桑叶生物碱对肝纤维化小鼠的改善作用及机制

目的：观察桑叶生物碱对转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）/Smads信号通路及基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase-13，MMP-13）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1）mRNA表达的调节作用，探讨桑叶生物碱改善小鼠肝纤维化的作用机制。方法：采用腹腔注射体积分数10% CCl4 橄榄油溶液（5 mL/kg mb）联合高脂饮食诱导小鼠肝纤维化模型。造模8 周后，正常对照组和模型组给予蒸馏水，低、中、高剂量组分别灌胃50、100、200 mg/kg mb剂量的桑叶生物碱，阳性药物组给予100 mg/kg mb水飞蓟宾，持续45 d。采用酶联免疫试剂盒测定各组小鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）、I型胶原蛋白（collagen I，Col I）及III型胶原蛋白（collagen III，Col III）含量；采用实时定量聚合酶链式反应测定肝组织TGF-β1、Smad3、Smad4、Smad7、MMP-13、TIMP-1 mRNA表达水平。结果：与模型组比，灌胃高剂量桑叶生物碱（200 mg/kg mb）的小鼠肝组织中α-SMA、Col I、Col III含量分别降低19.55%、19.93%、13.84%（P＜0.05）；TGF-β1、Smad3、Smad4、TIMP-1 mRNA表达水平分别下降59.04%、56.73%、50.70%、49.09%（P＜0.05），Smad7、MMP-13 mRNA表达水平分别上升48.29%、25.72%（P＜0.05）。结论：桑叶生物碱能改善小鼠肝纤维化，其机制可能是对TGF-β1/Smads信号通路相关因子和TIMP-1、MMP-13的基因表达具有调控作用。     

牦牛胶原蛋白肽降血糖效果研究

利用小鼠的糖尿病模型,研究牦牛胶原蛋白肽的降血糖作用。通过对昆明鼠腹腔注射四氧嘧啶（200 mg/kg）制备糖尿病小鼠模型。将造模成功的小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组（二甲双胍200 mg/kg）和牦牛胶原蛋白肽组（200 mg/kg）,每组6只,每天灌胃给药一次,连续灌胃2周,正常组和模型组小鼠灌胃等量生理盐水。在给药的第7 d和第14 d测定各组小鼠的空腹血糖、体重、低密度脂蛋白（Low-density lipoprotein,LDL）、甘油三酯（Triglyceride,TG）、总胆固醇（Total cholesterol,TC）和高密度脂蛋白（High-density and lipoprotein,HDL）含量等。同时采用苏木精-伊红染色法检测小鼠胰腺组织病理学变化。结果表明,与正常组相比,模型组小鼠的体重和血糖含量均有极显著性变化（P<0.01）,血清中TG、TC和LDL的含量均极显著性降低（P<0.01）;胰腺组织损伤严重,形态不完整,有明显的空泡产生。与模型组相比,200 mg/kg牦牛胶原蛋白肽可以显著改善糖尿病小鼠的症状,缓解糖尿病小鼠血糖及其它血液指标的增高趋势和胰腺组织的损伤程度。研究表明牦牛胶原蛋白肽可以显著性下调糖尿病小鼠的血糖水平,缓解糖尿病的症状。     

