HPLC测定长柄扁桃仁及饼粕中苦杏仁苷与野黑樱苷

为确保长柄扁桃仁在加工与其副产物利用过程中,更快更有效地明确降解产物中有害物质含量,本文建立了一种同时测定样品中苦杏仁苷与其降解产物野黑樱苷的高效液相色谱方法。在采用甲醇提取长柄扁桃仁、饼粕中苦杏仁苷和野黑樱苷,色谱柱Aglient ZORBAX SB-C18(5μm,4.6 mm×250 mm),流动相为20%甲醇和80%水,流速1.00 mL/min,检测波长210 nm,柱温30℃的条件下,苦杏仁苷和野黑樱苷色谱峰分离良好;苦杏仁苷浓度在0.50～300μg/m L间线性关系良好,R2=0.9999,野黑樱苷浓度在0.30～100μg/m L间线性关系良好,R2=0.9999;长柄扁桃仁提取苦杏仁苷和野黑樱苷平均加标回收率分别为87.10%～96.19%(RSD为4.64%～7.83%)和88.65%～103.10%(RSD为3.03%～7.55%);而在长柄扁桃饼粕中分别为98.32%～107.99%(RSD为1.44%～3.36%)和107.58%～117.60%(RSD为1.45%～2.26%)。本方法准确、可靠,适用于长柄扁桃仁、长柄扁桃饼粕中苦杏仁苷与野黑樱苷的测定。     

响应面法优化长柄扁桃中苦杏仁苷的提取工艺

为了综合利用长柄扁桃,提高利用价值,本实验通过响应面实验设计,以苦杏仁苷提取率为响应值,对长柄扁桃中苦杏仁苷的提取参数进行优化。优化后的最佳工艺条件为:乙醇浓度90%,料液比1∶6g/mL,提取时间55min,苦杏仁苷的提取率为提取率为86.91%。     

甜杏仁和苦杏仁野黑樱苷水解酶基因的克隆

以轮台小白杏（甜杏仁品种）和甲麦黄杏（苦杏仁品种）为实验材料,采用同源基因克隆方法克隆野黑樱苷水解酶（prunasin hydrolase,PH）基因。轮台小白杏PH基因命名为PaLTPh（GenBank登录号：KF888615）,序列长度3 686 bp;甲麦黄杏PH基因命名为PaMJPh（KF888616）,序列长度3 690 bp。PaLTPh和PaMJPh与扁桃Ph691基因相似性为94%。根据PaLTPh和PaMJPh保守区序列设计引物,克隆编码区（coding sequence,CDS）序列。PaLTPh CDS（KF888617）和PaMJPh CDS（KF888618）序列长度均为1 635 bp,与扁桃Ph691全CDS区相似性为97%。PaLTPh CDS和PaMJPh CDS序列均为全长的开放阅读框,编码蛋白质长度为544 个氨基酸。PaLTPH蛋白和PaMJPH蛋白均包含长度为26 个氨基酸的信号肽和糖基水解酶家族Ⅰ结构域,可催化野黑樱苷水解为扁桃腈和葡萄糖。杏PH基因与扁桃Ph691具有高度的同源性。     

高效液相色谱法同时测定保健食品中红景天苷和腺苷

目的 建立同时测定保健食品中的红景天苷和腺苷含量的高效液相色谱测定方法.方法 采用50％甲醇为溶剂,超声提取样品中的的红景天苷和腺苷成分.采用shim-pack CLS-ODS色谱柱(150 mm ×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇+ 20 mmol/L磷酸二氢钾水溶液(15 +85,V/V),流速1.0 ml/min,进样量10 μl,紫外检测波长为红景天苷275 nm,腺苷260 nm.结果 红景天苷在10.0 ～200 μg/ml范围内线性良好(r=0.999 5),平均回收率92.5％～99.5％,精密度2.8％～4.7％(n=6);腺苷在2.50～50.0μg/ml范围内线性良好(r=0.999 6),平均回收率90.0％～ 94.0％,精密度2.1％～5.2％(n=6).红景天苷和腺苷检出限LOD分别为0.01和0.005μ g/g.结论 本方法快捷、简便、灵敏度高,可准确同时测定保健食品中的红景天苷和腺苷含量.     

