车前草提取物抗菌活性的研究

采用滤纸片扩散法对车前草的60%vol﹑70%vol﹑80%vol﹑90%vol乙醇提取物及石油醚﹑氯仿﹑正丁醇和水相萃取物对4种细菌和13种真菌进行抗菌活性研究。结果表明:车前草粗提物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、青霉和假丝酵母等常见食物致病菌的抑制作用显著,对常见植物病原菌苹果腐烂病菌、黄瓜枯萎病菌、烟草赤星、草莓镰刀菌、番茄灰霉等的抑制作用也较好。     

宁夏枸杞鲜果采后病原菌的分离、鉴定及水杨酸的抑病效果研究

目的 分离、鉴定宁夏中宁地区引起枸杞鲜果采后病害的主要病原菌, 并研究水杨酸(salicylic acid, SA)的抑病效果。方法 采用常规方法从自然发病果实中分离病原真菌, 通过形态学和ITS(internal transcribed spacer)序列信息进行鉴定。使用不同浓度的水杨酸处理病原菌和果实, 观察SA对病原菌体外和体内的抑制效果。结果 共分离到4株病原真菌菌株, 它们均能引起枸杞鲜果的采后腐烂。其中, WB-1鉴定为梨黑斑链格孢(Alternariagaisen), WB-2鉴定为互隔链格孢(Alternariaalternata); WB-3和WB-4分别鉴定为镰刀霉属(Fusarium)和枝孢属(Cladosporium)真菌。SA对3种供试病原真菌的生长均有明显抑制作用, 且SA浓度越高抑制效果越明显。SA浸泡处理对常温和低温贮藏的枸杞鲜果病害有显著的控制效果, 并且SA处理对枸杞果实固形物含量(soluble solids content, SSC)无显著影响。结论 枸杞鲜果采后腐烂由多种病原真菌引起, SA处理对枸杞采后病害具有较好的控制效果, 具有潜在的应用前景。     

石榴皮粗提物抗菌活性的研究

目的:对石榴皮的水、60%乙醇、90%乙醇提取物以及石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取物对3种细菌和14种真菌的体外抗菌试验进行了研究.方法:纸片扩散法.结果:所有粗提物均对3种细菌和其中10种真菌具有不同程度的抑制作用.结论:石榴皮粗提物总体抑菌效果很好,尤其对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有很强的抑制作用.     

菊花脑茎叶抗病原菌活性及其有效成分研究

首次以菊花脑提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等6种常见的病原细菌及黑曲霉、啤酒酵母等4种病原真菌进行了拮抗试验,结果表明菊花脑提取物A、B和C具有较强的拮抗病原菌的活性,且抗菌活性有明显的量效关系,其对各种供试病原细菌的最低抑菌浓度为0.3%～0.5% (g/ml),对供试病原真菌的MIC值从0.3%～1.0%不等。菊花脑提取物A(挥发油)显示了广谱的抗菌范围,其对供试细菌和供试真菌的抑菌效力相当,但菊花脑提取物B和C(非挥发性成分)对供试细菌的拮抗作用(MIC值为0.3%～0.5%)远大于对供试真菌(MIC值为0.7%～1.0%)的作用。菊花脑中起抗菌作用的主要成分是挥发油、总黄酮、苦味素、野菊花内酯等活性成分。     

灵芝不同培养基发酵液粗提物抑菌活性研究

采用不同培养基对灵芝进行液体发酵培养,研究其发酵液粗提物对植物病原真菌抑菌活性。结果表明,3种不同培养基的灵芝发酵液粗提物,对不同植物病原真菌的抑菌活性存在差异性。其中1#培养基的灵芝发酵液粗体物对苹果炭疽病菌、小麦根腐病菌和西瓜枯萎病菌具有显著的抑菌活性;2#培养基的灵芝发酵液粗提物对番茄早疫病菌的抑制作用明显;而3#培养基的灵芝发酵液粗提物对小麦根腐病菌具有较强的抑制作用。由此可见,不同培养基的灵芝发酵液对各种植物病原菌表现出不同的抑菌活性,揭示培养基成分的不同可能对灵芝发酵液的抑菌活性物质的产生有着重要的影响。     

