放射自显影术对机体污染放射性核素的监测防护研究

作者考虑到医学辐射防护对人类健康的特别重要性,为了能及时监测机体受放射性核素内污染的情况,研究设计了用各种不同水平的放射自显影术进行不同条件内污染的监测。先后摸索成功了用冰冻微观放射自显影术来监测体内呈游离态和结合态的内污染核素;涂片放射自显影对污染机体的血、髓、尿和粪样进行监测;并设计探讨用双标记放射自显影术对复合污染的核素进行鉴别监测;尤其是我们摸索成功的将闪烁液直接渗入液体乳胶中的荧光增敏放射自显影术,可以提高灵敏度达10倍之多,从而显著提高对低水平内污染核素的监测能力。     

放射自显影技术对体内污染放射性物质的代谢研究

本项研究探讨和设计了各种不同放射自显影术在体内污染放射性物质的代谢研究中的运用。考虑针对污染放射性物质的代谢特点和行径动态的不同,可以设计具体运用不同水平的放射自显影术,如整体水平的、脏器水平的、细胞水平的和亚细胞水平的各种放射自显影术来观察体内污染放射性物质的代谢研究。应该指出,为了揭示放射性污染物在体内代谢过程中的存在形式,需要运用不同的组织固定操作法,如在石蜡包埋组织固定放射自显影术的操作中,可充分洗脱在组织中呈游离态的放射性污染物,而只保留与蛋白质呈牢固结合态的;至于在冰冻组织固定放射自显影术的操作中,则可完全防止放射性污染物在组织中的扩散或易位,可以保留机体在生存状态时的放射性物质代谢的确切行径和强度。尤其是摸索成功双标记放射自显影术和荧光增敏放射自显影术在代谢研究中的运用,显著提高了对体内污染放射性物质代谢检测的灵敏度和分辨力。至于色层分析放射自显影术在探讨体内污染放射性物质的分解代谢产物中的运用,更具有重要的作用。     

32Pβ射线在非组织等效介质中产生吸收剂量的估算

利用β发射体核素剂量点核函数经验公式计算体外照射培养细胞实验中所使用的^32P放射性贴片在组织等效介质(聚乙烯)中的吸收剂量作为标准剂量刻度，用放射自显影方法得出剂量一灰度曲线。结果显示：在0-68．84mGy范围内，吸收剂量与自显影灰度值呈线性关系；根据贴片隔非组织等效介质(培养瓶底玻璃)自显影的灰度值反推出^32P放射性贴片在非组织等效介质中产生的吸收剂量及剂量率：1MBq/cm^2贴片隔培养瓶底玻璃后的吸收剂量率为21．9cGy／h。本方法简单、易行，同时可以检测贴片的放射均匀性。     

磷屏的线性、饱和、衰减特性

对241Am1、4C和137Cs 3种核素在PE公司3种磷屏上的放射自显影性能进行了研究,并提出了一种估算曝光时间上限值的方法。从曝光时间角度研究了磷屏对α、β、γ射线的线性特性和饱和特性,结果表明磷屏上无饱和点出现时,3种磷屏都具有良好的线性特性。研究了α、β、γ射线在磷屏上所成影像光强度随时间的衰减性能,表明磷屏的衰减现象是普遍存在的,开始阶段衰减较快,此后衰减速度逐渐变慢。在用磷屏进行放射自显影研究时,一般在曝光后应立即扫描。     

用磷屏放射自显影法测量α核素的放射性活度

介绍了应用磷屏放射自显影法测量α核素放射性活度的实验方法,研究分析了样品与磷屏之间距离(即立体角)、曝光时间及样品放射性活度等因素对磷屏影像光强度的影响.结果表明,经过立体角修正后得到的磷屏影像光强度与测量几何条件无关;在磷屏未饱和的前提下,磷屏影像光强度与磷屏受到的辐射成正比.另外,对曝光环境、扫描次数、磷屏本底、γ或X射线的影响、源的状况等几个在实验过程中需要注意的问题进行了讨论,并给出了相应的建议.     

