大粒车前子多糖酸碱稳定性及热稳定性研究

探讨大粒车前子多糖在不同条件下的稳定性。从大粒车前子中提取、分离和纯化得到均一多糖(Plantago asiatica L. polysaccharide,PLP),考察PLP 经酸碱(HCl 溶液或NaOH 溶液)处理后其表观黏度、粒度和单糖组成等方面的变化,并采用热重- 差热同步分析仪(TG-DTA)考察PLP 的热稳定性。结果表明：酸碱处理对PLP 表观黏度、粒度和单糖组成等方面有一定影响。酸处理后(pH 值约为2.7),PLP 表观黏度和粒度增加,阿拉伯糖和木糖的物质的量的比值变化不大;碱处理后(pH 值约为11.4),PLP 表观黏度和粒度减小,木糖比例有一定程度下降。PLP 原液加热后再冷却,粒度增大。热稳定性分析表明PLP 在250℃开始发生降解,550℃基本结束。     

大粒车前子多糖对脂多糖刺激RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用

采用脂多糖构建RAW264.7巨噬细胞炎症模型,研究大粒车前子多糖的抗炎作用。培养巨噬细胞RAW264.7,利用脂多糖构建细胞炎症模型,中性红吞噬实验检测细胞吞噬活性;酶联免疫吸附法检测车前子精制多糖（Plantago asiatica L. crude polysaccharide,PLCP）处理前后细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosisfactor-α,TNF-α）、白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）和IL-6的分泌量,Griess反应测定RAW264.7细胞释放NO水平。结果表明,PLCP可显著抑制RAW264.7炎症细胞的吞噬活性,降低炎症细胞因子TNF-α、IL-10和IL-6的分泌量及NO的释放量。     

大孔吸附树脂法去除车前草粗多糖中的蛋白质

研究AB-8大孔树脂法去除车前草粗多糖中蛋白质的适宜条件。采用动态吸附和解析实验对树脂纯化工艺进行优化。结果表明适宜工艺条件为:上样液浓度40mg/mL,上样流速0.5 mL/min,上样液pH值7.0;以蒸馏水为洗脱剂,洗脱速度2 mL/min,洗脱体积2.5BV(1BV=20 mL)。纯化后AB-8大孔吸附树脂对车前草粗多糖中的蛋白具有较高的去除效果,蛋白去除率为84.83%,多糖保留率为88.32%。     

微波技术用于车前子多糖的提取

为保持车前子多糖的生物活性,提高得率,采用微波技术提取车前子多糖。通过正交试验确定了微波提取的最佳工艺参数,用该法提取所得车前子多糖采用蒽酮-硫酸法测定其多糖含量。结果表明,微波提取车前子多糖的最佳工艺参数为:车前子与水的质量比为1:15,在微波强度为60%的条件下提取65s。与其它方法比较,微波提取方法时间短,得率高,是车前子多糖提取的一种优选方法。     

车前草多糖的脱色工艺研究

以脱色率和多糖保留率为指标,采用活性炭和大孔吸附树脂两种方法对车前草多糖脱色。结果表明,活性炭脱色的最佳条件为：在60℃下,加入0．75％（m／V）的活性炭,脱色30min,在此工艺条件下脱色率为76．22％,多糖保留率为65．31％。大孔吸附树脂脱色的最佳条件是：以蒸馏水为洗脱剂,样pH值为8．0,洗脱流速为2mL／min,洗脱液体积为3BV（1BV=20mL）,在此工艺条件下脱色率为79．78％,多糖保留率为89．76％。大孔吸附树脂脱色效果优于活性炭脱色效果。     

大粒车前子麸壳多糖的分离纯化及部分理化性质

以大粒车前子麸壳为研究对象,提取水溶性多糖组分并对其部分理化性质进行分析。车前子麸壳水提粗多糖经过SephacrylTMS-400 HR葡聚糖凝胶柱得到纯化的多糖组分（polysaccharide from bran of Plantago asiatica L.,PBPL）。结果显示：PBPL为均一多糖,平均分子质量为619 651 D,糖含量、蛋白质含量和糖醛酸含量依次为（71.420±0.007）%、（6.07±0.02）%、（20.74±0.05）%。PBPL含有鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖及半乳糖5 种单糖,物质的量比为2.24∶1.87∶1.00∶3.24∶3.49,糖醛酸主要是半乳糖醛酸。红外光谱中有多糖、蛋白、糖醛酸以及β-吡喃糖环特征吸收峰。     

Chemical characteristics and antioxidant activities of polysaccharide purified from the seeds of Plantago asiatica L.

