酪蛋白糖巨肽分离条件的研究

探讨了利用了(NH4)2SO4分级沉淀、三氯乙(TCA)纯化酪蛋白的胃蛋白酶水解物中 CGMP的工艺.结果表明,经过20%和65%饱和度的硫酸铵沉淀胃蛋白酶水解物,质量分数为12%的TCA纯化得到的样品,其纯度为91.2%.整个工艺路线简便、快捷、成本较低,适合工业化生产.     

酪蛋白糖巨肽的生物学活性

酪蛋白糖巨肽(Caseino Glycomacropeptide,简称CGMP)主要是κ-酪蛋白经凝乳酶降解产生的一类含有糖链的多肽,具有许多的生理活性功能和独特的营养特性,可广泛地应用于保健食品和医药品.综述了CGMP的一些生理功能研究进展以及其生产制备工艺的现状,同时也介绍了它在食品和医药品中的应用前景.     

酪蛋白糖巨肽对小鼠腹腔吞噬细胞及肠黏膜免疫细胞的影响

目的：由于酪蛋白糖巨肽（casein glycomacropeptide,CGMP）具有许多生理活性功能和独特营养特性,研究CGMP对小鼠腹腔免疫细胞以及肠黏膜屏障的影响可为其应用于保健食品和医药品提供科学依据。方法：以96 只健康昆明雌性小鼠为实验动物,利用流式细胞仪、HE染色和免疫荧光标记技术,分别检测分析了灌胃不同剂量的CGMP（30 μg/d和120 μg/d）对实验小鼠腹腔吞噬细胞吞噬活性以及肠上皮内淋巴细胞（intraepithellallymphocytes,IEL）和固有层IgA+浆细胞数量的影响,探讨CGMP改善小鼠腹腔吞噬细胞和肠黏膜屏障功能的作用。结果：CGMP能够显著增加小鼠腹腔吞噬细胞的吞噬能力,灌胃时间越长,作用效果越明显;其中灌胃CGMP的剂量为120 μg/d的作用效果优于30 μg/d剂量组。且与对照组相比,灌胃CGMP组小鼠十二指肠上皮内淋巴细胞数和固有层IgA+浆细胞数量显著增加（P ＜ 0.01）。结论：CGMP可以增强小鼠腹腔吞噬细胞吞噬功能,诱导肠道黏膜免疫应答,增强肠黏膜免疫屏障功能,有望开发为抑制肠道炎症的功能性食品添加剂。     

乳源酪蛋白糖巨肽改善炎症性肠病的研究进展

乳源酪蛋白糖巨肽(CGMP)主要是κ-酪蛋白经凝乳酶降解产生的一类含有糖链的多肽,具有许多的生理活性功能和独特的营养特性,可广泛地应用于保健食品和医药品。本文首先概括CGMP的来源、结构特点及其研究开发现状,从炎症性肠病(IBD)的免疫病理机制的角度,对本实验室和国外在CGMP调理、改善和治疗IBD的相关研究进行系统地介绍,提出CGMP在一定程度上为IBD的生物免疫治疗提供了新的途径以及展示其广阔的开发前景。     

乳来源的酪蛋白糖巨肽(CGMP)的开发概况

酪蛋白糖巨肽 (CGMP)主要是κ 酪蛋白经凝乳酶降解产生的一类含有糖链的多肽 ,具有许多的生理活性功能和独特的营养特性 ,可广泛地应用于保健食品和医药品。文章综述了CGMP的一些生理功能进展以及其生产制备工艺的现状 ,同时也介绍了它在食品和医药品中的应用前景。     

乳源酪蛋白糖巨肽改善小鼠溃疡性结肠炎的研究

利用恶唑酮复制小鼠溃疡性结肠炎(UC)以研究乳源酪蛋白糖巨肽(CGMP)对溃疡性结肠炎的影响。空白对照组小鼠仅饲喂普通鼠食,模型对照组与3 个CGMP 组灌注恶唑酮诱导溃疡性结肠炎,诱导建模后对3 个CGMP组小鼠分别灌胃低、中、高剂量的CGMP(剂量分别为5、50、500mg/(kg bw·d)),连续灌胃5d。期间记录小鼠每天体质量变化,末次灌胃后检测小鼠血清中二胺氧化酶(DAO)活性以及结肠中髓过氧化物酶(MPO)活性和丙二醛(MDA)含量,并观察结肠组织形态。结果表明：低、中、高剂量CGMP 均可在一定程度上改善恶唑酮诱导的小鼠溃疡性结肠炎病症,尤其以中剂量CGMP 的作用较为明显,因此证实CGMP 作为一种营养手段调理溃疡性结肠炎具有很好的前景。     