核技术在抗疟新药——青蒿素、二氢青蒿素抗疟作用研究中的应用

青蒿素是从中药青蒿(Artemisia annua L.)中提取的一种抗疟有效成分。化学研究证明,青蒿素是一种带有过氧基团的新型倍半萜内酯。药理研究、毒性研究及临床观察证明,青蒿素治疗间日疟、恶性疟、抢救脑型疟以及治疗抗氯喹株疟疾均具有高效、速效、低毒的特点。为了深入探讨青蒿素类药物抗疟作用原理、构效关系,以及研究其药物代谢和药代动力学,采用核技术如液体闪烁计数法、整体放射自显影、电镜放射自显影等技术进行了以下研究。     

~(141)CeO_2经气管内注入后在肺及淋巴结内的动态分布

本文报告了应用γ放射性测量和放射自显影方法,观察~(141)CeO_2经气管内注入后在大鼠肺及局部淋巴结中动态分布的特点。实验结果表明,~(141)Ce 在肺内与在不同部位、不同个体和单个淋巴结中的分布都是很不均匀的;其滞留量随时间而变化。     

老年大鼠脑M1胆碱受体分布的放射自显影研究

采用放射自显影技术观察自然衰老大鼠几个重要脑区Ｍ１受体密度的变化及知母或其甘元ＺＭＳ的调整作用。图像分析仪给出不同脑区的平均灰度，老年鼠皮层、海马、纹状体的灰度显著低于青年鼠，皮层和纹状体降低１５％左右，海马降低不到１０％。给开始进入老年期的大鼠长期口服知母或其甙元ＺＭＳ，三个脑区的Ｍ１受体密度均明显高于老年对照组。     

~3H-麝香酮显微放射自显影研究

麝香酮(即3-甲基十五环酮)是天然麝香的主要成分之一。近年来上海和山东分别用芥子酸和十二烷二酸合成了麝香酮,并证明人工合成的麝香酮具有天然麝香的某些主要药理作用。[~3H]-麝香酮静脉注射或灌胃给药后,经肠道粘膜吸收及血液循环能很快分布到各主要脏器,尤其能迅速通过血脑屏障,而且在中枢神经系统中蓄积时间较长,并主要以原形药排出。为进一步确定[~3H]-麝香酮在细胞水平上的定位分布,我们对[~3H]-麝香酮进行了显微放射自显影研究。     

吲哚美辛对荷瘤小鼠抗肿瘤作用机制的实验研究

用微观放射自显影技术及免疫组化法探讨了非甾体类抗炎药吲哚美辛(IN)对Lewis肺癌的生长抑制作用机制。结果显示:与对照组相比,实验组IN的抑瘤率为55.05%;IN可显著下调Bcl-2蛋白的表达(t=6.154,P<0.001),对Bax蛋白的表达没有明显影响(t=2.101,P>0.05)。放射自显影结果显示,在肿瘤细胞的细胞膜、细胞浆及细胞核中均有黑色银颗粒分布,且在用药后12 h时肿瘤组织中的平均银颗粒数高于4、7、243、6 h时。以上结果表明,IN可抑制Lewis肺癌的生长,其机制与下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达及降低Bcl-2/Bax的比值有关;IN可进入到肿瘤细胞内发挥抗肿瘤作用。     

宏观和微观放射自显影术对~(35)S-蛋氨酸掺入机体不同组织蛋白比较研究

在预先引入体内蛋白质标记前身物~(35)S-蛋氨酸后,用宏观和微观放射自显影术,探讨了不同脏器和细胞水平的蛋白质生物合成部位和合成的相对程度。由定位和定量分析研究的结果表明,以肝组织中的蛋白质生物合成能力最强,其次为肾脏、脾脏和大脑,以及骨髓幼稚细胞。而心、肺和骨骼肌等虽具有重要的生理活性,但其蛋白质的生物合成并不旺盛。     

荧光显微镜及放射自显影观察^147Pm内照射诱发免疫细胞凋亡

对荧光涂料＾１４７Ｐｍ内照射人淋巴细胞血病细胞株Ｍｏｌｔ－４巨噬细胞株ＡＮＡ－１细胞诱发细胞凋亡进行了研究。估算了＾１４７Ｐｍ在不同阶段培养细胞中的辐射累积吸收剂量。通过荧光显微镜的形态观察，发现免疫细胞Ｍｏｌｔ－４和ＡＮＡ－１细胞在受和＾１４７Ｐｍ内照射作用后，可诱发明显的核断裂和核固缩，以及凋亡小体形成为特征的细胞凋亡。微观放射自显影研究表明，＾１４７Ｐｍ可通过免疫细胞膜，在细胞内呈亲膜性积聚     

