核桃蛋白肽的抗氧化活性研究

以VC为对照,研究了分子质量小于3000u的核桃蛋白肽混合物的还原能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力以及二苯代苦味酰基自由基清除能力。结果显示,随着核桃蛋白肽浓度的增加,其还原能力、羟自由基的清除能力和超氧阴离子清除能力增大,在浓度为30mg/mL时,核桃蛋白肽还原能力达到VC的57.1%;在浓度为50mg/mL时,核桃蛋白肽对羟自由基(OH.)的清除率分别69.1%,对超氧阴离子自由基的清除率达到了85%。而对二苯代苦味酰基自由基清除能力则是先增大后变小,在20mg/mL时达到最大值66%。核桃蛋白肽的分子质量分布主要有2大区域,蛋白肽氨基酸含量达到89.74%。     

预处理对核桃肽抗氧化活性的影响

比较了不同的预处理方式对低温和高温脱脂核桃粕酶解得到核桃肽的抗氧化活性和得率的影响.结果表明,对低温脱脂核桃粕进行加热、超声波、微波和碱提等预处理可以提高其酶解得到核桃肽的抗氧化活性和得率.其中,碱提得到核桃肽的抗氧化活性和得率分别为0.85±0.01、32.55％,微波预处理得到核桃肽的抗氧化活性和得率分别为0.86±0.03、34.63％,高于直接酶解得到的核桃肽的抗氧化活性和得率(0.72±0.08、18.46％),且差异具有显著性(P＜0.05).而高温脱脂核桃粕进行碱提等预处理与直接酶解得到核桃肽的抗氧化活性无明显差异.     

外翻肠囊法考察复合红花籽油的肠吸收特性

该研究旨在初步考察复合红花籽油的肠吸收特性。采用外翻肠囊法对其肠吸收部位、时间、给药浓度进行研究,通过气相色谱-质谱法（GC-MS）测定肠收集液中亚油酸（Linoleic Acid,LA）及α-亚麻酸（α-Linolenic Acid,ALA）含量,通过计算吸收转运参数、吸收速率参数分析其肠道转运机制。不同肠段中,其主要成分LA与ALA均能在十二指肠（LA:2.71 mg;ALA:1.60 mg）与空肠（LA:1.89 mg;ALA:1.43 mg）中被检出,通过计算不同部位透过药量（M）、药物吸收转化率（A）和药物剩余百分数（R）,结果显示十二指肠段中LA、ALA的M高于空肠段,A与空肠段接近,R低于空肠段,因此十二指肠为最佳吸收肠段。在120 min时,LA和ALA的Pappi（瞬时表观渗透系数）皆高于其他时间点,因此最佳吸收转运时间为120 min。在给药倍数为2.0倍时,肠囊液中的LA和ALA浓度最高,分别为0.35、0.19 mg/mL,因此最佳给药浓度为200 mg/mL。结果表明复合红花籽油的肠吸收特性可能为具有时间与浓度依赖性的被动运输模式且在十二指肠段中单向转运。     

预处理对核桃肽抗氧化活性的影响

比较了不同的预处理方式对低温和高温脱脂核桃粕酶解得到核桃肽的抗氧化活性和得率的影响。结果表明,对低温脱脂核桃粕进行加热、超声波、微波和碱提等预处理可以提高其酶解得到核桃肽的抗氧化活性和得率。其中,碱提得到核桃肽的抗氧化活性和得率分别为0.85±0.01、32.55%,微波预处理得到核桃肽的抗氧化活性和得率分别为0.86±0.03、34.63%,高于直接酶解得到的核桃肽的抗氧化活性和得率(0.72±0.08、18.46%),且差异具有显著性(p<0.05)。而高温脱脂核桃粕进行碱提等预处理与直接酶解得到核桃肽的抗氧化活性无明显差异。      

