冰结构蛋白及其应用研究

就近年来冰结构蛋白在鱼类、植物、昆虫、细菌和真菌的分类,抗冻机制,作为食品添加剂的安全性以及在食品、农业、医学上的应用等作了较为全面的综述.     

融合蛋白IFN-IgG Fc在乳酸乳杆菌中的表达及其生物学活性研究

用乳酸菌表达有药用价值的生物学活性多肽,是当前国际上的研究热点之,对开发新的功能性食品具有广阔的前景.本文应用PCR方法将人干扰素IFN-α-2b基因与IgG Fc基因连接,并引入一段柔性连接肽,构建了融合蛋白基因IFN-IgG Fc,将融合蛋白基因克隆到原核表达载体pSC111 AE中,转化乳酸乳杆菌ATCC393进行诱导表达及鉴定,并研究了融合蛋白的生物学活性.结果表明,通过Western-Blot方法在表达上清液检测出干扰素融合蛋白,ELISA测定表明两段多肽能够保持各自的构象,基因工程乳酸菌表达的上清液可以诱导WISH细胞产生明显的抗VSV病毒的活性,其活性为1.71×103IU/ml.本文首次构建并在大肠杆菌和乳酸菌表达了IFN-IgG Fc融合蛋白,获得了能产生人干扰素的乳酸菌株,为基因工程乳酸菌及相关药物的开发研究奠定了基础.     

葡萄根癌病病原菌中效应蛋白Tae4与其免疫蛋白Tai4的鉴定与分析

葡萄根癌病是一种由葡萄根癌病病原菌引起的革兰氏阴性细菌病害。而革兰氏阴性细菌含有非致病相关效应蛋白Tae4,可以杀死其他竞争菌种。有些革兰氏阴性菌本身可表达免疫蛋白Tai4,使自身免受伤害。本研究鉴定了18个Agrobacterium tumefaciens和4个Agrobacterium vitis株系的Tae4和Tai4蛋白,结果显示,A.tumefaciens含有14个Tae4蛋白,A.vitis含有1个Tae4蛋白和1个Tai4蛋白。通过蛋白性质分析、进化树分析、蛋白结构分析和编码基因的选择压力分析表明,A.tumefaciens Tae4蛋白和A.vitis Tae4蛋白相似度不高;A.tumefaciens Tae4蛋白可分为2组;A.tumefaciens和A.vitis的Tae4基因间遭受正向选择。对葡萄根癌病病原菌株系Tae4蛋白和Tai4蛋白的鉴定与分析将为借助Tae4蛋白消灭致病菌,进而防治病害奠定基础。     

食用蛋白新资源—叶蛋白

所谓叶蛋白,就是将新鲜植物的叶子切碎、压榨后从汁液中分离出来的一种蛋白质。早在1773年,Ruline就从压榨的绿叶汁液中分离出一种浓缩蛋白液。在第二次世界大战期间,由于传统蛋白食品供给的严重缺乏,英国最先选择了绿叶植物作为代用食品蛋白的来源. Pirie首先对此进行了详细的研究,建立了提取和浓缩绿叶蛋白的传统方法,并分析了提取物的化学成分与营养价值。战后,英国的科学工作者发展了叶蛋白     

乳清蛋白改性的研究进展

乳清蛋白具有多种功能特性,例如乳化性、成胶性和起泡性,广泛地应用于食品中.许多研究证明,通过改性可进一步改善乳清蛋白的功能特性,开发新型的功能性乳清蛋白配料,拓展其在食品工业中的应用范围.乳清蛋白的改性方法包括物理、化学和酶法改性以及相互结合的方法,选择性使用改性方法、控制反应条件可以改善所需的功能特性.通过美拉德反应对乳清蛋白的糖基化改性是一种比较新的方法,但已经成为食品中研究的热点.     

