转基因酵母检测葛根异黄酮酶解前后的雌激素活性

葛根中的主要活性成分是异黄酮 ,大部分异黄酮是以糖苷的形式存在 ,而相应游离甙元的活性要比糖苷高得多。为了提高葛根的生物利用率 ,充分发挥其在医药、食品中的潜在价值 ,文中采用酶解的方法 ,将部分异黄酮水解 ,用转基因酵母的方法测定出酶解后雌激素活性比酶解前增加了 7倍 ,同时也简单模拟了葛根在体内的代谢 ,化学分析表明 ,这是由于大豆苷和染料木苷转化成了大豆甙元和染料木素。     

染料木黄酮生理功能的研究进展

染料木黄酮是苷元形式的大豆异黄酮，是大豆异黄酮中的一种主要活性组分，具有多种生物活性。本文简述了染料木黄酮的植物雌激素功能、预防骨质疏松症、抗癌作用、预防和治疗皮肤疾病等多种生理功能。     

酶水解对大豆异黄酮粗提物中苷元含量的影响

采用β-葡萄糖苷酶水解的方法将大豆异黄酮糖苷转化为苷元,以染料木素和大豆苷元含量为指标,通过单因素试验对水解过程中的不同影响因素进行了考察。以染料木素含量为指标,运用正交试验优化了β-葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮的工艺条件为反应温度40℃、水解时间1.5h、水解介质pH4.5、水解底物浓度10mg/mL,在此条件下,水解得到的大豆异黄酮苷元中染料木素的含量可达到22.91%。     

里氏木霉β-葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮糖苷的工艺研究

研究了里氏木霉β-葡萄糖苷酶的酶学性质,及其水解大豆异黄酮糖苷能力.该酶反应的最适温度为50℃,最佳pH为5.0;此酶在pH 4.5～5.5之间和低于60℃下酶较稳定,在80℃基本无活力.采用里氏木霉β-葡萄糖苷酶水解的方法,将大豆异黄酮糖苷转化为苷元,以染料木苷水解率为检测指标.通过正交试验确定了该酶水解大豆异黄酮的工艺条件为反应温度50℃、水解时间90 min、水解介质pH4.5、加酶量20U,大豆异黄酮中染料木苷的水解率为99%.     

β-葡萄糖苷酶对豆奶及豆奶粉中大豆异黄酮糖苷化合物的转化作用研究

对利用β-葡萄糖苷酶将豆奶及豆奶粉中生物有效性较低的异黄酮糖苷化合物转化为高活性的异黄酮糖苷配基化合物进行了试验研究。研究了不同浓度β-葡萄糖苷酶对豆奶及豆奶粉中大豆苷、乙酰大豆苷和丙二酰大豆苷的降解转化作用。结果表明,在β-葡萄糖苷酶浓度1.5U/mL、pH5.5、45℃保温1h的条件下,豆奶及豆奶粉中大豆苷、乙酰大豆苷和丙二酰大豆苷的总量分别降低了89.1%和89.5%,大豆黄素的含量分别增加了57.2和78.7倍;黄豆苷、乙酰黄豆苷和丙二酰黄豆苷的总量分别降低了93.2%和87.7%,黄豆黄素的含量分别增加了4.2和11.7倍;染料木苷、乙酰染料木苷和丙二酰染料木苷的总量分别降低了93.8%和82.4%,染料木黄酮的含量分别增加了5.2和23.0倍。试验结论:利用β-葡萄糖苷酶能够将豆奶及豆奶粉中生物有效性较低的异黄酮糖苷化合物高效转化为高活性的异黄酮糖苷配基化合物。     

大豆异黄酮生理活性的研究进展——(1)大豆异黄酮的代谢及雌激素特性

大豆尤其是大豆胚轴富含有益于人类健康的大豆异黄酮。人体内的两种专一肠道细菌能将大豆异黄酮中的大豆苷和染料木苷代谢为相应的糖苷配基大豆黄素和染料木黄酮。马雌酚是大豆黄素在肠内细菌作用下的代谢产物,具有比大豆异黄酮更高的生理活性,但是并非在所有摄取大豆异黄酮的健康成年人体内都能产生马雌酚,马雌酚的产生与体内是否存在某些特定的肠内菌丛有关。大豆蛋白能影响肠内菌丛的构成,进而提高大豆异黄酮的生物利用率。大豆异黄酮是一类选择性雌激素受体调节剂,具有雌激素和抗雌激素的双重活性,可安全有效地用于预防和治疗妇女更年期综合症。     

