橄榄果汁冻干粉的降尿酸与抗痛风作用

采用高尿酸血症大鼠与痛风性关节炎大鼠模型,考察橄榄果汁冻干粉（Hidrox?12%）的降尿酸与抗痛风作用及机制。通过腹腔注射氧嗪酸钾（Potassium oxazinate,PO）建立高尿酸血症大鼠动物模型,灌胃相应药物,检测血清尿酸（Uric Acid,UA）、肌酐（Creatinine,CR）、尿素氮（Blood Urea Nitrogen,BUN）含量和血清与肝脏黄嘌呤氧化酶（Xanthine Oxidase,XOD）活性水平,检测肾皮质尿酸转运蛋白1（Recombinant Urate Transporter 1,URAT1）表达水平。通过给大鼠踝关节腔注射尿酸钠晶体（Monosodium Urate,MSU）建立痛风性关节炎大鼠模型,评价橄榄果汁冻干粉对痛风性关节炎大鼠关节肿胀、血清肿瘤坏死因子α（Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α）与白细胞介素1β（Interleukin-1β,IL-1β）水平的影响。通过UPLC-ESI-MS/MS法分离与鉴定降尿酸的有效成分。结果显示,与模型组相比,橄榄果汁冻干粉（80 mg/kg）能极显著降低大鼠血清尿酸水平（P<0.01）,极显著改善高尿酸导致的血清CR与BUN升高（P<0.01）。橄榄果汁冻干粉降尿酸的机制可能与其降低血清和肝脏XOD活性、下调URAT1表达等有关。在痛风性关节炎模型中,橄榄果汁冻干粉（80 mg/kg）能高度显著改善MSU导致的关节肿胀（P<0.001）,显著降低血清TNF-α与IL-1β水平（P<0.05）。进一步研究发现,橄榄果汁冻干粉成分中胡椒碱与木犀草素能有效抑制HEK-293T细胞URAT1的尿酸转运,可能是其降尿酸的活性成分。综上,橄榄果汁冻干粉能有效降低腹腔注射PO导致的高尿酸血症大鼠的尿酸水平,改善大鼠踝关节注射MSU晶体引起的痛风关节炎症状,其机制可能是降低肝脏XOD活性、下调URAT1表达以及改善炎症水平。     

茶多酚对果糖诱导的高尿酸血症大鼠血尿酸水平的影响及机制

目的:观察茶多酚(green tea polyphenols,GTP)对果糖诱导的高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)大鼠血尿酸水平的影响,并从调节尿酸产生和排泄途径探讨其药理机制。方法:连续给予大鼠10 g/100 mL果糖溶液8周,其中5~8周分别连续灌胃别嘌呤醇(4 mg/(kg·d))或GTP(75、150、300 mg/(kg·d)),每天1次。磷钨酸法检测血尿酸水平,比色法和Western blot法分别检测肝脏黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)活力及其表达水平,免疫组织化学染色法检测肾脏中尿酸盐转运子(urate transporter,UAT)、尿酸盐阴离子转运子(urate-anion transporter,URAT)1和葡萄糖转运子(glucose transporter,GLUT)9的表达水平。结果:150、300 mg/(kg·d)GTP显著降低了果糖诱导的HUA大鼠血尿酸水平(P0.05,P0.01)。同时,150、300 mg/(kg·d)GTP显著降低了HUA大鼠肝脏XOD活力和表达水平(P0.05,P0.01),显著增强了肾脏UAT表达水平和降低了肾脏URAT1和GLUT9的表达水平(P0.05,P0.01)。结论:150、300 mg/(kg·d)GTP可有效降低果糖诱导的HUA大鼠血尿酸水平,其机制与减少尿酸产生和促进尿酸排泄密切相关。     

