螺旋藻抗氧化肽的制备及其体外活性研究

为了制备高活性的螺旋藻抗氧化肽,通过优化木瓜蛋白酶酶解条件,并结合超滤、凝胶过滤层析等方法,从钝顶螺旋藻酶解液中分离、纯化抗氧化肽,并对其体外抗氧化活性进行研究。结果表明,木瓜蛋白酶酶解钝顶螺旋藻的最适工艺条件为:酶底比1.6%、温度60℃、水解时间9 h、pH7.0。相对分子质量范围为0到3 000的螺旋藻酶解液的抗氧化活性最高。该部分酶解液通过凝胶层析纯化获得更高活性的螺旋藻抗氧化肽,其DPPH·清除率、OH·清除率和总抗氧化能力分别相当于质量浓度为(1.01±0.07)×10-2、(4.77±0.28)×10-1、(3.79±0.81)×10-2mg/mL的抗坏血酸溶液,从而为螺旋藻抗氧化肽用于抗氧化功能食品和生物制药方面奠定基础。     

螺旋藻抗氧化肽的制备及其体外活性研究

为了制备高活性的螺旋藻抗氧化肽,通过优化木瓜蛋白酶酶解条件,并结合超滤、凝胶过滤层析等方法,从钝顶螺旋藻酶解液中分离、纯化抗氧化肽,并对其体外抗氧化活性进行研究。结果表明,木瓜蛋白酶酶解钝顶螺旋藻的最适工艺条件为:酶底比1.6%、温度60℃、水解时间9 h、pH7.0。相对分子质量范围为0到3 000的螺旋藻酶解液的抗氧化活性最高。该部分酶解液通过凝胶层析纯化获得更高活性的螺旋藻抗氧化肽,其DPPH·清除率、OH·清除率和总抗氧化能力分别相当于质量浓度为(1.01±0.07)×10-2、(4.77±0.28)×10-1、(3.79±0.81)×10-2mg/mL的抗坏血酸溶液,从而为螺旋藻抗氧化肽用于抗氧化功能食品和生物制药方面奠定基础。     

乳清蛋白酶解物的抗氧化活性研究

研究在不同的酶种类、[E/S]、酶解时间下,乳清蛋白酶解物的抗氧化活性。结果表明,在胃蛋白酶37℃,[E/S]为0.15%,水解温度水解时间2 h;胰蛋白酶[E/S]为0.4%,水解温度50℃,水解时间2 h的条件下,乳清蛋白的酶解物有较强的抗氧化活性。     

乳清蛋白肽抗氧化活性的研究进展

综述了乳源蛋白肽的研究现状和乳清蛋白肽的抗氧化途径。乳清蛋白肽通过清除自由基,螯合金属离子,减少氢过氧化物和改变食品物理性状等方式起到抗氧化作用。探讨了氨基酸组成及乳清蛋白肽的结构与抗氧化活性之间的关系。易于供氢的氨基酸最易被氧化起到抗氧化作用,抗氧化活性还受到多肽空间结构的影响。测定乳清蛋白肽抗氧化活性的方法很多,由于测定条件和测定指标的不同,研究者往往得出截然相反的结论。抗氧化活性肽来源丰富,乳清蛋白肽显示出一定的优势,具有广泛的市场应用前景。     

酶解乳清蛋白制备降胆固醇活性肽的工艺研究

利用生物酶技术酶解乳清蛋白,制备具有降胆固醇活性的多肽,通过响应面试验、二次旋转回归设计建立回归模型,以胆固醇胶束溶解度抑制率为评价指标,对乳清蛋白的酶解条件进行了优化。结果表明,乳清蛋白的最佳酶解条件为：酶解时间8.5 h、酶解温度55 ℃、酶解pH 8.0、加酶量4.7%、乳清蛋白含量5.8%,在此条件下,酶解乳清蛋白得到的活性肽的胆固醇胶束溶解度抑制率为18.21%。     

