反相高效液相色谱法检测食品添加剂乳铁蛋白

建立反相高效液相色谱法检测食品添加剂乳铁蛋白的方法.样品采用氯化钠溶液(0.5 mol/L)溶解,过滤后供液相色谱仪测定.采用CAPCELL SG300C18色谱柱分离,氯化钠溶液(0.5 mol/L)、乙腈及三氟乙酸为流动相,梯度洗脱,二极管阵列检测器280nm检测,保留时间及特征光谱图定性,外标法峰面积定量测定.标准曲线线性范围10.0mg/L～100 mg/L,相关系数均在0.999以上,定量检测低限5 mg/kg.     

高效液相色谱法测定羊乳中的乳铁蛋白

为开发羊乳中乳铁蛋白的高效液相色谱测定方法及报告羊乳中乳铁蛋白的分布规律。本研究采集哈尔滨地区羊乳样品(n=24)和经过巴氏杀菌的羊乳样品(n=24),采用高效液相色谱测定其乳铁蛋白质量浓度。样品脱脂后,调整pH沉淀酪蛋白,采用C8色谱柱分离,二极管阵列检测器210nm检测,以水、乙腈、三氟乙酸为流动相进行线性梯度洗脱。方法回收率94.2%,线性范围50~300μg/mL,检出限12μg/mL,定量限40μg/mL。原料羊乳中乳铁蛋白的质量浓度的平均值122.1μg/mL,巴氏杀菌后羊乳中乳铁蛋白的平均值103.9μg/mL。巴氏杀菌对羊乳中乳铁蛋白浓度无影响。      

反相高效液相色谱法测定婴儿奶粉中乳铁蛋白的含量

建立了反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定婴儿奶粉中乳铁蛋白的含量,采用C4色谱柱洗脱,二极管阵列检测器(波长220nm)测定.流动相A为0.1％三氟乙酸水溶液,流动相B为乙腈-水-三氟乙酸(体积比90∶10∶0.1).线性范围为5mg/L～1000mg/L,相关系数为0.9999,定量下限为30mg/kg,加标回收率为86.0％～91.7％.该方法用于实际样品的测定,样品处理简单,结果令人满意.     

反相高效液相色谱法快速测定乳铁蛋白含量

目的建立一种反相高效液相色谱法(RP-HPLC)快速测定乳铁蛋白在乳原料及乳制品中含量的方法。方法根据酪蛋白在等电点(p H 4.6)凝聚沉淀特点,采用RP-HPLC法,用p H4.6醋酸盐缓冲液溶解分离乳铁蛋白,用C18色谱柱快速分离,用流动相A为0.1%三氟乙酸水溶液,流动相B为含有0.09%(V:V)三氟乙酸的90%(V:V)乙腈水溶液,进行梯度洗脱,检测波长214 nm,流速0.7 m L/min。结果乳铁蛋白在10~500 mg/L之间呈现良好的线性,相关系数为0.9999,平均回收率为98.0%,RSD=0.8%(n=9)。结论该方法推广性高、快速,简便、准确,可用于乳铁蛋白原料、奶粉、牛奶及保健品等中乳铁蛋白的含量检测。     

评定高效液相色谱法测定婴幼儿配方乳粉中乳铁蛋白含量的不确定度

目的 对高效液相色谱法测定婴幼儿配方乳粉中乳铁蛋白含量的不确定度进行分析。方法 通过对实验过程中所用标准物质、样品处理过程、测量重复性以及回收率4个方面进行不确定度分析, 建立了不确定度的模型, 计算合成不确定度、扩展不确定度。结果 当乳铁蛋白的含量为64.9 mg/100 g时, 高效液相色谱法测定婴幼儿乳粉中乳铁蛋白含量的合成不确定度为0.023, 扩展不确定度为1.5 mg/100 g, 乳粉中乳铁蛋白含量的测定结果为(64.9±1.5) mg/100 g, (k=2, P=95%)。结论 本次评定揭示了该检测方法对结果影响最大的因素是标准溶液及工作液的制备过程, 因此在此过程中应严格按规范进行操作, 从而使检测结果更加准确可靠。     

