大黄中α-淀粉酶抑制因子的研究

采用甲醇粗提、石油醚、二氯甲烷、乙醚、乙酸乙酯、乙醇索氏极性梯度提取、pH梯度萃取以及硅胶制备板纯化并结合各组分α-淀粉酶抑制活性跟踪方法对大黄中α-淀粉酶抑制因子的分布进行了系统研究。结果表明,乙酸乙酯和乙醇组分对α-淀粉酶的抑制率分别为35.0%和26.9%;前者的pH梯度萃取组分为NaHCO3、Na2CO3、NaOH、剩余乙酸乙酯,对α-淀粉酶的抑制率依次为:66.5%、46.7%、58.1%和49.0%。其中NaHCO3组分用硅胶制备板纯化并水解,经薄层分析认定其苷元是大黄酸。纯化后对α-淀粉酶的抑制率不升反降的事实暗示了粗样中杂质的协同作用。     

青钱柳抑制α-淀粉酶活性筛选研究

目的:研究青钱柳提取物对α-淀粉酶的抑制作用。方法:采用不同溶剂(石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、无水乙醇和水)回流提取和不同溶剂(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇)萃取法制备青钱柳提取物,采用α-淀粉酶的抑制模型评价其活性筛选最佳提取方法;在此基础上,研究不同来源青钱柳对α-淀粉酶的抑制活性。结果:石油醚回流提取法获得的提取物对α-淀粉酶活性抑制最好;在30 mg/m L时,不同来源青钱柳石油醚提取物的抑制率分别为:江西修水(36.4%),湖南八大公山(71.0%),湖南张家界(67.6%),湖南绥宁(58.3%),湖南邵阳(59.6%),贵州榕江平阳(35.3%),贵州榕江小丹江(65.7%),贵州贵阳(67.7%)。结论:石油醚回流提取法适于获得青钱柳α-淀粉酶抑制活性成分;不同来源青钱柳提取物对α-淀粉酶均具有抑制作用,但存在差异性。     

广金钱草不同极性萃取物体外降脂及降血糖活性的比较

该研究旨在比较广金钱草乙醇提取物及其各萃取相的体外降脂及降血糖活性。以φ=75%乙醇为溶剂，回流提取得到广金钱草醇提物，经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水依次萃取，利用比色法检测乙醇提取物及各萃取相中总黄酮、总酚含量，并根据胰脂肪酶和胆固醇酯酶的抑制率评价乙醇提取物及其各萃取相的体外降脂活性，对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制率评价体外降血糖活性。研究结果显示乙酸乙酯萃取相中总黄酮和总酚含量最高，分别为154.57 mg/g和34.27 mg/g。乙醇提取物对胆固醇酯酶和α-葡萄糖苷酶的抑制活性最高，抑制率分别为53.24%和68.52%；正丁醇萃取相对胰脂肪酶表现出最高的抑制活性，抑制率达到77.39%。石油醚萃取相对α-淀粉酶的抑制作用最强，抑制率达到78.60%。研究表明，广金钱草乙醇提取物及其各萃取相具有显著的降脂和降血糖活性，可为其深入研究药理活性提供参考依据。     

番石榴叶黄酮与多糖提取及其降血糖活性研究

从番石榴叶中提取总黄酮以及多糖,测定其对α-葡萄糖苷酶以及猪胰液α-淀粉酶抑制活性以评估其降血糖活性。结果表明番石榴叶中提取的黄酮类以及多糖类化合物对这2种酶都具有较好的抑制活性,其中黄酮和多糖对蔗糖酶的抑制率分别为63.5%和29.3%,对麦芽糖酶的抑制率分别为47.7%和20.6%,对α-淀粉酶的抑制率分别为54.4%和31.9%。此外,所提取的总黄酮以及多糖对α-葡萄糖苷酶以及猪胰液α-淀粉酶的抑制活性存在协同作用,两者混合的酶抑制活性更好,其中黄酮和多糖的混合物对蔗糖酶,麦芽糖酶以及α-淀粉酶的抑制率分别为75.8%,53.5%和60.1%。     

花生芽中白藜芦醇的亚临界水萃取及抑制酶活性研究

为了提高花生芽中白藜芦醇的提取率，此试验通过考察液料比、亚临界萃取温度、萃取时间、提取次数对花生芽中白藜芦醇提取率的影响，在单因素试验基础上进行响应面优化亚临界水萃取花生芽中白藜芦醇的工艺。并通过测定白藜芦醇纯化物抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性的能力研究其抑制酶活性。结果表明，亚临界水萃取花生芽中白藜芦醇的最优工艺为：萃取温度135℃，萃取时间30 min，液料比130∶1(m L/g)，在此条件下整个试验过程重复三次，白藜芦醇提取率为（7.65±0.04）mg/g。花生芽白藜芦醇具有良好的抑制酶活性能力，其对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制率分别为67.36%、73.38%。     

