豆腐干优势腐败菌的分离鉴定及腐败特性分析

以腐败变质的真空包装豆腐干为材料,分离鉴定优势腐败菌并测定其致腐能力,为研究豆腐干腐败机理、控制并延长豆腐干产品货架期提供参考。从变质豆腐干中分离筛选出优势腐败菌,经形态学特征、生理生化特征及16S rRNA序列分析鉴定,再将优势腐败菌接种到无菌豆腐干,37℃下贮藏20 d,探讨豆腐干的腐败特征。结果表明:经分离筛选和感官评定获得1株优势腐败菌,鉴定为Bacillus subtilis。进一步致腐特性测定表明,接种优势腐败菌的豆腐干的硬度、弹性、胶着性等物理参数均明显降低;腐败相关化学成分含量也有明显变化,氨基酸态氮含量从0.037%增加到0.129%,挥发性盐基总氮(TVB-N)含量从5.63 mg/100 g增加到33.01 mg/100g,总酸(以乳酸计)含量从0.09%增加到0.544%。     

豆腐中主要腐败菌的分离鉴定及与品质的相关性分析

分离鉴定北方豆腐中的优势腐败菌,研究豆腐品质变化与腐败菌的相关性。以腐败变质的散装、盒装豆腐为研究对象,从中分离纯化出优势腐败菌,通过形态学特征,选择分离培养,比色法及VITEK2-Compact高级全自动微生物鉴定系统等方法鉴定散装与盒装豆腐中腐败微生物;然后将腐败菌回接到新鲜豆腐中,观察豆腐品质变化,同时以总酸度为测定指标,确定不同腐败菌对豆腐品质的影响。结果表明:有4株优势腐败菌,分别鉴定为溶血性葡萄球菌、克假丝酵母、短芽孢杆菌、托尔豪特链球菌。其中克假丝酵母、溶血性葡萄球菌及托尔豪特链球菌是导致豆腐发粘、涨袋及质构变软的主要微生物,而短芽抱杆菌对豆腐腐败变质无明显影响。托尔豪特链球菌是导致两种豆腐变酸的主要菌种。对豆腐品质变化有影响的腐败菌主要是克假丝酵母、溶血性葡萄球菌及托尔豪特链球菌。     

低温贮藏南美白对虾特定腐败菌的分离鉴定及腐败能力分析

为了分离鉴定南美白对虾在低温贮藏条件下的腐败菌并测定其腐败能力的大小,分别在4℃和-18℃的低温条件下贮藏南美白对虾,从中分离腐败菌,进行形态学观察和分子生物学鉴定,并将腐败菌接种至灭菌虾汁中进行分解蛋白质对比试验。结果表明,从南美白对虾中分离得到12株腐败菌,分别是Shewanella hafniensis,Acinetobacter johnsonii,Planoccoccus citreus,Bacillus cereus,Acinetobacter beijerinckii,Enterobacter hormaechei,Arthrobacter bergeri和Bacillus licheniformis,其中X1与X10可能为潜在新种或新属。南美白对虾优势腐败菌致腐能力研究结果显示:南美白对虾在冷藏条件下致腐能力强的优势腐败菌依次是Acinetobacter johnsonii,X1,Shewanella hafniensis和Acinetobacter beijerinckii;冻藏条件下致腐能力强的优势腐败菌依次是Planoccoccus citreus,Acinetobacter johnsonii,Shewanella hafniensis,Acinetobacter beijerinckii和X1。     

冰温贮藏中南美白对虾特定腐败菌的分离鉴定及其腐败能力分析

为了分离鉴定南美白对虾在冰温贮藏条件下的腐败菌,并分析其腐败能力的大小。通过冻结实验,确定南美白对虾的冰点,在0℃与冰点之间贮藏南美白对虾,从中分离腐败菌,进行形态学观察和分子生物学鉴定,将分离得到的腐败菌接种至灭菌虾汁中,通过产硫化氢,降解蛋白质,产挥发性盐基氮(TVB-N)的测定衡量腐败能力的大小。结果表明:从南美白对虾中分离得到12株腐败菌,分别是Shewanella hafniensis,Acinetobacter johnsonii,Planoccoccus citreus,Bacillus cereus,Acinetobacter beijerinckii,Enterobacter hormaechei,Arthrobacter bergeri,Bacillus licheniformis,未鉴定出的菌株X1和X10。在冰温贮藏条件下,导致南美白对虾腐败的优势腐败菌依次是Shewanella hafniensis、X1、Acinetobacter johnsonii和Acinetobacter beijerinckii。     