乳清低聚肽的制备及其抗氧化活性

利用两步酶解法制备出乳清低聚肽,对其基础理化成分、氨基酸组成和分子量分布进行了分析,从羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基清除能力以及还原能力四个方面评价其抗氧化活性。组成分析结果表明:总蛋白质含量为86.83%,氨基酸组成丰富,富含抗氧化性氨基酸,其中亮氨酸、缬氨酸、脯氨酸含量较高;分子量小于1000u的组分高达85.78%,132~576u范围内组分占59.55%。抗氧化实验结果显示:乳清低聚肽具有较强的抗氧化活性,并且呈量效关系,对羟基自由基和DPPH自由基的半抑制浓度(IC50值)分别为:2.3、4.2mg/mL,浓度为2.5mg/mL时的还原能力与0.012mg/mL的抗坏血酸相当。      

水牛奶乳清蛋白制备抗氧化活性肽工艺的研究

实验是以水牛奶为原料,分离纯化后得到乳清蛋白。利用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶5种不同的蛋白酶对水牛奶乳清蛋白酶解以制备抗氧化活性多肽。酶筛选结果显示,中性蛋白酶是最适宜酶解水牛奶乳清蛋白制备抗氧化活性肽,其酶解液的还原能力和DPPH自由基清除率较其他4种酶高。探讨酶解反应时pH、温度、时间、酶浓度对酶解反应的水解度、酶解液的还原能力和DPPH自由基的清除率的影响,在单因素试验基础上,采用响应面法对酶解工艺进行优化。结果表明,中性蛋白酶酶解乳清蛋白的最佳工艺参数为:pH为7.4,温度为50.5℃,酶与底物浓度比为2.1%,酶解时间5.0h,此时2mg/mL酶解物的DPPH自由基清除率为32.58%。实测结果与预测值吻合效果良好。     

乳清蛋白肽美拉德反应产物的优化制备及其抗氧化活性

以乳清蛋白碱性蛋白酶水解物为原料与葡萄糖发生美拉德反应,通过单因素试验和响应面耦合遗传算法优化制备乳清蛋白肽美拉德反应产物(whey protein peptides Maillard reaction products,WPP-MRPs),并测定其对2,2′-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)二铵盐自由...     

改性乳清蛋白体外抗氧化特性

以木糖、葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖和乳清蛋白为美拉德反应原料,按照一定比例进行湿热糖基化反应。结果表明:在湿热糖基化反应后,6种糖类与乳清蛋白复合物在420 nm和294 nm处的吸光值差异显著(P<0.05);除乳清蛋白-蔗糖复合物外,其他5种乳清蛋白糖基复合物的游离氨基酸含量均显著降低(P<0.05)。除了乳清蛋白-蔗糖复合物外,其他5种乳清蛋白糖基化复合物随浓度的增加,还原能力和DPPH自由基清除能力都有所提高,其中乳清蛋白-木糖复合物的抗氧化能力提高最大,而且SDS-PAGE显示乳清蛋白-木糖复合物反应后分子质量明显增大;傅里叶红外光谱(FTIR)结果显示,乳清蛋白-木糖和乳清蛋白-葡萄糖复合物中蛋白质的酰胺I和II明显减少。     

乳清蛋白肽美拉德反应产物的抗氧化活性与稳定性

以乳清蛋白碱性蛋白酶水解物为原料与葡萄糖发生美拉德反应,制备得到乳清蛋白肽美拉德反应产物（whey protein peptide Maillard reaction products,WPP-MRPs）,并研究其抗氧化活性以及温度、pH值、光照、金属离子和过氧化氢对其抗氧化活性的影响。结果表明,WPP-MRPs具有较强的总还原力、羟自由基（·OH）清除能力和2,2’-连氮基-双-（3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸）二铵盐自由基（ABTS+·）清除能力,且抗氧化活性随着WPP-MRPs质量浓度的增加而加强。WPP-MRPs在90～100 ℃时具有较高的活性;在碱性环境中的抗氧化活性大于在中性及酸性环境中;室外自然光照射会降低WPP-MRPs抗氧化活性;金属离子Cu2+、Fe2+、Fe3+和氧化剂--过氧化氢能够显著降低WPP-MRPs的抗氧化活性。     

