枯草芽孢杆菌糖化型α-淀粉酶的研究(Ⅲ)——酶的催化作用

糖化型α-淀粉酶(BSA)作用于淀粉时与液化型α-淀粉酶(BLA)具有相同的基本特性——随机切割α-1.4葡萄糖苷键,产生小分子糊精、低聚糖。BSA能水解低聚糖(G7-G4),且对G3有一定的分解力,主要产物为G2和G。其水解淀粉程度比BLA彻底,同一蓝值时产生的还原端比BLA多。BSA不能切割1.6-葡萄糖苷键,作用于支链淀粉时残留异麦芽糖苷麦芽糖BSA还有一定的分子间糖基转移催化活性。     

脂肪代用品的研究Ⅱ——低DE值马铃薯淀粉麦芽糊精组成与性能研究

本文对采用耐高温α-淀粉酶水解得到的麦芽糊精测定了分支化度：耐高温α-淀粉酶生产的麦芽糊精分子线性化程度大于原淀粉；耐高温α-淀粉酶生产的麦芽糊精分子大小差别的范围大于原淀粉；耐高温α-淀粉酶生产的麦芽糊精颗粒大小均匀，具有较为明显的空洞，呈现海绵状的碎石结构，颗粒粒度显著下降，达到模拟脂肪口感的要求；耐高温α-淀粉酶生产的麦芽糊精经过水解和干燥晶形结构仍然存在，酶水解产物的结晶度14．6356％，对在此基础上对其性质进行了研究，得到了实际应用浓度的上下限：10％和40％。     

食品添加剂-β-环糊精的毒性

β-环糊精(Cyclodextrin简称β-CD)是由环状糊精葡萄糖基转移酶(Cyclodex-trin glycosyltransterase简称CGT酶)作用淀粉生成的7个葡萄糖以α-1,4糖苷键结合成的低聚糖。呈闭合简状结构,     

超高压对抗性糊精制备过程的影响

通过表征超高压条件(500 MPa, 10 min)对抗性糊精制备各阶段的结构及性质影响，探究难消化性更强的抗性糊精制备条件。结果表明，在高温(170℃, 2 h)、酸化(基于淀粉质量10%的盐酸)及超高压(500 MPa, 10 min)条件下，糊精化过程得到促进，结晶度降低的同时淀粉分子被水解成更小分子质量的短链糖和糊精片段。超高压在各阶段均促进酸热发挥作用，溶解度提升，达到80%左右，水分活度(AW)整体低于淀粉，影响食品稳定性的反应难以发生。键型结构方面，超高压处理后新形成的键型包括α-1,2、α-1,6、β-糖苷键、还原端等结构，新键型不利于再结晶和双螺旋结构的形成，故平均聚合度(DP)降低。高压与转苷酶联用对两者的转糖苷作用使得抗性糊精平均分支度(DB)大幅增加，远高于焦糊精，最高达到45.54%,此时难消化性最强。超高压助于α-淀粉酶淀粉分子解聚的基础上，也提供给了转苷酶更多的底物，间接增进酶反应效率。     

对β-环糊精改善发芽小麦粉面团特性的初步探讨

发芽小麦粉烘焙品质差。用于制面包时,面包表面为暗灰色,面包心粗糙,粘牙。其主要原因是发芽小麦α-淀粉酶活性增高,使面粉中淀粉粒被水解为双、单糖和糊精,数量增多,因而影响面团流变学特性和面包品质。本文应用β-环糊精添加到发芽小麦粉中,研究对其烘焙品质改善的可能性。环糊精是由Bacillus macerans淀粉酶对淀粉作用产生的一种不具还原端的环状糊精,它们由6-10个葡萄糖残基α-1,4糖苷键连接而成。由七个葡萄糖残基构成的环糊精叫做β-环糊精,也直接称为cycloheptaamylose,简称为CHA。1982年Weselake发现CHA连结在α-淀粉酶非     

