CXCL4基因敲除小鼠的饲养、繁殖及基因型鉴定

目的饲养、繁殖并鉴定CXC趋化因子配体4[chemokine(C-X-C motif)ligand 4,CXCL4]基因敲除小鼠,为深入研究CXCL4的生物学功能奠定基础。方法将引进的杂合子小鼠进行饲养并繁殖,剪取繁殖成功的子代小鼠耳朵,提取其基因组DNA,采用PCR法鉴定小鼠的基因型;比较野生型小鼠和CXCL4敲除的纯合子小鼠的体重变化及结直肠的长度,通过HE染色观察野生型小鼠和CXCL4敲除的纯合子小鼠的结直肠形态结构;采用ELISA法验证CXCL4野生型和纯合子小鼠血清中CXCL4的表达。结果繁殖成功的子代小鼠有3种基因型:野生型、杂合子及纯合子;4、10周龄雌性纯合子小鼠体重明显重于同龄的野生型小鼠(P0.05),6、10周龄雄性纯合子小鼠体重明显重于同龄的野生型小鼠(P0.05);6周龄雌性纯合子小鼠结直肠长度明显长于同周龄的野生型小鼠(P0.05),但结直肠的形态结构无显著改变;纯合子小鼠血清中CXCL4的表达量明显低于WT小鼠(P0.05)。结论成功获得了CXCL4基因敲除纯合子小鼠,为深入研究CXCL4的生物学功能奠定了基础。     

白色念球菌对小鼠阴道内β-防御素-2表达的影响

目的探讨白色念球菌对小鼠阴道内β-防御素-2表达的影响。方法将白色念球菌按约500个/(0. 5 mL·只)注入小鼠阴道,建立阴道感染模型,于建模0、24、48和72 h经尾部采血,检测白细胞数量;建模72 h将小鼠断颈处死,取其阴道组织,通过免疫荧光和Western blot检测β-防御素-2的表达。结果随着感染时间的增加,小鼠血液中白细胞数显著增加(P 0. 05),小鼠阴道内β-防御素-2的表达水平显著增加(P 0. 05)。结论白色念球菌可显著提高小鼠阴道内β-防御素-2的表达,为β-防御素-2的进一步研究奠定了基础。     

T-cadherin基因通过雄激素受体通路对前列腺癌LNCa P细胞增殖的抑制作用

目的分析前列腺癌组织中T-cadherin基因mRNA转录水平,探讨T-cadherin基因通过雄激素受体(androgen receptor,AR)通路抑制前列腺癌LNCaP细胞增殖的作用。方法收集前列腺癌及癌旁相应正常组织各60份,实时荧光定量PCR检测组织中T-cadherin mRNA转录水平;将培养24 h的前列腺癌LNCaP细胞分为腺病毒GFP组、腺病毒GFP-T-cadherin组及空白对照组(不含腺病毒),CCK-8法检测T-cadherin对前列腺癌LNCaP细胞增殖的影响,Western blot法检测过表达T-cadherin后前列腺癌LNCaP细胞中AR及前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)蛋白表达水平,并检测不同组别LNCaP胞浆及胞核中AR蛋白表达水平。结果 T-cadherin基因在癌组织中较癌旁组织mRNA转录水平明显减少(P 0. 01),其转录水平与前列腺癌的分期、格里森评分及分化均有关(P均0. 05);与空白对照组比较,腺病毒GFP-T-cadherin组能抑制前列腺癌LNCaP细胞增殖(P 0. 05),而T-cadherin过表达能下调LNCaP细胞中AR及下游靶基因PSA的表达水平(P均0. 05)。结论前列腺癌组织中T-cadherin基因mRNA转录水平明显减少,其过表达能通过AR通路抑制前列腺癌LNCaP细胞的增殖,本研究为前列腺癌的治疗提供了新的靶点。     

淋巴细胞功能相关抗原-1基因敲除对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠引流淋巴结T细胞活性的影响

