蜜环菌饮料的研制

对蜜环菌饮料制作的工艺进行了优化研究。研究表明 ,当采用最佳培养条件时 ,发酵液中多糖含量高 ,制成的成品饮料含多糖为 0 2 96mg/mL ,氨基酸为 1 6g/L ,蛋白质为 44 9mg/L。当发酵液中添加 5 5 %蔗糖、0 1%柠檬酸及 0 0 5 %黄原胶等添加剂时 ,可以得到色、香、味俱全的营养保健饮料     

蜜环菌多糖生产培养基的研究

进行了蜜环菌深层发酵产胞外多糖的培养基的研究,研究结果表明：以豆粕粉作氮源时,菌丝得率最高,以麸皮作氮源时,多糖产量最高;红薯粉为蜜环菌菌丝生长和多糖产量的最适碳源,最适培养基配方为：红薯粉3%,葡萄糖1%,豆粕粉1.5%,KH2PO40.15%,机械搅拌对菌丝的生长和多糖的产生都不利;接种后当即上摇床比接种后静置一段时间再上摇床的菌丝干重及多糖含量都多;培养基中加1%的乙醇对菌丝的生长和多糖的产生都不利;600ml发酵试验中,发酵液多糖含量可达0.485mg/ml,菌丝干重可达20.8g/L。当发酵液pH降为5.0左右,颜色开始变为棕褐色,菌丝亮光由强变弱时,即可终止发酵。     

假蜜环菌胞内多糖的发酵研究

对假蜜环菌进行发酵条件的优化,确定其最适培养基为葡萄糖3g/L,蔗糖7g/L,蛋白胨5g/L,酵母膏3g/L,K2HPO40.1g/L,KH2PO4 0.5g/L,MgSO4 0.5g/L,pH6.4。最适培养条件为27℃培养5d,通气量为(200mL培养基/500mL三角瓶),160r/min。在最适培养基及培养条件下,假蜜环菌胞内多糖的产量可达298.35mg/L,菌体生物量可达314.3g/L。     

蜜环菌发酵保健饮料的研制

蜜环菌(Armillaria mellea Quel)是同兰科天麻互为寄生的食药兼用真菌，本项目对蜜环菌发酵保健饮料研制工艺进行了研究。结果表明，采用最佳工艺条件，发酵液中多糖含量高，添加6％复合甜味剂、0．1％L-乳酸及0．05％海藻酸钠等配制成饮料，可得多糖含量为0．3mg／mL，氨基酸为1．5g／L，蛋白质44mg／mL，色香味俱全的营养保键饮料。     

固体发酵蜜环菌多糖提取工艺的研究

研究了从固体发酵蜜环菌菌丝体中提取水溶性多糖的工艺。通过比较,证明了冷冻能提高多糖的提取效率;通过单因素实验,确定水溶性多糖的提取工艺;正交试验进一步优化提取工艺：即浸提时间2．5h、浸提90℃、固液比1：5为最佳提取条件。     

蜜环菌饲料的研制

对蜜环菌饲料制作的工艺进行了优化研究，研究表明，当采用最佳培养条件时，发酵液中多糖含量高，制成的成品饲料含多糖为0．296mg/mL，氨基酸为1．6g/L，蛋白质为44．9mg/L，当发酵液中添加5．5％蔗糖，0．1％柠檬酸及0．05％黄原胶等添加剂时，可以得到色、香、味俱全的营养保健饮料。     

蜜环菌产漆酶的发酵条件研究

对蜜环菌(Amillariella mellea)产漆酶的发酵条件作了研究。结果表明蜜环菌产漆酶的最佳培养基成分为:玉米粉30g/L,豆粕12g/L,微量元素混合液40mL/L,C/N2.5,吐温801g/L,木屑0.01g/L,CuSO4·5H2O0.05mmol/L。最佳发酵条件为培养基初始pH5.0,培养基装量为250mL三角瓶中35mL培养液,25℃条件下振荡培养(180r/min)18d。     

蜜环菌多糖分离纯化及性质的研究

进行了蜜环菌胞外糖分离纯化及性质的研究，得到如下结果：发酵液浓缩，三倍体积乙醇沉淀、75%乙醇洗涤、Sevage法除蛋白、20%H2O2脱色，得到的粗多糖上DEAE-纤维素（OH^-）柱层析，用蒸馏水、0.05-0.5mol/L的NaCl梯度洗脱，可以得到中性多糖和几咱酸性多糖。中性多糖上SephadexG-150柱层析，用蒸馏水洗脱，得到一种多糖A，多糖A为纯多糖。在400-4000cm^-1范围内摄得多糖A的红外光谱清明其含有β-糖苷键。多糖A的完全酸水解液用硅胶GF254薄层层析，氯仿-甲醇（60：40）与丙酮-水（96：4）展层，以及纸层析，丙酮-水（96：4）展层，苯胺-二苯胺显色，证明其组成单糖为葡萄糖。考马斯亮兰G-250反应阴性、茚三酮反应阴性、双缩脲反应阴性，聚丙烯酰胺凝胶电泳后、考马斯亮兰R-250染色无蛋白质带，都证明其不含蛋白质。     

高效液相色谱法检测蜜环菌发酵液中腺苷含量

采用高效液相色谱法对蜜环菌发酵液中腺苷含量进行检测。色谱柱:Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相:乙腈-水(10:90,V/V);检测波长259nm、柱温30℃、流速0.5mL/min。结果表明:线性范围为0.05～0.25mg/mL相关系数r为0.99964,精密度RSD为1.26%(n=5),稳定性RSD为1.29%(n=7),重现性实验RSD为1.76%(n=5),平均回收率99.82%。该方法准确、可靠,可以快速准确的对蜜环菌发酵液中的腺苷进行定性定量分析。     