用32P标记花粉放射自显影技术研究转基因水稻与几个野生近缘种的可交配性

通过对放射性标记的活度、引入方式、显影胶片和时间的比较,得出如下结论即用1.48×107Bq/L水培引入32P标记抗除草剂转基因水稻(Y003)花粉,将标记花粉授在剪颖未去雄的无芒稗(Echinochloa crusgallivar.mitis)、药用野生稻(Oryza officinalis)和杂草稻(Oryza sativa L.)的柱头上,3 h后剥取雌蕊固定在玻璃板上于暗袋内覆上乐凯400胶片进行自显影效果最好.结果表明,转基因水稻花粉管不能进入无芒稗花柱,不能完成受精;可在野生稻柱头上萌发、花柱内生长并到达花柱基部,但不能到达胚囊,也不能完成受精;可在杂草稻花柱内生长并到达胚囊.     

应用放射自显影术观察^99mTc—MIBI在大鼠甲甲状腺内的动态分布

报道了＾９９ｍＴｃ－ＭＩＢＩ在大鼠甲状腺内的动态分布。结果显示，甲状腺摄取＾９９ｍＴｃ－ＭＩＢＩ高峰在注药后３－６０ｍｉｎ，其前３ｍｉｎ主要与血供有关。１５－６０ｍｉｎ是腺体摄取的主要过程，为浓聚滞留时间，注药后６０ｍｉｎ内单位重量甲状腺组织摄取放射性大于同时间其它脏器和组织。放射自显影结果显示，在；甲状腺滤泡细胞周过部即上皮细胞及其周围银颗粒分布致密，而在滤泡腔内的胶质和滤泡间质内很少或基本未见     

靶向CD93分子探针制备及其生物学实验研究

CD93分子作为一种新型新生血管生成激活剂,有可能成为肿瘤监测的重要分子靶点,因此制备125I标记抗CD93单抗(125I-anti-CD93 mAb),研究其在荷瘤鼠体内生物学分布及磷屏显像特点,探讨其对A549肺癌靶向性及CD93阳性肿瘤监测的可行性。本文制备125I-anti-CD93 mAb及125I-IgG并进行鉴定;建立A549肺癌荷瘤小鼠模型,经尾静脉注射125I标记抗CD93单抗,并设125I-IgG为对照组,注药后不同时间进行生物学分布及磷屏放射自显影;肿瘤组织行HE染色及CD93免疫组织化学染色;采用统计软件对定量数据(x+s)进行统计学处理,组间数据用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果表明,125I-anti-CD93 mAb及125I-IgG标记率、放射性比活度、放化纯度分别为91.37%和90.24%,1096.44 MBq/mg和1082.88 MBq/mg,96.49%和94.82%,放置72 h后两标记物的稳定性仍>90%,两者间无统计学差异(生理盐水组P=0.93,t=0.09,血清组P=0.13,t=1.90)。荷瘤鼠生物学分布结果显示125I-anti-CD93 mAb主要经肝肾代谢,注射后48 h时肿瘤组织放射性摄取率为(6.42±0.71)%ID/g,T/NT(瘤/对侧肌肉)摄取比值为4.45±0.86,显著高于对照组125I-IgG组(2.45±0.33/1.71±0.24),P<0.05,t=3.07和P<0.01,t=5.10。动态全身磷屏自显影结果可见,24 h两组小鼠轮廓清楚,48 h时实验组肿瘤显像最清晰,肿瘤放射性摄取比(肿瘤/对侧肌肉)为3.34±0.18,明显高于对照组(1.62±0.19),P<0.01,t=6.52。免疫组化染色结果证实肿瘤高表达CD93。125I-anti-CD93 mAb制备简便,对A549肺癌组织靶向性好,有望成为CD93阳性肿瘤监测的新型分子探针。     

