微生物发酵法生产EPA及DHA的研究进展

EPA和DHA是两种人体必需多不饱和脂肪酸,对人体健康有重要意义,微生物发酵法生产EPA和DHA具有稳定性好、易于分离纯化和工业化等优点,是近年来研究的热点。从微生物利用葡萄糖合成多不饱和脂肪酸的代谢途径和影响微生物合成多不饱和脂肪酸的因素出发,论述了微生物发酵法生产EPA和DHA的研究现状和最新进展。     

利用微藻培养生产多不饱和脂肪酸研究进展

多不饱和脂肪酸(PUFA),尤其是二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)在营养和医学领域有着重要作用。目前PUFA主要从鱼油中提取,工艺复杂,价格昂贵。微藻中含有丰富的多不饱和脂肪酸,利用微藻生产多不饱和脂肪酸具有广阔的前景。本文综述了微藻培养生产PUFA的研究进展,包括生理作用、合成途径、来源分布及培养方式等。     

酶法制备n-3多不饱和脂肪酸型磷脂的工艺

研究了无溶剂体系中固定化磷脂酶A1催化大豆磷脂与乙酯型鱼油进行酯交换反应,制备n-3多不饱和脂肪酸型磷脂的工艺。考察了反应温度、反应时间、底物比(乙酯型鱼油与磷脂的质量比)以及加水量的影响,得到了较优的反应条件。实验结果表明,加酶量(按大豆磷脂的质量计算)20%,底物比8∶1,底物总质量5.0g,加水量55μL,55℃反应12h时,所得产物中EPA和DHA的含量分别为8.0%和17.8%。     

不同类型n-3多不饱和脂肪酸对心血管疾病的防治作用及其机制研究进展

3种主要的食源性n-3多不饱和脂肪酸包括α-亚麻酸(ALA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)。综述了ALA、EPA和DHA降低甘油三酸酯水平和血小板凝集,改善炎症和氧化应激指标以及改善血管和心脏血液动力学的功能,从而对动脉粥样硬化等心血管疾病起到防治作用。此外,总结了联合使用ALA、EPA和DHA防治心血管疾病的作用,并进行了展望。     

气相色谱法测定海豹油中EPA、DPA、DHA含量的方法学研究

目的：建立气相色谱检测海豹油中EPA、DPA和DHA的方法。方法：采用氢氧化钾-甲醇酯化法将海豹油中的脂肪酸快速、有效的转化成脂肪酸甲酯,并通过方法学实验验证其可行性。结果：EPA、DPA和DHA甲酯含量在10～2000μg/mL范围内,峰面积与EPA、DPA和DHA甲酯含量呈良好线性关系;加样回收率在96.93%～103.38%之间,相对标准偏差小于2%;结论：该方法可以快速、准确地同时测定EPA、DPA和DHA含量。     

多不饱和脂肪酸的研究进展

对多不饱和脂肪酸－亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的生物资源，分离分析方法，生物活性和应用前景等五个方面进行了综述。     

俄罗斯鲟鱼生殖腺营养成分分析及评价

研究了俄罗斯鲟鱼加工副产物生殖腺的基本营养成分,蛋白质的氨基酸组成,脂肪酸组成,为鲟鱼生殖腺的高值化利用提供依据。结果显示,鲟鱼精巢的粗脂肪、粗蛋白及灰分含量(以湿基计)分别为75.20%、9.06%、0.10%,而鲟鱼卵巢的相应营养成分含量分别为42.00%、5.96%、0.20%。精巢蛋白中必需氨基酸占总氨基酸质量分数的36.80%,而卵巢蛋白的相应数值为35.00%。精巢脂质中二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)总量达到总脂肪酸的7.41%,而卵巢脂质的相应数值则为7.25%。综上,鲟鱼生殖腺富含脂质,可作为该副产物今后开发利用的主要目标。      