尿石素A对转化生长因子-β1诱导的人近端肾小管上皮细胞纤维化的影响

为探究尿石素A(urolithin A,UA)对人近端肾小管上皮细胞（HK-2）纤维化的干预效果和潜在作用机制，本研究建立转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的HK-2纤维化模型，考察对照组、TGF-β1模型组（4 ng/mL处理48 h）、UA低浓度组（5μg/mL UA+4 ng/mLTGF-β1）、UA高浓度组（10μg/mL UA+4 ng/mLTGF-β1）对HK-2细胞的影响。试验结果表明：UA干预能改善TGF-β1引起的HK-2形态变化并显著降低细胞纺锤体指数（P <0.01）；降低纤维化标物Col I、Col III、Vimentin、Snail和Slug和炎症标志物IL-1β、IL-6、MCP-1、NLRP3的表达（P <0.01）；下调MAPK和TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白的相对表达（P <0.01）。上述研究表明UA能减轻TGF-β1诱导的HK-2细胞纤维化，其作用的机制可能是通过下调MAPK和TGF-β1/Smads信号通路来实现的。本研究能为开发天然活性成分UA用于延缓...     

大麦叶粉防治高尿酸血症及肾脏保护作用研究

为探究大麦叶粉(BLP)对氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症小鼠的降尿酸作用与肾脏保护作用及其作用机制,本研究通过腹腔注射氧嗪酸钾制备高尿酸血症小鼠模型,测定BLP对模型小鼠血清、尿液及粪便中的尿酸(UA)、血清肌酐(CR)及尿素氮(BUN)、血清与肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)肝脏活性的影响,观察HE染色后小鼠肾脏组织的病理学变化,检测各组小鼠尿酸转运蛋白mRNA的表达水平,以评估BLP的降尿酸作用与肾脏保护作用及其机制。结果显示,与模型组相比,200 mg/kg BLP能高度显著降低其血清UA水平(P<0.001),高度显著促进UA从尿液排出(P<0.001),极显著促进UA从粪便排出(P<0.01),同时高度显著降低血清与肝脏XOD活性、降低肝脏UA的生成(P<0.001)。此外,与模型组相比,200 mg/kg BLP能极显著降低高尿酸导致的血清CR水平升高(P<0.01),高度显著下调BUN水平(P<0.001),病理学分析结果也显示BLP能明显改善高尿酸导致的肾脏损伤。qRT-PCR实验结果显示,与模型组相比,200 mg/kg BLP可高度显著(P<0.001)下调肾脏尿酸重吸收蛋白URAT1、GLUT9,上调尿酸分泌蛋白OAT1的mRNA表达水平。综上,BLP的降尿酸和肾脏保护作用与其抑制XOD活性,下调URAT1、GLUT9,上调OAT1表达有关。     

枸杞中绿原酸对转化生长因子-β1诱导心肌成纤维细胞纤维化的影响

目的：考察枸杞中分离得到的绿原酸对转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）诱导心肌成纤维细胞（cardiac fibroblasts，CFs）纤维化的干预效果。方法：质量浓度10 ng/mL TGF-β1诱导CFs建立心肌纤维化细胞模型，用不同质量浓度绿原酸处理纤维化细胞，细胞毒性实验（cell counting kit-8，CCK-8）检测绿原酸对CFs增殖的影响；酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测纤维化标志蛋白胶原蛋白（collagen，Col）I、Col III和免疫荧光检测α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）的表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative real-time polymerase chain reaction，qPCR）检测Twist1、Acta2、Snail2及纤维化蛋白S100A4等mRNA表达水平；Western blot检测TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白及其磷酸化表达水平。结果：CCK-8检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能抑制细胞异常增殖；ELISA和免疫荧光检测表明，枸杞中分离得到的绿原酸能下调纤维化标志蛋白Col I、Col III和α-SMA的表达；qPCR检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能高度显著下调纤维化转录调控因子Acta2、Twist1、Snail1、Snail2、Smad4及纤维化蛋白S100A4的mRNA表达（P＜0.001）；Western blot检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能高度显著下调TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白的表达（P＜0.001）。结论：在本研究质量浓度范围内，枸杞中分离得到的绿原酸抑制TGF-β1诱导的CFs纤维化过程，其机制可能与TGF-βl/Smads信号通路有关。     