酚类物质及其化学修饰物抗真菌的构效关系研究

本文选用酚类物质及一系列酚类衍生物共30种为供试药剂,对果蔬采后难控制的三种致腐病原真菌进行药效实验。对药剂的化学结构与抗菌性能关系进行分析,结果表明:(1)邻位、对位多元酚对这三种病原真菌的抑制作用比一元酚作用强,间位多元酚的作用最弱。二元酚作用比对应三元酚强。(2)邻位、对位二元酚中的一个羟基被羧基取代后,其抑菌性能大大减弱。(3)对羟基苯甲酸羧基酯化后,极大地提高了抑菌性能,抑菌性能最强,当酯化烷链的碳原子数超过7个时(碳链长度≥7)其抗菌性能迅速降低。(4)酚乙酰化后,抑菌性能发生变化,间位多元酚乙酰化后,抑菌性能增强,其它酚乙酰化后,抑菌性能均有所下降。     

臭氧对砀山酥梨采后生理及腐烂效果的影响

研究了臭氧对冷藏条件下砀山酥梨采后生理以及贮期病害的影响。在冷藏(缓慢降温至(0±0.5℃)期间,每日用4 mg/m~3臭氧处理砀山酥梨3 h,定期测定了贮藏期相关生理指标和腐烂率,并进行了臭氧对砀山酥梨主要致腐菌梨青霉、梨褐腐、梨轮纹的离体和活体实验。臭氧处理可显著抑制砀山酥梨的呼吸强度,延缓可溶性固形物、可滴定酸以及丙二醛含量,有效降低果实的腐烂率,但对果实硬度没有显著影响;臭氧明显抑制引起砀山酥梨发生腐烂的青霉痛、褐腐病、以及轮纹病病原真菌孢子的萌发,抑制了接种病原菌在梨果实上的扩展。将臭氧用于砀山酥梨的贮藏,既可维持较高的贮藏品质,又可防治果实腐烂。     

黑曲霉发酵液抗真菌活性及稳定性研究

研究黑曲霉xj菌株发酵液的抗真菌活性及稳定性。以常见的病原真菌作为测试菌株,滤纸片法测定xj菌株发酵液的抑菌谱,通过温度、光照以及pH的变化测定发酵液中抗菌成分的稳定性。结果表明x:j菌株发酵液对5种病原真菌均有不同程度的抑菌活性,其中对茄病镰刀菌的抑菌效果最好,抑菌圈直径达到了(45.11±0.21)mm。发酵液中的抗菌成分对光照稳定,但对温度及pH不稳定。xj菌株发酵液的抗菌范围较广,提取发酵液的抑菌成分时应尽量在低于80℃以下,pH中性的环境中进行。     

解淀粉芽胞杆菌NCPSJ7对采后苹果轮纹病的生物防治作用

为了解解淀粉芽孢杆菌NCPSJ7及其抗菌蛋白对苹果轮纹病菌的抑制以及对采后苹果轮纹病的防治作用,以NCPSJ7发酵液、菌悬液及无菌胞外抗菌蛋白为试验材料,分别采用牛津杯法和果实打孔法试验对苹果轮纹病菌LW182的平板抑制效果和果体抑制效果进行检验。采用果实喷洒防腐试验,检验对采后苹果的防腐效果。结果显示,试验材料对轮纹病菌LW182均有不同程度的抑制作用。菌悬液和发酵液对轮纹病菌LW182的平皿抑制效果比胞外抗菌蛋白粗提液好。胞外抗菌蛋白粗提液对苹果轮纹病菌LW182的果体抑制作用非常明显,主要表现为减轻苹果的腐烂和变色程度,以及抑制轮纹病菌LW182菌丝的生长。果实防腐试验显示,胞外抗菌蛋白粗提液对采后苹果轮纹病具有良好的防治作用,防治效果与纳他霉素相当,而发酵液的效果不明显。解淀粉芽胞杆菌NCPSJ7及其抗菌蛋白对苹果轮纹病菌具有抑制作用,同时,NCPSJ7产抗菌蛋白对于采后苹果轮纹病的生物防治具有良好的实际应用价值。     