黄线狭鳕鱼皮胶原蛋白肽对D- 半乳糖致衰老小鼠改善作用

为探究黄线狭鳕鱼皮胶原蛋白肽对D-半乳糖致衰老小鼠改善作用,通过建造D-半乳糖致衰老小鼠模型,以制备的黄线狭鳕鱼皮胶原蛋白肽为研究对象,选用低剂量（200 mg/kg）、中剂量（400 mg/kg）和高剂量（800 mg/kg）胶原蛋白肽灌胃D-半乳糖致衰老小鼠模型,对皮肤抗衰老作用进行研究。通过测定小鼠皮肤中的水分、胶原蛋白、羟脯氨酸（hydroxyproline,HYP）、透明质酸（hyaluronic acid,HA）含量、小鼠血清和皮肤中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）活性、丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活性以及对小鼠皮肤组织形态学的观察,评价黄线狭鳕鱼皮胶原蛋白肽抗衰老作用效果。结果表明,黄线狭鳕鱼皮胶原蛋白肽可以显著提高D-半乳糖致衰老小鼠皮肤的水分、胶原蛋白、HYP 和HA 的含量,其中高剂量胶原蛋白肽组的效果最显著。此外,黄线狭鳕鱼皮胶原蛋白肽能显著增加衰老小鼠血清和皮肤中SOD、CAT 活性、提升GSH-Px 活性,并有效抑制MDA 的产生。通过病理切片观察小鼠皮肤组织形态,发现黄线狭鳕鱼胶原蛋白肽能有效减轻因衰老引起的皮肤粗糙、松弛、胶原纤维减少、排列障碍等现象。综上,黄线狭鳕鱼皮胶原蛋白肽对D-半乳糖致衰老小鼠有明显改善作用,有效延缓皮肤的老化进程。     

鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽的抗氧化活性

选取铁离子还原体系和3 种自由基体系为指标,研究鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽体外清除自由基效果和抗氧化作用。采用超滤膜分离鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽组分,筛选出体外清除•OH活性最好的组分,再建立小鼠衰老模型,将分离得到活性最好的组分采用灌胃法,测定小鼠皮肤中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）及丙二醛（malondialdehyde,MDA）和羟脯氨酸（hydroxyproline,Hyp）的含量,研究鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽体内抗氧化和清除自由基作用。结果表明：鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽具有较强的还原能力且对O－2•、DPPH自由基、•OH具有清除效果,质量浓度为10 mg/mL时对•OH、DPPH自由基、O－2•的清除率和对Fe3+ 的还原能力分别为70.48%、68.78%、42.53%和0.676;分子质量小于2 000 D的鮟鱇皮胶原蛋白肽组分对•OH具有较好的清除效果,IC50为15.7 mg/mL;剂量为100 mg/（kg•d）时,显著提高了皮肤中SOD、GSH-Px、CAT的活性,较模型组分别增加20.9%、41.3%和58.1%,且显著抑制MDA的形成。     

大鲵皮胶原蛋白肽的抗原反应特性研究

目的 探讨用酶法提取大鲵皮胶原蛋白肽,并确定大鲵皮胶原蛋白肽的抗原性,为进一步研究大鲵皮胶原蛋白肽的生物相容性提供依据。方法 采用酶法提取获得大鲵皮胶原蛋白肽,并对得到的胶原蛋白肽进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）分析确定其分子量分布范围。将得到的胶原蛋白肽与弗氏佐剂混合乳化后经免疫程序免疫ICR小鼠,采用抗体酶联免疫试剂盒检测小鼠血清中IgG、IgA、IgM以及IgE含量。结果 所得到的大鲵皮胶原蛋白为I型胶原蛋白,酶解后的胶原蛋白肽分子量均小于10 kDa,多数肽分子量集中在2000~5000 m/z,检测血清中IgA、IgG、IgM和IgE 4种免疫球蛋白的浓度范围分别是71.63~85.90 μg/mL、705.19~857.04 ng/mL、71.63~85.90 ng/mL与224.54~261.0 μg/mL。结论 大鲵皮胶原蛋白肽对ICR小鼠呈现出较弱的抗原性。     

鸡骨胶原蛋白肽对D-半乳糖致衰小鼠抗氧化性的研究

目的:采用D-半乳糖注射昆明种成年小鼠,建立衰老模型,研究鸡骨胶原蛋白肽对D-半乳糖致衰小鼠抗氧化能力的影响。方法:昆明种成年小鼠,随机分为正常组、模型组、低剂量组、高剂量组及VE对照组。以小鼠血清、肝脏及脑组织中的SOD、GSH-Px、CAT的活性及MDA含量为指标,考察鸡骨胶原蛋白肽在体内的抗氧化性能。结果:鸡骨胶原蛋白肽能够显著提高致衰小鼠体内肝组织、脑组织中的GSH-Px、CAT(P<0.05)和SOD活力(P<0.05),而血清、肝组织和脑组织中的MDA含量(P<0.05)则显著降低。结论:摄入适当的鸡骨胶原蛋白肽可以有效地增强小鼠机体的抗氧化能力,从而延缓D-半乳糖诱发的小鼠衰老。     