冷鲜鸡腿肉中优势腐败菌的分离鉴定及腐败能力研究

为了有针对性地控制冷鲜鸡中微生物污染,用平板划线分离和感官评价方法对变质冷鲜鸡中的优势腐败菌进行分离筛选。再将传统的微生物生理生化鉴定方法与16S r DNA序列分析方法相结合,通过构建系统发育树,对分离筛选出的进行鉴定。最后将各优势腐败菌重新接种至灭菌肉块于4℃贮藏,分别在第1、2、4、6、8天测定各组接种肉块的菌落总数和挥发性盐基氮(TVB-N),并以TVB-N产量因子(YTVB-N)探讨各优势腐败菌的腐败能力。结果表明:经选择性培养基划线分离和感官评价方法,接种肉块共筛选得到5株优势腐败菌即J3、S1、M3、V1和J1,鉴定结果分别为:Pseudomonas pseudoalcaligenes、Brochothrix thermosphacta、Staphylococcus saprophyticus、Achromobacter xylosoxidans、Serratia grimesii。进一步研究其腐败特性,接种优势腐败菌的肉块在4℃贮藏过程中,通过计算YTVB-N发现:J3的腐败能力最强,而V1的腐败能力相对较弱。     

冰温贮藏中南美白对虾特定腐败菌的分离鉴定及其腐败能力分析

为了分离鉴定南美白对虾在冰温贮藏条件下的腐败菌,并分析其腐败能力的大小。通过冻结实验,确定南美白对虾的冰点,在0℃与冰点之间贮藏南美白对虾,从中分离腐败菌,进行形态学观察和分子生物学鉴定,将分离得到的腐败菌接种至灭菌虾汁中,通过产硫化氢,降解蛋白质,产挥发性盐基氮（TVB-N）的测定衡量腐败能力的大小。结果表明:从南美白对虾中分离得到12株腐败菌,分别是Shewanella hafniensis,Acinetobacter johnsonii,Planoccoccus citreus,Bacillus cereus,Acinetobacter beijerinckii,Enterobacter hormaechei,Arthrobacter bergeri,Bacillus licheniformis,未鉴定出的菌株X1和X10。在冰温贮藏条件下,导致南美白对虾腐败的优势腐败菌依次是Shewanella hafniensis、X1、Acinetobacter johnsonii和Acinetobacter beijerinckii。      

环境因子对豆腐特定腐败菌消长特性的影响

以豆腐中分离纯化得到的特定腐败菌坚强芽孢杆菌为研究对象,考察不同环境因子(加热强度、pH、钙离子浓度、水分活度)对其消长特性的影响。研究结果表明,环境因子对豆腐特定腐败菌坚强芽孢杆菌的消长特性具有不同程度的影响。其中,热处理强度和pH对其消长规律影响显著,水分活度对其消长规律有一定的影响,钙离子浓度的影响不显著。研究结果将为豆腐制品生产和贮运过程中特定腐败菌的控制技术提供参考数据。     

葡萄糖酸内酯豆腐生产过程中微生物的变化及豆腐中主要腐败菌的鉴定

分别对新鲜的和37℃/24h贮藏后的葡萄糖酸内酯豆腐(GDL豆腐)中最普遍的菌落进行分离、纯化,发现二者中的存在的主要微生物不同。新鲜的充填豆腐中以坚强芽孢杆菌(Bacillusfirmus)为代表的芽孢杆菌为主;在37℃存放24h以后的豆腐中以屎肠球菌(Enterococcusfaecium)为主。为确定这些腐败菌的来源,研究了豆腐制作过程中微生物的种类和数量的变化。实验结果表明,在GDL豆腐生产过程中,熟浆中微生物含量极少,但灌装后细菌总数急剧上升,保温成型(二次杀菌)不能使细菌总数呈下降一个对数单位。芽孢杆菌和屎肠球菌主要来源于大豆原料中,在GDL豆腐生产的各工序几乎都能检测到。经过清洗和不清洗的大豆样品,在85℃恒温水浴锅中保温15min,然后检测大豆中残存的耐热微生物。实验结果表明,在这两个样品中都含有少量的芽孢杆菌和大量的肠球菌,对大豆原料进行清洗可以显著降低耐热菌的残存量。     

