鱿鱼加工副产物内源蛋白酶自水解工艺优化

鱿鱼(鸢乌贼)加工副产物包括头、内脏、皮和鳍,含有丰富的内源蛋白酶,可以将鱿鱼加工副产物中蛋白质部分水解成肽和氨基酸等成分.采用正交实验和响应面分析法系统研究并优化了鱿鱼加工副产物中蛋白质成分被内源蛋白酶水解的工艺条件,得到数学模型回归方程和最佳工艺条件:温度为45.487℃,加水量为27.6969%,初始pH6.42.最佳工艺条件的验证实验结果表明,水解液中的氨基态氮含量 (0.4137g/100mL)和回归方程的预测值(0.4286g/100mL )具有较好的拟和性,水解液中的氨基态氮含量比优化前的最大值(0.2954g/100mL)提高40%.     

鱿鱼加工副产物内源蛋白酶自水解工艺优化

鱿鱼(鸢乌贼)加工副产物包括头、内脏、皮和鳍,含有丰富的内源蛋白酶,可以将鱿鱼加工副产物中蛋白质部分水解成肽和氨基酸等成分。采用正交实验和响应面分析法系统研究并优化了鱿鱼加工副产物中蛋白质成分被内源蛋白酶水解的工艺条件,得到数学模型回归方程和最佳工艺条件:温度为45.487℃,加水量为27.6969%,初始pH6.42。最佳工艺条件的验证实验结果表明,水解液中的氨基态氮含量(0.4137g/100mL)和回归方程的预测值(0.4286g/100mL)具有较好的拟和性,水解液中的氨基态氮含量比优化前的最大值(0.2954g/100mL)提高40%。      

鱿鱼加工废弃物自溶水解过程中的生化变化

研究鱿鱼加工废弃物自溶水解过程中的生化变化规律,为鱿鱼加工废弃物的利用提供指导。利用鱿鱼加工废弃物所含的内源蛋白酶对原料蛋白质进行水解,选择原料的氨基酸组成和水解液的α-氨基态氮、总酸、可溶性总氮、TVB-N、pH、水解度及游离氨基酸为生化研究指标,得到其在自溶水解过程中的变化规律。结果表明原料的总氨基酸含量为10.7146g/100g,经过48h的自溶水解,部分蛋白质被内源蛋白酶转化成氨基酸等成分,水解度达到(26.20±0.64)%;TVB-N含量为(63.68±2.39)mg/100g。证明鱿鱼加工废弃物是一种营养丰富的蛋白质资源,所含的内源蛋白酶可以在鱿鱼加工废弃物深加工过程中较好地被利用。     

鱿鱼肝脏蛋白酶的鉴定及组织蛋白酶L的分离纯化

鱿鱼肝脏含有丰富的蛋白酶,为利用其内源蛋白酶进行可控的酶解,本研究以鲤鱼肌原纤维蛋白为底物对鱿鱼肝脏内源蛋白酶的种类和性质进行了研究。反应体系中添加E-64、1,10-菲啰啉和苯甲基磺酰氟(phenylmethylsulfonyl?fluoride,PMSF)后,肌球蛋白重链(myosin?heavy?chain,MHC)的降解得到了显著抑制,确定了鱿鱼肝脏含有金属类、半胱氨酸类、丝氨酸类3类蛋白酶。半胱氨酸类蛋白酶热稳定性最好,在50℃以上仍然具有较大活性,可将肌原纤维蛋白酶解成小分子质量的降解产物。利用特异性底物对半胱氨酸蛋白酶种类进行鉴定发现,该酶只酶解Z-Phe-Arg-MCA,添加亮抑酶肽后相对酶活性为0%,添加E-64相对酶活性仅存0.6%,初步确定鱿鱼肝脏中的半胱氨酸蛋白酶主要为组织蛋白酶L。最后,通过硫酸铵沉淀、离子交换层析、凝胶过滤对组织蛋白酶L进行分离纯化,在电泳上得到了分子质量约为25?kD单一条带。     

鱿鱼内脏蛋白酶的提取工艺研究

本文以鱿鱼内脏为原料提取蛋白酶.考察了各因素对提取效果的影响,包括用于提取的NaCl溶液浓度、内脏和提取液的固液比、提取温度、提取时间等.此外,根据蛋白质等电点沉淀原理,调粗酶液的pH值去除杂蛋白;并进一步比较了各种絮凝剂去除粗酶提取液中杂蛋白的效果.结果表明:NaCl溶液浓度为0.5％,固液比为1.0∶1.5,常温下提取60 min可达到较好的提取效果,蛋白酶的回收率达到96.06％,比酶活达到1.33 U/mg.调粗酶液的pH值为4.5左右,杂蛋白去除效果较好;Fe2(SO4)3是较好的絮凝剂,向粗酶液中添加1％ Fe2(SO4)3溶液,当添加比为4:1(V/V,粗酶液Fe2(SO4)3溶液)时,进一步去除杂蛋白的效果较好,蛋白酶的回收率达80.33％,比酶活达到9.37 U/mg.     