目的探讨淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocyte function-associated antigen-1,LFA-1)基因敲除对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)模型小鼠引流淋巴结T细胞活性的影响。方法采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG)35-55多肽诱导LFA-1a链CD11a基因敲除的C57BL/6小鼠及野生型C57BL/6小鼠,建立EAE小鼠模型,取MOG诱导后21 d EAE模型小鼠脊髓颈段切片,HE染色和LuxolFastBlue染色,观察小鼠脊髓组织学变化;于MOG诱导后7、14、21d处死小鼠,收集腹股沟引流淋巴结CD4+T淋巴细胞,加入终浓度为1μg/ml的MOG35-55多肽刺激48 h后,应用BrdU试剂盒检测细胞增殖情况;于MOG诱导后4、7、10、14、21 d处死小鼠,收集腹股沟引流淋巴结细胞,加入终浓度为1μg/ml的MOG35-55多肽刺激48 h后,进行细胞内细胞因子染色,观察分泌IFNγ和IL-17的T细胞比例。结果 MOG诱导的野生型小鼠脊髓出现明显淋巴细胞浸润及广泛的脱髓鞘变化,而LFA-1基因敲除小鼠无明显变化;在EAE疾病早期(7 d),LFA-1基因敲除可减少淋巴细胞向引流淋巴结聚集,降低MOG体外刺激T细胞增殖能力,分泌IFNγ及IL-17的T细胞比例也较野生型C57BL/6小鼠明显降低(P0.05);而在EAE疾病缓解期(21 d),LFA-1基因敲除小鼠淋巴细胞聚集及T细胞增殖能力与野生型C57BL/6小鼠相比无明显差异(P0.05),分泌IFNγ及IL-17的T细胞比例高于野生型C57BL/6小鼠(P0.05)。结论在EAE疾病发生早期,LFA-1可能起到了关键性的作用,LFA-1有可能成为自身免疫性疾病治疗的重要分子靶点。     

重组人睫状神经营养因子突变体及其长效分子对饮食诱导性肥胖伴胰岛素抵抗大鼠的治疗作用

目的探讨重组人睫状神经营养因子(recombinant human ciliaryneurotrophic factor,rhCNTF)突变体rhCNTF(R6315)及其长效分子P-rhCNTF(R6315)对饮食诱导性肥胖(diet induced obesity,DIO)伴胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)模型大鼠的治疗作用。方法利用基因工程重组表达技术制备rhCNTF突变体rhCNTF(R6315)及其长效分子P-rhCNTF(R6315)。通过饮食诱导建立肥胖伴胰岛素抵抗大鼠模型(DIO-IR),经背部皮下分别注射rhCNTF(R6315)0. 025、0. 05及0. 1 mg/kg(每天1次)及P-rhCNTF(R6315)0. 025、0. 05、0. 1、0. 2及0. 4 mg/kg(每7 d1次),共治疗28 d,评价rhCNTF(R6315)及P-rhCNTF(R6315)对DIO-IR大鼠的治疗作用。结果 DIO-IR大鼠治疗28 d后,rhCNTF(R6315)0. 1 mg/kg剂量组高血清胰岛素水平显著改善(P均0. 01),0. 05、0. 1 mg/kg剂量组肝脂肪变性均显著改善(P均0. 01);P-rhCNTF(R6315)0. 2、0. 4 mg/kg剂量组高血清胰岛素水平显著改善(P均0. 01),并恢复至正常水平,口服糖耐量无明显变化(P 0. 05),0. 1、0. 2、0. 4 mg/kg剂量组高血清瘦素水平显著改善(P均0. 05),同时总胆固醇水平显著改善(P均0. 05),所有治疗剂量组肝脂肪变性均显著改善(P均0. 05)。结论 rhCNTF突变体rhCNTF(R6315)及其长效分子P-rhCNTF(R6315)对DIO-IR大鼠的胰岛素抵抗、高瘦素血症、高胆固醇血症及肝脂肪变性均有显著的治疗效果,其中P-rhCNTF(R6315)发挥了长效作用。     

LFA-1基因对胶原诱导小鼠关节炎关节局部引流淋巴结T细胞活性的影响

目的探讨淋巴细胞功能相关抗原1(LFA-1)在类风湿性关节炎形成中的作用。方法采用Ⅱ型胶原诱导小鼠关节炎模型,观察LFA-1基因敲除小鼠引流淋巴结T细胞增殖和细胞因子水平。结果LFA-1基因敲除小鼠在应用Ⅱ型胶原免疫后,引流淋巴结和关节局部Th1型细胞因子IFN-γ和IL-12p40mRNA水平明显低于野生型对照小鼠,Th2型细胞因子IL-4mRNA水平无明显变化。LFA-1基因敲除小鼠引流淋巴结来源的CD4+T细胞在体外受Ⅱ型胶原刺激后,其特异性增殖和细胞因子IFN-γ的产生也明显低于野生型对照小鼠。结论LFA-1基因缺失抑制了辅助性T细胞的活化和向Th1方向的分化,进而抑制关节炎的发生。     