利用纳豆菌提取抗菌物质的研究

对纳豆菌产抗菌物质的摇瓶发酵条件进行初步研究,确定纳豆菌发酵的动态变化;用酸沉醇提法从纳豆菌发酵液中提取抗菌物质;采用凝胶过滤层析对抗菌物质粗提物进行纯化,并对提取、纯化效果进行分析,表明纳豆菌能够产生多个组分的抗菌物质。     

纺织品抗菌性能检测方法及其评估

介绍了纺织品经壳聚糖整理剂加工整理后抗菌作用的检测方法。并对纺织品抗菌性能的各种检测方法进行了对比。推荐使用统一的检测标准来反映纺织品抗菌性能。     

酶制剂抗菌活性检测标准菌株的药敏性分析

即将正式颁布的国家标准《食品加工用酶制剂通用卫生标准》首次将酶制剂的抗菌活性列入检验指标,并采用了国际标准检验方法。研究针对国际标准方法中规定的6株酶制剂抗菌活性检验标准菌,选择了9大类40种常用抗生素,采用Kirby-Bauer法进行药敏性测定与分析。结果显示,6株标准菌对不同类的抗生素表现为不同的敏感性,但这一菌株组合对全部40种抗生素均为敏感。因此,此菌株组合具有较为广谱的药物敏感性,能较为全面的检测酶制剂中的抗菌物质;且标准菌株的药敏性图谱可为今后进一步分析酶制剂中抗菌活性物质的种类提供参考。     

南瓜多糖抑制α-淀粉酶及抑菌活性的研究

研究了南瓜多糖对α-淀粉酶活性的抑制效果及其抗菌性。结果表明:南瓜多糖对α-淀粉酶活力的抑制作用较弱;热水提取的南瓜多糖抗菌活性较高,并且对大肠杆菌的抑制作用强于枯草芽孢杆菌,但是对黄曲霉和黑曲霉没有抑制性。     

罗伊氏乳杆菌的益生特性及安全性分析

本研究对一位128岁老人源罗伊氏乳杆菌进行了体外益生特性和安全性分析。采用模拟胃肠液对49株罗伊氏乳杆菌进行耐受筛选,得到了3株存活率都大于90.00%的菌株,分别是LT018、LT037、LT046。对上述3株罗伊氏乳杆菌进行表面特性、抑菌活性和安全性分析,结果表明,LT018具有较好的粘附繁殖能力(疏水性为54.65%,凝集性为67.20%),菌株的表面疏水性和凝集性之间存在负相关(R=-0.869);非酸性抑菌活性物质在酸性条件下才发挥作用,它们的上清液对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌、伤寒沙门氏菌和福氏志贺氏菌均有较明显的抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑制效果最佳,抑菌圈直径均大于15.00 mm;它们都不具有产生物胺有害物质的活性,除氯霉素外,对其他4种临床常用抗生素(红霉素、四环素、庆大霉素、万古霉素)敏感。综合上述结果,认为这些菌株具有良好的开发潜力。     