高效液相色谱法测定乳及乳制品中硫氰酸钠的含量

以乳及乳制品为原料,利用高效液相色谱法检测其中硫氰酸钠的含量。实验主要针对各类乳制品各成分指标的差异,建立不同提取净化提取方法。样品经离心沉淀蛋白后,利用碱性氧化铝小柱去除氨基酸、维生素等。以磷酸盐缓冲液:乙腈=95∶5(pH=7.00±0.02)作为流动相,在218nm下,通过Durashell HLP C18色谱柱(4.6*250mm,5μm),柱温30℃,流速为0.8mL/min,采用紫外检测器分析样品。结果显示:该方法对乳及乳制品中硫氰酸钠有较高的提取率,回收率均在80%以上。     

高效液相色谱测定广西生鲜乳中的维生素A

为了建立生鲜乳中维生素A的一种快速、准确、灵敏度高的检测方法,样品经皂化后,经石油醚提取,浓缩后采用高效液相色谱法,以Shim-pack VP-ODS柱(4.6 mm×150 mm,5μm),柱温35℃,检测波长325 nm,流动相为甲醇∶水(98∶2,体积比),流速1.0 mL/min的条件进行实验。结果维生素A在0.174～87.2μg/mL范围内线性关系良好,相关系数r=0.9999,平均回收率为98.17%,RSD=1.90%。建立的方法准确、可靠,可以用于生鲜乳中维生素A的含量检测。     

乳与乳制品中叶黄素的测定-高效液相色谱法

建立了乳与乳制品中叶黄素的测定方法.样品经皂化后,由乙醚提取,浓缩后经C30柱分离,高效液相色谱紫外检测器于445 nm处检测,外标法定量.叶黄素标准溶液在0.05～1.25 mg/L范围内呈线性相关(r=0.9997),不同基质中添加回收率为80.5%～91.3%,牛奶中叶黄素检出限为1 μg/100g,奶粉、奶酪中叶黄素检出限为4 μg/100g.试验证明本方法是一种准确测定乳与乳制品中叶黄素的方法.     

高效液相色谱测定生鲜乳及乳制品中三聚氰胺的方法研究

建立用高效液相色谱.二极管阵列法测定生鲜乳及乳制品中的三聚氰胺的检测方法.本实验参照FDA三聚氰胺检测方法、NY/T 1372-2007,探讨检测三聚氰胺的色谱条件和优化生鲜乳及乳制品中的三聚氰胺前处理方法.最后确立了有效的检测方法,采用硫酸铵(0.02mol/L):甲醇=94:6(V/V)作为流动相,203nm为检测波长.样品溶液在0.1～150μg/ml之间均具有良好的线性关系,最低检测限为0.5mg/kg,回收率均在91%以上,回归方程式为y=2.37×105x 1.21×104及相关系数r=0.9998.此法操作简便、快速、灵敏、准确,样品处理简便易行,适于测定生鲜乳及乳制品中的三聚氰胺.     

超高效液相色谱串联质谱法快速测定乳及乳制品中三聚氰胺

建立快速、经济测定乳及乳制品中三聚氰胺的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法。乳及乳制品样品中加入乙腈-水溶液,通过超声波提取和二氯甲烷液液萃取除去蛋白质、脂肪等杂质,进一步稀释后直接进样。经超高效液相色谱(UPLC)快速分离,采用电喷雾正离子(ESI+)多反应监测模式(MRM),实现对三聚氰胺的定性和外标法定量。乳及乳制品样品在1.2 min内完成分析,且具有良好的线性关系(r=0.999 1);方法检出限和定量限(LOQ)分别为0.005 mg/kg、0.017 mg/kg;在0.5～100μg/L的基质添加浓度范围内,平均回收率为91.3%～97.1%,相对标准偏差(RSD)小于9.03%。     