长白山松子抗氧化肽制备及活性研究

以长白山松子分离蛋白为原料,采用碱性蛋白酶制备抗氧化肽,通过Box-Behnken中心组合试验确定最佳水解工艺条件为:酶解温度56.5℃、加酶量7822U/g、底物质量浓度0.021g/mL、pH9.0、酶解时间240min。对该条件制备的抗氧化肽进行活性研究,结果显示随着浓度的升高,松子抗氧化肽在4mg/mL时对ABTS自由基的清除率和Fe2+螯合率达到100%,16mg/mL时对DPPH自由基清除率达到80.95%,24mg/mL时,对羟基自由基清除率达到100%。     

发酵乳清蛋白制取抗氧化肽的研究

为研究乳清蛋白发酵产物的抗氧化能力,采用益生菌对其进行发酵。以DPPH自由基清除率为指标,通过单因素试验和正交试验对发酵条件进行优化,得到发酵工艺的最佳参数为:10%乳清蛋白复原乳在37℃,初始pH值6.8,接种量4%条件下发酵24h。在该条件下,发酵产物对DPPH自由基的清除率为66.95%。     

核桃清蛋白抗氧化肽的制备及其活性研究

以核桃清蛋白为原料,用碱性蛋白酶进行酶解制备抗氧化肽,通过单因素与响应面试验,分析确定制备核桃清蛋白抗氧化肽的最佳工艺条件为:pH9.5,温度45℃,底物浓度4%,加酶量8 000 U/g,酶解时间2.5 h。对最优条件下制备的抗氧化肽进行活性研究,测定其Fe~(2+)螯合能力及对羟基自由基、DPPH·、ABTS~+·3种自由基的清除能力,结果表明核桃清蛋白抗氧化肽对几种自由基均有显著的清除作用和金属离子螯合能力,是一种活性的的天然抗氧化剂。     

长白山榛子抗氧化肽制备及其活性研究

以长白山榛子分离蛋白为原料,采用碱性蛋白酶制备抗氧化肽,通过Box-Behnken中心组合试验确定最佳水解工艺条件为:酶解温度50℃、加酶量8 000 U/g、底物浓度5.0%、pH9.5。对该条件制备的抗氧化肽进行活性研究,结果显示随着浓度的升高,榛子抗氧化肽在4 mg/mL时对ABTS自由基和DPPH清除率均达到100%,8 mg/mL时对·OH清除率和总还原能力分别达到85.46%和0.859,12 mg/mL时,对Fe~(2+)螯合率达到99.3%。     

乳清蛋白源抗氧化肽的酶法制备及评价方法的研究进展

氧化应激可引起细胞损伤和多种慢性疾病,饮食中的抗氧化剂可以帮助人体清除自由基。人工合成的抗氧化剂虽然具有很强的活性,但在机体内存在潜在的风险,因此,人们把目光转向了天然的抗氧化剂。近年来乳清中的乳清蛋白因其衍生肽具有较强的抗氧化活性而备受关注。该文综述了乳清蛋白源抗氧化肽的酶法制备及抗氧化的作用机理,归纳并对比了其抗氧化活性评价方法,指出了目前乳清蛋白源抗氧化肽在动物机体内的活性评价及作用机理方面的研究仍存在不够深入的问题,以期为进一步综合利用乳清蛋白产品提供思路。     

超滤分级研究乳清蛋白肽美拉德反应产物的抗氧化活性的影响

以乳清蛋白肽(WPP)为研究对象,利用葡萄糖对其进行美拉德修饰,制备得到美拉德反应产物(Maillard reaction products,MRPs),然后利用超滤技术将MRPs分成相对分子量不同的3个组分(组分I、II和III),测定各组分的抗氧化活性。研究结果表明,组分II(0.8~5 ku)具有最高的还原能力、自由基清除能力和金属离子螯合能力以及最强的抑制脂质氧化能力(P0.05),且随着各组分浓度的增高,其抗氧化活性显著增强(P0.05)。总之,分子量会对MRPs的抗氧化活性产生影响。     

