重组大肠杆菌产Bacillus subtilis 168来源γ-谷氨酰转肽酶的摇瓶发酵优化

为实现来源于Bacillus subtilis的γ-谷氨酰转肽酶(GGT)高效胞外分泌表达,以基因工程菌E.coli BL21(DE3)/p ET-20b(+)/ggt为出发菌株,对其发酵产酶的诱导条件和培养基进行优化。最终确定其最优发酵培养基为:10 g/L甘油,21 g/L酵母粉,7 g/L蛋白胨,130 mmol/L磷酸盐;发酵条件为:37℃、200 r/min培养4 h,加入0.2 mmol/L IPTG后转入25℃,诱导40~48 h,优化后酶活达到81.2 U/m L,是未优化前的1.9倍。本研究结果为目前国内报道大肠杆菌摇瓶发酵产γ-谷氨酰转肽酶的最高酶活,为该酶的工业化生产奠定了基础。     

高产果胶酶菌株选育及发酵产酶条件优化的研究进展

果胶酶是指能够催化果胶质分解多种酶的总称,最初是由MacDonnell从桔子里提取得到的。作为一种非常重要的工业酶制剂,果胶酶具有不可估量的潜在应用价值。该文概述了果胶酶菌株的选育、培养基的优化及其发酵产酶条件的研究进展,希望能为相关研究者和有关企业提供参考。     

黑曲霉发酵蚕沙产果胶酶工艺条件优化

蚕沙是蚕桑产业的主要废弃物,含有丰富的营养物质,是微生物发酵的良好原料。果胶酶是世界四大酶制剂之一,在工业生产中发挥着重要的作用。为了减少蚕沙随意丢弃带来的环境污染,充分挖掘蚕沙的利用价值,该研究以蚕沙为原料,利用黑曲霉发酵生产果胶酶。通过蚕沙固态发酵,首先采用单因素实验找出对果胶酶生产影响较大的因素,然后在单因素实验基础上利用正交实验对黑曲霉产果胶酶的条件进行优化。经单因素实验和正交实验得出黑曲霉固态发酵蚕沙的最佳产酶条件为:发酵初始pH 6,接种量0.5 mL,料液比(W/V)1∶1.7,基料(麸皮∶蚕沙)4∶6,发酵时间3 d,发酵温度30℃。在此发酵条件下,果胶酶活力达15.08 U/mL,是未优化前的1.87倍。研究结果可为桑蚕产业废弃资源的综合利用提供理论研究基础及新的思路。     

产原果胶酶菌株的筛选及其产酶条件优化

从土壤中筛选得到1株高产原果胶酶的菌株WJ-2,经初步鉴定为曲霉属(Aspergillus sp)。研究了菌种在不同初始pH值、温度、培养时间、接种量下的产酶情况并进行了产酶条件优化。通过单因素实验和正交实验确定了该菌株液体产酶的最佳条件:初始pH5.0、温度35℃、培养时间48h、接种量为10%,优化条件下的原果胶酶活力可达4545.235U/mL。     

黑曲霉WZW001液态发酵产果胶酶的工艺条件优化

采用菌株黑曲霉WZW001,通过实验探索了该菌株液态发酵生产果胶酶的工艺条件。经培养基优化及发酵条件优化确定该菌株发酵培养基的组成为(g/100 mL):麸皮4 g,硫酸铵1 g,橘皮粉2 g,K2HPO40.3 g,MgSO40.05 g,CaCl20.02 g,CuSO40.02 g,KCl 0.02 g;最适发酵条件为:初始pH 6.0,发酵温度30℃,接种量2 mL/100 mL。最终果胶酶活力可达54.65 u.mL-1,比优化前提高了45.2%。     

Bacillus natto TK-1产脂肽发酵条件的优化

对BacillusnattoTK-1产脂肽的发酵条件进行了优化。优化后发酵条件为:60mL培养基装于500mL三角瓶中,接种量3%,温度37℃,床转速110r/min。优化后,发酵液的相对溶血率提高了70%。      

假单胞菌B41产果胶酶发酵条件的研究

对假单胞菌B41发酵产果胶酶培养基和发酵培养条件进行了优化。经单因素和正交试验得到最优发酵培养基组成为桔皮粉20．0g／L,蛋白胨10．0g／L,FeSO40．5g／L,初始pH值5．5。最佳发酵条件为装液量50mL,接种量2％,发酵温度30％,发酵时间32h。在此优化条件下,果胶酶活力为739U／mL。     