高效液相色谱法测定食品中番泻苷A和番泻苷B的含量

建立高效液相色谱法测定食品中番泻苷A和番泻苷B的方法。样品经过0.2%碳酸氢钠溶液超声提取,采用Agilent ZORBAX SB-C₈(4.6 mm×150 mm,5.0 μm)色谱柱分离,以四氢呋喃-水-乙酸为流动相洗脱,DAD检测器,检测波长:340 nm。番泻苷A、番泻苷B在1～100 μg/mL范围线性关系良好,相关系数均大于0.999,检出限(S/N=3)为15 mg/kg,定量限(S/N≥10)为50 mg/kg。以空白样品进行添加回收试验,番泻苷A的回收率为80.88%～96.34%,相对标准偏差(Relative Standard Deviation)为3.07%～7.73%,番泻苷B的回收率为81.32%～102.2%,相对标准偏差(RSD)为2.62%～9.62%。该方法前处理简单、灵敏度高、操作简便、准确性良好。在市售的果冻类食品中,检出阳性样品。     

野巴旦杏营养成分及苦杏仁苷的测定

对新疆特有资源野巴旦杏的多种营养成分和药用成分进行测定。分别用索氏抽提法、微量凯氏定氮法测定野巴旦杏中脂肪、蛋白质,用氨基酸分析仪测定多种氨基酸含量,原子吸收法测定多种元素,紫外法及反相高效液相法测定天然苯甲醛及苦杏仁苷。测定结果表明野巴旦杏中含脂肪53.09%、蛋白质24.2%、氨基酸总量14.57%,并含多种微量元素,脱脂样品中苯甲醛及苦杏仁苷含量分别为1.363%、5.320%。野巴旦杏具有很好的利用开发价值。     

HPLC法同时测定湘莲中芦丁、金丝桃苷及槲皮素含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定湘莲中芦丁、金丝桃苷及槲皮素的含量。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),以甲醇—0.6%磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱，流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长255 nm。结果:20批湘莲样品中芦丁、金丝桃苷及槲皮素含量分别为1.32～2.06,1.36～2.43,1.41～3.26 mg/kg;芦丁、金丝桃苷和槲皮素检测质量浓度线性范围均为5～200μg/mL(R²=0.999 9),在相应的线性范围内，3种黄酮类物质线性关系好，灵敏度高，精密度、稳定性、重复性及回收率试验相对标准偏差(RSD)均小于4.0%;芦丁、金丝桃苷及槲皮素的平均加标回收率分别为96.6%,96.9%,97.4%。结论:该方法操作便捷且结果准确，可用于湘莲中黄酮类成分的含量测定和质量评价。     

高效液相色谱荧光光谱法测定蔬菜中顺、反白藜芦醇及苷

目的建立一种灵敏、快速的反相高效液相色谱荧光法,分离和测定蔬菜中的顺、反白藜芦醇及其苷的含量.方法条件经优化,采用NUCLEODUR 100-5 C18柱(250mm×4.6mm,5 μm);流动相为异丙醇和水二元梯度洗脱系统;流速0.6ml/min;荧光检测器激发波长334nm,发射波长404nm.结果在选定色谱条件下其顺、反白藜芦醇苷和白藜芦醇的最低检测限分别为0.102、0.117、0.083、0.084ng.线性范围分别为0.004%～1.0 mg/L,样品加样平均回收率反式白藜芦醇及苷分别为94.7%,101.1%;顺式白藜芦醇及苷分别为90.7%,92.4%;相对标准偏差反式白藜芦醇及苷0.92%～1.32%,顺式白藜芦醇及甘1.25%～1.94%.结论本方法精密度好,结果可靠,适合蔬菜中顺、反白藜芦苷和白藜芦醇的定量分析.     