植物抽取物对冰核活性细菌表达冰核活性蛋白的影响

植物提取物对于冰核活性细菌表达冰核活性蛋白具有明显的促进作用。通过添加适量的芥菜籽热水抽取物培养冰核活性细菌 (XanthomonasampelinaTS2 0 6) ,细菌的冰核活性比原来提高了 37.5 %,菌体的生物量提高了 36.2 %。芥菜籽抽提物作为一种效应物分子激活启动子 ,在冰核蛋白基因的表达中起到了重要作用 ,从而显著地提高了细菌高水平表达冰核活性蛋白的能力。     

抑菌活性蛋白(肽)作为食品防腐剂的研究进展

介绍三种抑菌活性蛋白(抗菌肽,细菌素,溶菌酶)的来源、种类、结构、生物活性、抑菌机理、制备方法.在食品防腐中的作用机理,应用及应用前景.     

小麦面筋蛋白研究进展

小麦面筋蛋白是一种营养丰富、物美价廉的植物性蛋白,在食品和非食品领域都有着广泛的应用。但由于天然的小麦面筋蛋白流变性和热稳定性相对较差,使其应用范围受到一定的限制。因此,小麦面筋蛋白的改性对开发其新的应用价值显得尤为重要。综述了小麦面筋蛋白结构和功能性质的一些影响因素,探讨了小麦面筋蛋白的几种改性方法,以期为提高小麦面筋蛋白的应用价值提供支撑。     

乳酸菌细菌素Avicin A的高效表达及抑菌活性研究

乳酸菌细菌素是一种广谱抑菌素,已成为天然食品防腐剂研究与开发的热点。文章进行了该类细菌素在大肠杆菌中的异源表达,并应用Western-blot鉴定。利用组氨酸标签纯化及Trx-Tag标签的切除,对重组蛋白的抑菌活性进行检测。根据GenBank数据库中公布的细菌素Avicin A基因设计引物,以本实验室分离自酸马乳中的乳酸菌XM-38株为模板,采用PCR方法扩增了细菌素Avicin A片段,利用原核表达载体pET-32a(+)构建重组质粒HIS-Trx-Avicin A,将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中表达,获得了可溶性表达的融合蛋白(HIS-Trx-Avicin A)。SDS-PAGE分析HISTrx-Avicin A蛋白大小约为42 ku,表达量约占菌体总蛋白的19%。经亲和柱层析纯化后,得到纯化的HIS-Trx-Avicin A蛋白,含量180μg/mL。用肠激酶对融合蛋白HIS-Trx-Avicin A进行解离,获得浓度为20μg/mL的目的蛋白Avicin A。对HIS-Trx-Avicin A进行Western-blot鉴定,表明该细菌素蛋白得到了重组表达,对多种菌的抑菌实验表明,该重组蛋白具有良好的抑菌活性,研究的Avicin A为食品添加防腐剂提供了一个切实可行的来源。     

酶促类蛋白反应的研究进展

酶促类蛋白反应是指将浓缩的蛋白水解物,在适宜的条件下,经蛋白酶催化成蛋白质类似物的过程。酶促类蛋白反应不仅可以弥补天然蛋白质在氨基酸组成上的缺陷,提高蛋白质功能性,改善蛋白水解物的风味,为科研和生产提供新的蛋白质来源,而且利用该方法获得的产品生物利用率高,无毒副作用,所以受到了科学界的广泛关注并逐渐被应用到食品工业之中。本文综述了酶促类蛋白反应的机理、影响因素、产物特性及其在食品领域的应用,以期为食品品质的改善提供新的方法,为新型食品的开发提供新的途径。     