基于脂肪酸特征指标的鳕鱼肝油掺假鉴定

通过分析鳕鱼肝油中各脂肪酸的相对含量及特征指标变化规律,建立鳕鱼肝油掺假鱼油的鉴定方法。鳕鱼肝油中所含脂肪酸经柱前衍生转化为甲酯后进行气相色谱测定,采用面积归一化法计算各脂肪酸相对总脂肪酸的相对含量。根据多样本脂肪酸相对含量分析结果,找出能有效识别掺假的特征性指标二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid,DHA）/二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid,EPA）值和鲸蜡烯酸相对含量,并确定其限度范围,DHA/EPA值为1.40～1.68,鲸蜡烯酸相对含量为7.0%～9.4%。当鳕鱼肝油样品中测得的DHA/EPA值和（或）鲸蜡烯酸相对含量超过此限度时,可初步判定该样品掺假鱼油。为进一步有效识别掺假水平,本研究探索建立一种以DHA/EPA值和鲸蜡烯酸相对含量为坐标的掺假模型,并绘制不同掺假水平的识别分析图,46 批样品经鉴定,有2 批样品疑似掺假25%的鱼油。该鉴定方法准确可靠、直观简便,可用于鳕鱼肝油中掺假鱼油的快速鉴定。     

深海粗鱼油的精炼工艺研究

对深海杂鱼粗鱼油精炼工艺进行优化,考察了磷酸体积分数、超量碱和活性白土添加量对鱼油酸值、回收率和感官品质的影响,并对精炼鱼油的理化指标及脂肪酸组成进行分析。结果表明:适宜的精炼条件为采用占鱼油质量1%、体积分数80%的磷酸脱胶,脱胶油中加入占鱼油质量1.5%的超量碱和理论碱量的Na OH(4 mol/L)脱酸,脱色选用添加占鱼油质量20%的活性白土;精炼鱼油的理化指标均达到我国水产行业精制鱼油的一级标准(SC/T 3502—2000),酸值(KOH)由(5.52±0.12)mg/g下降到(0.29±0.11)mg/g;精炼工艺对鱼油脂肪酸组成的影响较小,其中二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的总量约占总脂肪酸含量的38%,且分别占多不饱和脂肪酸含量的35.99%和51.59%,品质较优。     

利用生物技术生产廿碳五烯酸和廿二碳六烯酸

根据现在的了解，能产生有意义含量的廿碳五烯酸（ＥＰＡ）和廿二碳六烯酸（ＤＨＡ）的微生物有真菌和藻类。在微生物中，多不饱和脂肪酸的合成通常是以单不饱和脂肪酸、油酸为底物。合成途径中，有两个主要的反应，即碳链的增长和去饱和作用。ＥＰＡ和ＤＨＡ的生成通过ω－３代谢途径。微生物脂肪酸构成的质量和数量都受培养基的组分，通气、光照强度、温度和培养时间等环境因素的影响。大多数用于提取鱼油中的ＥＰＡ的方法也可用于微生物脂质中的ＥＰＡ的提取。几种方法被提出来生产高含量的ＥＰＡ和ＤＨＡ。它们一般是基于下列技术的结合：溶剂提取、尿素包合法、分子蒸馏、分馏、液相色谱法和超临界二氧化碳提取。     

利用Crypthecodinium cohnii高密度发酵生产DHA的流加策略研究

利用流加策略实现了隐甲藻(Crypthecodinium cohnii)生产DHA的高密度发酵。根据隐甲藻间歇式发酵的特性,探讨最佳补料时间及流加液中最佳碳氮比,结果表明,在葡萄糖浓度降至4g/L左右时流加碳氮比为30∶1的营养液对隐甲藻的生长和脂肪酸积累最有利。根据以上结果,初始葡萄糖浓度25g/L,采用5d连续发酵多次流加策略,细胞干重达6.37%,DHA产量为4.08g/L。     