诃子活性成分的抗氧化活性及其结构鉴定

本实验中制备了诃子不同溶剂粗提物及部分纯化物,并考察了它们的清除自由基活性。1.1-二苯基-2-苦肼基(DPPH.)清除实验结果表明,所有粗提物均具有很强的活性,其顺序为:甲醇>乙酸乙酯>丙酮>乙醚>石油醚。其中甲醇粗提物(1 mg/mL)活性略高于等浓度的TBHQ;色谱纯样a比其原粗提取物(乙酸乙酯)的抑制率提高最多,为其1.6倍,而甲醇粗提物纯化样c的绝对活性最高,约为同浓度TBHQ(1 mg/mL)的1.2倍,且略高于茶多酚。它们的化学结构经显色反应、UV-Vis和H1NMR检测推定:a为诃黎勒酸,b为棓酸衍生物,是诃子单宁的小水解碎片,而c是诃黎勒酸的变体。     

红豆肽的制备、分离纯化及降糖活性研究

目的：筛选红豆蛋白的酶解工艺并研究红豆多肽的降糖活性及构效关系。方法：采用碱沉酸提法提取红豆粗蛋白,以肽得率、水解度、α-葡萄糖苷酶抑制、Fe2+螯合率、DPPH清除率为指标筛选最佳蛋白酶;酶解得到红豆多肽,醇沉多糖后通过DA201-C大孔吸附树脂进行脱盐纯化后,测定多肽的分子量及氨基酸组成来探讨其构效关系。结果：经4种蛋白酶（中性、碱性、风味、复合蛋白酶）水解后,碱性蛋白酶的肽得率为82.95%,水解度为52.67%,实验浓度范围内最佳α-葡萄糖苷酶抑制为72.14%,比其他3种酶均高;85%乙醇醇沉后的肽糖比、α-葡萄糖苷酶抑制率（73.49%）和α-淀粉酶抑制率（31.31%）均最高,脱盐纯化后肽含量高达97.61%,在2 mg/mL时测定对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制效果,分别为52.49%和14.63%,表明除去多糖后红豆多肽仍具有独立降血糖活性;经测定,红豆多肽以小分子为主,3 kDa以下占比91.40%,其中小于1 000 Da占比达到75.28%。纯化后疏水性氨基酸占比约37.28%,其中甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸和谷氨酸含量较高。结论：碱性蛋白酶是制备红豆多肽的最佳蛋白...     

黑豆皮多酚提取物体外对α-淀粉酶和α-葡萄糖 苷酶活性的影响

目的以小麦粉、大米粉、小米粉、玉米粉4种常食用谷物和4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(4-Nitrophenyl-α-D-glucopyranoside,p NPG)为底物,研究在不同底物下不同浓度黑豆皮多酚提取物对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性的影响,同时探明其对酶的抑制动力学。方法采用大孔树脂纯化黑豆皮提取物,Folin-Ciocalteu比色法测定多酚含量,分光光度法测其抑制率,多重比较分析不同底物及不同浓度提取物的差异。结果提取物溶液浓度与抑制作用呈量效关系:当抑制剂浓度为0.25、0.5、1、2 mg/mL时谷物类底物间抑制率存在显著差异(P0.05),4、6 mg/mL时差异不显著;经纯化后多酚含量(78.3%)较纯化之前(39.5%)显著提高,同时其对酶抑制作用较纯化之前显著增强;动力学分析结果表明黑豆皮多酚提取物对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶两种酶的抑制类型分别为竞争性抑制和非竞争性抑制类型。结论黑豆皮多酚提取物在体外对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶均具有较强的活性抑制作用。     