紫薯腐败菌的分离与鉴定

目的 从自然腐败的紫薯上分离纯化紫薯腐败菌, 通过反接种确定其致腐性, 并将其鉴定到属。方法 通过多次稀释平板涂布培养, 进行单菌落形态学观察, 将菌种反接种到新鲜紫薯上, 筛选出腐败菌, 以真菌ITS序列、细菌16S rDNA序列构建发育树, 鉴定到属, 再将鉴定结果与分离的菌种的形态学鉴定结果对比, 验证菌种鉴定结果。结果 从样品中分离出6种典型腐败菌, 有4种属, 分别为枝孢霉属、青霉属、曲霉属、芽孢杆菌属。结论 确定紫薯的腐败菌为哥氏枝孢霉(Cladosporium gossypiicola)、Penicillium christenseniae、热带青霉(Penicillium tropicum)、黄曲霉(Aspergillus flavus)、贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)和阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)。     

大球盖菇腐败真菌的分离、鉴定及生长特性研究

目的：为避免微生物生长引起的大球盖菇褐变和腐败,亟待开展大球盖菇腐败菌种类的相关研究,并为探究贮藏保鲜技术提供理论依据。方法：对大球盖菇的腐败菌进行分离、纯化,通过致腐性分析筛选出优势腐败菌并对其进行形态学鉴定、分子生物学鉴定及生长特性研究。结果：分离得到镰刀菌属16株、曲霉属14株,根霉属4株。通过致腐性分析筛选出四种致腐性强的腐败菌,经形态学和分子生物学手段鉴定其分别为假嗜花镰刀菌（Fusarium pseudoanthophilum）、黑曲霉（Aspergillus niger）、单孢根霉菌（Rhizopus azygosporus）和产紫蓝状菌（Talaromyces purpureogenus）。对四种腐败菌的生长特性进行分析,发现其最适生长温度为25～28℃。温度为4～10℃和35～55℃时腐败菌生长缓慢,60℃时腐败菌无法生长。其最适生长pH为7.0左右,pH为13.0时腐败菌无法生长。结论：大球盖菇采后贮藏在低温和适当的碱性环境可抑制腐败菌的生长繁殖,利于大球盖菇贮藏保鲜。     

黄河鲤鱼优势腐败菌的鉴定及其腐败特性的研究

为解决黄河鲤鱼在贮运过程中的质量安全控制问题,对分离自冷藏过程中发生腐败的黄河鲤鱼的一株优势腐败菌进行了鉴定和腐败特性研究。通过16S rRNA序列比对分析了该菌的种属,并测定了该菌的胞外蛋白酶活性、生物被膜和泳动性,采用生物传感器法测定了该菌的群体感应活性。结果表明：该菌为嗜水气单胞菌,命名为Aeromonas hydrophila YCR17(A.hydrophila YCR17);该菌能够产生胞外蛋白酶,并随培养时间的增加而增强;形成的生物被膜在48 h时达到最大,为高强度生物被膜,随后开始逐渐消解、脱落;可以在泳动性培养基表面进行运动扩散,说明A.hydrophila YCR17具有泳动性;诱导紫色杆菌CV026产生紫色素,具有AHLs介导的群体感应调控系统。研究结果为黄河鲤鱼的腐败机制及质量控制提供了理论基础。     

半干面腐败菌的分离与鉴定

目的：探究引起半干面腐败变质的主要微生物类群。方法：采用形态学鉴定和生理生化鉴定的手段,对导致半干面腐败的主要微生物进行分离和鉴定。结果：半干面中以芽孢杆菌属(Bacillus)和葡萄球菌属(Staphylococcus)为优势腐败菌群;经分离鉴定的优势细菌有枯草芽孢杆菌(Bacillius subtills)、地衣芽孢杆菌(B. licheniformis)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)和金黄色葡萄球菌(S. aureus);分离鉴定的霉菌主要有白曲霉(Aspergillus candidus)、杂色曲霉(A. versicolor)和圆弧青霉(Penicillum cyclopium)。芽孢杆菌是半干面贮藏前期最主要的细菌,但随着贮藏时间的延长,葡萄球菌大量生长繁殖,成为半干面中的优势细菌。     

