U251细胞受X射线照射后的自噬现象

为探讨自噬在X射线对U251细胞增殖抑制的作用及机制,用X射线处理人胶质瘤细胞系U251细胞,采用WST-1法测定X射线对U251细胞增殖的抑制作用,MDC荧光染色和LC3免疫组化观察辐照后自噬的发生;WST-1法检测3-MA对辐照诱导的U251细胞毒性的影响。WST-1法显示,X射线对U251细胞生长有显著的抑制作用,且此作用呈明显的时间、剂量依赖性;MDC荧光染色和LC3免疫组化。结果表明,X射线可诱导U251细胞发生自噬;X射线照射前阻断自噬使细胞毒性增强。X射线照射能明显抑制U251细胞的生长,并诱导其发生自噬,但自噬对U251细胞可能起到一定的保护作用。     

自噬活性调节胶质瘤起始细胞辐射敏感性的体内实验研究

为探讨自噬调节对胶质瘤起始细胞移植瘤辐射敏感性的影响,建立裸小鼠皮下移植瘤模型,测量肿瘤体积大小,比较抑瘤率检测雷帕霉素对移植瘤的辐射增敏作用;建立裸小鼠颅内移植瘤模型,观察裸小鼠生存期,HE染色观察移植瘤的生长。取两种模型中各组肿瘤组织做Western blot,分析自噬相关蛋白LC3表达。结果显示,裸小鼠皮下移植瘤模型中,联合治疗组的肿瘤体积明显小于阴性对照组和单纯辐照组(P>0.05),抑瘤率明显增加(P>0.05);在裸小鼠颅内原位移植瘤模型中,联合治疗组的裸小鼠生存期较阴性对照组和单纯辐照组明显延长,HE染色中可见联合治疗组肿瘤生长局限,与周围正常脑组织界限清楚。Western blot结果显示,两种模型中,联合治疗组中的比值LC3II/LC3I显著增加。研究表明,自噬激动剂雷帕霉素通过激活胶质瘤起始细胞的自噬活性,增加胶质瘤的辐射敏感性。     

自噬调节电离辐射引起的神经胶质瘤细胞初级纤毛发生

探讨自噬与电离辐射诱导人神经胶质瘤细胞初级纤毛发生的关系。神经胶质瘤细胞M059K和M059J进行10 Gy X射线照射或血清饥饿处理,免疫荧光法检测纤毛标志物Arl13b及基体结构蛋白γ-tubulin指示初级纤毛并统计纤毛发生率,免疫荧光法检测自噬标志物LC3联合蛋白质免疫印迹法检测p62蛋白表达量评估细胞自噬水平,利用氯喹（CQ）或雷帕霉素（RAPA）抑制或激活自噬水平并检测对细胞纤毛发生的影响。结果显示：M059K细胞中具有纤毛的细胞比例约为40%,X射线照射处理后3 d上升至75%以上（p<0.01）,但M059J细胞中纤毛细胞的比例（约7%）在X射线处理后无明显变化,然而血清饥饿处理3 d时M059K和M059J中纤毛细胞的比例分别上升至约80%(p<0.01)和50%(p<0.01)。血清饥饿导致两种细胞的自噬水平均显著升高,但X射线照射仅引起M059K细胞自噬水平升高而对M059J细胞影响不明显。使用RAPA激活细胞自噬能够显著提高两种细胞中纤毛细胞的比例,而使用CQ抑制自噬能够降低X射线照射引起的M059K细胞纤毛发生或血清饥饿引起的M059J细胞纤...     