高效液相色谱法快速测定大豆异黄酮制品中有效成分的研究

采用高效液相色谱法测定大豆异黄酮制品中染料木苷、黄豆苷、染料木黄酮和黄豆苷元含量.固定相为Agilent-1100 C18柱(3.9 x 150mm);以甲醇:水=35%～45%为流动相,进行梯度洗脱,流速为1.0～2.0mL/min;柱温为室温;检测波长为260nm.实验结果表明,市售30%大豆异黄酮制品中,含大豆异黄酮糖苷近28%,其中染料木苷为4%、黄豆苷为8%,苷元形式异黄酮未检出;采用酶水解法制备的大豆异黄酮水解物中含染料木黄酮14.3%、黄豆苷元9.8%,其大豆异黄酮苷元占大豆异黄酮总含量的96%.     

丹贝异黄酮生物活性增强的机理研究

以少孢根霉RT-3孢子接种在含高浓度的大豆异黄酮提取物制成的发酵基质中，发酵36h后大豆异黄酮被部分水解成相应的苷元．用从丹贝中分离的β-葡萄糖苷酶与标准品染料木素糖苷和大豆苷元的糖苷作用10min，染料木素糖苷和大豆苷元的糖苷被水解成相应的苷元．结果表明：丹贝异黄酮生物活性增强是发酵剂RT-3孢子分泌的β-葡萄糖苷酶将异黄酮由糖苷水解成苷元，而苷元比糖苷有更强的活性．     

浸泡过程对家用豆浆机所制豆浆异黄酮含量的影响

大豆浸泡过程会一定程度激活其内源酶,可能对家用豆浆机所制豆浆的异黄酮产生影响。该试验以不同浸泡条件下的大豆为原料制作豆浆,采用高效液相色谱分析豆浆中主要的异黄酮物质的含量。研究发现豆浆中异黄酮以染料木苷和大豆苷为主,干豆豆浆中染料木苷、大豆苷及对应的苷元含量分别为71.50,60.30,6.80,5.10 mg/L。浸泡豆豆浆的总异黄酮含量与之无显著差异,但苷元含量则显著提升。在60℃浸泡1.8 h的条件下,所制豆浆中染料木苷、大豆苷以及对应的苷元含量分别为75.17,62.84,10.66,7.58mg/L,两种苷元含量分别提升了56.8%和48.6%。同时,60℃浸泡豆较干豆所制豆浆的固形物和蛋白质含量均有显著提高。因此,可考虑采用60℃饱和浸泡来提升豆浆中活性异黄酮的含量。     

HPLC-ESI-MSn法鉴定大豆中12种大豆异黄酮的结构

为了鉴定大豆异黄酮的结构,采用高效液相色谱-电喷雾离子源-离子阱多级质谱联用仪(HPLC-ESI-MSn)法分离鉴定大豆粉乙醇提取物,通过多级质谱提供的准分子离子峰和多级碎片离子信息,分析得到了12种大豆异黄酮的相对分子质量、保留时间并推断了它们异黄酮糖苷的组成结构、异黄酮糖苷中糖的类型等,这12种大豆异黄酮分别是大豆苷元、大豆黄素、染料木素、大豆苷、大豆黄苷、染料木苷、乙酰基大豆苷、乙酰基大豆黄苷、乙酰基染料木苷、丙二酰基大豆苷、丙二酰基大豆黄苷、丙二酰基染料木苷。     

大豆异黄酮生理功能及其检测方法的研究进展

大豆异黄酮是大豆生长过程中形成的一类次级代谢产物,具有弱雌激素活性、抗氧化活性、抗溶血活性和抗真菌活性,能有效地预防和治疗癌症、骨质疏松、妇女更年期综合征等多种疾病。本文综述了大豆异黄酮的结构、性质及其提取、分离与分析检测方法的研究进展,拟为今后大豆异黄酮的综合利用及其衍生产品的开发提供参考。     

大豆异黄酮的研究和应用

本文对大豆生理活性物质大豆异黄酮的含量、种类、结构和分布特点、大豆异黄酮的雌激素样作用和抗氧化功能及其在人体内的代谢状况进行了综述，并简述了国外大豆异黄酮的利用现状和在我国的开发应用前景。     