鱿鱼皮蛋白质酶促水解研究

约占鱿鱼10%左右的鱿鱼皮在加工后作为废弃物而被处理。鱿鱼皮中蛋白质含量丰富,其水解物中含有生理活性肽。对鱿鱼皮的酶促水解进行了研究,结果表明,鱿鱼皮在45℃、pH6.5、水解时间4h、添加量1.50%条件下用胰蛋白酶或40℃、pH2.0、水解时间8h、添加量2.50%条件下用胃蛋白酶水解具有较高的水解度。     

鱿鱼肝脏油的营养成分及对小鼠血脂的影响

用常规方法分析了鱿鱼肝脏的基本营养成分,并使用气相色谱仪测定鱿鱼肝脏油的脂肪酸组成和含量,在此基础上通过动物实验探讨了鱿鱼肝脏油对小鼠血脂的影响。结果显示:鱿鱼肝脏蛋白质含量为17.62%、粗脂肪含量为48.42%、灰分1.37%、水分含量为28.44%。鱿鱼肝脏油中脂肪酸共有28种,总量为71.84mg/g,不饱和脂肪酸占73.18%。动物实验结果显示:灌胃鱿鱼肝脏油的实验组与灌胃猪油的对照组相比,小鼠血清中TG和LDL-C极显著低于空白组,TC显著低于对照组,HDL-C显著高于对照组。表明与人们日常食用的猪油相比,鱿鱼肝脏油更适于调节小鼠血脂平衡。     

利用内源蛋白酶对虾头水解的研究

本文研究了温度、固液比、时间、pH值等因素对近缘新对虾虾头内源蛋白酶酶解反应的影响，并用二次旋转正交实验确定了反应的最佳条件。结果表明最佳水解条件为：固液比1：2，pH值6．8l，温度53℃，时间5h。     

鱿鱼肝脏油的营养成分及对小鼠血脂的影响

用常规方法分析了鱿鱼肝脏的基本营养成分,并使用气相色谱仪测定鱿鱼肝脏油的脂肪酸组成和含量,在此基础上通过动物实验探讨了鱿鱼肝脏油对小鼠血脂的影响。结果显示:鱿鱼肝脏蛋白质含量为17.62%、粗脂肪含量为48.42%、灰分1.37%、水分含量为28.44%。鱿鱼肝脏油中脂肪酸共有28种,总量为71.84mg/g,不饱和脂肪酸占73.18%。动物实验结果显示:灌胃鱿鱼肝脏油的实验组与灌胃猪油的对照组相比,小鼠血清中TG和LDL-C极显著低于空白组,TC显著低于对照组,HDL-C显著高于对照组。表明与人们日常食用的猪油相比,鱿鱼肝脏油更适于调节小鼠血脂平衡。      

鱿鱼副产物自溶水解过程的生化变化及其机理

系统地研究了鱿鱼加工副产物内源性蛋白酶自溶水解过程中氨基氮、总可溶性氮（TSN）、TCA可溶性氮（TCA-N）、挥发性盐基氮（TVB-N）、pH、总酸、水解度（DH）以及游离脂肪酸的变化。确定最佳自溶水解条件为:料水比1:1、温度45℃、原始pH、水解时间39h。自溶水解39h离心后上清液中的氨基氮、TSN、TCA-N的含量分别为0·626±0·025、1·234±0·049、0·589±0·018g/100mL,TVB-N含量为59·10±1·28mg/100mL,蛋白质水解度达到23·89%±0·13%。鱿鱼加工副产物内源性蛋白酶可以较好地水解其自身蛋白质,在39h的自溶水解过程中没有腐败现象发生。      

Autolysis of Squid Mantle Muscle Protein as Affected by Storage Conditions and Inhibitors

Autolysis of squid mantle muscle was investigated under various conditions using muscle homogenate as a model system. Cleavage of myosin into heavy and light meromyosin was prominent during autolysis. Storage conditions such as NaCl concentration and temperature affected not only the rate of autolysis but also the products formed. Conditions for maximal autolysis were: NaCl concentration 0.3M, pH 7 and temperature 40°C. Autolysis was well inhibited by ethylenediaminetetra acetic acid and Na-pyrophosphate at <25°C and by phenyhnethylsulfonyl fluoride and chymotrypsin inhibitor extracted from potato tuber at >35°C suggesting two different types of proteinases were involved.     