采用盐析及Q Sepharose FF分离纯化酪蛋白胃蛋白酶水解物中的酪蛋白糖巨肽

本文探讨了利用了（NH4）2SO4分级沉淀、透析脱盐及Q—Sepharose FF层析分离纯化酩蛋白的胃蛋白酶水解物中的CGMP的工艺。结果表明：采用60％饱和度的（NH4）2SO4盐析，可从上清液中直接回收高纯度CGMP，得率为0．71％。低饱和度的（NH4）2SO4可有效脱除杂蛋白。脱盐粗提物CGMP Q—Sepharose FF层析条件为：pH8．5、20mmol／L Tris缓冲液平衡上样，用含0．3mol／L NaCl、20mmol、pH7．1的Tris缓冲液洗脱：浓缩物最大上样量为34．2mg蛋白／ml树脂。利用优化的工艺对水解液层析纯化，纯化产物得率约为2．19％（以酪蛋白汁），总结合态唾液酸回收率为87．4％（以酶解液中的唾液酸汁），糖基化度可提高到0．472以上。整个工艺路线简使、快捷、成本较低，适合工业化生产。     

乳源酪蛋白糖巨肽对溃疡性结肠炎小鼠MUC2表达的影响

目的： 研究酪蛋白糖巨肽(CGMP)对溃疡性结肠炎 (UC)小鼠结肠黏蛋白MUC2表达的影响,从而进一步探讨CGMP对UC的改善效果。方法：Balb/c 实验小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、CGMP组和SASP(柳氮磺胺吡啶)治疗组。对模型对照组、CGMP组和SASP组利用OXZ灌肠方法建立UC模型,诱导建模后同时给予CGMP组灌胃CGMP溶液(剂量为50mg/(kg ·d))以及SASP组灌胃SASP溶液(剂量为40mg/(kg ·d)),连续灌胃5d。期间记录小鼠每天体质量变化,进行疾病活动指数 (DAI),末次灌胃后处死小鼠,分离结肠进行组织损伤评分并制作石蜡切片,分别进行HE染色和MUC2免疫组化染色。结果：CGMP可有效缓解溃疡性结肠炎小鼠的一般状态,同时显著降低小鼠结肠的大体形态损伤指数,HE染色结果表明CGMP可以维持小鼠肠黏膜上皮细胞的完整,免疫组化结果证实了CGMP可以显著促进小鼠肠黏膜MUC2的分泌。结论：CGMP可以显著促进小鼠结肠MUC2的表达,通过维系肠黏膜的屏障作用来减缓炎症。     

超滤法纯化酪蛋白凝乳酶水解物中的酪蛋白糖巨肽

研究超滤法分离纯化了(CGMP)的条件,得到超滤的最佳条件是在室温下,压差为0.02 MPa,浓缩比为8.通过此方法得到比较纯的CGMP,蛋白回收率为1.77%,糖基化程度(唾液酸/蛋白质)为70.1μg/mg,并且此方法适用于工业化生产.     

超滤法纯化酪蛋白凝乳酶水解物中的酪蛋白糖巨肽

酪蛋白糖巨肽(CGMP)是蛋白酶酶解κ-酪蛋白得到的C末端亲水性糖肽,具有多种生理功能.研究了超滤法分离纯化CGMP的条件,得到超滤的最佳条件是在室温下,压差为0.02MPa,浓缩比为8.通过此方得到了比较纯的CGMP,蛋白回收率为1.77%,糖基化程度(唾液酸/蛋白质)为70.1 mg/g,并且此方法适用于工业化生产.     