胶原蛋白肽与银耳多糖对衰老小鼠皮肤改善作用及机理研究

目的:比较胶原蛋白肽和银耳多糖对衰老皮肤改善效果及探究作用机理.方法:以120 mg/kg D-半乳糖腹腔注射构建衰老小鼠模型,分为模型组、胶原蛋白肽组、银耳多糖组,同时分别灌胃生理盐水、胶原蛋白肽830 mg/kg·BW和银耳多糖100 mg/kg·BW,连续8周,正常小鼠作为对照组.实验结束后取小鼠背部皮肤检测羟脯...     

玉米肽对小鼠酒精性脑损伤的保护作用及其机制

建立小鼠慢性酒精性脑损伤模型,研究玉米肽对酒精性脑损伤的保护作用。将ICR小鼠随机分为 5 组,分别为正常对照组、慢性酒精性脑损伤模型组、玉米肽高剂量组（2 g/kg）、玉米肽中剂量组（1 g/kg）、玉米肽低剂量组（0.5 g/kg）。采用直接饮用酒精溶液法建立小鼠慢性酒精性脑损伤模型,同时实验组小鼠给予玉米肽,连续5个月,实验结束后取脑组织,进行病理组织学观察,同时采用酶联免疫试剂盒检测各组小鼠脑组织中氧化应激相关指标和促炎细胞因子水平,此外还测定了小鼠脑组织中部分凋亡相关指标。结果表明：脑病理组织学显示玉米肽低、中、高剂量组能够不同程度地减轻酒精对小鼠脑组织的损伤作用;氧化应激指标表明玉米肽能够提高小鼠脑组织中GSH含量,增加GST、GSH-Px和T-SOD活性,降低MDA含量,减少细胞中ROS含量（P<0.05）;此外玉米肽还能够显著降低小鼠脑组织中TNF-α、IL-6、IFN-γ、TGF-β1和NF-κB水平（P<0.05）。玉米肽不仅通过调节酒精引起的神经细胞氧化应激,而且通过下调促炎细胞因子水平而改善小鼠酒精性脑损伤。     

大鲵皮胶原蛋白肽的结构特性及其对乙醇诱导肝损伤小鼠的保护作用

研究了大鲵皮胶原蛋白肽结构特性及其对乙醇诱导肝损伤小鼠的保护作用。大鲵皮经胃蛋白酶水解制备胶原蛋白,经木瓜蛋白酶水解制备大鲵皮胶原蛋白肽。紫外光谱及红外光谱结果表明,大鲵皮胶原蛋白肽具有胶原蛋白的三股螺旋结构。SDS-PAGE结果表明大鲵皮胶原蛋白肽分子量低于55ku。大鲵皮胶原蛋白肽低(50mg/(kg·d))、高(150mg/(kg·d))剂量组可显著抑制小鼠乙醇诱导产生的血清中AST、ALT活性的升高,显著抑制肝组织MDA含量升高,并且抑制肝组织中SOD活性的下降。组织病理表明,乙醇诱导肝损伤模型组小鼠肝细胞明显肿胀变形,肝细胞索紊乱,伴有炎症细胞侵润,大鲵皮胶原蛋白肽各剂量组的肝细胞排列规则、肝细胞索清晰。结果表明,大鲵皮胶原蛋白肽具有保护乙醇诱导小鼠肝损伤的作用。     