青蒿素对脑胶质瘤U251细胞的辐射增敏作用

为探讨青蒿素(Artemisinin)对脑胶质瘤细胞辐射敏感性的影响及其机制,采用甲基四唑蓝(MTT)法检测青蒿素对胶质瘤U251细胞增殖的抑制作用;Hoechst 33258荧光染色观察凋亡小体;单丹磺酞尸胺(MDC)染色和Western blotting检测U251细胞的自噬活性的改变;用克隆形成实验测定自噬抑制剂3-MA对U251细胞的增殖抑制作用。结果显示:青蒿素对U251细胞增殖有抑制作用;青蒿素和X射线联合处理组细胞凋亡增加,并出现大量自噬泡且LC3-Ⅱ表达量值增大(p<0.01);3-MA、青蒿素和X射线三联处理组细胞克隆形成率较联合处理组显著降低(p<0.01)。研究表明,青蒿素可能主要通过诱导细胞凋亡来增强U251细胞对X射线的辐射敏感性,同时青青蒿素也能增强辐射诱导U251细胞的自噬活性,但自噬机制在此过程中可能起到细胞保护作用。     

磁性铁纳米材料的细胞学效应和膜转运机制

总结和讨论了针对Fe_3O_4纳米颗粒的生物兼容性、细胞内吞和转运过程及其自身酶活性对自噬和细胞代谢的研究,对于磁性纳米材料在体内抗氧化、自噬调控、疾病和辐射治疗等相关研究具有重要的参考和启发意义。     

EGFR与自噬在调节脑胶质瘤辐射敏感性中的关系

放射治疗是目前脑胶质瘤综合治疗最重要的治疗手段之一,但恶性脑胶质瘤产生的耐辐射作用限制了它的临床作用.因此,寻找胶质瘤耐辐射新机制具有十分重要的意义.研究表明,在脑胶质瘤放射治疗中,表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)与脑胶质瘤的辐射敏感性,自噬与肿瘤辐射抗性产...     

盐诱导激酶2对电离辐射诱导的自噬与凋亡的影响

为探索盐诱导激酶2(salt-inducible kinase 2, SIK2)对电离辐射引起的自噬与凋亡的影响,以期为肿瘤的放射治疗提供新的思路,以慢病毒颗粒LV-GFP和LV-SIK2体外转染HeLa细胞,48 h后用荧光显微镜观察转染是否成功,RT-PCR和Western blot检测转染细胞SIK2的干扰效果。通过Western blot检测SIK2低表达对8 Gy ⁶⁰Co γ射线照射下细胞中自噬相关蛋白LC3-Ⅱ 和P62表达的影响来观察自噬的变化;利用流式细胞术来检测SIK2低表达对8 Gy ⁶⁰Co γ射线照射下细胞凋亡的影响。结果表明,SIK2低表达的稳转细胞系被成功构建;8 Gy γ射线照射后,SIK2低表达细胞系LC3-Ⅱ表达下调,P62表达上调,表明自噬被减弱;流式细胞术检测发现SIK2低表达细胞系在照后12 h FITC⁺PI^-细胞比例就显著增加,表明SIK2低表达增加了细胞凋亡。因此,SIK2低表达会导致电离辐射引起的细胞自噬大大减弱,凋亡显著增加。     

槲皮素对胶质瘤干／祖细胞的辐射致敏作用及其机制的初步探讨

本研究旨在探讨槲皮素对胶质瘤干／祖细胞辐射敏感性的影响及其机制。用槲皮素（Quercetin,Que）作用于已经建立的胶质瘤干／祖细胞系SU-．2,用WesternBlot和免疫荧光法检测自噬相关蛋白LC3的变化,以检测SU-2的自噬活性的改变。采用四甲基偶氮唑盐（3．（4,5．Dimethylthiaz01-2-y1）．2,5-diphenyltetrazoliumbromide,MTT）比色法和克隆形成实验比较各处理组对SU．2的增殖抑制作用;应用AnnexinV-FITC／PI流式细胞术检测不同因素处理SU．2后细胞凋亡情况的改变。实验结果表明：用槲皮素预先处理胶质瘤干／祖细胞系SU-2再辐照组较单纯辐照组的细胞增殖率降低∞〈0．05）,克隆形成率明显降低p〈0,05）,细胞凋亡率显著增加仞〈0．05）。这些结果提示,胶质瘤干／祖细胞的基础自噬活性很低,经槲皮素处理后,再经X线照射,胶质瘤干／祖细胞的自噬活性提高,辐射敏感性明显增加。     