BACKGROUND: A water‐soluble polysaccharide from the seeds of Plantago asiatica L. (P. asiatica L. polysaccharide, PLP) was extracted with hot water and purified by gel filtration chromatography. The chemical characteristics of PLP were determined by high‐performance gel permeation chromatography (HPGPC) and Fourier transform infrared (FTIR) spectroscopy. In addition, the antioxidant activities of PLP in vitro were evaluated using various test systems, including scavenging of 1,1‐diphenyl‐2‐picryl‐hydrazyl (DPPH) radicals, scavenging of superoxide radicals generated by 1,2,3‐phentriol autoxidation, scavenging of hydroxyl radicals and inhibition of lipid peroxidation. RESULTS: The molecular weight of PLP was determined by HPGPC to be about 1894 kDa. PLP contained 29.2 g kg^?1 protein and 145.8 g kg^?1 uronic acid. The FTIR spectrum of PLP also revealed typical characteristics of a polysaccharide containing protein and uronic acid. Moreover, the results showed that PLP possessed antioxidant activities, but lower than those of ascorbic acid. CONCLUSION: PLP is an acid protein‐bound polysaccharide of high molecular weight, but its structure needs further study. The present results suggest that PLP could potentially be used as a natural antioxidant. Copyright © 2009 Society of Chemical Industry     

大粒车前子多糖提取工艺优化及其理化性质测定

采用水提、醇沉法从大粒车前子中提取得到多糖提取物,然后经Sevag 法脱蛋白、SephacrylTM S-400 HR 葡聚糖凝胶柱层析分离纯化,得到PLCP-1、PLCP-2 和PLCP-3 三个组分。应用高效凝胶渗透色谱法等方法测定PLCP-2 组分纯度及其理化性质;进一步采用单因素试验结合二次响应面法对车前子多糖提取工艺进行优化。结果表明：PLCP-2 为均一多糖(PLP),测得其相对分子质量为1849268、糖含量87.3%、蛋白含量1.2%、糖醛酸含量14.7%;通过岭脊分析获得最佳提取工艺条件,结合实际操作将最佳条件修正为提取温度99℃、料液比1:30(g/mL)、提取时间5.45h,实际测得多糖得率为13.79%,与理论预测值比较接近。该工艺经济、简约、可行性强。     

大粒车前子多糖酸水解产物的分析

经水提、醇沉、Sevag除蛋白后得到精制大粒车前子多糖（Plantago asiatica L. polysaccharide,PLP）,采用0.3 mol/L三氟乙酸对PLP进行部分酸水解。建立超高效液相色谱-蒸发光散射检测器技术筛选较优水解条件的方法,同时运用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用法分析产物。结果表明：车前子多糖除蛋白后多糖含量为68.56%。在水解温度90 ℃、水解时间1.5 h条件下,能够得到比较多的水解产物,经超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用分析鉴定,水解产物中含有单糖、二糖至低聚六糖,并且存在戊糖和己糖相互连接的片段,但并未发现多个己糖相互连接的片段。     

大粒车前子苯乙醇苷提取物的精制及降血尿酸作用

研究了大孔吸附树脂对大粒车前子苯乙醇苷粗提物的富集纯化效果,并探讨了苯乙醇苷精制物调节高尿酸血症大鼠的血尿酸水平的作用。经过比较HPD400、HPD400A等9种树脂苯乙醇苷的吸附解吸效果,最终选择HPD400A树脂来精制苯乙醇苷提取物。当层析树脂柱径高为1.00 cm×33.50 cm时,优化后的富集纯化条件为:粗提物上样液质量浓度为10.3 mg/m L,吸附流速为2.7 m L/min,解吸流速为3.5 m L/min,解吸剂为30%乙醇水溶液,解吸剂体积为400 m L。从500 g车前子原料中可得到总苯乙醇苷含量达80%的精制物3.07 g,得率为0.61%。经大鼠经口给药实验表明,苯乙醇苷粗提物和精制物均能显著降低血尿酸水平和黄嘌呤氧化酶活性,且与模型组相比差异显著(p<0.01)。      

响应面法优化超声辅助提取车前草中的熊果酸

目的：优化超声辅助提取车前草中的熊果酸工艺。方法：在单因素试验基础上,采用响应面法,以熊果酸的提取率为响应值,通过回归分析各工艺参数与响应值之间的关系,并由此预测最佳的工艺条件。结果：超声提取的最佳条件为提取温度75℃、乙醇体积分数90%、功率480W、液固比5:1(mL/g)、提取时间25min,该条件下提取3次,熊果酸的提取率达到0.144%。结论：响应面法优化超声辅助提取车前草中熊果酸的预测准确、方便,所得的最佳提取工艺条件高效、可行。     