含胶原蛋白肽饮品对衰老小鼠皮肤改善作用和抗氧化作用研究

目的 研究3款含胶原蛋白肽饮品对衰老小鼠的皮肤改善作用及抗氧化作用。方法 采取D-半乳糖诱导的衰老小鼠模型, 正常对照组每天腹腔注射生理盐水, 模型组和产品组每天对小鼠腹腔注射D-半乳糖120 mg/kg。各组小鼠每天按0.1 mL/10 g体积灌胃, 模型组及对照组灌胃生理盐水, 产品组灌胃相应体积样品, 连续8周, 各实验组剂量16.7 mL/(kg·d)。分别检测皮肤羟脯氨酸和透明质酸含量, 血清、肝脏、心脏中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)活性和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量, 小肠和结肠的pH、短链脂肪酸含量。结果 相对于模型组, 3款胶原蛋白肽饮品均能提高衰老模型小鼠皮肤透明质酸和羟脯氨酸的含量、提升衰老小鼠的抗氧化能力(P<0.05), 表现为提高血清、肝脏、心脏的SOD和GSH-Px活性, 以及降低MDA浓度, 且3款饮品中以UKDNA胶原蛋白肽饮品的效果最好。对小肠、结肠内容物pH和短链脂肪酸(short chain fatty acids, SCFAs)含量检测显示, 3款饮品能提高结肠环境pH并对异丁酸、正戊酸以及总短链脂肪酸有显著影响(P<0.05)。结论 含胶原蛋白肽饮品可能通过提高机体抗氧化能力来改善衰老皮肤中透明质酸和羟脯氨酸含量。     

超声辅助鸡爪胶原蛋白肽处理对鸡胸肉贮藏品质的影响

探究4 ℃（冷鲜）与－18 ℃（冷冻）条件下超声辅助鸡爪胶原蛋白肽处理对鸡胸肉贮藏品质的影响。设置未处理、去离子水浸泡、超声辅助去离子水浸泡、鸡爪胶原蛋白肽溶液浸泡、超声辅助鸡爪胶原蛋白肽溶液浸泡5 个处理组,研究4、－18 ℃贮藏期间鸡胸肉的品质变化,包括滴水损失率、蒸煮损失率、水分分布、质构指标和组织结构变化。结果表明：随着贮藏时间的延长,2 个贮藏温度下的鸡胸肉水分构成均发生大幅改变,4 ℃组的不易流动水向自由水大量转化,导致滴水损失率和蒸煮损失率变化的上升速率更快,－18 ℃组的水分迁移程度较小;4 ℃组鸡胸肉的保水性较差;超声处理组的质构参数得到显著改善（硬度降低、弹性增加）,且对鸡胸肉色泽无显著影响。超声辅助鸡爪胶原蛋白肽处理能显著提高鸡胸肉贮藏期内的品质。     

鸡胸软骨糖/肽水解物的结构表征及其抗炎活性

本研究从鸡胸软骨水解物中分离得到胶原蛋白肽和硫酸软骨素并对其进行了结构表征和抗炎活性研究。胶原蛋白肽和硫酸软骨素得率分别为68.32%和18.82%(以干重计)。氨基酸分析表明胶原蛋白肽中甘氨酸含量最高,达14.05 mg/g,其次为谷氨酸(9.09mg/g)和脯氨酸(7.44 mg/g);紫外光谱分析与圆二色性结果显示所提取样品符合胶原蛋白肽的典型特征;通过高效液相色谱分析发现92.38%的胶原蛋白肽分子量小于1000u。傅里叶红外光谱、琼脂糖凝胶电泳、二糖组成分析结果表明提取的硫酸软骨素主要由硫酸软骨素A组成,相对纯度为91.87%。通过建立关节炎大鼠模型并检测糖/肽水解物对炎症因子TNF-α、IL-1β、PGE-2水平影响,与模型组相比(TNF-α39.90 pg/mL、IL-1β22.38 pg/mL、PGE-2 89.41 pg/mL),灌胃软骨水解物、胶原蛋白肽和硫酸软骨素能显著降低关节炎大鼠TNF-α、IL-1β、PGE-2水平(p0.05)。本实验结果表明,使用软骨水解物、胶原蛋白肽和硫酸软骨素能够抑制炎症因子TNF-α、IL-1β、PGE-2水平,减轻关节炎大鼠炎症反应。     