枸杞多糖抑制TGF-β1诱导的心肌成纤维细胞活化作用机制

目的：探究宁夏枸杞多糖对转化生长因子β1（transforming growth factor β1，TGF-β1）诱导的心脏纤维化细胞模型干预作用。方法：分离培养小鼠原代心肌成纤维细胞（cardiac fibroblasts，CFs），用质量浓度10 ng/mL TGF-β1作用于CFs，建立心脏纤维化细胞模型，采用宁夏枸杞多糖进行处理，观察细胞形态；免疫荧光检测α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）的表达水平；Western blot检测TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白表达及其磷酸化水平；实时荧光定量聚合酶链式反应检测Snail、Twist和S100A4 mRNA的表达水平。结果：与对照组相比，模型组加入TGF-β1后，CFs细胞的形态由梭形变得狭长，细胞数目显著增多；α-SMA蛋白相对表达量升高；TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白表达及其磷酸化水平升高；Snail、Twist和S100A4的mRNA表达水平高度显著升高（P＜0.001）；给予宁夏枸杞多糖处理，可高度显著抑制TGF-β1诱导的CFs增殖（P＜0.001），减少CFs细胞中α-SMA及TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白的表达，高度显著下调Snail、Twist和S100A4的mRNA表达（P＜0.001）。结论：枸杞多糖对TGF-β1诱导的CFs纤维化具有改善作用，其作用机制与抑制TGF-β1/Smads信号通路有关。     

基于斑马鱼模型汉麻仁脱脂粉降尿酸作用

研究以斑马鱼高尿酸模型为试验对象,探讨经超微粉碎后的汉麻仁超临界脱脂粉的辅助降尿酸作用及其可能机制。采用10 mmol/L尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾和0.5 mmol/L尿酸合成前体黄嘌呤钠盐共同处理受精后5 d (5 day post-fertilization, 5 dpf)的斑马鱼20 h,建立斑马鱼高尿酸模型。以别嘌呤醇为阳性对照,对高尿酸斑马鱼分别进行500, 1 000和2 000μg/mL这3种不同浓度汉麻仁脱脂粉水溶液浸泡处理,测定斑马鱼对汉麻仁脱脂粉的最大耐受浓度(maximum tolerance concentration, MTC)以及斑马鱼匀浆中的尿酸水平、次黄嘌呤鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶(hypoxanthine phosphoribosyl transferase 1, HPRT1)和有机阴离子转运蛋白1 (organic anion transporter 1, OAT1)的mRNA表达。汉麻仁脱脂粉对模型斑马鱼的MTC为2 000μg/mL。与模型对照组相比,汉麻仁脱脂粉可通过上调斑马鱼匀浆中HPRT1相对表达量(P<0.05),有效降低尿酸水平(P&l...     

诺丽发酵果汁中总香豆素质量浓度的测定

以东莨菪内酯为对照品,建立诺丽发酵果汁中总香豆素的质量浓度测定方法,结果显示东莨菪内酯在0~0.020 mg/m L线性范围良好,r=0.999 2;平均回收率为102.44%,RSD=1.81%(n=9)。采用紫外分光光度法对不同发酵时间的诺丽果汁中总香豆素成分进行质量浓度测定,质量浓度在0.176~0.243 mg/m L范围内。本实验建立的质量浓度检测方法简单、迅速、准确、重复性好,适用于液体样品中香豆素成分质量浓度的测定。检测结果表明:随着发酵时间的增长,诺丽果汁中香豆素类成分的质量浓度变化不大。     