Thermomonospora curvata淀粉分支酶的过量表达及其催化反应机理研究

本文以质粒pET-22b(+)为载体,Thermomonospora curvata淀粉分支酶基因(Tc SBE)为客体,采用构建重组大肠杆菌BL21(pET-22b(+)-TcSBE)的方法,实现TcSBE过量表达。目标分支酶经分离纯化,酶活达90.28 U/mg,并分别以长直链淀粉和短直链糊精为底物,研究了TcSBE作用淀粉机理。结果表明:TcSBE以链间反应模式催化长直链淀粉生成大分子的支链淀粉和小分子的低聚糖;以短直链糊精为底物时,TcSBE通过水解作用和转糖基作用同时作用于底物,反应初期,水解作用较强,将底物随机水解成聚合度不等的小分子直链糊精,所需供体链的最低聚合度(DP)为12,随着反应的进行,水解作用不断减弱,转糖基作用增强,将DP 3~8的短链糊精通过α-1,6糖苷键与产物相连接,使产物中分支侧链含量增加,反应12 h后,TcSBE作用产物的α-1,6糖苷键含量达到0.9 m M。     

一种测定α-淀粉酶活力的简捷方法

<正> α-淀粉酶(α-1,4-葡聚糖、4-葡聚糖水解酶,E.C.3.2.1.1).是以随机方式水解直链淀粉、支链淀粉和糖原中的α-1,4糖苷键的内切型淀粉酶。关于它的活力测定,酶制剂厂均根据轻工业部规定,用碘色减少的糊精化率方法,即在60℃pH6下,用定量酶液作用于2％可溶性淀粉溶液(20毫升),定时取出少量反应液与碘反应,以蓝色消失为反应终点(以标准糊精或铬黑T为标准色)。国外各酶制剂厂以及世界卫生组织也多沿用此类方法,只     

葡聚糖蔗糖酶及其家族在结构与功能上的研究进展

葡聚糖蔗糖酶是一类从蔗糖合成具有不同结构和物理化学性质的α-葡聚糖的酶工具。这些α-葡聚糖在食品、医学和生物材料等方面具有多种商业应用价值，特别是用于开发填充型甜味剂、益生元和面团改良剂。糖苷水解酶第70家族的其他亚家族的发现将反应底物扩展到淀粉和糊精，丰富了产物中糖苷键的种类和组成方式，扩大了合成新型α-葡聚糖的范围。序列比对和构象分析结果表明：通过对关键氨基酸残基进行突变或修饰，可有效改变产物的糖苷键构成、分子量和支化程度；GtfB、GtfC和GtfD是GtfA亚家族和糖苷水解酶第13家族的进化中间产物。该综述介绍了α-葡聚糖的分类和常见的糖苷水解酶第70家族成员，对酶构效关系方面的关键进展进行分析，并展望通过酶工程技术去理性设计更高效、更稳定、更个性化的α-葡聚糖合成工具。     

水溶性环状淀粉的开发与应用

水溶性环状淀粉是由直链糊精两端的葡萄糖分子以β-1，4糖苷键连接而成的环状结构的麦芽低聚糖，早在1891年就已被发现，是软化芽孢杆菌作用于淀粉的产物。其最显著的结构特点是存在一个立体手性疏水空腔，因其分子独特的环状空间结构和极稳定的化学性质，而具有多种用途，广泛用于医药、食品、化工等多种领域。     

α-淀粉酶在液态法白酒生产上的应用

α-淀粉酶在白酒生产中已经正常使用，该酶能水解α－1，4葡萄糖昔键，不能水解α－1，6葡萄糖昔键，但能越过它继续水解，将庞大的淀粉分子断裂成较小分子，使淀粉浆粕度急速降低，生成糊精及少量麦芽糖和低聚精。α-淀粉酶根据其应用最适温度不同，又分为中温α-淀粉酶和耐高温α-淀粉酶两种，前者适宜温度为70～85℃，后者为95～100℃。在液态法白酒生产中，原料糊化和蒸煮的目的，在于使植物组织彻底破裂，使淀粉颗粒充分吸水膨胀，同时起到杀菌作用。淀粉酶的存在，能迅速将糊化的淀粉催化水解生成糊精，以降低粘度，便于醪液的输送和…     

淀粉酶和糖化酶在泠冻食品中的应用研究

本实验采用α-淀粉酶对冷食品中的淀粉进行水解，淀粉经α-淀粉酶液化水解生成糊精和一些还原糖，并用糖化酶糖化使其生成葡萄糖。由于葡萄糖的增加降低了浆料的冰点，使冷食品组织状态更加完善。同时由于改变淀粉的分子结构，可以防止淀粉老化返生，消除淀粉味感；增加淀粉的用量，降低白砂糖，奶粉，奶油的用量，从而降低产品的生产成本。     

