最适料液比为1:15(g:mL).通过丙酮粉缓冲液提取,硫酸铵沉淀和DEAE-Sepharose F F层析进行初步纯化.该酶被纯化了7.3倍,得率为6.4%.     

琯溪蜜柚中主要苦味物的丙酮提取工艺研究

目的:探讨琯溪蜜柚中主要苦味物(柚皮苷、柠碱和诺米林)的丙酮提取最佳工艺条件。方法:考察果实不同组织作提取原料、原料脱脂与否、脱脂溶剂的选择对提取率的影响,并运用正交试验考察丙酮用量(体积/质量)、提取时间、提取温度和pH值对提取率的影响。结果:琯溪蜜柚中主要苦味物提取的最佳工艺条件为20倍原料重的丙酮、40℃、pH7．0条件下水浴浸提15h。结论:采用本实验所确定的提取方法可将蜜柚中的三种主要苦味物同时提取出来。     

小麦苗中超氧化物歧化酶(SOD)提取条件的优化研究

利用磷酸盐缓冲液提取小麦苗中抗氧化组分超氧化物歧化酶(SOD),对磷酸缓冲液pH、抽提时间、热处理温度、热处理时间四个提取工艺参数进行单因素实验,并采用四因素三水平的响应曲面分析法(RSA)对上述因素的最佳水平范围进行优化,以邻苯三酚自氧化法对超氧化物歧化酶的活性进行测定。结果表明,在磷酸缓冲液pH8.0、抽提时间1h、热处理温度70℃、热处理时间15min的最优工艺条件下酶的活性较高,超氧化物歧化酶的活性可达587.60U/mL,此技术为小麦苗的综合利用提供了新方向。     

野生菊芋中超氧化物歧化酶SOD提取工艺研究

通过考察抽提野生菊芋SOD的温度,pH和体积并进行优化,探讨菊芋SOD的最佳提取工艺。结果表明:提取温度40℃,时间20 min,pH 6,丙酮︰酶液体积比为3︰1,菊芋SOD能够达到相对最大酶性。     

玉米超氧化物歧化酶的提取与纯化工艺

为优化玉米超氧化物歧化酶(SOD)提取与纯化工艺。研究不同浸提条件及沉淀分离工艺对玉米SOD提取及纯化效果的影响。最佳诱导和浸提的原料与缓冲液配比分别为1∶1.5~1∶3、1∶2,最佳诱导和浸提时间分别为25 h~30 h、1.5 h。采用50、60℃分别处理15、10 min两次热变性除杂蛋白、丙酮沉淀SOD的纯化效果最好。DEAE-纤维素柱层析纯化后,SOD比活为1 699.7 U/mg,回收率为31%,纯化倍数为30.7。该方法高效且低毒污染少,适于工业化生产。     

丙酮法提取菜籽饼多酚及体外抗氧化性研究

以菜籽饼为原料,探讨了采用丙酮法提取菜籽饼多酚的工艺及丙酮多酚提取液的体外抗氧化性。以多酚得率为考察指标,选择丙酮体积分数、提取温度、料液比及提取时间进行单因素及正交试验,确定了丙酮法提取菜籽饼多酚的最优工艺条件:提取温度70℃,料液比1∶12,提取时间30 min,丙酮体积分数35%,在此条件下菜籽饼多酚得率为20.64 mg/g。以鞣酸、维生素C为对照,通过测定丙酮多酚提取液的还原能力及对DPPH.的清除能力,结果表明,丙酮多酚提取液具有一定的体外抗氧化能力。     

蜂蛹超氧化物歧化酶(SOD)的提取及理化性质研究

对蜂蛹超氧化物歧化酶(SOD)的提取工艺及理化性质进行了研究。结果表明,用磷酸盐缓冲液可以对蜂蛹SOD进行有效的提取,最佳提取工艺条件为:用pH7.6的磷酸盐缓冲液于室温下静置提取4h后于55℃条件下加热20min,按该工艺条件进行提取,蜂蛹SOD的活力为110.41U/mgpro。蜂蛹SOD最适温度为40～60℃,最适pH为pH7.0～9.0,氰化钾和H2O2是蜂蛹SOD的抑制剂,可以有效地抑制蜂蛹SOD的活性。     

Comparison of solvent and microwave extracts of cranberry press cake on the inhibition of lipid oxidation in mechanically separated turkey