黑曲霉HY-M27产果胶酶固态发酵条件的优化

以黑曲霉HY-M27为菌株,麸皮和豆粕为发酵主料,采用固态发酵法来生产果胶酶,通过单因素实验和响应曲面分析(RSM)实验确定了黑曲霉HY-M27的最佳培养条件。实验结果表明:诱导物橘皮粉的添加量为1.28g/10.5g干基、初始pH为5.15、接种量为2.7×106个/g干基,在此优化条件下,果胶酶活力可达到6839.86U/g。在果醋中加入果胶酶后,其澄清度有较大提高。     

枯草芽孢杆菌产碱性果胶酶发酵条件的优化

通过单因素实验对枯草芽孢杆菌菌株发酵产碱性果胶酶的培养基组分及培养条件进行优化。利用单因素实验确定了产酶的最优培养基:30 g/L豆饼粉、35 g/L马铃薯淀粉、20 g/L果胶、2.775 g/L氯化钙、4.025 g/L硫酸锌、113.6 g/L Na 2HPO 4。同时对温度、接种量、发酵pH进行优化,得到最优发酵条件:温度35℃、接种量3%、发酵过程控制pH=7.4,在此基础上进行补料流加实验,补料配方为350 g/L葡萄糖、10 g/L果胶,补料控制总糖浓度为20 ug/mL,并调整转速和风量控制溶氧30%~40%,最终酶活达到6120 U/mL,较初始酶活1061 U/mL提高了4.77倍。     

枯草芽孢杆菌产原果胶酶发酵条件研究

原果胶酶(Protopectinase)是可以催化原果胶水解的酶类,广泛用于果胶生产、单细胞食品制备和棉织品的生化精炼之中。实验对影响枯草芽孢杆菌XZ2(BacillussubtilisXZ2)摇瓶发酵生产原果胶酶的相关因子:豆粕粉的水提时间、水提液浓度、磷酸盐浓度、金属离子、发酵培养基初始pH值、接种量和接种龄等采用单因素试验进行了研究,在单因素试验基础之上,选取pH、接种量、Mg2 、磷酸盐和转速等因素进行正交试验,结果表明发酵培养基初始pH和磷酸盐缓冲液浓度对产酶影响显著。当发酵初始pH7.5,接种量10%,MgSO4·7H2O0.04%,磷酸盐缓冲液浓度为0.20mol/L,摇床转速为120r/min的摇瓶发酵条件下,产酶酶活最高为16.71U/ml。     

果胶酶澄清枇杷果汁工艺的优化研究

本文采用果胶酶对\     

产果胶酶菌株的分离鉴定及其产酶条件优化

为丰富高效产果胶酶的微生物种质资源,该研究采用刚果红染色法从采自菠萝地的土样中分离产果胶酶微生物,通过测定菌株产果胶酶能力对其进行筛选,并对其进行形态学鉴定、生理生化特征分析和分子生物学鉴定,最后通过单因素和响应面试验设计对其发酵产酶条件进行优化。结果表明,经初筛与复筛得到一株产果胶酶酶活最高的菌株XW-18,经鉴定,该菌株为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。其最佳产酶条件为：蔗糖添加量40 g/L,蛋白胨添加量20 g/L,发酵温度30℃,培养基初始pH 7.0,在此最佳条件下,所产的果胶酶活力达到（1 804.32±55.28）U/mL。     

多粘类芽孢杆菌20185液态发酵产碱性果胶酶发酵条件的研究

对多粘类芽孢杆菌20185发酵产碱性果胶酶的培养基和发酵培养条件进行了优化.经单因素和正交试验得到最优发酵培养基组成为(g/L):果胶10.0,蛋白胨20.0,K2HPO4·3H2O 6.0,KH2PO4 3.0,NaCl 10.0,MgSO4·7H2O 0.2,SDS 1.0.发酵最佳培养条件为:250mL三角瓶装液量为50mL,种龄24h,接种量9％,初始pH值9.0,温度35℃,培养36h.在此优化条件下,酶活为311U/mL.     

嗜盐嗜碱菌Alkalibacterium sp. F26产碱性果胶酶发酵条件的优化

对Alkalibacteriumsp.F26发酵产碱性果胶酶的培养基和培养条件进行了优化.考察了碳源、氮源、无机盐、表面活性剂及起始pH、发酵时间、温度等发酵条件的影响.经单因素和响应面分析试验得到适宜的发酵培养基为(组分g/dL):葡萄糖0.95,蛋白胨1,NaCl 6.3,MgSO4.7H2O0.02,K2HPO4.3H2O 0.1,NaCO31,吐温-80 1;培养条件为:250 mL三角瓶装液量25 mL,35℃,起始pH值11.25,培养24 h.在此优化条件下培养,酶活达1 015 U/mL.     

