有限酶解猪血红蛋白制备亚硝基血红素多肽的研究

为了使亚硝基(NO-)更易结合于血红素亚铁离子及提高色素稳定性,本研究采用蛋白酶有限酶解猪血红蛋白,酶解液中大分子血红素多肽与亚硝基反应合成亚硝基血红素多肽。试验表明,以选用木瓜蛋白酶效果较好,最佳酶解条件为:底物浓度16%,加酶量4000U/g,水解时间6h;酶解液合成色素最佳参数为:pH5.00,反应时间12min,反应温度为55℃,NaNO2的添加量为1.6%。     

根霉脂肪酶降解壳聚糖条件研究

以德氏根霉(Rhizopus delemar)为菌种,采用固态发酵法生产脂肪酶,并用此酶对壳聚糖进行非专一性水解.研究了脂肪酶降解壳聚糖的多种影响因素,包括温度、pH、底物浓度、酶浓度、反应时间和常见金属离子等.结果表明,在45℃、pH5.0务件下,该脂肪酶能显著地降解壳聚糖,反应6h后,壳聚糖溶液的粘度即下降为原溶液的8%.适当增加酶浓度可使降解速度加快,但此酶促反应不遵循Michealis-Menten动力学方程.     

木瓜蛋白酶水解大豆蛋白的工艺优化研究

以大豆蛋白水解度为指标,通过单因素和正交试验研究了温度、pH、底物浓度和酶浓度四因素对木瓜蛋白酶水解大豆蛋白工艺的影响,并优化了工艺条件。试验结果表明,影响木瓜蛋白酶水解大豆蛋白的主次因素为温度、pH、酶浓度、底物浓度。最佳工艺参数组合为:温度60℃,pH7.5,酶浓度3.5%,底物浓度5%。在此工艺条件下,木瓜蛋白酶水解大豆蛋白40 min,水解度达到6.58%,大豆肽的氨基酸平均数目为15,平均分子量为1875。     

龙虾头壳制备低聚壳聚糖的研究

以虾仁加工的副产品龙虾头壳为原料,采用酸浸碱煮工艺制备甲壳素,得率为(16.11±0.73)%;浓碱处理脱乙酰基制得壳聚糖,得率为(68.07±1.60)%(相对于甲壳素);选用纤维素酶对壳聚糖进行降解制备低聚壳聚糖。分别研究了加酶量、pH、温度、时间、底物物浓度对壳聚糖降解为低聚壳聚糖的影响。选择0.5%的壳聚糖浓度,通过优化设计试验,确定纤维素酶降解壳聚糖最佳条件为:加酶量8IU/(g底物),pH5.0,温度60℃,时间4h。取最佳工艺条件下降解的低聚壳聚糖,采用乙醇分步沉淀,EP75为(2.36±0.15)%,平均聚合度为9;EP87为(0.85±0.15)%,平均聚合度为7;ES87为(79.84±0.10)%,平均聚合度为5。龙虾头壳制备壳聚糖,纤维素酶降解制成聚合度10以下的低聚壳聚糖,平均得率为8.8%。     

木瓜蛋白酶降解壳聚糖动力学研究

研究了木瓜蛋白酶催化壳聚糖降解过程中，温度、pH值、酶量、底物浓度等条件对降解速度的影响。结果表明，反应最适pH和温度分别为4．5和45℃左右，降解速度随着用酶量的增加而线性增加，降解过程符合米氏方程。     

组成型壳聚糖酶制备壳寡糖酶解条件的优化

主要对组成型壳聚糖酶降解壳聚糖制备低壳寡糖的工艺进行了研究。以酶解产物壳寡糖的产量(mg)为指标,酶解pH、酶解温度(℃)、底物浓度(%)、酶解时间(min)为自变量,在单因素试验的基础上,通过正交实验确定了最佳酶解工艺为:酶解pH 7.0、酶解温度50℃、酶解时间90 min、底物浓度1%,此时壳寡糖产含量为5.476 mg。     

玉米黄粉酶解工艺条件研究

研究木瓜蛋白酶水解玉米黄粉蛋白最佳工艺,通过单因素实验研究底物浓度、酶底比和酶解时间对制备工艺影响,并经正交实验,结果表明,木瓜蛋白酶水解玉米蛋白最佳工艺条件为:底物浓度5.0%,酶底比0.4%,pH6.5,温度50℃,进行酶解4小时水解度最高,此条件下水解度可达39.29%。     