脱支和重结晶法制备抗性糊精的结构和功能特性分析

为探究脱支和重结晶法制备抗性糊精的结构和功能特性。以蜡质玉米和普通玉米淀粉为原料,采用脱支和重结晶法制备抗性糊精,对其形貌特征、结晶结构、热力学特性、官能团、糖苷键等变化进行表征,并探究其抗消化特性。结果表明：与原淀粉相比,两种抗性糊精热稳定性和溶解度显著增加（P<0.05）,具有良好的色泽。两种抗性糊精形貌粗糙、呈不规则形状的小碎片聚集体。蜡质玉米抗性糊精呈典型的A型结晶结构,普通玉米抗性糊精呈典型的B型结晶结构。由核磁共振波谱和红外结果可知,抗性糊精在制备过程中糖苷键断裂重新聚合形成新的抗消化糖苷键,无新的官能团产生。两种抗性糊精的抗消化性能力增加,且普通玉米淀粉制备的抗性糊精的慢消化和抗消化性能力最强。综上所述,脱支和重结晶法能提高抗性糊精的抗消化能力,将为抗性糊精的绿色制备工艺进而实现产业化生产提供新的思路和理论指导。     

真菌α淀粉酶生产菌株的筛选

在工业上,真菌α-淀粉酶通常是指一类由米曲霉生产的α-淀粉酶,它兼有液化和糖化能力。虽然它也是从淀粉分子内部切开α-1,4糖苷键,将淀粉转化为糊精和还原糖的酶类,但耐热性较细菌α-淀粉酶差,水解产物含有多量的麦芽糖和麦芽三糖,而葡萄糖的产量则很少。由于真菌α-淀粉酶具有特殊的性质,使它在淀粉糖工业和面包工业中有重要的应用价值。在淀粉糖工业中可以利用真菌α-淀粉酶代替大麦芽或β-淀粉酶作为糖化剂来制造麦芽糖含量达50～60%的高麦芽糖浆。在面包工     

罗伊氏乳杆菌葡萄糖基转移酶的生化特性及催化行为初探

葡萄糖基转移酶(glucosyltransferase, GTase)是一类可将α-1,4糖苷键转化为其他糖苷键的重要酶类,经其改性后得到的产物可作为一种新型的膳食纤维。该研究对来源于罗伊氏乳杆菌的葡萄糖基转移酶基因进行了异源表达,并对纯化后的GTase进行酶学性质分析及功能研究。结果表明,GTase的分子质量为105 kDa,在pH 7.0～8.5之间很稳定,4℃下保存12 h,残余酶活力仍保持在80%以上。最适温度和最适pH分别为40℃和5.0,在此条件下加入Ca²⁺,可使酶活力提高约2.1倍。最适反应条件下,GTase对麦芽糊精(DE12)的K_m和V_max分别为(1.18±0.21)g/L和2.6μg/s。麦芽糊精(DE12)经GTase在40℃反应72 h,产物中α-1,6糖苷键的提高了38.4%,易消化淀粉的含量降低了25.96%,慢消化淀粉及抗消化淀粉的含量分别提高了8.97%和17.76%。     

高温型α-淀粉酶制取麦芽糊精工艺条件的优化

研究了高温型α-淀粉酶水解玉米淀粉制备麦芽糊精的工艺，通过正交试验对其工艺条件进行了优化。结果表明，高温型α-淀粉酶制备麦芽糊精的最佳工艺为：温度90℃、时间80min、加酶量60U／g。     

α-淀粉酶水解玉米淀粉的研究

研究了中温和耐高温α-淀粉酶水解玉米淀粉制取糊精，确定了它们水解适宜的工艺条件。中温α-淀粉酶晟佳的工艺条件为温度84℃、时间20min、酶用量16U／g；而寸高温α-淀粉酶最佳的工艺条件为温度95℃、时间40min、酶用量15U／g。     