燕麦β-葡聚糖对2型糖尿病大鼠肠黏膜屏障的影响

目的:探究燕麦β-葡聚糖对2型糖尿病大鼠肠黏膜屏障的影响。方法:雄性SD大鼠高脂饲料喂养4周,腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立2型糖尿病模型,成模后随机分为模型对照组和燕麦β-葡聚糖低、中、高剂量组。低、中、高剂量组由基础饲料添加燕麦β-葡聚糖至其质量分数分别为0.275%、0.550%、1.100%,模型对照组和正常对照组均以基础饲料喂养。10周后,测定其空腹血糖、肠道菌群以及结肠β-防御素-2、分泌型免疫球蛋白A(secretory immunoglobulin A,s Ig A)、紧密连接蛋白Occludin含量。结果:高剂量组较模型对照组血糖水平显著降低(P0.05);燕麦β-葡聚糖各干预组结肠紧密连接蛋白Occludin的表达水平显著高于模型对照组(P0.05),β-防御素-2水平显著低于模型对照组(P0.05),结肠s Ig A水平与模型对照组之间的差异不显著(P0.05);中、高剂量组结肠大肠杆菌数量上升幅度减小(P0.05),燕麦β-葡聚糖各干预组双歧杆菌、乳酸杆菌数量上升幅度增大(P0.05)。结论:燕麦β-葡聚糖可以改善2型糖尿病大鼠肠黏膜机械屏障和生物屏障的损伤,起到保护肠黏膜屏障的作用。     

酪蛋白糖巨肽的分离纯化研究

酪蛋白糖巨肽(CGMP)主要是-酪蛋白经凝乳酶降解产生的一类含有糖链的多肽,具有许多的生理活性功能和独特的营养特性,可广泛地应用于保健食品和医药品。对酪蛋白糖巨肽的适合于工业化生产的分离纯化条件进行更深层次的研究。     

酪蛋白糖巨肽分离纯化方法的研究进展

酪蛋白糖巨肽(CGMP)主要是κ-酪蛋白经凝乳酶降解产生的一类含有糖链的多肽,具有许多的生理活性功能和独特的营养特性,可广泛地应用于保健食品和医药品。本文对酪蛋白糖巨肽的来源及结构作了简要概括,对其分离纯化方法及进展作出了详细论述。     

乳源酪蛋白糖巨肽对溃疡性结肠炎小鼠肠道菌群多样性的影响

研究乳源酪蛋白糖巨肽（casein glycomacropeptide,CGMP）对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）小鼠肠道菌群多样性的影响,从肠道菌群角度探讨乳源CGMP改善溃疡性结肠炎与肠道菌群变化关系的可能机制。恶唑酮（oxazolone,OXZ）诱导小鼠UC模型,设立正常对照组、模型对照组、乳源CGMP组（50 mg/（kg·d））和柳氮磺胺吡啶（salazosulfapyridine,SASP）治疗组（40 mg/（kg·d））,其中正常对照组和模型对照组灌胃相应剂量的生理盐水,连续灌胃7 d。利用Ion Torrent PGM技术检测实验期间小鼠肠道菌群多样性的变化。UC小鼠肠道菌群结构失调,其肠道菌群多样性降低以及优势菌群比例下降。对测序序列通过主成分分析（principal componentanalysis,PCA）、UniFrac等统计分析发现,UC小鼠肠道中厚壁菌门（Firmicutes）和拟杆菌门（Bacteroidetes）的丰度降低而放线菌门（Actinobacteria）和变形菌门（Proteobacteria）的丰度升高。乳源CGMP干预后UC小鼠肠道菌群多样性增加,厚壁菌门和拟杆菌门的相对比例高于模型组,提示乳源CGMP可通过调节失衡的肠道菌群来改善UC。     

利用TGase 结合微滤技术从乳清粉中分离纯化C G M P 的研究

利用谷氨酰胺转氨酶(TGase)结合微滤技术从乳清中分离纯化酪蛋白糖巨肽(CGMP)。结合微滤技术考察底物浓度、TGase浓度、pH值、温度和反应时间对分离纯化的影响。通过实验得出最佳酶反应条件为底物浓度8%、TGase酶浓度7U/g、pH6.5、温度39℃、反应时间80min、微滤浓缩循环6次,最后经微滤可得到纯度为70%左右的CGMP。     