Accelerated Cheddar Cheese Ripening with an Aminopeptidase Fraction from Squid Hepatopancreas

ABSTRACT: An aminopeptidase (AP) fraction from squid (Illex illecebrosus) hepatopancreas was added to Cheddar cheese at 2 levels, and its influence on ripening indices was determined for up to 3-mo storage at 11 °C. Two commercial enzymes (Neutrase ® and Flavourzyme ®) were similarly tested. Cheese with the higher level of squid AP contained more soluble N, amino acids, and Cheddar flavor after 1 mo, but it developed defects in texture and bitterness as ripening progressed. Cheese with less squid AP did not differ from the control with respect to all ripening indices over 3-mo storage. Ripening Cheddar contains cysteine protease inhibitor(s) that inhibit low levels of squid AP but not Neutrase ® and Flavourzyme ®.     

Solubilization of Myofibrils and Inhibition of Autolysis of Squid Mantle Muscle by Sodium Citrate

ABSTRACT:  The effects of organic salts (sodium (Na)-citrate, Na-gluconate, and Na-succinate) on the solubilization of myofibrillar proteins and the inhibition of autolysis of squid mantle muscle were investigated. All of the organic compounds dissolved myofibrils as NaCl did. Na-citrate showed the strongest ability with half dissolving at 0.06 M. Half dissolving by Na-gluconate, Na-succinate, and NaCl were 0.27, 0.21, and 0.27 M, respectively. Dissolving myofibrils by Na-citrate was not accompanied by the acceleration of autolysis. Na-citrate above 0.25 M almost completely inhibited the autolysis. The inhibition of autolysis by Na-gluconate and Na-succinate was much less than that of Na-citrate. Consequently, it was concluded that Na-citrate was the organic salt to dissolve squid myofibrils without inducing autolysis.     

鱿鱼内脏的营养价值及综合利用研究进展

我国鱿鱼资源非常丰富,年产量接近40万吨。鱿鱼内脏是鱿鱼加工过程中产生的主要副产物,营养丰富,富含蛋白质、脂肪、牛磺酸和钙、磷等多种微量元素,尤其是呈味氨基酸和多不饱和脂肪酸的含量较高,极具开发利用前景。本文简述了鱿鱼内脏的基本营养组成,并在此基础上分别从蛋白质、脂肪和其他功能性成分三个方面对鱿鱼内脏不同化学组分的研究和利用现状进行了综述,同时对未来的发展趋势和研究方向进行了展望,以期为鱿鱼内脏的进一步综合开发利用和鱿鱼精深加工产业的快速发展提供一定的理论参考。     

Autolysis and Protease Inhibition Effects on Dynamic Viscoelastic Properties during Thermal Gelation of Squid Muscle

ABSTRACT: Viscoelastic changes during thermal gelation of squid ( Loligo vulgaris ) muscle with protease inhibitors were studied, in order to evaluate the contribution of different proteinases to gel degradation. Calcium chloride was also tested as enzyme activator. A minimum in elastic modulus without inhibitors was achieved at 38 to 40°C. Although denaturation temperature was around 55°C, pronounced melting of connective tissue started at 40°C. Proteolysis occurred between 25 and 75°C, with maximum at 40 to 45°C. Addition of PMSF led to highest values of G'. The strong inhibition of autolytic activity by PMSF confirmed the predominance of serine proteases. Addition of CaCl₂ favored thermal protein aggregation from 40°C upwards.     

食品添加剂对罗非鱼蛋白自溶作用的影响

以水解液中氨基态氮、可溶性蛋白及可溶性固形物含量为指标,研究13 种常用食品添加剂对罗非鱼蛋白自溶作用的影响。结果表明：在葡萄糖≤ 2.00%、苯甲酸钠≤ 0.02%、亚硫酸钠≤ 0.03%、氯化钠≤ 10%、柠檬酸≤ 0.10% 的添加量范围内,对罗非鱼蛋白自溶有一定的促进作用,超过该范围则显示抑制作用;氯化钙、抗坏血酸则对蛋白自溶具有较好的促进作用;乳酸≥ 1.00%、酒石酸≥ 0.10% 、乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)≥ 0.02%的添加量对罗非鱼蛋白自溶有一定的抑制作用;氯化钾、硫酸镁、氯化镁对罗非鱼蛋白自溶无明显作用。添加苯甲酸钠、柠檬酸、乳酸及酒石酸可使罗非鱼蛋白水解液腥味减少,并减缓其腐败变质。     