嗜黏蛋白阿克曼氏菌对高尿酸血症小鼠血清尿酸及组织炎症的影响及机制

目的：研究活的和巴氏杀菌处理的嗜黏蛋白阿克曼氏菌（Akkermansia muciniphila）对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平及组织炎症的影响和潜在机制。方法：使用氧嗪酸钾和次黄嘌呤联合含20%（以体系质量计）酵母膏的饲料对ICR小鼠进行为期3周的高尿酸血症造模,同时分别灌胃活的和巴氏杀菌处理的嗜黏蛋白阿克曼氏菌作为处理组,采集小鼠血液和组织样品,测定小鼠血清尿酸浓度以及肝脏黄嘌呤氧化酶活力,并通过苏木精-伊红染色法进行小鼠肾和肠道病理分析。结果：不同形式的嗜黏蛋白阿克曼氏菌均能一定程度地降低小鼠血清尿酸浓度。肝脏黄嘌呤氧化酶活力检测以及蛋白印迹分析结果表明两种形式的嗜黏蛋白阿克曼氏菌能下调该酶活性及蛋白表达,从而减少肝脏尿酸的生成。肾和肠道组织病理分析结果表明模型组小鼠肾脏和肠道均有损伤,包括肾小球萎缩、肾间质炎性细胞浸润以及肠绒毛变短,嗜黏蛋白阿克曼氏菌处理能减轻这些症状。嗜黏蛋白阿克曼氏菌干预还能下调肾脏及肠道Toll样受体4和Caspase 1水平,从而抑制白细胞介素-1β表达,有效缓解小鼠脏器中的炎症反应。结论：嗜黏蛋白阿克曼氏菌能用于改善小鼠高尿酸血症,并且巴氏杀菌处理后的...     

天麻素调控SIRT3改善BV2细胞衰老和炎症的作用

目的:探讨天麻素对D-半乳糖诱导的BV2细胞衰老的保护作用及机制。方法:使用不同浓度（10、20、30和40 μg/mL）的D-半乳糖刺激BV2细胞24 h,建立细胞衰老模型,并用CCK-8法筛选出D-半乳糖的最佳造模浓度;实验分为4组:正常组、模型组、Silent mating type information regulation 2 homolog 3（SIRT3）抑制剂+天麻素组和天麻素组;用CCK-8法检测不同浓度（10、20、30、40和50 μmol/L）的天麻素对D-半乳糖刺激的BV2细胞活力的影响,并筛选出最佳的天麻素浓度;使用β-半乳糖苷酶（Senescence β-Galactosidase,SA-β-Gal）染色检测细胞衰老面积;使用生化法检测各组细胞活性氧（Reactive oxygen species,ROS）水平;使用Enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）法检测各组细胞神经炎症因子IL-1β（Interleukin 1β,IL-1β）、IL-6（Interleukin 6,IL-6）和TNF-α（Tumor necrosis factor α,TNF-α）水平;使用免疫荧光法检测各组细胞SIRT3荧光强度;使用Western Blot法检测细胞SIRT3、P16和P21的蛋白表达水平。结果:30 μg/mL的D-半乳糖刺激BV2细胞活力极显著降低（P<0.01）,引起BV2细胞中SA-β-Gal染色面积和衰老蛋白P16和P21表达极显著增加（P<0.01）,细胞中ROS水平和炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平极显著增高（P<0.01）,细胞内SIRT3蛋白表达极显著降低（P<0.01）。而30 μmol/L天麻素能极显著提高D-半乳糖刺激的BV2细胞活力（P<0.01）,并且极显著降低细胞SA-β-Gal染色面积和衰老蛋白P16和P21表达水平（P<0.01）,极显著降低ROS水平和神经炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平（P<0.01）,极显著提高细胞内SIRT3蛋白荧光强度和表达水平（P<0.01）。结论:天麻素能够提高D-半乳糖刺激的BV2细胞活力,改善BV2细胞衰老染色和衰老蛋白表达,并降低ROS水平和减缓炎症反应,这可能与天麻素提高SIRT3蛋白表达有关。     

