治疗恶性黑色素瘤的靶向药物研究进展

黑色素瘤是由异常黑色素细胞过度增生引发的常见皮肤肿瘤。黑色素细胞的恶性转变通常被认为是正常细胞由于遗传因素发生变化而导致黑色素细胞不断增殖。近年来随着对黑色素瘤的分子生物学和传导信号的研究深入,大批治疗恶性黑色素瘤的靶向药物进入临床研究阶段。本文针对作用于黑色素瘤的不同靶点,分别对几个主要的作用靶点的机制和相应的代表药物进行了综述。     

家蝇抗菌肽抑菌活性及其稳定性研究

通过体外抑菌实验,采用纸片扩散法对家蝇抗菌肽的抑菌性进行定性研究。试验用菌有金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌和黑曲霉菌。在对家蝇抗菌肽抗菌谱研究的基础上,进一步用肉汤稀释法（试管法）定量测定其最低抑菌浓度（MIC）,并对其稳定性进行研究。结果表明,家蝇抗菌肽对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和大肠杆菌3种细菌有较好的抑制作用,而对白色念珠菌和黑曲霉没有明显的抑制作用,对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和大肠杆菌最低抑菌浓度（MIC）分别为0.156 mg/mL、0.312 5 mg/mL和6.25 mg/mL。另外,对其稳定性进行讨论,结果表明,家蝇抗菌肽的稳定性良好。     

抗菌肽的结构修饰及活性研究进展

抗生素耐药性是目前急需解决的医疗问题之一,寻找新的有效抗菌药物是解决耐药性的一种有效途径。抗菌肽(Antimicrobial peptides, AMPs)是广泛存在于生物体内的一类重要的多肽活性物质,具有广谱抗菌活性,并且部分抗菌肽还具有一定的抗肿瘤活性。因为抗菌肽具有独特的破膜作用机制,传统的耐药机制难以对其产生影响,在治疗细菌感染方面有广阔的应用前景,因此得到了研究者的广泛关注。主要通过总结相关研究文献,对抗菌肽的研究现状以及结构改造的研究加以综述,为抗菌肽在临床上的进一步研究和开发提供参考。     

靶向性重组PF4裸质粒抗血管生成活性的研究

构建重组真核表达载体pcDNA3.1（+）-PF4^47-70-RGD,并检测靶向性重组血小板因子四（PF4）在真核细胞内的表达水平,探讨其体外抗血管生成活性。设计构建了靶向性重组PF4真核表达载体pcDNA3.1（+）-PF4^47-70-RGD,用脂质体法将其转染至中华仓鼠卵巢细胞系（CHO）,用G418筛选稳系,采用RT-PCR和Western blot检测表达产物,MTT法测定CHO稳转体系培养上清对脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖的影响。成功构建出重组真核表达载体pcDNA3.1（+）-PF4^47-70-RGD,并获得稳转CHO细胞系,从基因水平和蛋白水平均可检测到目的基因的表达。MTT法显示,CHO稳系培养上清对HUVEC生长抑制率是50.8%,与对照组比,血管内皮细胞的增殖能力显著减小。靶向性重组PF4具有较强的体外抑制血管生成活性,该重组肽能够抑制HUVEC增殖。     

线粒体靶向白杨素的设计、合成与抗缺氧活性研究

为了提高天然产物白杨素的生物活性,以长链烷基为桥联基,通过2步反应将白杨素与线粒体靶向配体三苯基膦偶联得到了3个线粒体靶向白杨素衍生物。目标化合物分子结构经红外光谱(IR)、核磁共振谱(~1H NMR和~(13)C NMR)和质谱(MS)分析确证。常压密闭缺氧实验结果表明:3个衍生物均能延长缺氧小鼠的存活时间,且活性显著优于白杨素。     

