某市出厂水的贾第鞭毛虫和隐孢子虫现状调查

贾第鞭毛虫和隐孢子虫是水源中普遍存在的寄生原生动物,其高致病性严重威胁着水质安全.因此对水体中的两虫情况进行监测,了解其污染现状.这里使用EPA1623免疫荧光分析方法对某江流域进行贾第鞭毛虫和隐孢子虫的现状调查,并分别在丰水期和枯水期对某市6个水厂的水源水和出厂水进行贾第鞭毛虫和隐孢子虫的检测研究.结果表明,某江流域及各水厂源水均存在原虫污染情况,所有出厂水样本均未检出贾第鞭毛虫孢囊或隐孢子虫卵囊,说明经过水厂净水处理后自来水中两虫的去除率还是符合出厂水要求的.     

水中贾第鞭毛虫和隐孢子虫的检测

该文对Filta-Max Xpress压力淘洗装置过滤、淘洗水样、免疫磁分离及免疫荧光检验的两虫检测技术进行了研究,同时对上海市自来水市北公司下属制水企业的水源水、出厂水和龙头水进行了检测。结果表明源水中均有贾第鞭毛虫和隐孢子虫存在,范围为0-9个/20 L,出厂水和龙头水中均未检出。     

探讨温度对饮用水中贾第鞭毛虫和隐孢子虫检测回收率的影响

贾第鞭毛虫和隐孢子虫,都是可能在水中或其他介质中发现的原虫类寄生虫。这两种寄生虫均可导致霍乱样腹泻,为全球六大腹泻病之一。本文研究分析了温度对饮用水中两虫检测的影响。结果表明,环境温度越低,两虫回收率越高;环境温度一定时,降低样品的存储温度,也能提高两虫的回收率。     

氯系消毒剂杀灭饮用水中贾第鞭毛虫实验研究

为了考察氯系消毒剂对饮用水中贾第鞭毛虫的灭活作用,分别对Cl2和ClO2的投加量、反应时间、浊度、pH值和温度等影响因素进行考察。实验结果表明:氯系消毒剂对贾第鞭毛虫理想灭活效果的反应条件是Cl2投量6.5mg.L-1,反应480min,ClO2投量3.0mg.L-1,反应240min;浊度越高,Cl2对贾第鞭毛虫的灭活率越低,ClO2对贾第鞭毛虫灭活率当浊度升高到10.0NTU时,影响基本稳定;pH值波动对Cl2灭活影响不大,ClO2在pH值6~7范围内灭活效果最佳;5至35℃范围,水温增加,灭活效果渐强。     

十二指肠贾第虫α-6贾第素的原核表达及纯化

目的原核表达并纯化十二指肠贾第虫α-6贾第素(α-6 Giardin)。方法以十二指肠贾第虫的c DNA为模板,PCR扩增α-6 Giardin基因片段,连接至p MD18-T载体,得到重组克隆质粒p MD18-T-α-6,将双酶切后得到的目的片段连接至p ET-28a表达载体中,得到重组表达质粒p ET-28a-α-6,转化至E.coli Rosetta感受态细胞中,IPTG诱导表达目的蛋白α-6 Giardin,收集菌体,离心后进行SDS-PAGE及Western blot鉴定,并利用Ni-NTA亲和层析柱纯化融合的α-6 Giardin蛋白。结果质粒p ET-28a-α-6经双酶切鉴定,证明构建正确;表达的目的蛋白α-6 Giardin为带His标签的包涵体蛋白,相对分子质量约40 000,可与鼠抗His单抗特异性结合,具有良好的反应原性;纯化的重组α-6Giardin融合蛋白相对分子质量约40 000,纯度可达80%。结论成功克隆、表达并纯化了十二指肠贾第虫α-6Giardin蛋白,为十二指肠贾第虫α-6 Giardin进一步的功能研究奠定了基础。     