毛霉发酵豆渣过程中异黄酮含量及构型的变化研究

以传统纯种毛霉发酵方法,对豆渣前后发酵过程中异黄酮含量测定,结果表明,豆渣发酵后异黄酮含量增加,在前发酵时期变化最大,由132．30μg／g增加到318．59μg／g,增加了约2．4倍,后发酵时期稍下降,至284．33μg／g并逐渐稳定。在豆渣发酵过程中,异黄酮结构由结合型糖甙向高活性的游离型甙元转变,游离犁甙元的含量明娃增高,从原料豆渣至后发酵20d时期咀,糖甙与甙元比例的变化瞿线性关系,叫归方程为：Y=-0．614X3＋2．1112X2 -17．291X＋75．341,其中系数R2=0．9422。     

大豆异黄酮的抗氧化活性

从大豆乳清中提取出大豆异黄酮 ,对其抗氧化活性进行了研究。采用α 脱氧核糖氧化法和连苯三酚氧化法 ,分别研究了不同浓度的大豆异黄酮对羟自由基·OH和超氧自由基O- 2 ·的清除效果。结果表明 ,随着大豆异黄酮浓度的增大 ,其对羟自由基·OH的清除能力大大增强 ;而对超氧自由基O- 2 ·的清除能力却呈下降趋势。试验结果还表明 ,随着时间的延长 ,不同浓度的大豆异黄酮对超氧自由基O- 2 ·的清除能力都迅速减弱。     

发酵处理对豆豉抗氧化活性影响的研究

发酵处理基本上不改变豆豉中异黄酮的总含量,而糖苷型大豆异黄酮在β-葡萄糖苷酶的作用下部分转化为游离型大豆异黄酮,使游离型大豆异黄酮的含量明显提高;在样品未添加任何抗氧化剂的前提下,通过试验发现豆豉的自身抗氧化性比原料熟黑豆强许多。     

浏阳豆豉发酵过程中抗氧化成分及活性变化研究

通过测定大豆异黄酮、总黄酮、总多酚含量的变化,结合发酵过程中浏阳豆豉的抗氧化活性的变化,来探讨浏阳豆豉抗氧化活性变化的机理。结果表明:虽然总黄酮与总大豆异黄酮的含量逐步减少,但发酵初期原料中大豆异黄酮主要为糖苷型(占85.75%),而发酵末期则主要为更具活性的苷元型大豆异黄酮(占81.41%),且总多酚经发酵从2.78 mg/g提升至5.76 mg/g,发酵最后一天(L20)豆豉的总抗氧化能力、DPPH·、·OH、O₂^-·清除率分别增加至1088.91 U/g、93.67%、90.24%、88.38%,此外相关性结果表明苷元型大豆异黄酮要比总多酚对豆豉抗氧化活性的影响更大。实验证明发酵有助于大豆中总多酚的增加以及糖苷型大豆异黄酮向苷元型大豆异黄酮转换,这是提高豆豉抗氧化能力及功能性的关键因素之一。     

亚临界水提取大豆胚芽中异黄酮及低聚糖的研究

以大豆胚芽为原料、高压反应釜为反应容器,应用亚临界水为溶剂、采用高纯氮气加压提取大豆胚芽中异黄酮及大豆低聚糖。利用紫外分光光度法测定大豆异黄酮的含量。选取液料比、提取时间、提取温度、压力4个因素进行单因素试验,再进行正交试验优化亚临界水提取大豆异黄酮的条件。结果表明:在液料比25:1,浸提温度120℃,浸提时间40 min,浸提压力1.9 MPa的条件下,大豆异黄酮的得率是1.09%,大豆异黄酮粗提物的产率为6.52%,粗提物纯度是2.60%;大豆低聚糖粗提物产率是35.2%。     

大豆异黄酮对衰老小鼠羟脯氨酸等物质变化的影响

以13月龄昆明种NIH雌性小白鼠为材料，通过小鼠自由饮用含不同剂量大豆异黄酮的溶液，就大豆异黄酮对老龄小鼠脂质过氧化物含量、谷光甘肽过氧化物酶活性及皮肤羟脯氨酸含量变化的影响作了初步探讨。结果显示大豆异黄酮可显著提高衰老小鼠皮肤羟脯氨酸含量；较高剂量的异黄酮可显著降低老龄小鼠全血脂质过氧化物含量，且随着老龄小鼠月龄增大，大豆异黄酮降低脂质过氧化物作用显著；大豆异黄酮对衰老小鼠全血谷胱甘肽过氧化物酶活性的提高作用不显著，但在高剂量下，对小鼠在衰老过程中全血谷胱甘肽过氧化物酶活力下降有一定的延缓作用。提示，大豆异黄酮具有一定的延缓机体衰老的功能。