低分子量胶原蛋白肽交叉苦瓜素辅助降低糖尿病小鼠血糖作用特性

采用小鼠糖尿病模型研究低分子量胶原蛋白肽交叉苦瓜素辅助降血糖的作用特性。对糖尿病模型小鼠进行胶原蛋白肽交叉苦瓜素灌胃处理,测定给药前后小鼠的空腹血糖值、体重、脏器指数与肝组织抗氧化能力,进行糖耐量实验。结果表明,胶原蛋白肽交叉苦瓜素将糖尿病模型小鼠的血糖含量降低至7.5~17.8 mmol/L,葡萄糖耐量曲线下面积(AUC)降低至32.62~38.66 mmol/(min·L),肝脏指数和肾脏指数降低至44.98~57.17 mg/g和11.29~17.95 mg/g,脾脏指数提高至2.71~3.52 mg/g,超氧化物歧化酶(SOD)活力增强至88.18~158.38 U/mg prot,丙二醛(MDA)含量降至1.66~3.00 nmol/mg prot。与模型组相比,胶原蛋白肽交叉苦瓜素处理的糖尿病模型小鼠,第28 d的血糖值和第21 d的AUC显著降低(p<0.05),肝脏指数和肾脏指数下降,脾脏指数上升,肝组织抗氧化能力提高,其中石斑鱼骨胶原蛋白肽交叉苦瓜素的中剂量组与罗非鱼皮胶原蛋白肽交叉苦瓜素的中剂量组和高剂量组效果较显著。研究表明胶原蛋白肽交叉苦瓜素可使糖尿病小鼠的血糖值显著降低(p<0.05),且血糖值降低与肝脏抗氧化能力提高相关联,同时胶原蛋白肽交叉苦瓜素可促进糖尿病模型小鼠的脏器损伤修复,提高其自身免疫能力。     

鱼皮胶原蛋白中透明质酸酶抑制肽的制备工艺优化

目的：高效提取胶原蛋白中的透明质酸酶抑制肽。方法：以剑鱼（Xiphias gladius）鱼皮为原料，使用胃蛋白酶提取酶溶性胶原蛋白并使用盐析法进行纯化，经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定胶原蛋白种类；通过单因素和响应面法优化透明质酸酶抑制肽的提取工艺。结果：使用胃蛋白酶提取的胶原蛋白为I型胶原，透明质酸酶抑制性胶原蛋白肽的优化提取条件为复合酶比（m_{胶原蛋白酶}∶m_蛋白酶）8∶2，酶解温度32 ℃，酶解时间6 h，加酶量6%。在此条件下胶原蛋白肽的透明质酸酶抑制率为42.35%，响应面模型拟合性好，透明质酸酶抑制率的预测值与实际值无显著差异（P>0.05）。结论：该工艺可应用于对剑鱼鱼皮中具有透明质酸酶抑制性的胶原蛋白肽的提取。     