Filta-Max法测定水中贾第鞭毛虫和隐孢子虫

建立水源水、生活饮用水中贾第鞭毛虫和隐孢子虫的分析方法。采用Filta-Max法过滤、淘洗、浓缩、免疫磁珠分离、免疫荧光分析和微分干涉镜检等技术进行分析检测。该方法的初始回收率及精度、过程加标回收率和本底加标回收率及精度符合美国EPA1623方法质控要求,孢囊和卵囊的过程加标回收率可分别达到47%和46%。该方法适用于水源水、生活饮用水中贾第鞭毛虫和隐孢子虫的测定。     

云南大理某农村猪星状病毒分子流行病学调查

目的了解云南大理某农村猪群中星状病毒(astrovirus,AstV)感染情况,为AstV的防控提供理论依据。方法利用逆转录巢式聚合酶链反应(RT-nested PCR)技术,对云南大理某农村采集的42份猪粪便样品进行PAstV799 bp基因部分片段扩增、克隆,并测序;利用NCBI BLAST进行数据库比对,Mega 4.1软件进行序列同源性比较和系统进化树构建。结果 Trizol试剂提取42份猪粪便样品上清总RNA,经RT-nested PCR扩增,5份样品可见799 bp的目的基因片段,阳性率为11.90%;PAstV 799 bp片段同源性分析显示,5个毒株与PAstV-1、2、3、4和5的同源性为46.3%~87.9%,与PAstV-4的同源性最高,为75.5%~87.9%;PAstV 799 bp片段的系统进化分析显示,分离的毒株属于PAstV-4,同源性为80.0%~99.5%。结论云南省PAstV-4流行病学调查将有利于中国AstV的预防及治疗。     

犬贾第虫巢式PCR检测方法的建立

目的建立犬贾第虫巢式PCR检测方法并进行验证。方法根据犬贾第虫Rnase P基因序列设计两对特异性引物,通过优化Mg2+浓度和退火温度建立巢式PCR检测方法,并进行灵敏度和特异性验证。用优化的巢式PCR方法检测60份犬临床粪样。结果建立的巢式PCR方法的最佳Mg2+浓度为3.0 mmol/L;最佳退火温度为53℃;对犬贾第虫的最低检测量可达1个虫体DNA/ml;对柔嫩艾美尔球虫、伊氏锥虫、弓形虫、阴道毛滴虫、犬心丝虫等寄生虫基因组DNA的扩增结果均为阴性;60份犬临床粪样贾第虫的检出率为61.7%。结论建立的巢式PCR检测方法具有较高的灵敏度和特异性,可用于犬贾第虫感染的临床检测。     

水中肠贾第氏鞭毛虫孢囊和隐孢子虫卵囊的检测

详细介绍了检测水中肠贾第氏鞭毛虫孢囊和隐孢子虫卵囊的仪器设备、试剂及方法,并对长江原水;黄浦江原水及相关出厂水进行了检测;在长江原水和所有出厂水中均未检出隐孢子虫卵囊,在黄浦江上游原水中检出极少量肠贾第氏鞭毛虫孢囊,而在下游水中检出的孢囊较多。     

饮用水中隐孢子虫与贾第虫的危害及其去除灭活研究

本文在介绍"两虫"即贾第虫和隐孢子虫的生态、危害及传播的基础上,综述了常规水处理工艺、膜法及组合工艺对"两虫"去除效果;分析了各种消毒剂和消毒方法灭活的优缺点,提出多种方法协同灭活将成为水消毒技术研究和开发的一个发展方向。预处理、絮凝、沉淀、澄清和过滤等常规水处理单元不能有效去除两虫,难以保证饮用水安全;膜过滤法两虫去除效率高,但大规模应用困难较大。而常规的氯消毒剂灭活两虫的效果不佳,臭氧对两虫的灭活效果优于氯和二氧化氯;UV能有效灭活两虫,但穿透力弱,UV灯管寿命短,运行费用高;US灭活两虫,能耗比较高。单一的消毒剂灭活两虫效果欠佳,采用多种消毒剂(方法)联合使用,通过协同作用,可达到较高的灭活率。     