橄榄仁抗氧化肽的分离鉴定及分子对接

该研究利用酶解法结合凝胶色谱柱从橄榄仁中分离纯化得到6个抗氧化肽,采用分子对接模拟6种抗氧化肽与超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的结合机制。采用酶解法从橄榄仁中提取抗氧化活性肽,以水解度、DPPH自由基清除率为指标,从6种商用酶中筛选出最适蛋白酶为木瓜蛋白酶,以底物浓度、酶底比、酶解时间、温度进行单因素试验,选取影响酶解反应的3个因素(酶底比>温度>时间)进行响应面法优化得出最佳工艺条件为底物质量浓度50 g/L、酶底比为3.3%(质量分数)、温度20℃、时间88 min。对最优条件下的粗肽液进行SephadexG-25和SephadexG-15分离纯化得到6个具有良好活性的抗氧化肽,分别为WLSF、TSVLR、LVYLVR、AGGKPFQ、YYPFKGFA、AFNVDERLAR。TSVLR显示出最高的DPPH自由基清除活性81.07%和羟自由基清除能力42.48%。分子对接研究表明,纯化的肽通过疏水效应和氢键与抗氧化相关的关键蛋白SOD有效结合。结果表明,橄榄仁可作为天然食物来源制取功能性食品的一个新的探究方向。     

澳洲坚果抗氧化肽的分离纯化及肽段鉴定

为研究澳洲坚果抗氧化肽的抗氧化活性和氨基酸组成,以复配蛋白酶水解澳洲坚果粕制备粗多肽,利用超滤、大孔树脂纯化技术制备了抗氧化活性最佳的分子量小于1000 Da的多肽,采用Sephadex G-15凝胶对其分离并评价各组分对DPPH、羟基、ABTS+自由基的清除能力与还原能力,筛选出抗氧化活性最强组分,利用液相色谱-串联质谱技术(liquid chromatography and tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)进行鉴定并分析。结果表明,葡聚糖凝胶柱层析分离出G1、G2、G3组分,其中G3具有最佳的抗氧化活性,其羟基自由基清除能力半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC₅₀)6.18 mg/mL与还原能力IC₅₀ 2.19 mg/mL优于谷胱甘肽,DPPH自由基清除能力IC₅₀ 0.50 mg/mL,ABTS+自由基清除能力IC₅₀ 0.02 mg/mL;通过液相色谱-串联质谱鉴定G3含有46个肽段,肽段长度均小于...     

加酶超声提取核桃抗氧化肽工艺优化

实验利用脱脂核桃粕为原料,在加酶提取核桃抗氧化肽工艺基础上,采用超声辅助技术,研究了超声辅助加酶提取核桃抗氧化肽的最佳提取条件。以对DPPH自由基清除率为考察指标,在单因素实验基础上进行正交实验优化超声辅助加酶提取核桃抗氧化肽工艺。结果表明:加酶超声提取核桃抗氧化肽的最优工艺为:酶解时采用Alcalase2.4L碱性蛋白酶,料液比(核桃粕:缓冲液)1:20,[E]/[S]为13:500、pH9、酶解温度49℃的条件下酶解2h;超声功率150W,超声时间20min,超声温度50℃,在此条件下制备的核桃抗氧化肽对对二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)的清除率达65.11%,抗氧化肽产率62.37%。     

铁离子螯合亲和层析分离抗氧化活性核桃肽

采用铁离子螯合亲和层析方法分离出具有不同抗氧化活性的核桃肽,并探讨核桃肽的抗氧化活性与铁结合能力的关系。结果表明,核桃肽在酸性条件(pH 5.5)下与铁的结合能力最强,随着pH逐渐升高,结合能力下降。磷酸氢二钠对吸附到铁亲和层析柱上核桃肽的洗脱效果最好,通过阶段洗脱,得到铁结合能力逐渐增强的核桃肽组分(F1、F2和F3)。对其总还原能力和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除能力进行测定,发现其抗氧化能力为F3>F2>F1(P<0.05)。结果表明,核桃肽的铁结合能力越强,其抗氧化活性越高。     

核桃花抗氧化活性研究

采用DPPH.清除法对民间食用蔬菜--新鲜核桃花提取物的体外自由基清除作用进行研究.结果表明,核桃花食用部位具有一定的抗氧化活性, 以乙酸乙酯提取物活性最好,活性强于BHA,IC50值达到30.7 μg.     