Cranberry press cake, an under utilized by-product of the cranberry processing industry is a potential source of food antioxidants. The objective of this research were (1) to prepare extracts from cranberry press cake using solvent extraction (SE) and microwave assisted solvent extraction (MASE), and (2) to test the ability of these extracts to inhibit lipid oxidation in mechanically separated turkey (MST). Water, ethanol and acetone were used as extraction solvents. Heating press cake prior to extraction with 70% ethanol increased antioxidant efficacy compared to extracting unheated press cake. Water extracts were least effective in inhibiting lipid oxidation. The most effective extracts were obtained by SE with 100% acetone or MASE with 100% ethanol. A poor correlation of 0.69 was obtained between the total phenols in the extracts and their ability to inhibit thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) formation in MST. The correlation coefficient between the amount of quercetin in the extracts and the number of days of TBARS inhibition in MST was 0.87. This indicates that although quercetin may be good inhibitor of lipid oxidation, polyphenols other than quercetin are likely have a role in the inhibition of TBARS in MST. For a similar yield of the extracts, MASE extract using 100% ethanol was a better inhibitor than 100% ethanol SE extract of lipid oxidation in MST. In terms of choice of solvent, based on their flammability and toxicity, MASE with 100% ethanol would be a more likely a choice over SE with 100% acetone, for inhibiting oxidation in MST.     

反胶束提取小麦胚芽蛋白的工艺研究

以副产品小麦胚芽为原料,用反胶束法研究了小麦胚芽蛋白的提取条件,包括前萃和后萃。前萃由琥珀酸二(2-乙基己基)酯璜酸钠(AOT)-异辛烷-氯化钾缓冲溶液组成的反胶束体系从小麦胚芽中提取蛋白;后萃先回收异辛烷,少量KCl的缓冲溶液溶解剩余的固形物,最后用丙酮沉淀得小麦胚芽蛋白。通过单因素实验,考查了AOT浓度、萃取时间、加入小麦胚芽粉量、温度、KCl浓度、缓冲溶液pH、W/O对小麦胚芽蛋白前萃率的影响以及KCI浓度、缓冲液pH、缓冲液加入量对小麦胚芽蛋白后萃率的影响。     

黄棒菜超氧化物歧化酶(SOD)分离纯化的技术

以植物新品种黄棒菜为原料,研究料液比,浸提温度及pH,热变性温度及时间、丙酮加入量等因素对黄棒菜超氧化物歧化酶(SOD)提取效果的影响,利用正交试验与单因素试验优化提取工艺。结果表明,提取SOD的最佳条件为:料液比1︰3(g/mL),浸提温度0℃,pH 7.0,50℃热变性20 min,1.5倍酶液体积的丙酮,此时SOD纯化倍数可达3.17。经层析纯化及真空冷冻干燥,获得SOD成品。最佳条件下处理新鲜黄棒菜叶茎、叶片组织,测得SOD最终比活力分别为7662.23 U/mg,4897.39 U/mg,纯化倍数达17.55、23.08,叶茎更适于提取SOD。经电泳检测,黄棒菜SOD相对分子质量约80 kDa,据文献鉴定为Mn-SOD。试验结果为黄棒菜SOD的分离纯化及资源开发提供技术参考。     

葡萄糖异构酶的研究——酶的分离提纯

葡萄糖异构酶细胞经丙酮处理,缓冲液抽提。DEAE—纤维素离子交挟柱层析和Sephadex G—200凝胶柱层析等方法得到分离井纯化。该法与超声破碎法相比,比活提高3.3倍,活力收率为74%,得到了高纯度异构酶,经Sephadex G—200凝胶柱层析获得较高收率的电泳纯制品。     

Extraction and normal-phase HPLC-fluorescence-electrospray MS characterization and quantification of procyanidins in cranberry extracts

Cranberries are a major source of procyanidins, an abundant class of bioactive polyphenols found in nature. The objective of this study was to apply a protocol for extraction and normal-phase high-performance liquid chromatograph-fluorescence-mass spectroscopy separation and quantification of procyanidins in cranberry extracts containing varying processing aids and/or methods of production. Cranberry extracts were best extracted using an acetone/water technique versus an acid/alkaline extraction. Procyanidins were semi-purified with C-18 and Sephadex LH-20 SPE cartridges (GE Healthcare Life Sciences, Piscataway, N.J., U.S.A.). Characterization and quantification of procyanidins up to octamers and higher molecular weight compounds, including separation of the A- and B-type dimers to tetramers was achieved.