长春市预防接种后4例婴儿死亡病例分析

目的分析婴儿接种疫苗后死亡原因及其与疫苗的相关性,为减少偶合症及预防接种安全提供参考。方法收集长春市2010年1月至2016年12月4例因注射疫苗后死亡的预防接种异常反应专家组诊断资料,对注射疫苗后死亡的婴儿的接种、死亡情况及尸体解剖报告进行综合分析。结果 4例死亡病例中,2例属于偶合症,诊断为间质性肺炎;2例为预防接种异常反应,由过敏性休克导致死亡。结论偶合症是预防接种后死亡比较常见的类型,及时进行尸体解剖有利于准确判断接种后死亡病因,也有助于解决此类纠纷。     

吉林省不同年份乙型肝炎血清流行病学调查分析

目的评价吉林省2006和2014年调查人群乙型肝炎病毒感染标志物的流行情况及乙型肝炎疫苗纳入计划免疫后的免疫效果,为制定全省乙型肝炎防治措施提供科学依据。方法采用多阶段随机抽样方法,对吉林省4个地级市中5个县(市、区),于2006年抽取1~59岁人群2 239人,2014年抽取1~29岁人群650人,进行乙型肝炎流行病学调查,并采集血液样本,ELISA法检测乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBs Ag)、乙型肝炎病毒表面抗体(hepatitis B surface antibody,HBs Ab)、乙型肝炎病毒核心抗体(hepatitis core antibody,HBc Ab);用EPIData3.1建立数据库,SPSS 13.0软件进行数据统计学分析。结果 2006和2014年调查人群各年龄组接种率及全程接种率差异有统计学意义(P0.016 7)。2006年15~59岁组人群HBs Ag携带率和乙型肝炎病毒感染率均高于其他两组(P0.016 7);HBs Ab阳性率随年龄组升高而降低。2014年各年龄组人群HBs Ag、HBs Ab携带率及乙型肝炎病毒感染率差异无统计学意义(P0.05)。2006年调查人群HBs Ag携带率及乙型肝炎病毒感染率均低于1992年而高于2014年,HBs Ab阳性率高于1992年而低于2014年,差异均有统计学意义(P0.05)。结论接种乙型肝炎疫苗可有效控制乙型肝炎病毒的感染;免费接种可提高乙型肝炎疫苗接种率,降低HBs Ag携带率及HBV感染率,在青少年、成年及老年人中进行有效接种,可降低易感人群的感染风险。     

2012年长春市健康人群流行性脑脊髓膜炎抗体水平调查

目的调查2012年长春市健康人群流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)抗体水平,预测流脑发病的趋势,为流脑的防控提供科学依据。方法选择农安县作为监测点,按照《全国流行性脑脊髓膜炎监测方案》规定的采样数量和分组方法,将健康人群分为7个年龄组:1岁、1~2岁、3~4岁、5~6岁、7~14岁、15~19岁、≥20岁,每组30人,共调查210人。采集静脉血2 ml,分离血清,采用ELISA法检测血清中A群、C群流脑IgG抗体水平,并计算抗体几何平均滴度(GMT),同时调查150名15岁以下儿童流脑多糖疫苗的免疫史。结果 2012年长春市健康人群A群流脑IgG抗体阳性率为85.71%(180/210),GMT为1∶4.420,C群流脑IgG抗体阳性率为71.43%(150/210),GMT为1∶2.936,A群流脑抗体阳性率和GMT均明显高于C群(P均0.001);不同年龄组之间A群流脑抗体GMT差异无统计学意义(P0.05),而阳性率差异有统计学意义(P0.05);C群各年龄组人群抗体阳性率差异无统计学意义(P0.05),而抗体GMT差异有统计学意义(P0.001);男性与女性人群之间A群、C群流脑抗体的阳性率和GMT差异均无统计学意义(P0.05);不同年龄组人群A群与A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗接种率差异有统计学意义(P0.001),抗体阳性率差异无统计学意义(P0.05)。结论 2012年长春市不同年龄组健康人群A群和C群流脑IgG抗体的阳性率维持在较高水平,提示大部分人对A群和C群流脑具有免疫力,但可能存在C群脑膜炎球菌的自然感染危险,应加强流脑疫情监测;在做好6岁以下儿童常规接种的基础上,应开展7~14岁儿童A+C流脑疫苗的免疫接种,防止流脑疫情局部暴发。     