车前籽水溶性膳食纤维的提取及其性能研究

采用水提法和醇析法提取车前籽中的水溶性膳食纤维(SDF),获得车前籽SDF的最佳提取条件。并对车前籽SDF的溶解性、膨胀性、持水性和黏度等性能进行研究。结果表明:车前籽SDF的最佳提取工艺条件是:车前籽粒度60目、提取温度90℃、提取时间20min、加水量20倍。乙醇醇析的最佳条件为:乙醇加量4倍,乙醇浓度95%,醇析时间50min。车前籽SDF具有良好的水溶性:在37℃、60℃、80℃、100℃中静止状态下完全溶解的时间分别为2.5h、80min、50min和20min。车前籽SDF的糖溶性和盐溶性较差。车前籽SDF在模拟胃液、小肠、大肠环境pH中的膨胀力分别为2mL/g、8mL/g、8mL/g,持水力分别为13.36g/g、22.69g/g和22.90g/g。1.5%、2.0%和2.5%浓度的车前籽SDF的黏度分别为25.6MPa.s、34.2MPa.s和44.1MPa.s。     

车前保健可乐的研制

对车前保健可乐的加工工艺及产品配方进行了初步研究,研制出了营养丰富,风味独特,富含水溶性膳食纤维的保健可乐     

马齿苋、车前草复合保健饮料的研制及其抗氧化作用研究

以马齿苋、车前草为主要原料,添加柠檬酸、蔗糖、蜂蜜等辅料,经过筛选配方和优化工艺,研制了马齿苋、车前草复合保健饮料;并采用化学模拟体系测定了该饮料抑制脂质体过氧化及清除·OH、O2·和DPPH·的能力。结果表明：主辅料用量均对该饮品的质量有较大影响,最佳配方为1000ml 饮料中含干马齿苋6.67g、干车前草 8.33g、白砂糖60g、蜂蜜12g、柠檬酸1.4g。马齿苋、车前草复合保健饮料对自由基的清除能力较强,其清除·OH、O2·、DPPH·和抑制脂质体过氧化的IC50 分别为96.2、201、4.76 和15.34mg/L(以总黄酮计) 。     

车前草粗多糖对环磷酰胺所致免疫低下小鼠的免疫增强作用

为研究车前草粗多糖对环磷酰胺所致免疫低下小鼠的免疫增强作用,自车前草中提取粗多糖,将昆明小鼠分为正常组、模型组、车前草粗多糖高、中、低剂量组及左旋咪唑组,每组10只。除正常组外,其余小鼠通过腹腔注射环磷酰胺(80 mg/kg)造成免疫低下模型。造模成功后,车前草粗多糖高、中、低剂量组分别灌胃900、300、100 mg/kg的车前草粗多糖;左旋咪唑组灌胃25 mg/kg;正常及模型对照组小鼠灌胃等体积的蒸馏水。给药21 d后,考察小鼠血清中溶血素水平,炭粒廓清功能及迟发型变态反应,监测小鼠体重并计算其脾脏与胸腺指数。结果表明,适宜浓度的车前草多糖能明显提高免疫低下小鼠的廓清指数,增强其炭粒廓清功能,增强免疫低下小鼠迟发型变态反应,提高其血清中溶血素水平,且对模型小鼠的体重减轻、脾脏与胸腺萎缩有缓解作用。本研究表明,车前草粗多糖可增强免疫低下小鼠的免疫功能。     

库拉索芦荟中芦荟多糖提取方法的比较

对库拉索芦荟中芦荟多糖的3种常用提取方法的提取条件分别进行研究,得到热水浸提法、微波辅助法和超声波辅助法的最佳提取条件,并分别在最佳提取条件下比较了3种方法对芦荟多糖提取率的影响。结果表明,超声波辅助法最有利于库拉索芦荟中芦荟多糖的提取,超声波辅助法的最佳提取条件为超声波功率800 W,超声波时间9 min,料液比为1∶30(g/mL),芦荟多糖的提取率为5.42%。超声波辅助法芦荟多糖的提取率分别比热水浸提法和微波辅助法提高了4.43%和3.83%。     

桑叶多糖的含量测定

用蒽酮-硫酸比色法测定了桑叶中多糖的含量。测定波长620nm,多糖换算因子f=3.07;在10～60μg/ml范围内吸收度与被测物含量呈良好的线性关系,r=0.999005;多糖的平均回收率为98.81%,RSD为2.08%(n=5)。测定结果表明,10月份桑叶中多糖含量最高。本法简便、准确、重现性好,可作为桑叶中多糖的含量测定方法。