三种闪烁体在高速自显影中的荧光增敏效率的研究

在~3H-TdR细胞参入试验、~3H-TdR低高浓度两次细胞标记及细胞迁移示踪试验中,对三种闪烁体POPOP、PBD及PPO的不同浓度的荧光增敏效率进行了比较,结果表明,7.5％PPO的二甲苯闪烁液在样品曝光48h后增敏效果最佳,灵敏度比普通方法提高15-20倍,为提高显微自显影的效率提供了依据。     

帕金森病模型大鼠脑多巴胺D_2受体放射自显影、病理形态学及行为的联合观察

应用脑立体定位技术，建立稳定、可靠、重复性好、与人类帕金森病的病理及行为学改变相似的偏侧大鼠模型。在此基础上，应用１２５Ⅰ－ＩＢＺＭ对其进行脑内Ｄ２受体分布的放射自显影研究。６只帕金森病大鼠病侧纹状体／额叶皮质放射性计数比值为５．３２±０．３７，较健侧及对照组的比值明显升高（Ｐ＜０．０５），与病理形态改变符合性好、且其增高的数值与阿朴吗啡诱导旋转的转数呈正相关（ｒ＝０．９５６），印证了早期帕金森病时Ｄ２受体的上调效应。１２５Ⅰ－ＩＢＺＭ作为Ｄ２受体配基可以很好地反映脑内Ｄ２受体的分布及变化，为将ＩＢＺＭ用于早期帕金森病的临床影像诊断提供理论依据。     

[~3H]海轮碱Ⅱ在怀孕大鼠体内的整体放射自显影研究

海轮碱Ⅱ是一个较为理想的新的肌松剂。在前文基础上,本文用整体放射自显影技术对本品在怀孕大鼠体内的分布进行了研究。 1.方法 [~3H]海轮碱Ⅱ系中科院上海原子核所制备,放射性比活度为6Ci/mmol,放化纯度>90％。该药是2％乙醇水溶液,以生理盐水稀释后供静脉注射。取妊娠十八天的大鼠3只,尾静脉注射[~3H]海轮碱Ⅱ1mCi/kg(137μg/kg),分别于给药后2分、4小时及24小时将动物投入己烷-干冰(-78℃)溶液中速冻处死,     

~（75）Se－蛋氨酸在体内不同水平的转运和滞留

研究了７５Ｓｅ－蛋氨酸注入机体内在全身、脏器和细胞水平的转运和滞留过程：设计用整体测量装置测得的全身滞留方程为Ｒ（ｔ）＝２４．０６ｅ－０．６７９ｔ＋４１．２４ｅ－０．０４２ｔ＋１５．４１ｅ－０．００５ｔ。可见有速度不同的三个半滞留期Ｔ１＝１．０ｄ、Ｔ２＝１６．４ｄ、Ｔ３＝１３２ｄ，而在尿和粪中的排除都有快和慢两个组分，尿的Ｔ１＝０．６ｄ，Ｔ２＝９．８ｄ；粪的Ｔ１＝５．２ｄ，Ｔ２＝１３．２ｄ。进而运用脏器水平放射自显影和细胞水平放射自显影及荧光增敏放射自显影研究了７５Ｓｅ－蛋氨酸注入后在脏器和细胞水平的转运和滞留特性，观察到其蓄积依次为胰腺、肝脏、甲状腺、骨骼和骨髓，而在毛发中仅见痕量。从而提供了７５Ｓｅ－蛋氨酸在体内不同水平的滞留和作用依据。     

放射性示踪研究体内硒结合蛋氨酸的转运和滞留

以~(75)Se结合蛋氨酸作示踪,设计用整体测量装置探讨在摄入机体时的全身转运和滞留动态,得出滞留方程。进而运用脏器水平放射自显影和微观水平放射自显影,尤其是荧增敏放射自显影研究了~(75)Se结合蛋氨酸在脏器和细胞水平的转运和滞留特性,观察到~(75)Se结合蛋氨酸的蓄积放射性活度依次为胰腺,肝脏,甲状腺,以及骨骼和和骨髓,而在毛发中仅见痕量。从而提供了硒结合蛋氨酸在体内不同水平滞留和作用过程的依据。