新疆地产干果中苦杏仁苷含量的快速测定

研究利用高效液相色谱法快速分析新疆地产干果杏仁、苦杏仁和桃仁中苦杏仁苷的含量。采用Shim-packVP-ODS(150mm × 4.6mm,5μm)色谱柱,甲醇- 水(20:80,V/V)为流动相,进样量为2μL,流速为1mL/min,柱温为40℃,在波长215nm 处检测苦杏仁苷,并进行方法学考察。结果表明,利用此方法能有效分离并快速分析干果中苦杏仁苷含量,建立的回归方程为Y ＝ 4.86244 × 10-6X － 0.0129273,具有良好的线性和重复性,可作为在线检测干果中苦杏仁苷的定量手段。     

HPLC-ELSD法测定苦杏仁中苦杏仁苷的含量

建立了苦杏仁中苦杏仁苷的高效液相色谱-蒸发光散射检测器检测方法。采用ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为V(甲醇)∶V(水)=40∶60,流速1.0mL/min,柱温40℃;蒸发光散射检测器漂移管温度60℃,载气(空气)压力0.2MPa。在上述条件下测得苦杏仁苷在0.28～5.5μg范围内的线性关系良好(r=0.9975),检出底限达58ng/L,平均加标回收率为96.2%。该方法简便快捷,重现性和准确度良好,可用于实际工作中样品的测定。     

HPLC法测定山茱萸及其保健酒中马钱苷的含量

建立了测定山茱萸及其保健酒中马钱苷含量的高效液相色谱分析法.样品用80%甲醇回流提取并用0.45μm微孔滤膜过滤.色谱柱为Phenomsil C18 BDS柱(250mm×4.6mm,5μm),柱温为35℃,马钱苷检测波长为236nm,流动相为乙腈-水(1486),流速为1mL/min.该方法测得马钱苷的线性范围为0.092μg/mL～0.92μg/mL,回归方程为A=1264.1C 18.992(R=0.9997),平均回收率为99.82%,RSD=l.95%(n=5)山茱萸及其保健酒中马钱苷的含量分别为1.378%、0.703%.此法准确、快捷、重复性好,适合于马钱苷的含量测定.     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定保健食品中14种功效成分

功效成分是保健食品常见的一项检测项目,是控制保健食品质量的重要指标。本文建立了超高效液相色谱-串联质谱同时测定保健食品中14种功效成分的快速检测方法。样品前期采用甲醇超声提取,采用Venusil MP C18(100 mm×2.1 mm,3μm)色谱柱,0.1%甲酸水-乙腈为流动相,梯度分离后使用串联四级杆质谱进行检测,外标法峰面积进行定量。结果表明,超高效液相色谱-串联质谱的方法能在4 min内完成所有样品的出峰。芦荟苷、腺苷在0.05～10 ng/mL,芦丁、淫羊藿苷、苦杏仁苷、芍药苷在0.5～100 ng/mL,其余8种功效成分在5～1000 ng/mL浓度范围内线性关系良好(r0.998)。方法精密度相对标准偏差5%。绿原酸、没食子酸、丹参素钠、白藜芦醇、红景天苷、黄氏甲苷、甘草酸、大蒜素检出限为75μg/kg,芦荟苷、腺苷检出限为0.75μg/kg,芦丁、淫羊藿苷、苦杏仁苷、芍药苷检出限为7.5μg/kg。通过三个浓度的加标回收实验表明,方法回收率在83.42%～108.44%。该方法灵敏度高、线性关系和重现性好,可快速地对保健食品中多种植物功效成分进行同时测定,可为保健食品的质量监控提供一定的技术参考。     