真姬菇菌丝体发酵藜麦产物中多糖的抗氧化和α-淀粉酶抑制活性

利用真姬菇发酵藜麦,通过单因素试验优化发酵物中多糖的提取条件,并将提取的多糖进一步分离纯化,分别测定多糖纯化前后的抗氧化和α-淀粉酶抑制活性。试验结果表明:酶解辅助提取法较优,多糖提取量为(207.67±2.52)mg/g。对提取到的多糖分离纯化后得到4种多糖组分。未纯化多糖(unpurified polysaccharide,UP)对DPPH和羟基自由基清除效果较其他组分显著,最高清除率达到28.95%与43.36%;中性多糖(neutral polysaccharide,NP)对ABTS+自由基清除效果最为明显,最高值达到了51.22%。酸性多糖-0.1(acid polysaccharide-0.1,AP-0.1)对枯草芽孢杆菌来源的α-淀粉酶的抑制效果最强,最高抑制率为60.22%;酸性多糖-0.5(acid polysaccharide-0.5,AP-0.5)对猪胰腺来源的α-淀粉酶抑制能力较显著,最高抑制率为50.36%。结果表明真姬菇与藜麦发酵产物多糖具有一定的抗氧化和α-淀粉酶抑制活性,为其在功能性食品添加剂方向的应用提供了数据基础。     

葡萄籽原花青素的分离纯化及其自由基淬灭活性的研究(上)

葡萄籽经有机溶剂梯度法及酶法提取,大孔树脂初步纯化,薄层色谱法分离纯化得到原花青素单体和二聚体。结果表明,以60％醇于50℃浸提3次、每次30min（固液比1：7,w／v）效果最好;梯度提取各细分原花青素得率为：（7．73-281．49）mg／100g葡萄籽,其中以乙酸乙酯组分最高,其次为丙酮、乙醇、乙醚。在浓度为0．004g／mL时,淬灭自由基活性最高的是乙醇组分,抑制率为85．13％,其次是乙醚（77．60％）和乙酸乙酯组分（48．64％）。大孔树脂纯化以40％乙醇最佳。以制备薄层法（展开体系：v甲苯：v丙酮：v冰乙酸=2：2：1）分别对乙酸乙酯、乙醚组分进行纯化,前者原花青素单体和二聚体的百分含量分别为33．25％和16．23％,后者为60．64％和10．13％．     

苦荞提取物成分分析及不同极性提取物对α-淀粉酶的抑制作用

采用石油醚、乙酸乙酯与正丁醇萃取获得不同极性的苦荞提取物,采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法分析提取物的成分。结果表明苦荞提取物中含有大量的黄酮类物质,主要包括芦丁、槲皮素、异槲皮素及其糖苷等,还含有羟基苯甲酸等酚酸类物质。再以抑制率、抑制类型、荧光猝灭效应实验分析提取物对α-淀粉酶的抑制作用。结果表明,苦荞提取物对α-淀粉酶的抑制作用表现为乙酸乙酯相提取物、正丁醇相提取物与粗提物的结果类似,都有较为显著的抑制作用,而石油醚相提取物则没有明显且规律的抑制效果,可推断出苦荞提取物中各成分共同发挥了对α-淀粉酶活性的抑制作用,且抑制类型为非竞争性抑制。通过荧光猝灭实验得知抑制的机理为苦荞提取物中的成分与α-淀粉酶结合,从而使α-淀粉酶的荧光特性发生静态猝灭。     

野艾蒿提取物对金黄色葡萄球菌的抑制作用

本文以95%的乙醇为溶剂,采用超声辅助提取的方法对野艾蒿进行提取,得到的粗提物干膏用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取,得到不同的萃取组分。采用水蒸气蒸馏法提取野艾蒿中的挥发油。采用滤纸片法和二倍稀释法研究各个萃取组分和挥发油对金黄色葡萄球菌体外抑菌活性。并研究了野艾蒿提取物对金黄色葡萄球菌生长曲线的影响。以昆明小鼠为实验动物进行体内抑菌实验。体外抑菌实验表明各组分的抑菌能力大小为乙酸乙酯相正丁醇相石油醚相=挥发油。水相组分未检出抑菌活性。石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相、挥发油的最小抑菌浓度(MIC)依次为为10.00,2.50,5.00,10.00mg/mL。乙酸乙酯相和正丁醇相对金黄色葡萄球菌的生长有显著的抑制作用(p0.05)。体内抑菌实验表明小鼠灌胃0.50 g/kg的野艾蒿提取物时,体内抑菌活性最好。比模型组的死亡率降低了77.78%。实验表明野艾蒿提取物对金黄色葡萄球菌具有抑菌活性。     