超声波辅助酶法提取榛蘑多糖

目的:为了研究榛蘑中多糖的提取条件,以榛蘑多糖得率为指标,采用超声波辅助复合酶(纤维素酶、木瓜蛋白酶)法进行实验。方法:通过单因素实验研究了酶解温度、超声功率、超声时间、液料比、酶解时间、复合酶比例以及加酶量对榛蘑多糖得率的影响,在此基础上进行响应面优化实验。结果:通过单因素实验,确定了酶解温度50℃、超声功率360 W、超声时间20 min;通过响应面优化实验,确定了最佳提取条件:加酶量1.9%、复合酶比例2:1、酶解时间138 min、液料比30:1(mL/g)。结论:在此条件下,榛蘑多糖得率为40.56%。      

蜜环菌水溶性多糖的抗氧化活性研究

目的:通过蜜环菌水溶性多糖对·OH、O2-·和DPPH·三种自由基清除作用,评价其抗氧化性能,为蜜环菌药物制剂的活性研究及其产品的质量检测标准提供重要参考。方法:经热水浸提、除蛋白等步骤分离纯化到水溶性多糖,以抗坏血酸和TBHQ为对照,采用分光光度法评定其抗氧化特性。结果:蜜环菌水溶性多糖对三种自由基均有不同程度的清除活性,对三种自由基的清除能力是DPPH·>·OH>O2-·,当清除率达到90%以上时,清除DPPH·、·OH和O2-·的所需的多糖浓度分别为1.0、5.0、6.0mg·mL-1,蜜环菌多糖的清除能力显著。结论:蜜环菌水溶性多糖在体外具有较明显的抗氧化活性,在实验浓度范围内,抗氧化效果与浓度呈显著的线性相关。作为一种重要的天然活性物质,蜜环菌多糖的抗氧化活性和抗衰老作用将具有较高的应用价值。     

高速逆流色谱法分离蜜环菌发酵上清液乙醇提取物条件的研究

利用高速逆流色谱法分离蜜环菌发酵液乙醇提取部位,筛选其最佳溶剂体系分离条件。结果表明:溶剂体系为正丁醇-乙酸乙酯-水、且体积比为1:4:5的条件下,能得到最佳分离效果,最终分离出4个峰,效果较好,4个峰的提取率分别为51.10%、1.47%、0.86%、1.80%。     

蜜环菌液体培养基及多糖提取条件的优化

筛选最优菌株,确定最佳液体发酵培养时间和碳源、氮源的组合,采用L16(45)正交试验设计优化蜜环菌水提和超声提取多糖的工艺。用苯酚-硫酸法测定多糖含量。结果表明:最优菌株M7的最佳发酵时间为7d,最适碳源、氮源组合为糊精+红薯粉、蚕蛹粉+玉米浆。水提蜜环菌多糖的最优工艺是水提温度100℃、料液比1:20、水提时间1.5h、水提4次。在最优水提优化的基础上最佳超声工艺是水提时间90min、超声时间10min、超声功率90%、超声2次。水提优化比普通方式提取多糖,多糖得率增加104.27%。在水提优化的基础上进行超声优化,多糖得率增加5.86%,可将超声波法作为蜜环菌多糖提取的辅助手段。     

山榛蘑多糖提取工艺研究

以山榛蘑为原料,采用热水浸提法提取山榛蘑多糖。在单因素实验的基础上,通过正交实验进一步优化提取工艺条件,确定影响山榛蘑多糖提取率的主次因素分别是料液比、浸提时间、浸提次数和浸提温度。结果表明,最佳工艺条件是料液比1∶25,浸提温度95℃,浸提时间5h,浸提次数3次,多糖得率达4.81%。     

不同蜜环菌菌株酯酶同工酶及过氧化物同工酶的研究

研究不同来源蜜环菌菌株的酯酶同工酶及过氧化物同工酶图谱的变化规律;采用不连续垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳法;同一菌株在不同的培养天数同工酶谱带的条数不同,但具有一定数量迁移率(Rf)相同的谱带贯穿于整个培养时间。不同蜜环菌菌株具有各自特征性谱带。结果表明,同工酶谱带的多少及活性与菌丝的生产速度及代谢的强弱成正相关。     

榛蘑多糖的分离鉴定及其清除氧自由基作用研究

榛蘑烘干后经热水提取,乙醇沉淀得粗多糖。粗多糖经Sevag法除蛋白后上DEAE-纤维素(OH-)柱层析,分离得到五种多糖组分Am-I、Am-II、Am-III、Am-IV和Am-V,SepharoseCL-4B测得Am-I分子量为1.46×104,红外光谱和NMR波普分析表明Am-I为含有葡萄糖醛酸的主要以β(1,3)糖苷键和β(1,6)糖苷键连接的D-吡喃葡聚糖。邻苯三酚自氧化法测定榛蘑粗多糖和Am-I均具有清除氧自由基的作用。     

山榛蘑即食营养汤料的研制

以长白山野生榛蘑为原料,通过正交试验筛选出最佳产品配方为食盐16％、白砂糖7％、榛蘑量30％、调味剂量10％.在此条件下可研制出食用便捷、适口性好、营养丰富的野生榛蘑营养汤料.