绿豆抗性糊精的结构表征及抗消化特性研究

为探究绿豆抗性糊精的结构表征及抗消化特性,本实验以绿豆淀粉为原料,采用酸热法制备绿豆抗性糊精,对其颗粒形态、晶型、偏振光、官能团、分子量、糖苷键等结构变化进行表征,并通过模拟体外消化探究其抗消化特性。结果表明:与绿豆淀粉相比,绿豆抗性糊精的结构为大小不一、形状不规则的碎片状,偏振光十字消失,化学基团相似,各官能团的峰位保持不变且没有新峰产生,晶型为非晶态结构,分子发生降解其重均分子量M_W为5.24×103 g/mol,糖苷键发生断裂且生成新的耐消化糖苷键;通过模拟体外消化实验表明:绿豆抗性糊精具有极强的抗消化能力,抗消化淀粉含量为92.28%。本实验旨在为功能性膳食纤维的开发提供理论与数据支持。     

Thermobifida fusca异淀粉酶的作用机制分析

异淀粉酶可水解支链淀粉的α-1,6糖苷键,为淀粉彻底水解所必须。使用仪器分析方法推断此类酶作用机制的研究国内未见报道。Thermobifida fusca异淀粉酶经镍离子亲和色谱纯化,以玉米支链淀粉(maize amylopectin,AP)为底物,结合体积排阻色谱、高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测器及氢谱核磁共振等仪器分析方法研究其作用机制。结果表明:AP分子的相对分子质量为2 812 000,水解反应2 h后生成两类葡聚糖组分,相对分子质量分别为760 000和7.2 000,比例为1∶4.4;IAM随机水解支链淀粉分子的α-1,6糖苷键,并可切断带有2-3个葡萄糖残基的侧链分支点生成麦芽糖和麦芽三糖,而对α-1,4糖苷键无作用。完全水解支链淀粉生成具有α或β型还原末端的直链淀粉链或麦芽寡糖,产物聚合度(degree of polymerization,DP)主要在15~35之间。IAM作用机理的研究可为其工业化应用奠定基础。     

GH77家族4-α-糖基转移酶在淀粉改性中应用的研究进展

糖苷水解酶（glycoside hydrolase,GH）77家族4-α-糖基转移酶（4-α-glucotransferase,4αGT）由于对α1→4糖苷键的独特作用而被广泛应用于淀粉改性中。4αGT通过分子间转糖基化将淀粉凝胶改性为热可逆淀粉凝胶,还进行分子内转糖基化生产大环糊精,而且经4αGT处理淀粉的慢消化特性有所改善。4αGT可与分支酶和淀粉蔗糖酶等协同制备更具抗性的α-葡聚糖产品。4αGT改性淀粉在低脂食品、甜味剂和冷冻食品中有着广泛的应用前景,其作为脂肪替代物和乳脂状增强剂添加到蛋黄酱、低脂涂抹酱、搅拌型和凝固型酸奶中,有潜力代替碳水化合物冷冻保护剂成为低甜度冷冻保护剂。全文综述了GH77家族4αGT改性淀粉在应用方面的进展与挑战,为4αGT的工业生产提供参考。     

高粱抗性糊精制备工艺的优化及其结构和体外消化特性研究

为探究酸热法制备高粱抗性糊精的最佳工艺,以高粱淀粉为原料,采用单因素及响应面试验优化制备工艺,并对其进行结构表征。结果表明：高粱抗性糊精的最佳制备工艺为盐酸添加量21%,热解温度188℃,热解时间84 min,在此条件下的抗性糊精含量为86.71%,色度为50.58;制得的抗性糊精呈现起伏不平、片层状的不规则结构,原有衍射峰完全被破坏,形成了重结晶峰,化学基团无明显变化且各官能团峰位与高粱淀粉特征峰相似,分子降解后抗性糊精的M_w为6.1×10³ g/mol,经糖苷键断裂及小分子重聚合反应后,抗性糊精同时拥有α和β两种首旋异构体,使得高粱抗性糊精具有良好的分子特性。此外,通过模拟体外消化实验结果显示其抗消化淀粉含量可达93.61%,表明其具有良好的抗消化特性。综上,利用酸热法制备的抗性糊精可以使高粱抗性糊精的分子量减小且抗消化能力更强,同时也为高粱抗性糊精的高效制备提供新的理论指导。