植物乳杆菌UA149的降尿酸作用

为了筛选具有降尿酸作用的乳酸菌新菌株,本研究以自主分离鉴定的5株植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)为研究对象,对其体外降解嘌呤核苷能力进行了评价,获得植物乳杆菌UA149是一株降解嘌呤核苷能力较强的菌株,并通过动物体内实验评价了该菌株降尿酸作用和机制。以氧嗪酸钾联合果糖诱导高尿酸血症大鼠模型,植物乳杆菌UA149菌液连续灌胃两周,测定血清中尿酸、黄嘌呤氧化酶和炎症因子水平等相关生化指标,并采用蛋白杂交技术,探讨植物乳杆菌UA149降尿酸的作用机制。结果表明:植物乳杆菌UA149能够显著降低高尿酸血症模型大鼠血尿酸水平(39.71%),降低血清黄嘌呤氧化酶活性(15.36%),降低白三烯(25.81%)、血栓素(38.40%)和炎症因子水平(IL-1 26.89%、IL-8 10.40%、IL-6 17.29%、IL-1β20.95%和TNF-α23.09%)。植物乳杆菌UA149可以通过调节AMPK/NF-κB/NLRP3信号通路来减缓高尿酸血症引起的肾脏炎症反应。说明植物乳杆菌UA149可作为益生菌用于高尿酸血症的预防和辅助治疗。     

茶及其功能成分降尿酸作用研究进展

高尿酸血症是由机体内嘌呤代谢紊乱和尿酸排泄减少引起血尿酸增高的疾病.近年来,研究报道茶叶及其功能成分(主要为茶多酚类和茶色素类化合物)通过抑制嘌呤代谢酶来减少尿酸的生成和调节尿酸转运蛋白来增加尿酸的排泄,从而发挥降尿酸作用.文章系统阐述了茶叶及其功能成分的降尿酸作用及作用机制,旨在为论证饮茶降尿酸和茶叶功能产品研发提供...     

羊栖菜多糖对糖尿病大鼠胰岛β细胞葡萄糖转运蛋白-2表达的影响

探讨羊栖菜多糖对2型糖尿病（2-diabetes mellitus,2-DM）大鼠降血糖作用机制。通过静脉注射链脲佐菌素（STZ）将Wistar大鼠制作成2型糖尿病模型。8周后,测定空腹血糖（FPG）和空腹胰岛素（FINS）;并用RT-PCR法检测胰岛β细胞中葡萄糖转运蛋白-2 mRNA（Glut-2 mRNA）的表达水平,发现羊栖菜多糖可能通过上调糖尿病大鼠胰岛β细胞中Glut-2 mRNA表达,从而改善大鼠胰岛素抵抗、降低血糖。     

诺丽酵素抗氧化性能与蛋白质营养价值评价研究

对3种不同发酵时间的诺丽酵素体外抗氧化能力、氨基酸的含量以及蛋白质营养评价进行研究,结果表明：随着发酵时间的 延长,诺丽酵素中总酚含量有轻微上升;3种酵素均具有抗氧化能力,且均表现出显著的浓度依赖性（P＜0.05）,发酵时间长短对其影 响不明显（P＞0.05）;随着发酵时间的延长,蛋白质含量有轻微下降,3种酵素均检测出16种常见蛋白氨基酸和γ-氨基丁酸（GABA）, 半胱氨酸（Cys）未检出,GABA含量随着发酵时间的延长有所上升,3种酵素中必需氨基酸含量丰富;9种必需氨基酸得分（AAS）均＞ 100%,比值系数分（SRC）均＞55,单从蛋白质营养价值来说,从高到低依次为：发酵360 d诺丽酵素＞发酵540 d诺丽酵素＞发酵720 d 诺丽酵素。     

壳寡糖复合固体饮料对高尿酸血症小鼠肠道微生态的调节作用研究

为探究壳寡糖复合固体饮料（KSP）对高尿酸血症小鼠肠道微生态和短链脂肪酸的影响。将小鼠分为正常对照组、模型组、低/中/高剂量KSP组、别嘌呤醇组,通过灌胃酵母膏和腹腔注射氧嗪酸钾建立高尿酸血症模型,通过喂食含KSP的饲料给药。21 d后收集小鼠血清检测尿酸,收集结肠、盲肠内容物用于短链脂肪酸检测和16S rDNA高通量测序。结果显示：KSP可以降尿酸和改善拟杆菌属（Bacteroides）、拟普雷沃菌属（Alloprevotella）、普雷沃氏菌科UCG-001(Prevotellaceae＿UCG-001)、阿克曼氏菌属（Akkermansia）、乳酸菌属（Lactobacillus）等的相对丰度,同时缓解由高尿酸血症引起的丙酸、丁酸、戊酸、异戊酸等水平的异常增高。因此该壳寡糖复合固体饮料可以通过调节肠道菌群组成和短链脂肪酸水平改善高尿酸血症。     