长春市2007~2014年疑似预防接种异常反应报告分析

目的分析长春市2007~2014年疑似预防接种异常反应(Adverse Events Following Immunization,AEFI)报告质量及其流行性特征。方法对来自长春市2007年1月~2014年12月的AEFI监测系统的个案数据进行描述分析。结果长春市AEFI报告病例数累计9 841例,6和7月份发生构成比高于其他月份,分别为1 002例(10.57%)和960例(10.13%),病例主要集中在0和1岁,分别为4 879例(51.46%)和2 542例(26.81%),异常反应发生率前3位的一类疫苗分别为百日咳-白喉-破伤风联合疫苗(全细胞)(10.28/10万)、麻疹-风疹联合减毒活疫苗(3.12/10万)、麻疹减毒活疫苗(2.19/10万),二类疫苗分别为水痘减毒活疫苗(2.93/10万)、b型流行性感冒嗜血杆菌结合疫苗(2.42/10万)、流感病毒裂解疫苗(1.94/10万)。结论长春市AEFI的监测敏感性逐年升高,婴幼儿发生比重大,且AEFI发生率高于全国平均水平,应加强相关人员的培训,定期开展AEFI工作督导,确保监测工作质量,提高疫苗接种安全性。     

长春市2018~2019年婴幼儿口服轮状病毒减毒活疫苗不良反应分析

目的分析长春市2018~2019年婴幼儿口服轮状病毒减毒活疫苗(简称轮状病毒疫苗)不良反应。方法以2018年6月~2019年8月于长春市所有预防接种门诊口服轮状病毒疫苗的2~47月龄婴幼儿为研究对象,监测接种后30 min、3 d、30 d内发生的发热、乏力、烦躁、胃肠道反应及变态反应等情况,监测数据采用卡方检验进行统计分析。结果长春市2018年6月~2019年8月口服轮状病毒疫苗的2~47月龄婴幼儿共10822人次,发生不良反应1624例次,排在前5位不良反应依次为吐出疫苗、哭闹不止、发热、食欲下降及恶心呕吐,且未见变态反应等异常反应。月龄及疫苗复温情况是发生吐出疫苗的重要影响因素;月龄是发生哭闹不止的重要影响因素;性别、月龄及疫苗复温情况是发生发热重要影响因素;疫苗复温情况是发生食欲下降的重要影响因素。结论疫苗复温及降低接种年龄可缓解轮状病毒疫苗接种后的不良反应。     

吉林地区食源性肠炎沙门菌流行病学特征及同源性分析

目的运用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)技术,分析吉林地区2014～2018年食源性疾病患者粪便样本中分离的肠炎沙门菌(Salmonella enteritidis)的同源性及分子流行病学特征,为鉴定溯源及防控预警提供数据支持。方法对吉林地区2014～2018年食源性疾病患者1 000份粪便样本中分离的肠炎沙门菌进行鉴定,确定血清型及PFGE分子分型,采用Bio Numerics version 6. 6软件对PFGE图谱进行数据分析,绘制聚类树状图。结果分离出符合O(1,9,12):H(g,m)的肠炎沙门菌51株,检出率为5. 1%;经聚类分析,带型相似度为51. 3%～100%,共获得12种带型,其中,PS3与PS4型菌株带型相似度为93. 7%,为近年主要流行菌株,且菌株同源性较高。结论吉林地区肠炎沙门菌PFGE型别具有多样性和复杂性,具有优势克隆系。     