木瓜蛋白酶水解大豆豆渣的工艺优化研究

本试验以大豆豆渣作为试验原材料,大豆豆渣水解度作为评价指标,通过单因素和正交试验探究温度、pH、底物浓度、酶浓度对木瓜蛋白酶水解豆渣效果的影响。结果表明:影响木瓜蛋白酶水解大豆豆渣的主次因素为温度底物浓度pH酶浓度。最优工艺条件参数组合为:温度55℃,底物浓度4%,pH7.0,酶浓度35ug/g。在此条件下,豆渣的水解度达到6.27%。     

木瓜蛋白酶与中性蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究

研究了大豆分离蛋白经过加热预处理后用木瓜蛋白酶和中性蛋白酶水解的可行胜.以水解度(DH)为指标,考察了单因素水解条件得出:木瓜蛋白酶水解反应的最佳条件为反应底物浓度3.0%,pH 7.0,反应温度55℃,酶用量30μg/g;中性蛋白酶水解反应的最佳条件为反应底物浓度5.0%,pH 7.0,反应温度55℃,酶用量40 μg/g.在此条件下,大豆分离蛋白水解度分别为3.69%和9.80%.在一定条件下复合酶分步水解优于单一酶水解.     

木瓜蛋白酶酶解7S大豆球蛋白的研究

采用实验室提取的7S大豆球蛋白为底物,以水解度为试验考察指标,选择底物浓度、温度、时间、pH值、木瓜蛋白酶酶添加量进行试验.结果表明,木瓜蛋白酶酶解7S大豆球蛋白的最佳工艺条件为:底物浓度4.5%,酶解时间3 h,体系pH值7.2,酶解温度50℃,酶用量为6 000 U/g.原7S大豆球蛋白氮溶解指数(NSI)为40.6%,经最佳酶解条件处理后其NSI值为78.5%.     

酶法水解小麦面筋蛋白研究

分别采用Alcalase、Neutrase、Protamex、Flavorzyme、胃酶、木瓜蛋白酶对小麦面筋蛋白进行水解研究,结果表明,Alcalase能有效水解面筋蛋白,并确定其最佳水解条件:pH 9．0,温度60℃,底物浓度5％,酶浓度E/S为1％,即0．03AU/g蛋白,反应时间4hr左右,在此条件下,水解度可达 20％左右。     

响应面法优化豆豉蛋白酶解工艺

以豆豉蛋白为原料,选用木瓜蛋白酶与复合风味酶分步水解制备豆豉蛋白水解物。通过单因素试验和响应面分析,确定了木瓜蛋白酶的水解条件为:反应温度62.93℃、pH7.49、酶/底物4.91%、底物浓度5.48%,在此条件下水解5h;木瓜蛋白酶水解液再加入复合风味酶酶解,优化的水解条件为:在pH6.0,酶/底物为3%,55℃条件下反应3h,豆豉蛋白最终水解度达到28.37%。     

壳聚糖固定化木瓜蛋白酶提取牛蒡多糖的研究

以壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂固定化木瓜蛋白酶,从牛蒡中提取多糖,考察固定化工艺的选择、固定化酶提取牛蒡多糖的优化条件及固定化酶的稳定性。结果表明:壳聚糖固定化木瓜蛋白酶的最佳条件为:壳聚糖浓度2.5%,加酶量0.3g/g载体,时间6h,温度15℃,pH7.5,酶活力回收率38.98%。提取牛蒡多糖的最佳条件为:固液比1:20,pH6.5,温度60℃,时间8h,加酶量1.8g/g载体,多糖提取率11.04%。固定化酶重复使用五次,酶活力仍保持50%以上。     

壳聚糖铁的制备及其在蔗汁澄清中的应用研究

本文以脱乙酰度为85%的壳聚糖与FeCl3反应制备壳聚糖铁,并对其用于红糖粉生产的蔗汁澄清工艺进行了研究。将壳聚糖铁用于蔗汁澄清实验,得出澄清蔗汁的最佳工艺是:壳聚糖铁用量为100mg/L,pH值约为7.5,澄清温度为90℃。结果表明壳聚糖经过改性后,其絮凝性能有了较大提升。     

木瓜蛋白酶降解壳聚糖

通过粘度测定、还原端基测定和凝胶层析分子式量分布测定 ,研究了木瓜蛋白酶非专一性降解壳聚糖过程中温度、pH值、反应时间和酶用量等因素对木瓜蛋白酶降解能力的影响 ,探讨了壳聚糖脱乙酰化度和相对分子质量与木瓜蛋白酶降解反应的关系 .结果表明 :木瓜蛋白酶在温度4 0～ 4 5℃、pH 4 .0～ 5 .0和酶用量 0 .5 %～ 10 %范围内 ,对壳聚糖的降解将随酶用量的增加而加快 ,但随脱乙酰度的升高而减慢 ;木瓜蛋白酶适合作用于数均分子式量在 2 0～ 5万的虾壳聚糖 .     