发酵糙米乙醇提取物改善3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢

探讨发酵糙米乙醇提取物(FBREE)对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢的影响。高浓度葡萄糖加胰岛素刺激诱导3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型。不同浓度FBREE处理细胞24 h后检测培养液中葡萄糖,游离脂肪酸(FFA),甘油,甘油三酯(TG),肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素6(IL-6)水平。实时定量PCR检测细胞氧化物酶体增殖激活受体γ(PPARγ),CAATT增强子结合蛋白(C/EBPα),固醇调节元件结合蛋白(SREBP1c),葡萄糖转运蛋白4(GLUT4),脂肪酸结合蛋白(a P2),蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B),葡萄糖转运蛋白(GLUT-4),激素敏感脂肪酶(HSL)和TNF-α,IL-6,单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和C反应蛋白(CRP)的m RNA表达。FBREE具有促进细胞葡萄糖利用,降低细胞内TG含量,减少FFA及甘油溢出的能力。与模型组细胞相比,高浓度FBREE(100μg/m L)处理的细胞中TG和FFA水平分别下降52.44%和37.83%。FBREE同时能减少模型细胞TNF-α和IL-6的分泌,高浓度FBREE(100μg/m L)分别抑制TNF-α(21.18%),IL-6(31.39%),MCP-1(40.09%)和CRP(41.73%) mRNA表达。此外,FBREE有效降低细胞中PPARγ,C/EBPα,SREBP1c,PTP1B,a P2和HSL的m RNA表达,上调GLUT-4m RNA表达。结果提示,FBREE能有效促3T3-L1脂肪细胞消耗葡萄糖,分解TG,减少FFA和甘油溢出;调控细胞糖、脂代谢来改善胰岛素抵抗,并降低胰岛素抵抗所致炎症水平的升高。     

壳寡糖复合固体饮料对高尿酸血症小鼠的降尿酸作用研究

为探究壳寡糖复合固体饮料“壳酸平”(ke suan ping, KSP)在高尿酸血症小鼠中的降尿酸及肝肾保护作用,该研究将60只昆明小鼠分为6组：阴性对照组(negative group, NC)、高尿酸血症模型组(model group, M)、低剂量KSP组(low-dose KSP group, LKSP)、中剂量KSP组(middle-dose KSP group, MKSP)、高剂量KSP组(high-dose KSP group, HKSP)、别嘌呤醇组(allopurinol group, AP)。适应性喂养1周后,通过腹腔注射氧嗪酸钾辅以灌胃酵母膏建立了高尿酸血症模型小鼠,同时更换KSP组小鼠饲料为含不同剂量KSP的饲料,AP组在造模1 h以后给药。收集小鼠血清用于尿酸、肌酐、尿素氮、黄嘌呤氧化酶的检测;收集小鼠肝、肾、肠用于苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining, HE染色)和q-PCR。结果显示,与M组相比,KSP可以降低高尿酸血症小鼠血清尿酸、肌酐、尿素氮、黄嘌呤氧化酶活性,缓解高尿酸血症小鼠肝肾损伤,调节GLUT9、URAT1、...     