吉林市HIV-1型感染者耐药结果的分析

目的分析吉林市HIV感染者中HIV-1型对常用治疗药物的基因型耐药情况。方法采集吉林市接受抗病毒治疗的HIV-1感染者血样,提取RNA,采用巢式PCR法扩增HIV-1基因,利用ABI 3100测序仪进行核苷酸序列测定;用Sequencher 4.9对测定的序列拼接,用Bioedit软件进行多序列比对及序列清理后,与Stanford HIV Drug Resistance Database中的参考株序列进行比较,分析耐药基因突变及耐药结果。结果 49名HIV感染者中发现27人耐药,耐药率55.1%。检测出反转录酶(RT)区耐药突变位点8个,其中核苷类反转录酶抑制剂(nucleoside reverse transcripase inhibitors,NRTIs)类中,15例M184V和3例M41L突变,对应拉米夫定(Lamivudine,3TC)/恩曲他滨(Emdtricitabine,FTC)耐药15例和齐多夫定(Zidovudine,AZT)/司他夫定(Stavudine,D4T)耐药7例;非核苷类反转录酶抑制剂(non-nucleoside reverse transcripase inhibitors,NNRTIs)类中,13例K103N、8例V106I、6例Y181C及4例P225H突变,对应奈韦拉平(Nevirapine,NVP)耐药26例、依非韦伦(Efavirenz,EFV)耐药25例和利匹韦林(Rilpivirine RPV)耐药14例。蛋白酶(PR)区仅发现次要耐药突变(A71V/T/I和L10I/V),未造成相应药物的耐药。结论吉林市HIV感染者中耐药率较高,应加强耐药监测,拟定患者个性化治疗方案。     

2016年吉林省流行性出血热流行病学特征分析

目的分析2016年吉林省流行性出血热(epidemic hemorrhagic fever,EHF)的流行病学特征,为预防控制工作提供科学依据。方法采用描述性流行病学方法对2016年吉林省EHF疫情资料进行分析。结果 2016年吉林省共报告EHF病例515例,报告发病率1.87/10万;死亡2例,报告死亡率0.007/10万;报告发病数居前3位的市(州)为:白城市101例,长春市86例,通化市72例,占全省报告发病总数的50.29%;男女性别比为3.56∶1,男性发病总数高于女性,男女之间发病率差异有统计学意义(P<0.05);年龄集中在25~60岁组(390例),占全部报告病例的75.73%;职业构成以农民(344例)为主,占报告发病总数的66.08%;全年形成2个发病高峰,第1个在春季5~6月份,第2个在冬季11月份。褐家鼠和黑线姬鼠是主要的宿主动物和传染源。结论 2016年吉林省EHF发病情况平稳,应采取综合性防治措施,控制疫情的传播与蔓延。     

吉林市HIV-1感染者基因型耐药分析及亚型分布

目的观察2014~2015年吉林市内抗病毒治疗失败HIV-1感染者中HIV基因型耐药情况及其亚型分布。方法收集吉林市2014~2015年HIV-1感染者中接受抗病毒治疗后HIV病毒载量≥1 000拷贝/ml的患者血浆样本,提取病毒RNA,进行POL基因区扩增及测序后,使用美国斯坦福大学HIV耐药数据库进行耐药位点分析,Mega 6.0软件Neighbor-joining tree方法构建系统进化树,进行亚型分布分析。结果 2014~2015年275份抗病毒治疗失败人群血浆样本全部扩增成功,共发现106份基因型耐药样本,耐药率为38.5%,其中7份对蛋白酶类药物耐药,82份对核苷类药物耐药,99份对非核苷类药物耐药,有80份同时对核苷类和非核苷类药物耐药。核苷类逆转录酶区耐药位点以M184V/IV突变为主,非核苷类逆转录酶区耐药位点以G190G/A/S和V179D/E/G突变为主,2例蛋白酶类药物主要耐药突变位点分别为A71V/T和L10I/M/V。序列亚型以CRF01_AE为主(64.7%),主要流行簇以CRF01_AE第4、第5及CRF07_BC第1簇为主。结论耐药位点的出现是影响吉林市HIV感染者抗病毒治疗效果的一个重要原因,应加强对治疗失败患者的耐药监测,及时发现耐药突变,尽早更换药物。