高效液相色谱法测定益康胶囊中的红景天苷

目的建立高效液相色谱法测定益康胶囊中红景天苷含量的方法,为保健品中红景天的测定提供检测和质量控制参考。方法采用甲醇对样品进行超声处理,经色谱柱(C18,4.6 mm×250 mm,5.0μm,安捷伦),流动相:乙腈:水=9:91(V:V)等度洗脱,柱温:40℃,检测波长:215 nm,流速:1.0 m L/min,采用外标法定量。结果结果表明,红景天苷在0.016~0.16 mg/m L范围内具有良好的线性关系(r2=1.0000),检出限为0.63μg/g,定量限为2.1μg/g,精密度(RSD)为0.5%,平均回收率97.4%(n=9)。结论此法操作简单、准确、快速,可作为益康胶囊中红景天苷含量的检测方法。     

HPLC法测定复方保健酒中人参皂苷和西红花苷的含量

采用高效液相色谱仪建立测定复方保健酒中人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、西红花苷I、西红花苷II含量的方法。结果表明,最佳测定条件为采用Agilent SB-Aq色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,人参皂苷的检测波长203 nm,西红花苷的检测波长为440 nm,进样量10μL。人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rc、西红花苷I、西红花苷II在各自浓度范围内线性关系良好(R≥0.999 9),平均加标回收率97.83%～101.72%,精密度试验结果相对标准偏差(RSD)0.43%～1.85%。实验结果表明该方法操作简单,精密度和准确度高,重复性好,可用于复方保健酒中人参皂苷和西红花苷含量测定。     

欧洲越橘类保健食品中花色苷含量测定方法的研究

目的建立一种快速、简单测定欧洲越橘类保健食品中花色苷的方法。方法将样品回流水解,使花色苷水解成花色素苷元,用高效液相色谱法对苷元矢车菊素进行定性及定量分析,以矢车菊素含量表征花色苷含量。采用Xtimate C18柱(250 mm×4.6 mm×5μm),流动相A:0.4%三氟乙酸(TFA)水溶液,流动相B:0.4%TFA乙腈,梯度洗脱,流速1 ml/min,检测波长190～800 nm,柱温35℃。结果矢车菊素在2～100μg/ml范围内线性良好r,=0.999 9,平均加标回收率为95.1%～97.2%,检出限为0.005μg/ml。结论该法简便、准确、灵敏度高,是快速测定欧洲越橘类保健食品中花色苷含量较合适的方法。     

高效液相色谱法测定罗汉果饮料中甜苷V的含量

建立了高效液相色谱法测定罗汉果饮料中甜苷V的方法。样品经70%甲醇溶液提取溶解,采用C18反相色谱柱分离,用乙腈-0.1%磷酸溶液(22∶78)为流动相进行洗脱,检测波长为203nm,流速为1m L/min,以色谱峰保留时间和紫外可见光谱进行定性,外标法进行定量,并应用该方法对多个样品中甜苷V含量进行检测。结果表明,甜苷V在0.0024~0.384mg/m L范围内线性关系良好(R2=0.9999),检出限为3mg/kg,加标回收率为98%~105%。该方法操作简单,精密度好,能满足罗汉果饮料中甜苷Ⅴ的检测要求。固体饮料甜苷V含量在0~65mg/100g之间,液体饮料在0~15mg/100g之间,甜苷在罗汉果饮料生产中对其含量控制较低,因其甜味性质,含量高会导致口感不佳,消费者难以接受。因此,该方法可作为罗汉果饮料产品的质量控制及真伪鉴别的检测方法。     

高效液相法对桃仁中苦杏仁苷含量的测定

建立了高效液相色谱法测定桃仁中苦杏仁苷含量的方法。色谱柱：LichrospherC18（4．6mm×250mm,5μm）;流动相：甲醇-水（20：80）;柱温：25℃;流速：1．0mL／min;检测波长：210nm。结果表明,苦杏仁苷浓度在O．06613—4．23200μg间线性关系良好,R2=1．0000,平均回收率为95．91％（RSD=2．29％）。该方法准确、可靠。     