乳苣不同溶剂提取物对α-淀粉酶的抑制作用及光谱研究

利用3,5-二硝基水杨酸(DNS)和8-苯胺-1-萘磺酸(aNs)荧光探针法,研究乳苣不同溶剂提取物对α-淀粉酶的抑制作用和类型、紫外光谱和表面疏水性的影响。结果表明:水、正丁醇、石油醚、氯仿和乙酸乙酯提取物对α-淀粉酶的半抑制浓度(IC₅₀)分别为2.002、4.086、1.248、4.299和6.904mg/mL。水提取物对α-淀粉酶为可逆非竞争性抑制,抑制常数(K_i)为1.653mg/mL。正丁醇提取物对α-淀粉酶为可逆混合性抑制,K-和酶-底物络合物抑制常数(K_is)分别为0.795和0.435mg/mL。石油醚提取物对α-淀粉酶为不可逆竞争性抑制,K_i为2.893mg/mL。水、正丁醇和石油醚提取物可增强Ot一淀粉酶紫外吸收,但均不改变吸收峰。水提取物增强ANS荧光强度,低浓度正丁醇提取物增强了荧光强度,高浓度则降低了荧光强度,石油醚提取物则与此相反。另外,各提取物均使ANS发生蓝移。该研究可为进一步开发天然淀粉酶抑制剂提供理论依据。     

苦笋壳提取物不同极性相抗氧化与降血糖活性研究

研究苦笋壳不同提取相的抗氧化作用和对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的活性抑制作用。以70%(体积分数)乙醇和水分别对苦笋壳进行提取,并测定提取物中的黄酮、总酚及总糖含量。以ABTS阳离子自由基、DPPH自由基、·OH清除能力、铁离子抗氧化能力(ferric reducing ability of plasma, FRAP)等方法评价其抗氧化活性,测定乙酸乙酯、正丁醇、石油醚3种萃取相对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制活性。结果表明,水提方式总糖含量为(97.3±0.28)%,高于醇提方式。总酚和黄酮含量在醇提相中较高,分别是(28.53±1.67)%和(27.22±2.02)%。从对α-葡萄糖苷酶抑制活性上看,醇提相大于水提相。醇提方式下抗氧化活性：乙酸乙酯相>正丁醇相>石油醚相,乙酸乙酯相对·OH清除能力可达(67.32±1.57)%,乙酸乙酯相对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制活性最强,IC₅₀值分别是(0.158±0.003)、(0.104±0.006)mg/mL,酶抑制动力学结果表明苦笋壳乙酸乙酯相对α-葡萄糖苷酶抑制类型为竞争性抑制类型,对α-淀...     

黄花倒水莲不同极性部位抗氧化和降血糖活性研究

探究黄花倒水莲醇提物的不同萃取物的抗氧化和降血糖作用。采用95%乙醇制备黄花倒水莲提取物,通过有机溶剂萃取法对其进行纯化,分别得到石油醚部分、乙酸乙酯部分、正丁醇部分、氯仿部位和水相部分;采用Folin-Ciocalteu法分别测定其多酚含量,采用NaNO₂-Al(NO₃)₃法分别测定其黄酮含量;通过ABTS法、DPPH法、羟自由基法、α-葡萄糖苷酶抑制活性来评价黄花倒水莲的体外抗氧化、降血糖活性。结果显示,黄花倒水莲醇提物中多酚、黄酮含量丰富,经萃取分段后乙酸乙酯萃取物中多酚含量最高,可达(483.9±0.8)mg/g,石油醚部位黄酮含量最多高达(53.1±0.57)mg/g。黄花倒水莲醇提物及各萃取物均表现出很好的抗氧化能力。ABTS总抗氧能力显示乙酸乙酯部位抗氧化活性最强,其对羟自由基,DPPH自由基清除率远高于阳性对照V_C,此外其对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制活性(IC₅₀=(0.064±0.013)mg/mL),其作用强度远高于阳性对照阿卡波糖(IC₅₀=(0.867±0.032)mg/mL)。因此,黄花倒水莲各部位均有抗氧化,降血糖作用,乙酸乙酯部位最佳,可能活性成分为多酚类化合物。     

山奈抗氧化活性部位研究

为筛选具有较优抗氧化活性的山奈抗氧化活性部位,采用80%乙醇溶液超声提取山奈,提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取,制备了山奈乙醇提取物和石油醚相、氯仿相、乙酸乙酯相、正丁醇相和水余相5个部位,并分别采用DPPH和ABTS法测试了其抗氧化活性。结果显示:山奈提取物具有较好的抗氧化活性,5个部位中,氯仿相抗氧化活性最好,其对ABTS的半清除浓度约为阳性对照V_C的2倍,对DPPH的半清除浓度约为阳性对照V_C的4倍,乙酸乙酯相也具有较好的抗氧化活性,再次是正丁醇相,石油醚相抗氧化活性较差,水余相基本没有抗氧化活性。山奈具有较好的抗氧化活性,抗氧化活性成分主要集中在氯仿相和乙酸乙酯相。     