奶及乳制品中三聚氰胺的检测研究

用高效液相色谱法测定奶及乳制品中三聚氰胺的含量。色谱条件为：色谱柱：C18 柱(150mm × 4.6mm,5μm);流动相：乙腈:0.202% 庚烷磺酸钠-0.210% 柠檬酸水溶液(10:90,V/V);检测波长：235.8nm;柱温：30℃。结果表明：在0.1～1.6μg/ml 范围内三聚氰胺与峰面积呈良好线性关系,相关系数为0.9973,回归方程为A ＝ 59746C＋ 183.48,回收率为98.3%～99.2%,相对标准偏差小于1.52%。     

高效液相色谱法测定乳制品中的低聚果糖的含量

ＨＰＬＣ法能准确,快速地对低聚果糖进行定性,定量分析,本研究对添加了低聚果乐的酸奶,测定各糖组分如下：乳糖约３０％,葡萄糖１５％,ＦＯＳ４０％。此外还含有少量的果糖和蔗糖。     

柱前衍生-高效液相色谱-荧光法测定乳制品中左旋肉碱含量

本文研究了柱前衍生．高效液相色谱（HPLC）-荧光检测技术测定乳制品中左旋肉破皿．肉碱）含量的分析方法。经优化后的前处理条件为：提取液采用10％（V／V）甲醇水溶液（经磷酸调节pH至2．7～2．8）,经超声提取20min过滤后调节pH至6．0,取一定滤液加热浓缩近干,用20mL乙醇溶解。经重复两次高速离心（12000r／min、5min）、旋转蒸发浓缩后,残留物用乙醇溶解,以L-丙酰胺-β-萘胺为衍生化试剂于50℃恒温衍生5min后终止反应,于激发波长280nlTl、发射波长328nnl下经HPLC分析测定。乳粉检出限为4．0mg／kg,液体乳检出限0．5mg／kg、0．2～20．0mg／L范围内线性关系良好,相关系数0．9990,平均回收率为80--90％,相对标准偏差RSD小于10％。同时,利用该方法对不同配方奶粉及液体乳中L-肉碱进行了含量测定。该方法灵敏度高,准确性好,适用于乳制品中L．肉碱的含量测定。     

毛细管电泳法检测婴幼儿奶粉中乳铁蛋白的质量分数

建立了准确简便的测定婴幼儿奶粉中乳铁蛋白质量分数的方法,样品经脱脂、酸法去除酪蛋白和硫酸铵沉淀富集、纤维素滤膜过滤净化等方法进行预处理,选择直径为50μm,有效长度为57 cm的未涂层毛细管柱进行检测,缓冲溶液为浓度40 mmol/L的硼酸盐/磷酸盐(pH值为9.5),浓度为50 mmol/L的SDS,浓度为20 mmol/L的Brij35,体积分数4%异丙醇,浓度为30 mmol/L硫酸钠,工作电压为18 kV,检测波长为200 nm。结果显示标准曲线相关系数为0.9992;平均回收率为92.8%,6次样品测定RSD为2.4%。     

分子印迹整体柱用于测定奶制品中的三聚氰胺

目的：采用分子印迹整体柱技术,建立测定奶制品中三聚氰胺的一种新方法。方法：通过制备分子印迹整体柱,并将其作为固定相,采用高效液相色谱法进行测定。以体积分数10% 甲醇溶液- 体积分数0.1% 醋酸溶液(5:95,V/V)为流动相,紫外检测波长240nm,流速0.5mL/min。结果：三聚氰胺在1.0～100.0μg/mL 范围内线性关系良好,r ＝ 0.9987。加样回收率为87.0%～100.5%,RSD 小于5.0%(n ＝ 6)。结论：该方法操作简单,针对性强,不需复杂的样品前处理,可用于奶制品中三聚氰胺残留量的测定。     