牛蛙皮肤抗菌肽的分离纯化与活性测定

目的分离纯化牛蛙皮肤抗菌肽,并检测其活性。方法通过刺激与浸提的方法,得到牛蛙皮肤抗菌肽粗提物,测定其抑菌活性及最低抑菌浓度。利用SephadexG-50凝胶过滤和反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离纯化粗提物,用质谱仪测定多肽的相对分子质量及氨基酸序列,并进行活性检测。结果两种方法提取的牛蛙皮肤抗菌肽粗提物均具有较强的抑菌活性,纯化后的多肽相对分子质量约为4370,N-端含22个氨基酸,与其他两栖类来源的抗菌肽同源性较低。活性试验表明均无胰蛋白酶水解活性,存在一定的胰蛋白酶抑制剂活性,有轻微的溶血活性,不具有局部出血活性,具有抗凝和溶栓作用。结论已成功分离并纯化了1种新的牛蛙皮肤抗菌肽。     

靶向胆碱酯酶的抗阿尔茨海默病分子骨架

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种神经退行性疾病,典型表现为记忆丧失,严重影响认知功能.乙酰胆碱(ACh)是一种与记忆相关的重要神经递质,在大脑海马和皮层区域分布,ACh的水平对AD有直接影响.乙酰胆碱酯酶(AChE)通过水解ACh减弱其功能,丁酰胆碱酯酶(BuChE)是与AChE类似的...     

抗HIV靶向治疗制剂的研究进展

抗HIV靶向治疗是利用特异性的运载工具,将可杀伤HIV-1感染靶细胞的生物活性弹头选择性地运送到感染靶细胞部位,通过与靶细胞相结合后内化,杀灭体内残存病毒颗粒和潜伏感染细胞,并修复机体免疫系统,恢复机体正常免疫功能。将靶向治疗作为艾滋病(AIDS)治疗的辅助和补充手段,正成为AIDS一种新型的治疗方法。本文就抗HIV靶向治疗的运载工具及生物活性弹头的研究进展作一综述。     

纳米肿瘤疫苗抗小鼠黑色素瘤的免疫效果

目的 研究基于纳米复合佐剂[包载CpG的纳米颗粒(CpG-coated nanoparticles,CNP)]及黑色素瘤细胞裂解物抗原的纳米肿瘤疫苗的抗黑色素瘤免疫效果。方法 检测CNP及黑色素瘤细胞裂解物抗原对小鼠骨髓来源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDCs)的免疫调控作用及其对细胞因子IL-6和IL-12表达分泌的调控作用。接种黑色素瘤细胞的小鼠成瘤后,选择肿瘤体积相近的40只雌性C57BL/6N小鼠随机分为4组:对照(PBS)、佐剂(CNP)、裂解液(Lysate)和疫苗(CNP+Lysate)组,按皮下接种方式给药,1周1次,给药3周;每3 d记录小鼠肿瘤大小并绘制肿瘤生长曲线;收集小鼠外周血检测IFN-γ和TNF-α含量;免疫组化法检测CD8⁺T淋巴细胞在肿瘤组织中的浸润情况。结果 与PBS、CpG和肿瘤裂解物抗原组相比,纳米疫苗佐剂CNP能有效刺激BMDCs成熟,促进IL-6和IL-12分泌;接种纳米肿瘤疫苗显示出较好的体内抗肿瘤活性,疫苗组小鼠肿瘤体积明显减小,其血清中IFNγ和TNF-α分泌...     

肺靶向抗肿瘤药物新剂型研究进展

肺癌属于一种严重威胁着人类生命健康的恶性肿瘤之一,肺癌化疗的主要给药方式为静脉注射给药,疗效低且易引起严重的全身不良反应。近年来,出现了很多新型药物载体,能够选择性地靶向肿瘤细胞,有效降低抗肿瘤药物的不良反应。本文对近些年来肺靶向抗肿瘤药物新剂型的研究文献进行了综述,为肺靶向剂型的开发提供参考。     