新橙皮苷对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响及其作用机制

为探讨新橙皮苷对脂肪细胞脂肪形成的影响及其作用机制,采用MTS法检测新橙皮苷对3T3-L1前脂肪细胞的细胞活力的影响,确定新橙皮苷的作用浓度后,油红O染色法和分光光度法测定3T3-L1脂肪细胞的分化及胞内甘油三酯的含量,RT-PCR测定脂肪形成相关基因CCAAT增强子结合蛋白α（CCAAT/enhancer binding proteinα,C/EBPα）和过氧化物酶体增殖激活受体γ（Peroxisome proliferators-activated receptorγ,PPARγ）mRNA表达,Western蛋白印迹法检测蛋白激酶B（Protein kinase B,PKB/Akt）、糖原合成酶激酶3β（Glycogen synthase kinase3β,GSK3β）和糖原合成酶（Glycogen synthase,GS）的磷酸化水平;利用GSK3β选择性的抑制剂LiCl作用3T3-L1脂肪细胞后,检测新橙皮苷对3T3-L1细胞分化、胞内甘油三酯含量、C/EBPα、PPARγ及aP2蛋白表达的影响。结果表明,新橙皮苷能极显著抑制脂肪细胞分化和胞内甘油三酯的形成（P<0.01）,激活Akt信号通路,促进p-Akt和p-GSK3β水平增加,极显著抑制C/EBPα、PPARγ、aP2 mRNA和蛋白表达（P<0.01）。新橙皮苷的这些影响部分地被GSK3β抑制剂LiCl所抑制（P<0.01）。新橙皮苷能够通过激活Akt/GSK3β信号通路抑制脂肪细胞分化。     

硫辛酸对高糖诱导小鼠RIN-m5F细胞保护作用的机制

探究α-硫辛酸(α-LA)对高糖诱导RIN-m5F细胞的保护机制。RIN-m5F细胞分为对照组(11 mmol/L葡萄糖)、葡萄糖损伤组(22 mmol/L或44 mmol/L葡萄糖)、α-LA干预组(上述3个葡萄糖浓度+200μmol/Lα-LA),分别检测细胞内活性氧自由基(ROS)、丙二醛(MDA)水平、总抗氧化能力(T-AOC)及超氧化物歧化酶(SOD)活性;BAX、BCL-2、GSK-3βm RNA表达水平;细胞线粒体膜电位及蛋白印迹法检测GSK-3β和p-Ser9 GSK-3β蛋白质水平。结果表明,与糖损伤组相比,200μmmol/Lα-LA显著降低胞内ROS水平,分别降低30%和83%;增强细胞SOD活性及T-AOC能力,降低MDA积累;上调抗凋亡因子BCL-2 m RNA表达水平,下调促凋亡蛋白质BAX m RNA表达水平,提高细胞线粒体膜电位。此外,α-LA能够下调GSK-3βm RNA表达水平,提高p-Ser9 GSK-3β蛋白质水平,表明α-LA对高糖诱导RIN-m5F细胞的抗氧化和抗凋亡保护作用与调节GSK-3β有关。     

酱香型白酒中非乙醇物质抗幽门螺杆菌代谢物诱导的胃黏膜上皮细胞炎症作用研究

目的:研究酱香型白酒中非乙醇物质(JFY)抗幽门螺杆菌代谢物(Helicobacter pylori Metabolites,HPM)导致的胃黏膜上皮细胞(GES-1)炎性损伤作用。方法:参考文献方法获得JFY及HPM;MTT法检测JFY、HPM对胃黏膜上皮细胞(GES-1)的细胞活性的影响;ELISA测定JFY对相关炎症因子白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)及肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)等的影响;Western blotting检测Bax、Bcl-2和NF-κB信号通路相关蛋白的表达,探索JFY抗HPM刺激GES-1诱发凋亡的作用机制。结果:HPM显著降低GES-1细胞活性;JFY预处理GES-1细胞显著抑制由HPM刺激导致的细胞活性降低(P0.05),JFY抑制HPM刺激导致的IL-1β、IL-8及TNF-α分泌增加。Western blotting结果显示JFY可通过调节GES-1细胞内Bax、Bcl-2及NF-κB信号通路蛋白的表达发挥抗炎作用。结论:酱香型白酒中含有的生物活性物质具有一定的抗炎活性,可减弱HPM对GES-1细胞损伤,抑制炎症因子IL-1β、IL-8及TNF-α的分泌及调控Bax、Bcl-2及NF-κB信号通路蛋白的表达发挥抗炎作用。