促成骨细胞增殖活性骨胶原蛋白肽的靶向筛选及活性分析

酶法制备的骨胶原蛋白肽为混合肽,通常具有多种潜在的生物活性,但目前缺乏基于促成骨细胞增殖活性的靶向性研究。本实验以酶法制备的牦牛骨胶原蛋白肽为原料,采用高效液相色谱法与纳米液相色谱-串联质谱法分别测定混合肽的分子质量与序列构成,基于与表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）的CDOCKER半柔性对接,靶向筛选具有潜在促成骨细胞增殖活性的骨胶原蛋白肽,并进行体外细胞增殖培养验证。结果表明,共鉴定得到78 条牦牛骨胶原蛋白肽,主要以低分子质量肽段为主（小于3 000 Da的组分占91.8%）,通过与EGFR对接发现,多肽GPAGPQGPRGDKGETGEQ（GP-18,1 736.815 Da）、TPEVDDEALEKFDK（TP-14,1 634.775 Da）、GPAGPQGPRGDKGETGE（GP-17,1 608.757 Da）、GKSGDRGETGPAGPAGPIGPV（GK-21,1 875.951 Da）和GKSGDRGETGPAGPAGPIGPVG（GK-22,1 932.973 Da）具有潜在促成骨细胞增殖活性。小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1细胞培养实验结果表明,3.0 mg/mL GK-22促成骨细胞相对增殖率达106%,显著高于空白组（P＜0.05）。本研究可为促成骨细胞增殖活性肽的靶向筛选和工业化制备提供理论参考。     

4 种食源性肽改善SD大鼠光老化皮肤弹性及机理的比较分析

为评价4 种食源性肽口服后对SD大鼠光老化皮肤弹性的改善效果并探讨其力学机制,将健康成年雌性SD 大鼠随机分为空白对照组、紫外线（ultraviolet,UV）辐照模型组、4 种活性肽摄取组,空白组不施行UV辐照,模 型组及肽组均行UVA＋UVB联合辐照,4 种活性肽分别配制成0.3、0.9、1.5 g/L的含肽水溶液口服,脱毛后连续UV 辐照18 周至光老化模型建立,测定皮肤弹性后将动物处死,取其背部皮肤制备匀浆,生化法测定羟脯氨酸和透明 质酸含量,酶联免疫吸附法检测Ⅰ型胶原蛋白（collagen I,Col I）、III型胶原蛋白（Col III）含量及基质金属蛋白 酶-1（matrix metalloproteinase-1,MMP-1）活力,另取部分皮肤组织进行石蜡包埋、切片后进行苏木精-伊红染色 观察。结果表明,与空白组相比,模型组大鼠皮肤弹性,Col I、羟脯氨酸、透明质酸含量显著降低（P＜0.05）, 而Col III含量及MMP-1活力显著升高（P＜0.05）,组织化学显示皮肤表皮增生,真皮层胶原纤维排列紊乱、且断 裂呈片段化聚集扭曲,基底膜溶解呈扁平化。与模型组相比,4 种活性肽口服后均能改善皮肤弹性,且样品2效果 最显著,其皮肤组织中Col I、羟脯氨酸、透明质酸含量显著升高（P＜0.05）,而Col III含量及MMP-1活力显著降 低（P＜0.05）。组织化学显示样品2摄食组大鼠表皮增生明显改善,真皮层增厚、胶原纤维增加,排列趋向均匀化 致密分布,不同程度上恢复到空白组波浪状规律排列,提示样品2提高光老化SD大鼠皮肤弹性的机理在于促进了胞 外基质（extracellular matrix,ECM）的生物合成,抑制了ECM降解酶MMP-1活力,修复了受损皮肤的力学结构。     

鳕鱼皮胶原蛋白肽果汁饮料抗紫外线照射引起的皮肤光老化

为研究鳕鱼皮胶原蛋白肽果汁饮料(CJD)对紫外线诱导的皮肤光老化的调节作用,将ICR雄性小鼠随机分为正常组(NC)、模型组(MC)、CJD低剂量组(CJD-L)、中剂量组(CJD-M)和高剂量组(CJD-H),通过观察各组小鼠造模部位皮肤的表观特征、结合HE染色,皮肤中羟脯氨酸和水分的含量来评价CJD对小鼠皮肤光老化的防护作用;通过测定小鼠皮肤组织和血清中的总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力,丙二醛(MDA)的含量,来探究CJD对皮肤光老化的作用途径。结果显示,与MC组相比,CJD中剂量和高剂量组可以显著抑制光老化小鼠皮肤中水分的流失(p<0.05)及胶原含量的降低(p<0.01),显著提高小鼠皮肤组织和血清中T-SOD、GSH-Px、CAT的活力(p<0.05),显著降低MDA的含量(p<0.05)。研究表明,胶原蛋白肽饮料对紫外线引起的皮肤光老化有保护作用,能够有效预防和延缓光老化。     