一种新型杂合抗菌肽在毕赤酵母中的表达及其抗菌活性

目的在毕赤酵母中表达杂合抗菌肽CA(1-11)CD(12-37)ME(1-18)(ADM),并检测其抗菌活性。方法根据毕赤酵母(Pichia pastoris)偏爱密码子,合成杂合抗菌肽CA(1-11)CD(12-37)ME(1-18)基因,插入pPIC9K载体,构建重组表达质粒pPIC9K-ADM,电转化至毕赤酵母GS115,筛选阳性菌株,甲醇诱导表达,Tricine-SDS-PAGE检测ADM蛋白的表达,并对其抗菌活性进行初步检测。结果重组表达质粒pPIC9K-ADM经双酶切和测序鉴定证明构建正确;阳性酵母转化子的PCR产物可见目的基因条带;杂合抗菌肽在毕赤酵母GS115中获得分泌表达,可溶性蛋白约占菌体总蛋白的13%;且对E.coli DH5α、E.coliJM109和金黄葡萄球菌具有一定的抗菌活性。结论已在毕赤酵母GS115中表达了具有一定抗菌活性的杂合抗菌肽ADM,为相关新药的研究奠定了基础。     

人溶菌酶-抗菌肽tachyplesins融合蛋白的原核表达及其抗菌活性

目的原核表达人溶菌酶(Human lysozyme,hLYZ)和抗菌肽tachyplesins融合蛋白,并检测其抗菌活性。方法人工合成抗菌肽tachyplesins基因和linker,与pMD18-T-hLYZ上切下的hLYZ基因融合,将融合基因克隆至带有GST标签的原核表达载体pGEX-4T-1上,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达条件进行优化。表达的融合蛋白经亲和层析纯化后,进行抗菌活性检测。结果重组表达质粒pGEX-4T-1-hLYZ-tachyplesins经PCR、双酶切及测序鉴定,证明构建正确;表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约44000处可见目的蛋白条带,诱导温度在25℃,IPTG终浓度为0.8mmol/L,诱导时间为6h,融合蛋白表达效果较好,主要以可溶性形式存在;纯化的融合蛋白纯度可达90%以上,对金黄葡萄球菌和大肠杆菌具有一定的抑制作用。结论已成功在原核细胞中表达了人溶菌酶-抗菌肽tachyplesins融合蛋白,纯化的融合蛋白具有一定的抗菌活性。     

抗菌肽Cecropin D在毕赤酵母中的表达、纯化及活性鉴定

目的在毕赤酵母GS115中表达抗菌肽Cecropin D,并检测其抗菌活性。方法根据毕赤酵母密码子的偏爱性,人工合成6条寡聚核苷酸片段,经磷酸化、退火、连接并克隆入酵母表达载体pPIC9K。重组表达质粒pPIC9K-D转化至毕赤酵母菌GS115,经G418筛选,阳性高拷贝克隆用0.5%的甲醇诱导表达,表达产物经CM-Sepharose层析柱纯化,Tricine-SDS-PAGE分析,琼脂糖扩散法和比浊法测定其抗菌活性。结果经Tricine-SDS-PAGE检测,在相对分子质量3900左右处可见目的蛋白表达条带,纯化后的目的蛋白纯度达90%以上,获得的抗菌肽Cecropin D对一些革兰阳性菌和革兰阴性菌均有抑菌活性。结论抗菌肽Cecropin D成功地在毕赤酵母中分泌表达,为以后深入研究抗菌肽奠定了基础。     

梅州香樟挥发油抗炎活性试验

目的:探究梅州香樟挥发油的抗炎活性。方法:采用角叉菜胶致大鼠足跖炎症模型评价梅州香樟挥发油及其脂质体凝胶的抗炎活性。结果:梅州香樟挥发油及其脂质体凝胶对大鼠足肿胀抑制率分别为26.92%和33.75%,而其脂质体凝胶肿胀抑制率高于市售红花油(32.03%)。结论:梅州香樟挥发油制成脂质体凝胶具有明显的抗炎活性,该实验为梅州香樟的综合利用及进一步药用开发提供科学的参考依据。     