基于细胞自噬机制的健康科学研究进展

自噬(autophagy)是细胞对自身组件进行降解与回收的自然过程,与人类健康高度相关。很多疾病都伴随着自噬的异常。本文回顾了国内外近年来在自噬与健康关系领域的研究,包括自噬与癌症、神经退行性疾病等疾病的关系。并且回顾了对人体健康有明显影响的电离辐射、体育锻炼、针灸、按摩等物理刺激对细胞自噬的调控作用,从自噬的角度对这些作用的分子机制进行了讨论。最后,对于自噬调控在未来的医疗保健中的潜在价值进行了展望。     

辐射诱导细胞凋亡及其在肿瘤治疗中的应用研究进展

细胞凋亡是一种生理性细胞死亡，其特征与细胞坏死不同。深入了解和研究细胞凋亡，对辐射生物学理论探讨及对指导辐射防护实践和肿瘤治疗实践都有重要价值。本文就辐射诱导正常细胞和癌细胞凋亡及其基因调控机制以及它在肿瘤放疗中的应用前景，作了简要介绍     

The role of autophagy in cell survival from heavy ion irradiation in the plateau region

To study cytotoxic effect of heavy ion irradiation in the plateau region, and investigate whether autophagy in- duced by heavy ion irradiation is cytoprotective, HeLa cells were irradiated with 350 MeV/u carbon ions beams, and the clonogenic survival was analyzed. The results showed that cell survival decreased with increasing doses. It was also found that G2/M-phase cells increased, and the autophagy-related activity was significantly higher than the control. When autophagy was blocked by 3-methyladenine in carbon-ion irradiated cells, G2/M phase arrest and the percentage of apoptosis cells were further elevated, and cell survival decreased significantly, in- dicating the induction of cytoprotective autophagy by carbon-ion irradiation. Our results demonstrated that autophagy induced by carbon ion irradiation provided a self-protective mechanism in HeLa ceils, short-time inhibition of autophagy before carbon-ion irradiation could enhance radiation cytotoxicity in HeLa cells.     

白藜芦醇对UVA照射HaCaT细胞的防护效应及其机制

采用Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)检测HaCaT细胞的增殖水平。Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测HaCaT细胞的凋亡率和死亡率。单丹磺酰尸胺(Monodansylcadaverine,MDC)荧光染色和二氯荧光黄二乙酸酯(Dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)探针标记后,用激光共聚焦显微镜进行扫描,分别检测HaCaT细胞内自噬体和活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平变化。Western blot检测HaCaT细胞内LC3B-II、磷酸化AKT(p-AKT)和总AKT蛋白表达变化。结果显示:经10~80 J/cm~2 UVA照射后,HaCaT细胞的增殖水平随受照剂量的增加逐渐降低(p0.05);白藜芦醇预处理能显著促进UVA照射后HaCaT细胞增殖(p0.01),降低其凋亡率和死亡率(p0.05);经20 J/cm~2 UVA照射后3~24 h,HaCaT细胞内LC3B-II蛋白表达增强(p0.01);白藜芦醇预处理能使UVA照射后HaCaT细胞内自噬增强(p0.01),ROS水平降低(p0.01),p-AKT蛋白表达增强(p0.01)。提示白藜芦醇可能通过促进细胞自噬和AKT蛋白磷酸化,以及降低细胞内ROS水平,拮抗UVA导致的HaCaT细胞增殖抑制、凋亡和死亡。     