小鼠多能干细胞对小鼠肝脏电离辐射损伤的作用

目的探讨小鼠多能干细胞(mouse pluripotent stem cells,miPS)对小鼠肝脏电离辐射损伤的作用。方法采用医用电子直线加速器进行单次全身性照射(电子辐射线源为6 MeV,照射总剂量为8 Gy,照射剂量率为1. 0 Gy/min)。辐射组于辐射后12和24 h,经小鼠尾静脉注射生理盐水(200μL/只);治疗组于照射后12和24 h,经尾静脉注射mi PS细胞悬浮液[3×106个/(200μL·只)];对照组小鼠不进行辐射,仅注射生理盐水(200μL/只)。末次注射后1、3、7、14 d,记录小鼠体重、计算肝脏指数,并检测小鼠肝脏中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平;末次注射后14 d,观察小鼠状态,并采用组织病理学方法观察肝脏病理形态学变化。结果与对照组比较,辐射组小鼠精神状态和食欲状况均不佳,体重显著降低(P <0. 05),肝脏指数差异无统计学意义(P> 0. 05),肝脏中SOD活性显著降低(P <0. 01),MDA水平显著升高(P <0. 05);与辐射组比较,治疗组小鼠体重明显升高(P <0. 05),肝脏指数差异无统计学意义(P> 0. 05),肝脏中SOD活性显著升高(P <0. 05),MDA水平显著降低(P <0. 01)。对照组小鼠肝脏组织无明显病变;辐射组小鼠肝细胞发生明显肿胀及肝细胞索紊乱等明显病理变化;治疗组小鼠肝细胞索排列整齐,肝细胞轻度肿胀,病理变化得到改善。结论 miPS可通过其增殖分化减少小鼠体内氧化应激产生的细胞凋亡,对电离辐射造成的小鼠肝脏损害有明显的修复作用。     

电针刺激对大鼠条件性位置回避行为反应的影响及其作用机制

目的探讨电针(electroacupuncture,EA)刺激对大鼠条件性位置回避(conditioned place avoidance,CPA)行为反应的影响及其可能的作用机制。方法免疫荧光染色法检测正常大鼠前扣带皮层(anterior cingulate cortex,ACC)脑区组织中μ-阿片受体和NR1的共表达情况。于大鼠ACC脑区内分别预先微量注射μ-阿片受体拮抗剂CTOP及0. 9%氯化钠(NS)后,经左脚掌皮下注射完全弗氏佐剂(complete Freund adjuvant,CFA)诱导产生慢性炎性疼痛,并与特定环境进行匹配,建立CPA模型,再进行环跳穴位电针(electroacupuncture,EA)刺激(即CTOP+CFA+EA组和NS+CFA+EA组),同时设假EA刺激组(EA不通电,即CTOP+CFA+shamEA组和NS+CFA+shamEA组)及对照组(ACC及脚掌均注射NS,EA不通电,即NS+NS+shamEA组),记录CPA试验的第1、3天各组大鼠在痛侧匹配室停留时间,计算回避分数。将各组大鼠放置50℃热板上,检测EA刺激对大鼠热痛行为反应的影响。Western blot法检测各组大鼠ACC脑区组织中μ-阿片受体及磷酸化NR1(p-NR1)的表达水平。结果μ-阿片受体与NR1在正常大鼠ACC脑区同一个神经元上共表达。NS+CFA+shamEA组大鼠第3天在痛侧停留时间比第1天显著缩短(P 0. 001),回避分数比NS+NS+shamEA组显著增大(P 0. 001);NS+CFA+EA组大鼠第3天在痛侧停留时间与第1天相比,差异无统计学意义(P 0. 05),回避分数比NS+CFA+shamEA显著减小(P 0. 001)。EA刺激不影响大鼠的热痛行为反应。与NS+CFA+shamEA组比较,NS+CFA+EA组大鼠ACC脑区μ-阿片受体表达量明显增高(P 0. 001),p-NR1蛋白表达量明显降低(P 0. 001)。CTOP可明显逆转EA刺激对CFA诱导CPA反应及ACC脑区μ-阿片受体、p-NR1的表达水平的影响(P 0. 001)。结论大鼠CPA反应可能是由CFA诱导ACC脑区p-NR1水平增高导致的,而EA刺激可通过激活μ-阿片受体来减弱该反应。     

健脾疏肝颗粒对糖尿病小鼠糖脂代谢的实验研究

目的评价健脾疏肝颗粒改善小鼠糖脂代谢的作用。方法采用STZ联合高脂诱导小鼠糖尿病模型,连续给药疏肝健脾颗粒4周,检测前后体重、血糖变化,给药后的血脂、糖耐量变化,评价疏肝健脾颗粒的降脂作用。结果与模型组相比,疏肝健脾颗粒低、高组小鼠的血糖、血脂、高胰岛素水平均降低。结论疏肝健脾颗粒通过改善糖脂代谢,提高胰岛素敏感性,发挥治疗糖尿病作用。     