影响静注免疫球蛋白抗补体活性分析

经检测分析表明 :(1)不同聚合体含量的IVIG中ACA差异有显著意义 ;(2 )不同pH的IVIG中ACA明显不同 ,即随pH升高而增加 ;(3)用生理盐水溶解的IVIG中ACA明显高于用注射用水溶解的IVIG ;(4)在pH4 0～5 0的加温样品中ACA明显低于未加温样品 ,且差异有显著意义。     

抗菌肽(tachyplesin Ⅰ)串联基因的构建、表达及抗菌活性

为了实现通过基因工程方法制备具有稳定结构的抗菌肽tachyplesin Ⅰ,采取了tachyplesinⅠ基因串联表达的方法.实验以高拷贝穿梭表达载体pSBPTQ为表达载体,通过RT-PCR扩增tachyplesin Ⅰ基因(tac)和采用直接退火的方法合成tachyplesin Ⅰ串联基因(2tac).构建重组表达载体pSBPTQ-TAC和pSBPTQ-2TAC,转化到枯草杆菌WB800实现高效表达,经2％蔗糖诱导获得表达串联产物(2TAC)和TAC.通过离子交换柱层析纯化后得表达产物2TAC和TAC,2TAC经BrCN水解后,对表达产物抑菌活性分析,观察发酵液上清对大肠杆菌(E.coli K88)和伤寒沙门氏菌(Salmonella typhi)的抑菌圈和细胞微观形态的变化.实验结果表明:基因tac和2tac在枯草杆菌中表达成功,表达产物在发酵上清液中的含量分别约为8.25、17.36 mg·L-1;表达产物TAC和2TAC对大肠杆菌K88和伤寒沙门氏菌都具有明显的抑菌作用,2TAC经BrCN水解产物抑菌活力高于TAC.     

抗消化乙酰酯淀粉结构和结肠靶向性能研究

采用扫描电镜、X射线衍射和生物体外(In-V itro)降解等方法,对不同取代度DS的抗消化乙酰酯淀粉的颗粒形貌、结晶结构和生物降解性能进行了研究。结果表明:乙酰酯淀粉的颗粒表面变得粗糙并发生破损;随着乙酰基团取代度的增大,淀粉的抗消化性能不断提高,当DS>2时,淀粉中抗消化淀粉质量分数达到90%以上,其结晶结构也由A型向V型转变。生物体外降解试验表明,抗消化乙酰酯淀粉薄膜在模拟人体上消化道环境中的降解程度低于2.5%,在人工模拟结肠环境中的微生物降解程度为30%—50%,显示出潜在的结肠靶向性和微生物降解性。由此可见,抗消化乙酰酯淀粉适合作为菌群触发型口服结肠靶向药物控释载体材料。     

查尔酮类化合物抗糖尿病活性的研究进展

查尔酮类化合物是一类存在于药用植物中的天然有机化合物,具有抗糖尿病、抗肿瘤、催眠、抗菌、抗病毒、抗痛风、抗炎等多种生物活性,因此人们对此类化合物进行了大量研究。了解该类化合物的药理作用机制和构效关系,可为新药设计和开发提供先导化合物或药物资源。综述了查尔酮结构改造与修饰及查尔酮衍生物在抗糖尿病活性方面的研究进展。     

青蒿素及其衍生物的抗寄生虫活性研究进展

青蒿素是一种从菊科蒿属植物黄花蒿(Artemisia annua L.)中分离出来的倍半萜类天然产物,具有广泛的生物活性,如抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗恶性疟原虫等.青蒿素也是重要的抗疟先导化合物,目前临床上使用的青蒿素类抗疟药物有双氢青蒿素、蒿甲醚、青蒿琥酯.近年来的研究发现,青蒿素及其衍生物对弓形虫、血吸虫、犬新孢子虫、...