一种胶原蛋白寡肽促进皮肤胶原蛋白与透明质酸合成的研究

研究罗非鱼鱼鳞胶原蛋白寡肽对人皮肤成纤维细胞透明质酸分泌以及对小鼠真皮中胶原蛋白合成的影响.采用WST-8法测定了该胶原蛋白寡肽对人皮肤成纤维细胞增殖的影响,ELISA法检测了胶原蛋白寡肽对人皮肤成纤维细胞透明质酸分泌的影响;以D-半乳糖衰老模型小鼠为实验对象,考察胶原蛋白寡肽对小鼠真皮中胶原蛋白合成的影响.结果表明,胶原蛋白寡肽能促进人皮肤成纤维细胞增殖(p＜0.01),能促进人皮肤成纤维细胞透明质酸和小鼠真皮中胶原蛋白的合成(p＜0.05)说明该胶原蛋白寡肽能有效促进透明质酸和胶原蛋白的合成.     

双缩脲法测定罗非鱼源胶原蛋白肽含量的改良及应用评价

为探究罗非鱼源胶原蛋白肽含量的快速测定方法,以罗非鱼皮胶原蛋白肽为对照品,改良双缩脲比色法测定肽含量的操作方法,考察显色络合物最大吸收波长、线性拟合度高的肽和三氯乙酸（trichloroacetic acid,TCA）用量范围、pH值;在优化条件下对标准曲线进行重复性、精密度评价以及加样回收率实验;研究本方法对不同分子质量罗非鱼皮及鱼鳞胶原蛋白肽体系检测的适用性。结果显示,当胶原蛋白肽（标称分子质量3 kDa）质量浓度在0.3～1.5 mg/mL范围内,使用13% TCA溶液,调整体系pH 12.5,在波长545 nm处检测,吸光度与肽质量浓度线性拟合好（R2=0.999）,标准曲线方程为y=0.144 9x＋0.001 5;重复性和精密度实验得到相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）分别为1.86%和1.84%,加样回收率分别为113.9%、109.7%,RSD分别为1.39%、1.00%;线性范围宽、重复性好、准确度高。将本法应用于不同种类罗非鱼肽产品体系的检测,加样回收率相差不大,偏差均较小,说明本法简便、快捷,适用于罗非鱼源肽含量的检测。     

枸杞中绿原酸对转化生长因子-β1诱导心肌成纤维细胞纤维化的影响

目的：考察枸杞中分离得到的绿原酸对转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）诱导心肌成纤维细胞（cardiac fibroblasts，CFs）纤维化的干预效果。方法：质量浓度10 ng/mL TGF-β1诱导CFs建立心肌纤维化细胞模型，用不同质量浓度绿原酸处理纤维化细胞，细胞毒性实验（cell counting kit-8，CCK-8）检测绿原酸对CFs增殖的影响；酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测纤维化标志蛋白胶原蛋白（collagen，Col）I、Col III和免疫荧光检测α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）的表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative real-time polymerase chain reaction，qPCR）检测Twist1、Acta2、Snail2及纤维化蛋白S100A4等mRNA表达水平；Western blot检测TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白及其磷酸化表达水平。结果：CCK-8检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能抑制细胞异常增殖；ELISA和免疫荧光检测表明，枸杞中分离得到的绿原酸能下调纤维化标志蛋白Col I、Col III和α-SMA的表达；qPCR检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能高度显著下调纤维化转录调控因子Acta2、Twist1、Snail1、Snail2、Smad4及纤维化蛋白S100A4的mRNA表达（P＜0.001）；Western blot检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能高度显著下调TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白的表达（P＜0.001）。结论：在本研究质量浓度范围内，枸杞中分离得到的绿原酸抑制TGF-β1诱导的CFs纤维化过程，其机制可能与TGF-βl/Smads信号通路有关。