凡纳滨对虾主要过敏原鉴定及酶法消减技术的研究

以凡纳滨对虾为研究对象,用免疫印迹法检测其主要过敏原蛋白组分;用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶对凡纳滨对虾水溶性蛋白水解,消减过敏原。并且通过间接酶联免疫吸附实验和致敏豚鼠全身免疫实验对过敏原消减情况进行检测,确定酶法消减过敏原条件。结果表明,凡纳滨对虾的主要过敏原为99、33、19kD 以及14kD 的蛋白质组分。胰蛋白酶最佳水解条件为：pH8.0,酶与底物比1:100(m/m,下同),45℃,底物质量浓度3g/100mL,水解时间3h;木瓜蛋白酶最佳水解条件为pH6.5,酶与底物比1:100,60℃,底物质量浓度3g/100mL,水解时间3h;菠萝蛋白酶最佳水解条件：pH7.5,酶与底物比1:100,55℃,底物质量浓度5g/100mL,水解时间3h。并且胰蛋白酶水解产物和木瓜蛋白酶水解产物对致敏豚鼠的全身免疫实验安全性很好。     

不同因素对松花粉中脂肪酶活力的影响

为研究松花粉中脂肪酶的最适反应条件,考察了温度(℃)、pH、底物、金属离子等因素对其酶活的影响。通过脂肪酶的催化水解作用,以95%乙醇终止反应,测定其酸价,进而求得酶活,并选择出脂肪酶的最适反应条件。结果表明,最佳反应条件为:温度35℃,pH7.4,底物为三丁酸甘油酯,Ca2+、Fe3+、Mg2+、Fe2+会提高脂肪酶活力。     

中国对虾蛋白酶性质的研究

采用酶学分析方法研究了中国对虾蛋白酶的性质。结果表明,该酶最适温度为60℃,最适pH为9.0,是一种碱性蛋白酶。此酶在50℃以下及pH 7.0~10.0稳定性较好。以酪蛋白为底物,蛋白酶的最适底物浓度为2%。60℃时,该酶的半衰期为22 min,70℃时则为7 min。低浓度的EDTA对酶活有抑制作用,Mn2+、Ca2+、Mg2+对蛋白酶有一定的激活作用,而Cu2+、Zn2+、Fe2+、Pb2+对酶活有不同程度的抑制作用,可推断该酶是一种金属蛋白酶。     

通过酶促反应制备壳寡糖

用酶降解法对壳聚糖进行降解 ,研究了温度、pH值、金属离子等对酶促反应的影响 ,降解的最佳温度和pH值分别为 5 0℃和 5 0 ,Mg2 + 和Ca2 + 对酶降解具有一定的促进作用 ,而重金属离子Cu2 + ,Ni2 + 和Zn2 + 对酶降解有强烈的抑制作用。通过降解过程中壳聚糖溶液粘度的变化可以得出 ,该壳聚糖酶是以内切方式作用于壳聚糖。采用离子交换色谱柱对降解产物进行分离 ,得到了聚合度为 2～ 9的壳寡聚糖。该酶促反应符合米氏动力学方程 ,米氏常数Km 值为 2 60 1g/L ,Vmax 值为 3 5 79× 10 - 2 g/min·L。     

多胺柔性链改性壳聚糖微球固定化木瓜蛋白酶

用反相悬浮交联法制备了单分散壳聚糖微球树脂,以其作为固定化载体基体,经氨基保护、C6羟基环氧化后接枝亲水性多乙烯多胺,制备了粒径为220～300μm、具有较高机械强度的多胺柔性链改性壳聚糖载体。采用该载体对木瓜蛋白酶在pH8.0缓冲液中室温下固定25h,固定化酶表观活力最高可达313U.g-1,活力回收率最高达61.5%,是采用未经多胺分子修饰的壳聚糖微球固定化的2.3倍。该柔性固定化酶的最适温度为65℃,最适pH为8.0,连续使用6～7次后仍保持原来活力的一半。