果胶酶高产菌株的激光选育及发酵条件的优化

利用氦氖激光诱变原生质体筛选到了一株产果胶酶性能稳定且酶活明显提高的突变株ZH-2。其最适发酵条件为：以2％桔皮粉＋1％乳糖作碳源，以1％（NH4）2SO4＋0．3％酵母膏作氮源，在起始pH7．0，33℃摇床发酵32h左右达产酶高峰。分析ZH-2所产果胶酶的性质得出，酶作用最适条件为：pH6．5，50℃，以聚半乳糖醛酸为底物，酶的热稳定性实验显示，50℃保温60min后，酶活力基本不变。     

Bacillus subtilis B2产1-脱氧野尻霉素（DNJ）发酵条件优化

为探索制备含有1- 脱氧野尻霉素(1-deoxynojimycin,DNJ)的降血糖功能性食品的新方法,以产DNJ 的菌株Bacillus subtilis B2 为初始菌株,以价廉的农产品加工副产物豆渣为原料,通过对发酵条件的优化,获得富含功能因子DNJ 的发酵液。结果表明：接种量对α- 葡萄糖苷酶抑制活性影响不明显,当接种量大于104 个/mL 时,发酵液的α- 葡萄糖苷酶抑制活性均在20 以上。而豆渣浓度、发酵温度、培养基初始pH 值及发酵时间对发酵液α- 葡萄糖苷酶抑制活性影响较大,在豆渣质量浓度30mg/mL,初始pH 值6～8,发酵温度40℃的条件下发酵48h,发酵液表现出较高的α- 葡萄糖苷酶抑制活性。以Bacillus subtilis B2 发酵豆渣的发酵液为原料开发含DNJ 的降糖功能食品,可以大大提高豆渣的利用价值,为降糖功能食品的开发利用开辟新途径。     

复合果胶酶加工番石榴果汁的工艺优化

采用法国产的复合液态果胶酶加工番石榴果汁。研究结果表明,最佳工艺条件为:每千克番石榴果浆加入20mL浓度为0.01mL/mL的复合液态果胶酶、pH为3.5、45℃下恒温酶解5￣6h。使用不同的澄清剂对番石榴果汁进行澄清,结果表明,加浓度为0.5%的明胶溶液20mL/kg果汁中的效果最佳。番石榴果汁,保持了原有果实的营养成分和保健功能,有独特的风味。     

扩展青霉利用苹果渣发酵产果胶酶条件的优化

通过单因素及二次旋转正交实验,对扩展青霉YL-9固体发酵产果胶酶的培养条件进行了探索。结果表明:最佳培养基组成为:麸皮8.15%、苹果渣16.5%、(NH4)2SO40.86%、MnSO40.3%、KCl0.15%、0.04%的吐温80、加水量74.0%。采用最佳培养基配方,在250mL三角瓶中于28℃下恒温培养96h,果胶酶酶活可达到752.29U/g干曲。     

扩展青霉利用苹果渣发酵产果胶酶条件的优化

通过单因素及二次旋转正交实验,对扩展青霉YL-9固体发酵产果胶酶的培养条件进行了探索。结果表明:最佳培养基组成为:麸皮8.15%、苹果渣16.5%、（NH4）2SO40.86%、MnSO40.3%、KCl0.15%、0.04%的吐温80、加水量74.0%。采用最佳培养基配方,在250mL三角瓶中于28℃下恒温培养96h,果胶酶酶活可达到752.29U/g干曲。      

Bacillus subtilis CICC20034产脂肪酶的培养条件研究

目的 优化Bacillus subtilis CICC 20034产脂肪酶的培养组分和发酵条件,为后续深入研究提供数据资料.方法 优化不同碳源、氮源、金属离子和培养基复配发酵培养组分;优化培养温度、pH、培养时间进一步提升菌株产酶能力.结果 最佳利用碳源为甘油,无机氮源比有机氮源更有利于脂肪酶生产,优化培养组分为:10g/L甘油,10 g/LNH4Cl,8g/LNa2HPO4· 12H2O,2 g/L K2HPO4,0.5 g/L MnSO4.最适培养pH 6.0,温度30℃,发酵周期28 h.结论 通过前期优化筛选,获得脂肪酶活性达24.16 U/mL,为后续深入优化和代谢调控提供了良好的数据资料.