乳及乳制品中乳铁蛋白含量的快速SDS-PAGE荧光检测方法

该研究采用新型的Chromeo P503（P503）染料替代考马斯亮蓝染色方法,以克服脱色染色步骤繁琐、耗时长（≥5 h）的不足,建立一种乳及乳制品中乳铁蛋白的快速简便十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis,SDS-PAGE）检测方法。P503染料标记蛋白产生强烈的红色荧光发射,在30 min内一步操作即可完成,并且进行脱铁处理后消除乳铁蛋白铁饱和度对于荧光信号的干扰,保证定量的准确性。根据凝胶成像图中78 ku蛋白条带是否存在及其灰度值的大小,实现乳铁蛋白的定性与定量检测。在优化的实验条件下,线性范围为15~75 μg/mL,检出限为5.11 μg/mL,加标回收率在75.79%~108.09%之间,表明该方法具有较高的灵敏度和准确性。SDS-PAGE和P503结合无需进行肝素亲和柱前处理,便可直接应用于乳及乳制品中乳铁蛋白快速简便的准确定量检测,P503染料标记还可以用于其它乳蛋白的SDS-PAGE快速低成本定量检测, 从而为乳品质量控制和营养评价及加工工艺研究提供有力工具。     

Lipid Oxidation Determination in Butter and Dairy Spreads by HPLC

Butter and dairy spread were stored for 14 wk at 20°C. Lipid hydroperoxides were analyzed by HPLC. Two methods were tested with chemiluminescence detection based on a post-column reaction with cytochrome c and luminol. One was for separation of neutral lipids and one for separation of phospholipids. Lipid oxidation in triacylglycerols and phospholipids in both butter and dairy spread increased during storage. A linear relationship was observed between the chemiluminescence response of oxidized triacylglycerols and the peroxide value. Correlation coefficient was 0.97 for stored butter and 0.99 for stored dairy spread (PV-range 0.1-1.4 and 0.2-5.4 meq/kg, respectively). The method is sensitive, fast and reliable for detection of primary oxidation in dairy products.     

免疫活性蛋白的开发及其在乳制品中的应用

母乳化奶粉目前的研究重点是模拟母乳中具有生物免疫活性的功能因子,其中最重要的有免疫球蛋白（Immunoglobulin),转铁蛋白（Transferrin）及溶菌酶（Lysozyme)。美国及日本的公司已开发了含免疫球蛋白或乳铁蛋白等活性物质的婴儿配方奶粉,我国刚开始这方面的工作。鸡蛋被认为是丰富和优良的高生物活性免疫球蛋白,转铁蛋白及溶菌酶的资源。但分离的难度较大,除溶菌酶外,还没有工业化生产的报道,从而影响了它的广泛应用。浙江长兴艾格生物制品有限公司在国家“八五”重点科技（攻关）项目－－“鸡蛋中免疫球蛋白的分离提取”的基础上,通过对中试工艺的进一步改良,生产出含优质高生物活性的蛋黄免疫球蛋白和转铁蛋白的免疫复合产品。为开发生物免疫活性的婴儿配方奶粉奠定了良好的基础。     

高效液相色谱法测定鸭血制品中甲醛含量

建立鸭血制品中甲醛的高效液相色谱测定法。以衍生液2,4-二硝基苯肼乙腈溶液-水（1∶1,v/v）的混合溶液为提取剂对样品进行提取,Waters SunFireC18（4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱进行分离,流动相为甲醇-水（65∶35,v/v）,流速1.0 mL/min,在波长365 nm处以紫外检测器检测,外标法定量。结果表明,甲醛在线性范围0.4～6.0 μg/mL内,相关系数为0.999 7,最低检出限为0.2 mg/kg,精密度（相对标准偏差）小于5%,加标回收率为85.1%～92.7%。本方法操作简便、灵敏度高、分离度好,适用于鸭血中甲醛含量的测定。