人溶菌酶基因在乳酸克鲁维酵母中的表达

人溶菌酶是一种天然广谱抑菌物质,在食品和医药工业有潜在应用前景。为获得高活性的人溶菌酶制剂,采用乳酸克鲁维酵母表达系统,对经密码子优化的人溶菌酶基因(h LYZ)进行分泌表达。将人工合成h LYZ插入到乳酸克鲁维酵母表达载体p KLAC1,构建重组载体p KLAC1-h LYZ,并用电脉冲法将SacⅡ线性化的重组质粒转化到乳酸克鲁维酵母GG799中。通过全细胞PCR鉴定,最后获得了一株多拷贝整合的基因工程菌h LYZ1。工程菌可以分泌表达分子量约14 ku的目的蛋白质,与预期大小相符。摇瓶发酵培养128 h,酶活最高达到1430 U/mL。抗菌活性检测结果显示,重组人溶菌酶对溶壁微球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌有较好的溶菌活性。本研究成功地在乳酸克鲁维酵母中表达了重组人溶菌酶,表达的蛋白具有较高的酶活性,试验结果为利用乳酸克鲁维酵母表达系统规模化生产重组人溶菌酶奠了基础。     

广谱抑菌物质产生菌GX-21的筛选及鉴定

本研究在广东省及其周边地区共11个采样地点采集土壤样品156份,分离得到放线菌1026株。土壤预处理采用碳酸钙富集培养法,分离采用平板稀释法,选取高氏一号合成培养基作为分离培养基,添加50 mg/L重铬酸钾作为抑制剂。初筛采用琼脂块法,选择金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希氏菌、白假丝酵母菌、黑曲霉共5种指示菌进行抑菌试验,共得到95株活性菌株。复筛选择初筛的5种指示菌加上副溶血性弧菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌共8种指示菌,分两级进行复筛:一级复筛仍采用琼脂块,得到19株活性菌株;二级复筛采用牛津杯定量扩散法,得到5株优良菌株。对优良菌株GX-21进行鉴定,通过形态特征观察、培养特性观察、生理生化试验和16S r DNA序列分析,确定菌株GX-21为多产色链霉菌(Streptomyces polychromogenes)。菌株GX-21具有抑菌谱广的特点,对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌均有抑制作用。     

牡蛎壳丙酸钙的非煅烧法制备工艺及其抑菌活性研究

以牡蛎壳为钙源,不经过高温煅烧,经粉碎、水飞法处理后直接用于制备丙酸钙。为了获得最佳工艺条件,考察了反应温度、丙酸量、反应时间等因素对产率的影响。结果表明,在60℃、丙酸过量75%条件下转化反应进行2h,丙酸钙产率可达87.9%,且产品纯度大于99.5%。同时,研究还发现丙酸钙对大肠杆菌、志贺氏菌和荧光假单胞菌三种革兰氏阴性菌均有一定的抑制效果,并具有显著延缓面包片霉变的效果。     

抗菌肽的来源、活性及作用机制最新研究进展

在过去的几十年中,抗生素药物的过量使用导致耐药性(antimicrobial resistance, AMR)的产生,这促使人们开始寻找传统抗生素的潜在替代品,从而降低AMR的发生率。目前,研究人员开始持续关注具有广谱抗菌活性的抗菌肽(antimicrobial peptides, AMPs)。AMPs是一种能够抑制细菌、真菌、病毒、寄生虫、肿瘤细胞等的小分子多肽,是不同生物体先天免疫系统的重要组成部分,是宿主抵御病原体的第一道防线,具有快速杀伤活性、低毒性和细胞选择性等优点,在医药、食品、畜牧业、农业等领域均具有良好的应用前景。本文概述了AMR的发展、来源、结构、生物活性和作用机制,并讨论了AMPs转化为临床应用所面临的挑战,旨在总结AMPs结构和作用机制的最新研究进展,并提供其微生物活性的详细证据,为人们进一步深入研究AMPs的抗微生物作用机制提供借鉴与参考。     