酶解方式对核桃蛋白肽及其抗氧化活性的影响

分别采用7种蛋白酶对核桃蛋白进行单酶水解,并与双酶复合酶解进行比较,考察不同酶解方式对酶解产物水解度、短肽得率和抗氧化活性的影响。结果表明,碱性蛋白酶单酶酶解核桃蛋白,产物的水解度和短肽得率显著高于其它单酶处理,分别达到18.94%和76.37%,对DPPH自由基清除能力的IC50值仅为3.23mg/mL,抗氧化活性显著高于其它处理;将碱性蛋白酶分别与其它蛋白酶组合酶解,核桃蛋白酶解产物的水解度和短肽得率均有所提高,其中与木瓜蛋白酶组合处理的水解度可达28.36%,短肽得率可提高至85.62%。双酶酶解产物对提高清除DPPH自由基和羟自由基的活性不显著,碱性蛋白酶分别与中性蛋白酶、木瓜蛋白酶的组合可以显著提高酶解产物清除超氧阴离子自由基的活性。     

预处理提高核桃肽得率及核桃肽乳饮料制备

以核桃蛋白为原料,采用酶解法制备核桃肽,考察水浴加热、超声波、微波等预处理方式对核桃肽得率的影响,通过单因素、正交试验制备核桃肽乳饮料。结果表明,微波处理10 min后再进行酶解核桃肽,得率最高可达97.18%;超声波处理12 min,核桃肽得率可提高至77.57%;水浴加热耗时较长,核桃肽得率的提高不明显。将核桃肽与全脂奶粉以1︰5比例混合,制成质量浓度为8 g/100 mL的溶液,向溶液中添加白砂糖,添加量为溶液的6%,当添加CMC 0.05%,黄原胶0.05%,单甘酯0.3%时,可以得到感官品质和稳定性较好的核桃肽乳饮料。     

量子化学计算及分子对接技术对豌豆蛋白源抗氧化肽YLVN、TFY的抗氧化作用机制研究

目的 探究豌豆蛋白源抗氧化肽YLVN、TFY的抗氧化机制。方法 利用量子化学理论计算构建抗氧化肽的优势构象,前线轨道分布及能级差(ΔE)和福井函数(Fukui)中的f⁰(r)对二者活性位点进行了推测;分子对接技术对抗氧化肽与1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine,DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐[2,2-diazo-di(3-ethyl-benzothiazol-6-sulfonic acid)diamiammonium salt,ABTS]自由基的清除作用机制进行了探究,并通过体外自由基清除实验验证肽的活性,将理论计算和实验测定进行分析比对。结果 前线分子轨道中的最高占据分子轨道(highest occupied molecular orbital, HOMO)及轨道能级确定酪氨酸(Tyr)残基是肽YLVN、TFY重要的活性位点,与Fukui函数f⁰(r)推断肽YLVN中Tyr的酚羟基O14-H47和肽TFY中Tyr的酚羟基O26-H52...     

牦牛乳硬质干酪苦味肽RK7的抗氧化活性及其机制

目的:研究从牦牛乳硬质干酪中鉴定出苦味肽RK7的抗氧化活性及其机制。方法:运用生物信息学方法计算和分析RK7的理化和生物学特性,采用固相合成技术体外人工合成RK7并测定其抗氧化活性。借助分子对接工具,基于长寿酶家族sirtuins(SIRT1-7)和单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)介导的信号通路,研究RK7的抗氧化机制。结果:RK7的不稳定性指数为19.84;疏水性为42.86%;生物活性评分为0.404;小肠吸收能力(HIA)为0.9072+;血脑屏障穿透能力(BBB)为0.9701-;急性口腔毒性为0.6259;合成纯度为99.579%;当肽质量浓度在0.2～1.0 mg/mL范围内变化时,DPPH自由基清除率为12.26%～53.78%,ABTS自由基清除率为80.86%～87.86%;RK7与NAD+降解酶(3DZK)和胞质接头蛋白(2FLU)分别形成6个和5个氢键,3DZK的氨基酸残基Arg140、Asp147和2FLU的氨基酸残基Ser390、Asp394是其与RK7结合的重要活性位点。RK7和GSSH与3DZK和2FLU的结合表现出相似的分子机制,分别结合于3DZK的Site 1区域(X:-11.93,Y:-1.30,Z:0.38,R:10 ?魡)和2FLU的Site 2区域(X:8.33,Y:13.99,Z:20.41,R:9 ?魡)。研究结果为从分子水平分析、解释RK7的抗氧化性提供科学依据。     