玉米须缓解脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的:探讨玉米须缓解脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用。方法:将60只小鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(0. 005g/kg. d)、玉米须低、中、高剂量组(2. 5、5、10 g/kg. d),每组10只。灌胃给药,每天1次,连续给药10 d,末次给药2 h后除正常组小鼠气管滴注等量生理盐水外,其他各组小鼠气管滴注脂多糖(10 mg/kg),12 h后眼球采血,处死小鼠,取新鲜肺组织,ELISA检测血清中TNF-α和IL-1β水平以及肺组织中MPO活性,计算肺组织湿/干重比值,HE检查肺组织的病理变化。结果:与正常组比较,模型组小鼠肺组织湿/干比值、血清中TNF-α和IL-1β水平、肺组织中MPO活性均显著性升高(P 0. 05,P 0. 01)。与模型组比较,地塞米松组、玉米须中剂量和高剂量组小鼠肺组织湿/干比值、血清中TNF-α和IL-1β水平、肺组织中MPO活性均显著性降低(P 0. 05,P 0. 01),并改善了肺组织损伤。结论:玉米须能够对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤有一定的保护作用,其机制可能与抑制体内炎性介质释放有关。     

乙烯酮(双乙烯酮)下游产品废水的治理技术

乙烯酮(双乙烯酮)是十分重要的化工中间体,其下游产品较多。江苏某化工厂开发生产乙烯酮(双乙烯酮)下游产品三十多个,年生产规模三万多吨,是国内以乙烯酮(双乙烯酮)为中间体生产精细化学品的综合骨干企业。针对乙烯酮(双乙烯酮)下游产品废水特点,该厂结合企业实际,开展了产品优化,结构调整,清洁生产,资源循环利用,节水降耗等工作,从源头削减了污染物的生产。同时投资二千多万元新建预处理装置三套,6000m3/d废水生化处理装置一套,使全厂乙烯酮(双乙烯酮)下游产品的废水得到了有效的治理。     

分解炉扩径的技术改造

我厂3号回转窑(Φ4m×60m)生产线在1996年年底由SP窑(产量912t/d)改为NSP窑(产量1320t/d),预分解系统为四级旋风预热器带离线式分解炉     

基于组件技术的化工原理实验课件的设计

利用组件技术开发化工原理实验课件,给出了系统层、组件库层和应用层的架构划分。重点讨论了组件库的设计,给出了流体阻力这一典型实验的实现描述。实践证实,基于组件技术可以提高仿真实验的开发效率。     

水泥水化热测定方法综述

水泥水化热是中、低热水泥和核电工程用水泥的一项关键的技术指标。全球范围内测定水泥水化热的方法有溶解法、直接法/半绝热法、等温传导量热法三种。本文总结了中、美、欧相关方法标准,对其测试原理、仪器设备、试验过程等方面进行了比对,并对其在领域的应用做了简单的概括。     

几种乙炔加压设备性能的比较

阐述并比较了几种加压设备在乙炔加压清净过程中的性能和特点。     

A study of miscibility of blends of polybutadienes of varying microstructure

The miscibility of various amorphous polybutadienes with mixed microstructures of 1,4 addition units (cis, 1,4 and trans 1,4) and 1,2 addition units have been investigated. The studies here involved optical transparency, differential scanning calorimetry, and small angle light scattering. It was found that a 90 percent (cis) 1, 4 addition polybutadiene was immiscible with high (91 percent) 1,2 addition polybutadiene. Reduction of the 1,2 content to 71 percent induced an upper critical solution temperature (UCST) with the cis 1,4 polymer. Polybutadienes with 50 percent and 10 percent 1,2 contents were miscible above the crystalline melting temperature of the cis 1,4 polybutadiene. Immiscibility of the 91 percent 1,2 addition polymer was also found with a 10 percent 1,2 polybutadiene. The latter polymer also exhibits an UCST with the 71 percent 1,2 polymer. The results are used to interpret the characteristics of blends of polybutadienes of varying microstructure.     

粉煤灰中烧失量检测的不确定度分析

以F类粉煤灰为例,详细介绍了测定粉煤灰中烧失量的步骤、计算数学模型、影响测量不确定度的因素以及各项测量不确定度分量评定,人员、设备、材料、方法、环境都是影响测量不确定的因素。     

Process of acceleration of filtration of viscose

Conclusions It is significant that the purification on a single passage of viscose through porous ceramic corresponds to the result of a two-stage filtration of it in industrial filter-presses with standard fillings.Kiev Combine. Kiev Technological Institute of Light Industry. Translated from Khimicheskie Volokna, No. 3, pp. 20–22, May–June, 1969.