磷脂型DHA的消化、吸收与转运

二十二碳六烯酸（DHA）参与大脑生长发育,影响大脑中神经递质、突触可塑性以及信号转导等生理功能。目前,市售DHA膳食补充剂产品较多,其脂质结构主要分为甘油三酯型DHA(TAG-DHA)、乙酯型DHA(EE-DHA)和磷脂型DHA(PL-DHA)。DHA不同酯化结构影响其吸收、转运和生物利用度。目前PL-DHA和TAG-DHA生物利用度高仍存在争议,而大部分的研究证明PL-DHA是最佳的DHA吸收形式,尤其是能被脑组织更好地吸收。本文比较分析磷脂型DHA与其它形式DHA的吸收、转运等,总结不同模型中磷脂型或甘油三酯型DHA在人体或动物体内生物利用度。目前大多是动物实验研究,还需更深入的人体试验,来探究PL-DHA在人体的吸收过程及其机理,评价其生物利用度以及对神经发育的长期作用。PL-DHA有望成为一种更高效的DHA食品营养强化剂,添加到婴儿配方奶粉中或制成胶囊服用。     

二十二碳六烯酸对老年大鼠脑组织抗氧化和脂肪酸的影响

目的:研究二十二碳六烯酸(DHA)改善老年大鼠抗氧化的可能机制。方法:动物分为青年组(7月龄青年雄性大鼠)、老年组(20月龄雄性大鼠)、DHA低剂量组(灌喂20月龄雄性大鼠DHA 180mg/(kg.d)42d)、DHA高剂量组(灌喂20月龄雄性大鼠360mg/(kg.d)42d),处死大鼠后测定脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活力、丙二醛(MDA)含量,然后用气相色谱-质谱联用分析法分析脑脂肪酸组成及含量,最后用薄层层析和磷钼酸法分析磷脂构成。结果:与老年大鼠相比,灌喂DHA的各组大鼠的脑中SOD、GSH-Px、CAT活性显著提高,同时灌喂DHA减少MDA的含量;对脑脂肪酸和磷脂的分析,表明灌喂DHA显著提高脑DHA含量,增加总n-3脂肪酸/总n-6脂肪酸和DHA/AA(二十碳四烯酸)的比率,显著降低AA含量,还能显著提高磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸及神经鞘磷脂的含量。结论:DHA显著提高自然衰老大鼠的脑组织抗氧化能力,其机制可能与改变脑脂肪酸组成有关。     

轮枝霉(Diasporangiumsp.)产生EPA、AA发酵条件的初步研究

对本实验室分离的轮枝霉 (Diasporangiumsp )发酵产生含EPA、AA等多不饱和脂肪酸的条件 ,如碳源种类、氮源种类、pH、菌种的接种量和种龄、培养温度、通气量进行了研究 ,摇瓶发酵结果表明 ,以玉米粉和葡萄糖混合作为碳源能获得最高的不饱和脂肪酸产量 ;有机氮源有利于菌丝不饱和脂肪酸的产生 ;低温有利于菌丝中长链不饱和脂肪酸的产生 ,发酵接种量宜大 ;pH对菌丝生物量、EPA和AA的含量均有显著的影响。发酵培养 6d后菌丝中的不饱和脂肪酸含量达到最大值。在初步优化培养条件下 ,EPA、AA分别达到 2 5 3 7mg/L和 5 49 8mg/L。     

尿素包合法富集海狗油中的多不饱和脂肪酸

研究了尿素/脂肪酸的质量比、结晶时间和结晶温度三因素对尿素包合法富集多不饱和脂肪酸效果的影响。结果显示适宜的尿素包合条件为:尿素/脂肪酸的质量比4∶1;结晶时间20h;结晶温度4℃,在此条件下未包合脂肪酸中EPA、DPA和DHA的总含量可从21.1%提高至73.32%,富集得率为17.91%。     

蚕蛹油改善小鼠记忆作用的实验研究

目的验证蚕蛹油具有改善小鼠记忆的作用。方法按卫监发（1996）第38号《保健食品功能学评价程序和方法》中的改善记忆作用检验方法进行跳台试验和避暗试验。结果蚕蛹油对动物记忆获得与巩固过程有一定的促进作用，能明显地提高小鼠跳台被动回避反应再现能力和提高避暗反应再现能力。结论蚕蛹油具有明显改善记忆作用。