北豆腐中主要腐败微生物的分离与鉴定

从东北和华北腐败变质的豆腐中分离得到2株主要腐败细菌xy-1、xy-2。对这两种菌株进行了菌落形态、生理生化特征和16S rDNA序列分析。结果表明：导致豆腐腐败的主要微生物为短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）和恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）。     

即食鲍鱼特定腐败菌的鉴定及其致腐能力研究

为研究真空包装即食鲍鱼的特定腐败菌及其致腐能力.根据前期研究结果,利用选择性培养基分离、纯化出即食鲍鱼的特定腐败菌.通过16S rDNA技术结合细菌生化鉴定法来鉴定即食鲍鱼的特定腐败菌.将特定腐败菌接种于即食鲍鱼中,与自然腐败鲍鱼进行对比,分析即食鲍鱼的汁液流失率、TVB-N、pH值、菌落总数、PPO等理化及感官指标的...     

低温熏煮香肠中腐败菌的分离及鉴定

研究低温熏煮香肠中腐败菌相,分离出一株主要腐败菌,命名为NO.1A。利用生理生化检验和16SrDNA序列分析对该菌进行鉴定,结合生理生化检验结果和系统进化树分析结果,确定该菌为枯草芽孢杆菌。      

豆腐在不同储藏温度下腐败菌菌相比较

以盒装内酯豆腐和简易包装老豆腐为研究对象,包括这两种豆腐的新鲜样品和在不同温度储藏后(4、25、37℃)的腐败样品,提取样品细菌基因组后对16S r RNA V3区基因片段扩增,采用Mi Seq高通量测序技术,分析腐败菌菌相组成及细菌多样性情况。结果表明:盒装内酯豆腐的菌相复杂程度小于简易包装老豆腐,盒装内酯豆腐中的细菌主要由芽孢杆菌属(Bacillus)组成,比例均在90%以上。简易包装老豆腐在4℃腐败后相比其他两个温度下的样品,细菌多样性更丰富。明串珠菌属(Leuconostoc)是25℃和37℃下腐败老豆腐的主要优势菌,分别占到了71%和80%。高通量测序相比于传统的可培养技术,反映的微生物信息更加接近于真实的样品生态,此研究可为小型豆腐生产企业的卫生控制提供参考。     

啤酒腐败菌的分离鉴定及对啤酒的危害

从啤酒厂分离到31株啤酒腐败菌。对其进行了AP150CHL试剂条生理生化反应试验。并测定了这3l株菌的16SrDNA部分序列，与Genebank中已知序列进行了比较，并以此为依据进行了系统进化关系分析。结果表明，31株啤酒腐败菌分属于5个种，部分腐败菌对啤酒风味有不良影响。     

非发酵豆制品主要腐败菌的分离鉴定

以非发酵性豆制品(豆腐丝、豆腐)为试验材料,从其腐败过程中分离纯化得到3株主要腐败细菌:df1、df2、df3,对其形态和菌落特征、生理生化特性进行了系统的研究,并进行了分类鉴定.结果表明引发非发酵性豆制品腐败变质的3株主要细菌为成团肠杆菌(E.agglomerans)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)和巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium).     

盒装豆腐辐照工艺及剂量研究

以钴-60为放射源,研究了盒装豆腐的辐照灭菌处理工艺。研究采用静态堆放照射方法,分别采用0、2、4、6 k Gy剂量进行处理,在常温(20℃)下贮藏3 d后测定菌落总数、蛋白质、脂肪等指标。结果表明辐照剂量为4 k Gy时,菌落总数符合国家标准,蛋白质、脂肪的含量无明显变化。     

镇江肴肉中腐败菌的初步分离鉴定

分离镇江肴肉中腐败菌,并对主要菌株进行鉴定,为研究特定腐败菌的腐败原理,延长产品的保质期打下基础.利用纯培养的方法,根据细菌的菌落形态、菌落颜色、革兰氏染色等特征,从市售冷藏镇江水晶肴蹄中选取菌落形态差别比较明显的8株菌株,通过16S rDNA序列进行分类研究,确定各细菌所属种.试验结果表明:T-1为假单胞菌属的荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens),T-2为希瓦氏菌属的渡罗的海希瓦氏菌(Shewanella baltica),T-3、P-1、P-2、V-1、V-2、V-3为拉乌尔菌属的解鸟氨酸拉鸟尔菌(Raoultella ornithi-nolytica)[从前的解鸟氨酸克雷伯氏茼(Klebsiella ornithinolytica)].