泥鳅抗氧化活性肽的制备、鉴定及其生物活性

泥鳅是亚洲常见的淡水鱼,具有较高的营养和药用价值。本研究采用短小芽孢杆菌4SP5分泌的蛋白酶水解泥鳅肉糜,超滤获得不同分子质量的水解产物。其中,分子质量小于5 ku的组分的抗氧化活性最强。经G25色谱过滤纯化,LC-MS/MS测序和鉴定过滤组分,获得6种潜在的生物活性肽。其中寡肽AFRVPTP具有良好的DPPH自由基清除活性(IC50 37 μg/mL)、羟自由基清除活性、超氧阴离子清除活性(IC50 0.73 mg/mL)。此外,该寡肽还具有抑制α-葡萄糖苷酶的作用,IC50为15.86 mg/mL。经在线预测,该寡肽无毒性和致敏性。分子对接结果表明,AFRVPTP通过与α-葡萄糖苷酶催化域的关键氨基酸结合而发挥作用,其可与Keap1活性口袋中的关键氨基酸残基(Asn387、Arg415、Tyr334、Arg380、Gln530、Tyr525、Arg483和Ser508)相互作用,表明该寡肽具有调节体内抗氧化作用的潜力。研究结果为泥鳅的精深加工提供参考依据。     

核桃清蛋白抗氧化肽的制备及其活性研究

以核桃清蛋白为原料,用碱性蛋白酶进行酶解制备抗氧化肽,通过单因素与响应面试验,分析确定制备核桃清蛋白抗氧化肽的最佳工艺条件为:pH9.5,温度45℃,底物浓度4%,加酶量8 000 U/g,酶解时间2.5 h。对最优条件下制备的抗氧化肽进行活性研究,测定其Fe~(2+)螯合能力及对羟基自由基、DPPH·、ABTS~+·3种自由基的清除能力,结果表明核桃清蛋白抗氧化肽对几种自由基均有显著的清除作用和金属离子螯合能力,是一种活性的的天然抗氧化剂。     

长白山区核桃青皮多糖分离纯化、鉴定及抗氧化活性分析

对核桃青皮多糖（polysaccharide of walnut green husks,JPs）进行分离纯化,并对得到的多糖进行单糖组成及体外抗氧化活性分析。利用超声波辅助提取JPs,经醇沉、除蛋白、透析等一系列处理后,先后利用DEAE-Sepharose和Sephadex?G-100柱色谱分离纯化JPs得到了两种均一多糖（JPs-1-1和JPs-2-1）;利用高效凝胶渗透色谱法测定两种均一多糖的分子质量分别为5.45×104、5.22×104?u;利用PMP-柱前衍生高效液相色谱法测定了两种均一多糖的单糖组成,均是由鼠李糖（Rha）、葡萄糖醛酸（GlcA）、半乳糖（Gal）、葡萄糖（Glc）、半乳糖醛酸（GalA）、木糖（Xyl）及阿拉伯糖（Ara）以不同的物质的量比组成。总抗氧化能力实验、1,1-二苯基-2-苦味基肼自由基和羟自由基清除实验结果表明JPs及分离纯化得到的两种均一多糖均具有较好的抗氧化活性,而且抗氧化活性的能力与样品的质量浓度呈正相关。     