西印度醋栗枝叶提取物的α-葡萄糖苷酶抑制活性及安全性评价

对西印度醋栗(Phyllanthus acidus Skeels)枝叶提取物的α-葡萄糖苷酶抑制活性及安全性进行评价,为该植物的安全食用和药用研发提供参考。采用溶剂回流提取得到西印度醋栗枝叶的全组分样品,然后按照极性大小进一步对全组分进行分组划段,分别得到石油醚、乙酸乙酯和正丁醇组分,以及乙醇洗脱组分和水溶出组分;以半抑制浓度(IC₅₀)为评价指标,比较不同组分的α-葡萄糖苷酶抑制活性。通过经典急毒实验法测定各组分对小鼠的近似最大耐受量(MTD)和半数致死量(LD₅₀),将全组分样品进行连续灌胃20 d评价其亚急性毒性。结果表明,西印度醋栗枝叶各组分对α-葡萄糖苷酶均有一定的抑制能力;全组分的MTD为2.0 g/kg,不同组分样品的毒性大小为乙醇洗脱组分>水溶出组分>石油醚组分>乙酸乙酯组分>正丁醇组分>全组分。主要急性毒性症状是惊跳随后怠动、扭体、呼吸急促等。亚急性毒性试验未见明显毒性反应及病变,表明在口服摄入西印度醋栗全组分2 g/kg/d(相当于干燥枝叶8.6 g/kg)是安全的,具有开发为降血糖、减肥食品...     

泽泻提取物对α-葡萄糖苷酶抑制活性的研究

将泽泻水提取物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,萃取后的水相过大孔树脂柱得到水洗脱部分和95%乙醇洗脱部分,然后测定各部分的酶抑制活性,对高活性部分进行酶抑制动力学研究。结果显示,正丁醇萃取部分的抑制活性最高,α-葡萄糖苷酶抑制率达92.30%,高于阳性对照阿卡波糖。正丁醇萃取部分的抑制作用属非竞争性抑制。     

老山芹降血糖功能成分提取及活性研究

为增加老山芹资源的开发利用价值,以老山芹为原料,采用不同溶剂(不同浓度乙醇溶液、甲醇、乙酸乙酯)超声波辅助提取老山芹活性成分,以α-葡萄糖苷酶抑制率和α-淀粉酶抑制率为指标,确定适宜的提取溶剂,并通过单因素和响应面优化试验确定可保留老山芹降血糖功能成分的最佳提取条件。结果表明:适宜的提取溶剂为80%乙醇溶液,优化后的提取条件为超声温度49 ℃,超声时间114.5 min,料液比1:15.3 (g/mL),在此条件下得到老山芹提取液对α-葡萄糖苷酶抑制率为69.52%±1.13%,α-淀粉酶抑制率为56.38%±0.96%,二者的IC₅₀分别为0.169、0.339 mg/mL。老山芹可以作为具有降血糖功能的抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的物质来源。     

橡子仁萃取物成分分析及对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶的抑制作用

为探索橡子仁萃取物的成分组成及对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶的抑制作用,以栓皮栎橡子仁为材料,采用超声波辅助乙醇提取和有机溶剂萃取,制备橡子仁乙酸乙酯、正丁醇、水萃取物,通过紫外吸收光谱、高效液相色谱分析各萃取物的化学成分组成,通过抑制率测定、抑制动力学和荧光猝灭试验分析各萃取物的体外抑酶效果及作用机制。结果表明:三种橡子仁萃取物结构高度相似,主要为单宁类物质;乙酸乙酯萃取物含表儿茶素没食子酸酯、没食子酸、没食子儿茶素没食子酸酯等9种物质;正丁醇萃取物含表儿茶素没食子酸酯、儿茶素、没食子儿茶素没食子酸酯等16种物质;水萃取物含没食子酸、绿原酸等21种物质。三种橡子仁萃取物均可有效抑制α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶活性,乙酸乙酯、正丁醇、水萃取物对α-淀粉酶的半抑制浓度（IC₅₀）分别为1.047、1.122、4.031 mg/mL,对α-葡萄糖苷酶的IC₅₀值分别为0.014、0.028、0.037 mg/mL。三种萃取物对两种酶的酶抑制类型多为混合型抑制,荧光猝灭类型多是以静态猝灭为主,动态猝灭为辅的混合猝灭。