18F-FDG PET/CT显像在食管癌分期中的应用

对30例食管癌初诊患者于手术或放化疗前一周内进行18F-FDG PET/CT检查,将15例手术治疗患者的130枚区域淋巴结的PET/CT结果与病理学检查相比较.所有患者的远处转移灶及15例非手术治疗患者的区域淋巴结转移根据活组织病理学检查、多种影像学检查临床随访而定,随访时间均大于6个月.结果显示:30例食管癌患者,原发病灶18F-FDG PET/CT均为高代谢病灶(100%),病灶界限显示清晰.以患者为单位计算,30例食管癌患者,20例(66.7%)证实有区域淋巴结转移,18F-FDG PET/CT真阳性18例,假阳性2例,假阴性2例,诊断的灵敏度、特异性和准确性分别为90.0%、80.0%、86.7%.以淋巴结为单位计算,在15例手术治疗患者的共130枚淋巴结中,病理学检查证实为淋巴结转移33枚(25.4%),PET/CT真阳性23枚.18F-FDG PET/CT对区域淋巴结转移诊断的灵敏度、特异性及准确性分别为69.7%、97.9%、90.8%.检出远处转移4例(13.3%),分布于肝脏、肺及骨骼.30例PET/CT显像后,16例提高了临床分期;1例降低了临床分期;13例与18F-FDG PET/CT显像前的临床分期一致.     

耐辐射基因工程菌Deinococcus radiodurans及其在环境修复中的应用

耐辐射球菌(Deinococcus radiodurans)是一种革兰氏阳性微球菌,非致病菌,可以应用于放射性核素污染环境的生物修复。由于一般的微生物对辐射非常敏感,因此不能用于既存在放射性核素,又存在有机污染物的复合污染场所。利用物理化学方法清除这类污染,其价格非常昂贵。利用微生物修复这类环境是一种具有活力的替代技术。基因工程手段可以解除微生物固有的一些物理、化学和生理方面的限制。在辐射成为限制微生物生存和发挥其功能的情况下,利用基因改造的Deinococcus radiodurans进行环境修复是一种具有实用潜力的手段。     

The Effect of Atmospheric Pressure Plasma Corona Discharge on pH,Lipid Content and DNA of Bacterial Cells

Effect of plasma corona discharges on the pH, whole cell lipids and DNA of bacteria is investigated. Results showed an increase in the acidity levels of water due to plasma reactive species which, however, were not responsible for bacterial cell death. No changes in the whole cell lipid contents were observed, while DNA after plasma treatment showed deterioration of the amplified sequences, indicating the possible occurrence of DNA degradation. In conclusion, reactive species produced by plasma discharges affects DNA, possibly contributing to cell death.     

抗肿瘤药物PARP-1抑制剂及其放射性核素标记的研究进展

聚（腺苷二磷酸-核糖）多聚酶(poly(ADP-ribose)polymerase,PARP)是当今癌症治疗的一个新靶点。PARP不但能修复DNA损伤和调控转录,维持细胞内环境与基因组稳定,调节细胞存活和死亡过程,同时也是肿瘤发展和炎症发生过程中的主要转录因子。抑制PARP活性能降低肿瘤细胞的DNA修复功能,增强其对DNA损伤因子的敏感性,从而提高肿瘤放疗和化疗疗效。大量的研究表明,无论单一用药或联合化疗药物,PARP抑制剂都显示了在抗肿瘤治疗领域的潜力。本文综述了PARP-1抑制剂在抗肿瘤方面的研究进展。根据PARP-1抑制剂的发展阶段进行分类,着重介绍几种有代表性的,处于临床试验阶段,且具有潜在临床应用价值的PARP-1抑制剂。正电子发射计算机断层扫描（Positron Emission Tomograph,PET）利用组成人体主要元素的短半衰期核素作示踪剂,在分子水平上,无创伤、定量、动态地观察代谢物或药物在人体内的各种变化,是当代最先进的影像诊断技术,本文也将简单介绍用放射性核素标记PARP-1抑制剂的研究进展。