芽孢杆菌的产酶特性及其对抗生素的耐受性

以4株枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）和2株地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）为研究对象,通过测定其成胞率、中性蛋白酶活性及对24种抗生素的耐受性,从中筛选优良芽孢杆菌。结果表明,从6株芽孢杆菌中筛选得到3株成胞率和产中性蛋白酶均较好的芽孢杆菌,分别为枯草芽孢杆菌BLCC1-0552、BLCC1-0615和地衣芽孢杆菌BLCC1-0441,液体发酵24 h后,成胞率较高,均达到98%;中性蛋白酶活性分别为90.58 U/mL、100.32 U/mL和24.72 U/mL。其中,枯草芽孢杆菌BLCC1-0615固体发酵玉米-豆粕型常规饲料产中性蛋白酶活力最高,发酵48 h时达到2 154.49 U/g。3株芽孢杆菌对抗生素的耐受性不一致,其中枯草芽孢杆菌BLCC1-0615对24种抗生素中的17种表现敏感,敏感率最高为70.83%。因此,确定优良菌株为枯草芽孢杆菌BLCC1-0615,其成胞率、产中性蛋白酶能力好及对抗生素耐受性较低,具有作为饲料添加剂应用于畜禽饲料中的潜力。     

Gene function adjustment for carbohydrate metabolism and enrichment of rumen microbiota with antibiotic resistance genes during subacute rumen acidosis induced by a high-grain diet in lactating dairy cows

The high-grain diets fed to ruminants generally alters the structure and function of rumen microbiota, resulting in variations of rumen fermentation patterns and the occurrence of subacute rumen acidosis (SARA). To clarify the microbial mechanism for carbohydrate metabolism during SARA, 8 ruminally cannulated Holstein cows in mid lactation were selected for a 3-wk experiment. The cows were randomly divided into 2 groups, fed either a conventional diet (CON; 40% concentrate; dry matter basis) or a high-grain diet (HG; 60% concentrate; dry matter basis). Compared with the CON diet, the HG diet reduced average daily pH (5.71 vs. 6.13), acetate concentration (72.56 vs. 78.44 mM), acetate ratio (54.81 vs. 65.24%), and the ratio of the concentrations of acetate to propionate (1.87 vs. 3.21) but increased the concentrations of total volatile fatty acids (133.03 vs. 120.22 mM), propionate (41.32 vs. 24.71 mM), and valerate (2.46 vs. 1.68 mM) and the propionate ratio (30.51 vs. 20.47%). Taxonomic analysis indicated that the HG cows had a higher relative abundance of Ruminococcus, Eubacterium, Selenomonas, Ruminobacter, Succinimonas, Methanomicrobium, and Methanocaldococcus accompanied by a lower relative abundance of unclassified Firmicutes, unclassified Bacteroidetes, Bacteroides, Fibrobacter, Alistipes, Candidatus Methanoplasma, Methanomassiliicoccus, and Methanolobus. Carbohydrate-active enzyme annotation suggested that there was enriched abundance of glycosyltransferases (GT) 2, glycoside hydrolase (GH) 13, GH24, carbohydrate-binding module (CBM) 26, GH73, GH25, CBM12, GH23, GT8, CBM50, and GT9 and reduced abundance of GH78, GH31, S-layer homology, GH109, carbohydrate esterase 1, GH3, carbohydrate esterase 10, and GH43 in the HG group. Functional profiling revealed that the HG feeding mainly downregulated the pentose phosphate pathway of carbohydrate catabolism, acetate metabolism, propionate metabolism (succinate pathway), and methane metabolism, whereas it upregulated the Embden-Meyerhof-Parnas and Entner-Doudoroff pathways of glycolysis and the citrate cycle. Additionally, the HG feeding promoted the abundance of various antibiotic resistance genes and antimicrobial resistance gene families. These results elucidated the structure and function adjustment of rumen microbiota for carbohydrate metabolism and summarized the enrichment of rumen antibiotic resistance genes under the HG feeding, which expands our understanding of the mechanism underlying the response of rumen microbiota to SARA in dairy cattle.