高效液相色谱法同时测定蔷薇科木本植物油中的苯甲醇和苯甲醛

建立了一种同时测定蔷薇科木本植物油中苯甲醇和苯甲醛的高效色谱法方法。样品经甲醇提取后,采用具有紫外检测器的液相色谱仪测定,色谱条件：Agilent SB-C18柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,甲醇：0.02%磷酸水=30:70为流动相,柱温为30℃,流速为1.0 mL/min,苯甲醇检测波长为210 nm,苯甲醛检测波长为250 nm。结果表明,苯甲醇加标平均回收率为91.8%～93.7%,精密度为0.6%～2.0%;苯甲醛加标平均回率为96.5%～97.7%,精密度为0.2%～2.9%;苯甲醇的检出限为0.41 mg/kg,定量限为1.23 mg/kg;苯甲醛的检出限为0.33 mg/kg,定量限为0.98 mg/kg。本方法不仅回收率高,重复性好,而且灵敏度高,可用于测定杏仁油、长柄扁桃油等蔷薇科木本植物油中的苯甲醇和苯甲醛含量,为科学评价蔷薇科木本油脂产品的风味提供了技术支撑。     

高效液相色谱荧光光谱法测定蔬菜中的顺、反白藜芦醇及苷

目的:建立一种灵敏、快速的反相高效液相色谱荧光法,分离和测定蔬菜中的顺、反白藜芦醇及其苷的含量。方法:条件经优化,采用NUCLEODUR100-5C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为异丙醇和水二元梯度洗脱系统;流速0.6ml/min;荧光检测器:激发波长:334nm,发射波长:404nm。结果:在选定色谱条件下其顺、反白藜芦醇苷和白藜芦醇的最低检测限分别为0.102、0.117、0.083、0.084ng。线性范围分别为0.004%～1.0mg/L,样品加样平均回收率:反式白藜芦醇及苷分别为94.7%,101.1%;顺式白藜芦醇及苷分别为90.7%,92.4%;相对标准偏差:反式白藜芦醇及苷0.92%～1.32%,顺式白藜芦醇及甘1.25%～1.94%。结论:本方法精密度好,结果可靠,适合蔬菜中顺、反白藜芦苷和白藜芦醇的定量分析。     

HPLC-MS/MS法测定甜樱桃花色苷与非花色苷酚的组成与含量

应用高效液相色谱-质谱联用技术测定甜樱桃‘雷尼’、‘红艳’、‘红灯’3个品种的花色苷与非花色苷酚的组成与含量。花色苷的检测条件为:色谱柱Kromasil 100-5C18柱(250 mm×4.6 mm,6.5μm),流动相为水-甲酸-乙腈溶液,梯度洗脱,进样量30μL,流速1.00 m L/min,柱温50℃,检测波长525 nm;非花色苷酚的检测条件为:色谱柱Zorbax SB-C18(50 mm×3.0 mm,1.8μm),流动相为1%乙酸-1%乙酸-乙腈溶液,梯度洗脱,进样量2μL,流速1.00 m L/min,柱温25℃,检测波长280 nm。结果表明,3个品种共检测到9种花色苷,主要为花青素-3-芸香糖苷和花青素-3-葡萄糖苷,其在‘红艳’果皮、‘雷尼’果皮、‘红灯’果皮、‘红灯’果肉中的含量分别为5.21、2.51、75.70、7.40 mg/g和0.09、0.07、3.57、0.34 mg/g。非花色苷酚类化合物检测出了芦丁与山柰酚-3-芸香糖苷这2种化合物,其在‘红艳’果皮、‘雷尼’果皮、‘红灯’果皮中的含量分别为0.30、0.63、0.74 mg/g和1.17、2.91、2.37 mg/g。