乌贼墨多糖对冷藏鱿鱼的防腐保鲜作用研究

使用从乌贼墨中提取的活性多糖对低温储藏的鱿鱼进行处理,通过测定细菌总数、挥发性盐基氮(TVBN)值、pH 值,并作感官评定来探讨其防腐作用。结果表明：乌贼墨多糖对冷冻鱿鱼有较好的防腐抗菌作用,多糖的最佳作用pH 值为7.00,最佳使用质量浓度为7mg/mL;完全浸泡保藏的效果较浸泡20min 后沥干的要好;在防腐抗菌效果上乌贼墨多糖的作用低于同质量浓度的山梨酸钾和壳聚糖,综合来看,7mg/mL的乌贼墨多糖和1mg/mL的山梨酸钾、3mg/mL 的壳聚糖效果相当。     

不同包装材料对烤制鱿鱼贮藏品质的影响

为开发中国枪乌贼(Uroteuthis chinensis)烤制产品并筛选适宜的包装材料,本文采用37℃加速破坏实验,考察普通包装袋、蒸煮包装袋和铝箔包装袋三种不同材料包装烤制鱿鱼,测定烤制鱿鱼在37℃贮藏过程挥发性盐基氮(TVB-N)含量、微生物菌落总数(TVC)、硫代巴比妥酸还原值(TBARS)、色泽和质构的变化,并对其进行感官评价。结果表明:普通包装袋、蒸煮包装袋内烤制鱿鱼的TVB-N含量分别在第4、6 d时超过GB 2733-2015标准(30 mg·100 g^-1),为31.77、30.6 mg·100 g^-1,铝箔包装袋内烤制鱿鱼TVB-N含量在整个贮藏过程中没有超过标准;铝箔包装袋、蒸煮包装袋、普通包装袋内烤制鱿鱼的菌落总数分别在贮藏的第3、4、6 d时超过DB11/617-2009标准(4.47lg CFU·mL^-1),分别为5.17lg、5.17lg、4.97lg CFU·mL^-1;不同包装材料内烤制鱿鱼的TBARS、色泽、质构和感官评分差异显著(P<0.05)。与普通包装袋和蒸煮包装袋相比,铝箔包装袋能有效的抑制烤制鱿鱼TVB-N含量、TVC以及TBARS的上升,且能减缓烤制鱿鱼质构和色泽的变化,使烤制鱿鱼保持良好的感官性状,是更有利于烤制鱿鱼包装和贮藏的包装材料。     

牛肉成熟过程中氧化对钙激活酶活性及降解的影响

为了探究牛肉宰后成熟过程中氧化对钙激活酶活性及降解的影响,在牛屠宰后立即取其背最长肌,注射不同浓度氧化剂（0 mmol/L H2O2＋5 mmol/L NaCl ;50 mmol/L H2O2＋5 mmol/L NaCl;200 mmol/L H2O2＋5 mmol/L NaCl;500 mmol/L H2O2＋5 mmol/L NaCl）。真空包装后于4 ℃成熟。分别在0、1、3、7、14 d时取样,通过活性电泳和蛋白免疫印迹进行分析钙激活酶的活性和降解情况。结果表明：在牛肉的宰后成熟过程中,随着氧化程度的提高,μ-钙激活酶活性逐渐减弱,降解程度逐渐增强,而m-钙激活酶活性几乎未发生变化。因此,氧化促进了μ-钙激活酶的降解并抑制了其活性。     

内源酶对刺参肠自溶的作用

以刺参肠为原料,通过诱导自溶并添加各种酶抑制剂,以三氯乙酸可溶性寡肽和还原糖释放量为指标,并采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测方法,研究内源酶在刺参肠自溶过程中的作用。结果表明,在一定的浓度范围内,胃蛋白酶抑制剂、胰蛋白酶抑制剂、丝氨酸蛋白酶抑制剂、α-淀粉酶抑制剂和β-1,3-葡萄糖苷酶抑制剂对刺参肠的自溶均具有一定的抑制作用,且丝氨酸蛋白酶抑制剂N-甲苯磺酰-L-赖氨酸氯甲基化酮作用较强。说明胃蛋白酶、胰蛋白酶、丝氨酸蛋白酶、α-淀粉酶和β-1,3-葡萄糖苷酶参与刺参肠自溶过程。