荷花粉多糖显著减轻氟尿嘧啶所致小鼠肠道黏膜屏障损伤

目的：探讨不同干燥方法提取的荷花粉多糖（lotus bee pollen polysaccharides,LP）对5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-Fu）所致小鼠肠道黏膜损伤及功能失调的改善作用。方法：分别采用热风干燥与真空脉动干燥的方法对荷花粉进行干燥,并提取多糖。建立5-Fu小鼠肠黏膜炎模型,随机分组、给药。炭末推进法测定小鼠的肠推进率,并测量小鼠结肠长度;计算全肠道派氏集合淋巴结（Peyer’s patches,PPs）的面积;取小鼠结肠组织进行病理组织切片观察;生物化学方法检测PPs匀浆上清液中活性氧（reactive oxygen species,ROS）和谷胱甘肽（glutathione,GSH）含量、过氧化氢酶（catalase,CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力;酶联免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法检测PPs匀浆上清中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的含量。结果：与正常组相比,5-Fu可显著抑制小鼠肠道的推进功能（P＜0.05）。热风干燥与真空脉动干燥样品中提取的LP能减缓5-Fu所致的结肠缩短（P＜0.05）,显著或极显著增加小鼠肠道PPs的面积（P＜0.05或P＜0.01）;此外,与5-Fu组比较,LP与5-Fu联合应用能明显促进小鼠肠道的推进功能（P＜0.05）,升高GSH含量、CAT和GSH-Px活力（P＜0.01或P＜0.05）,明显减少TNF-α含量（P＜0.05或P＜0.01）;结肠病理组织切片显示LP能明显减轻5-Fu所致的小鼠结肠黏膜上皮杯状细胞丢失、隐窝深度变浅及炎症细胞浸润。结论：LP能够减轻5-Fu所致小鼠结肠黏膜炎,改善5-Fu所致的肠道传输功能失调,保护5-Fu对肠道的氧化损伤,其中真空脉动干燥样品中提取的花粉多糖效果更好。     

酪蛋白糖巨肽通过树突细胞发挥免疫调节作用的初步研究

研究用酪蛋白糖巨肽(CGMP)刺激体外培养的小鼠骨髓源树突细胞,观察CGMP对树突细胞成熟的影响,初步探讨CGMP作为功能性食品对免疫的调节作用。实验选用6～8周雄性C57BL/6小鼠,分离培养小鼠骨髓细胞,用重组小鼠白细胞介素-4 (rmIL-4)、重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)诱导其分化,在培养的第6天,分别加入RPMI1640完全培养基作为空白对照, 脂多糖(LPS)为阳性对照和0.1、1、10μg/mL的CGMP 3个实验剂量。培养至第8天收集细胞,进行三色荧光标记,用流式细胞仪检测细胞表面标志：CD11c、CD80、CD86、MHC-Ⅱ。另一方面将第8天的树突状细胞(DCs)和T淋巴细胞共孵育进行混合淋巴细胞反应,96h后用Cell Counting Kit-8 (CCK-8)检测T淋巴细胞的增殖。结果表明：3个剂量的CGMP均具有刺激DCs成熟的作用,其中CGMP为1μg/mL时,DCs的各种成熟标志均达到最高水平,其中,CGMP对MHC-Ⅱ的刺激作用最为强烈,而MHC-Ⅱ在DCs对外源抗原的提呈中发挥重要作用;混合淋巴细胞反应结果显示各个不同浓度CGMP作用的DCs均具有不同程度的刺激T淋巴细胞增殖的能力,并且DCs:T为1:10时T淋巴细胞的增殖作用最明显。     

酪蛋白糖巨肽对二甲肼干预的大鼠细胞因子网络变化的研究

目的：探讨不同剂量酪蛋白糖巨肽（casein glycomacropeptide,CGMP）干预二甲肼处理的大鼠时,外周血和结肠组织内细胞因子水平的变化情况,从而推断CGMP对二甲肼处理的大鼠细胞因子网络的影响。方法：60 只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、CGMP低剂量组、CGMP中剂量组和CGMP高剂量组。除正常组外,对每只大鼠每周腹腔注射二甲肼,剂量为30 mg/（kg•周）,同时,3 个剂量CGMP组注射二甲肼的同时每天灌胃CGMP,剂量分别为10、50、100 mg/（kg•d）。15 周后,处死大鼠,取其结肠组织和血清,首先检测结肠末端异型隐窝灶个数,然后利用液相芯片法检测结肠组织和血清中的细胞因子的表达水平。结果：乳源CGMP对大鼠体质量影响没有显著性差异,乳源CGMP对大鼠内毒素和活性氧簇的水平具有显著的抑制作用,其抑制作用呈剂量依赖趋势。乳源CGMP可显著抑制异型隐窝灶的形成,且异型隐窝灶个数呈剂量依赖性降低。乳源CGMP可以显著抑制大鼠体内Th1/Th2类细胞因子的失衡,且呈剂量依赖趋势。结论：乳源CGMP具有改善二甲肼处理的大鼠结肠组织损伤的功能,其机制为乳源CGMP可以有效抑制二甲肼处理的大鼠体内异型隐窝灶的形成,并呈剂量依赖性,研究显示乳源CGMP可以下调大鼠体内IL-4等Th2类细胞因子的异常升高,促进IL-2等Th1类细胞因子的分泌,改善大鼠体内处于失衡状态的细胞因子网络。