大米蛋白体外消化产物抗氧化活性的研究

为了研究大米清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白体外消化产物的抗氧化活性,用Osborne法从大米粉中提取大米四种蛋白。采用胃-胰蛋白酶分步酶解,选择DPPH·,ABTS+·,·OH自由基清除能力和Fe2+金属离子螯合能力四个指标对消化产物的抗氧化活性进行综合评价。与市售的大豆肽比较,大米四种蛋白经模拟体外消化后具有良好的抗氧化活性。其中醇溶蛋白的消化产物抗氧化活性最好,DPPH·,ABTS+·,·OH自由基清除能力和Fe2+金属离子螯合能力的半抑制浓度分别为30.88 mg/m L、27.61 mg/m L、5.43mg/m L、0.18 mg/m L。大米四种蛋白酶解产物的Fe2+螯合能力半抑制浓度均小于1 mg/m L,具有良好的Fe2+螯合能力。研究结果表明大米四种蛋白的体外消化酶解物具有不同大小的抗氧化活性,分子量集中在181~1000 Da范围内,是一种易于被人体吸收的抗氧化肽。     

茶渣蛋白抗氧化肽制备及其活性研究

以茶渣蛋白为原料,采用酶解法制备茶渣蛋白抗氧化肽。分别以抗氧化肽的还原力和水解度为考察指标,通过单因素实验和响应面优化酶解法制备茶渣蛋白抗氧化肽的制备工艺,采用超滤法对酶解液进行初步分离纯化,并考察了温度、酸碱度、金属离子、食品添加剂以及体外消化环境对分子量小于3 kDa的茶渣蛋白抗氧化肽的还原力稳定性的影响。结果表明,酶解法制备茶渣蛋白抗氧化肽的最优工艺条件为底物浓度2%、酶解时间3 h、温度51 ℃、pH8.0、加酶量3034 U/g,在此条件下,茶渣抗氧化肽的还原力为0.316;当分子量小于3 kDa时,抗氧化肽的还原力为0.412,比纯化前提高了30.77%。温度从30 ℃升温至90 ℃,还原力从0.410降低至0.360;在酸碱及食品添加剂环境中仍能保持较好的还原力;在模拟消化环境中8 h后,还原力从0.412降为0.327。     

复合酶解乳清蛋白制备降血压肽的研究

采用碱性蛋白酶、胰蛋白酶水解乳清蛋白制备ACE抑制肽,通过体外检测法测定其ACE抑制率。通过正交试验,得出最优水解条件,即碱性蛋白酶和胰蛋白酶[E1/E2]之比为5:4,温度为45℃,pH值为8.0,时间为150min,水解度11.92%的条件下,乳清蛋白肽对ACE的抑制能力最强,达到60.19%。     

海蜇低分子肽制备及体外抗氧化活性

目的 优化海蜇低分子肽(low molecular weight peptide from Rhopilema esculentum Kishinouye, RKLP)制备工艺,评价其抗氧化活性及分析氨基酸组成。方法 海蜇利用碱性和中性蛋白酶双酶分步酶解制备海蜇肽,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率为指标,响应面实验优化酶解工艺条件。采用超滤技术,获得分子量≤3.5 kDa RKLP。通过测定DPPH自由基、2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonicacid),ABTS]自由基及超氧阴离子(O2-)自由基的清除率,评价RKLP抗氧化活性。氨基酸分析仪分析RKLP氨基酸组成。结果 酶解制备海蜇抗氧化肽的最佳工艺条件为:酶解温度50℃、3%碱性蛋白酶pH 7.5酶解2 h、1%中性蛋白酶pH 7.0酶解2 h,所得的DPPH自由基清除率为71.52%±0.59%,接近与预测值70.57%。RKLP水解度为6...