基于分子模拟技术筛选牛乳清蛋白源抗氧化肽

传统抗氧化肽的筛选往往需要经过酶解、纯化、分离、鉴定及体外试验验证,时间和物力花费较大。本研究以生物信息学为理论基础,利用计算机虚拟消化、相关活性预测与评价、药物代谢动力学及分子模拟技术对牛乳清蛋白源抗氧化肽进行依次筛选,对其可能发生的Keap1-Nrf2-ARE抗氧化途径进行分析、解释,分析其分子反应过程中构象的稳定性。应用PeptideRanker程序对生物活性进行预测评分,筛选得到137条评分大于0.4的肽段,同时采用ToxinPred、Innovagen、Expasy-compute及Pepdraw程序进一步分析肽段的理化性质,并通过药物代谢动力学ADMET、TOPKAT分析对肽段进行筛选,得到14条无毒、无致敏性、无致突变性、无致癌性及水溶性良好的多肽,然后将其与Keap1受体进行分子对接。将分子对接评分前4位的多肽与Keap1的最优结合复合物进行构象作用机制分析,最终通过复合物构象分子间作用力评价CDEF序列最具抗氧化活性的潜力,并将CDEF-Keap1受体复合物进行分子动力学模拟,结果显示动力学模拟过程中构象变化较稳定,因此CDEF抗氧化肽可在人体中较好地发挥抗氧化活性。...     

核桃(Juglandaceae)种仁、叶、花粉抗氧化活性及成分鉴定

为综合开发核桃生物资源,研究了7种不同溶剂提取的不同种类核桃种仁、叶及其花粉提取物的抗氧化活性,并鉴定其抗氧化成分。采用DPPH和ABTS⁺自由基清除能力以及FRAP还原能力评价其抗氧化活性,并测定总酚、总黄酮含量,采用高分辨质谱仪鉴定样品抗氧化活性成分。结果表明,供试7种溶剂中60%丙酮提取物抗氧化活性较高。山核桃叶的DPPH(IC₅₀=0.156 mg/mL)和ABTS⁺(IC₅₀=0.131 mg/mL)自由基清除能力及还原能力(62.17 mg V_C/g)较其他品种核桃叶强。‘西林3号’核桃不同部位抗氧化活性测定显示,DPPH和ABTS⁺自由基清除力及FRAP还原力顺序从强到弱为:内种皮 > 叶 > 花粉 > 带皮种仁 > 去皮种仁。利用LC-MS从‘西林3号’内种皮及其核桃叶、KT-J02核桃叶、山核桃叶等4个供试样品的60%丙酮提取物中共鉴定出17种抗氧化活性成分,其中酚类9种,黄酮类8种,槲皮素和汉黄芩素为4种供试样品共有成分。山核桃叶中鉴定出13种成分,其中4种仅存在与山核桃中,即没食子酸、3-咖啡酰奎宁酸、表儿茶素没食子酸酯和对香豆酸;‘西林3号’和KT-J02核桃叶分别有1种成分仅存在于其中,为没食子酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖和儿茶素。内种皮中鉴定出6种成分,鞣花酸仅存在于内种皮中。     

抗氧化活性肽的研究进展

抗氧化活性肽具有安全和高效的特点,已成为国内外学者的研究热点.本文综述了目前国内外有关抗氧化活性肽的研究概况,初步探讨了其作用机理,展望了抗氧化活性肽开发中存在的问题.     

基于计算机技术的乳类低聚肽筛选及抗氧化活性研究

利用计算机模拟技术筛选出牛乳的β-酪蛋白（β-casein）和羊乳的αS1-酪蛋白（α-S1-casein）中生物活性较好的多肽,并测定其抗氧化活性。先后运用Uniprot Database、BIOPEP-UWM Database、Peptide Ranker网络平台对多肽的潜在生物活性进行预测,并从中筛选出活性Score>0.5的多肽进行抗氧化活性测定。最终筛选出IPPL、VPPF、PPT、PPQ、PSF 5条多肽进行合成,并测定多肽的总抗氧化活性和·OH自由基清除能力测定。结果表明,5条多肽均具有一定的总抗氧化活性,其中2 g/L的PSF溶液的总抗氧化活性最强,相当于0.2085 mmol/L FeSO4。此外1 g/L的VPPF溶液的·OH清除率最高,为59.88%,该浓度下各多肽·OH清除能力排序为：VPPF(59.88%)>IPPL(46.97%)>PPQ(40.12%)>PSF(39.04%)>PPT(32.19%)。综上5条乳类多肽均具有一定的抗氧化活性,可作为抗氧化产品开发的研究对象;本文把计算机模拟与化学实验相结合的研究思路对多肽类功能性...