食源性致病菌快速检测方法的探索研究

目的探讨传统细菌培养法及荧光定量PCR检测两种检测方法在食源性致病菌上的检出效果。方法对2015年采集的7类食品共600例样品采用传统细菌培养法及增菌后的增菌液荧光定量PCR检测,对检测结果进行分析比较。结果被检食品存在食源性致病菌污染,600例样品共检测出35株致病菌,食品致病菌的总检出率为5.83%,其中副溶血性弧菌与金黄色葡萄球菌检出率最高,达到15%。蜡样芽胞杆菌检出率较高,达到10.00%。传统细菌培养法致病菌阳性检出率为2.67%,荧光定量PCR检测致病菌阳性检出率为3.17%,两种检测方法下的检出率差异没有明显差异(X~2=1.882,P0.05)。结论检测中将传统细菌培养法同荧光定量PCR检测这两种检测方法结合起来,不仅提高了食源性致病菌检出率,也可缩短检测时间,提高检出率。后续研究将继续加大样本量并覆盖更多食品种类。     

多组学诠释食源性致病菌小菌落变种形成分子机制研究进展

摘 要:食源性致病菌在环境胁迫下可形成小菌落变种(small colony variants, SCVs), 被认为是其抗逆存活的重要调控方式之一。SCVs的形成及防治对于食品安全领域具有重要挑战 , 这是因为与正常细胞相比, SCVs通常具有较强的耐药性, 而且能够抵抗宿主细胞的清除并存活数十年。当条件适宜时，SCVs细胞甚至能够在保持耐药性的同时，重新转变为快速生长细胞。随着生物技术的高速发展, 多组学方法应用到微生物抗逆分子机制研究领域越来越常见。通过基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学和联合组学大大增加研究者对细胞中基因调控及蛋白质表达关键途径的理解。本文就近年来食源性致病菌SCVs诱导途径以及多组学诠释SCVs分子机制研究进展进行综述, 以期为建立针对性的安全控制技术, 抑制食品加工中食源性致病菌SCVs形成提供参考。     

食源性病原菌的富集与检测复合技术研究进展

食源性致病菌对食品安全及人体健康造成威胁。食品中极低浓度的病原菌需要通过前处理再结合有效的检测技术才可检出。现有快速检测方法受到增菌液成分、食品成分或菌体浓度低的影响,需要进行致病菌的分离富集后才能缩短检测时间、进行准确检测。本文分析了单一的致病菌富集法,包括裸磁珠及功能化磁珠的富集法。进而综述了富集与检测一体法,包括电泳技术、微流控技术等。对于致病菌的特异性富集,需要进一步提高吸附率及灵敏度。富集检测复合技术的检测灵敏度及检测限有待不断改进。     

蛋白质组学在乳及乳制品特性研究中的应用

蛋白质组学工具可用于考察蛋白质的多样性.随着越来越多的细菌基因组网络资源的日益丰富,可以利用蛋白质组学技术来筛选各种发酵食品中的微生物所表达的蛋白质,提供全面而动态的研究.综述了蛋白质组学技术的发展,及其在乳蛋白质以及乳酸菌蛋白质表达研究中的应用.以奶酪为例,介绍了蛋白质组学在复杂食品基质中的应用.     

噬菌体编码的金黄色葡萄球菌肠毒素A的 研究进展

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种人畜共患的食源性致病菌,并且能够产生不同种类的毒素,其中金黄色葡萄球菌肠毒素(staphylococcal enterotoxin,SE)是引起食物中毒的一类主要毒素。金黄色葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)在食物中毒事件中的检出率最高,毒性最强,成为目前研究的热点。编码金黄色葡萄球菌肠毒素A的基因sea是由噬菌体携带并在菌体之间传播的。本研究主要综述了编码SEA的噬菌体与SEA之间的关系、SEA的分类、在不同的食品基质中环境因子对SEA产生量、sea基因相对表达量的影响及SEA新型的检测方法等,并介绍了目前金黄色葡萄球菌肠毒素研究的难点及研究方向的分析。     

消除鲜食生菜中细菌污染的研究进展

随着营养均衡的饮食观念不断深入人心,人们对于鲜食蔬果的消费量不断上升。生菜这种广受中西方民众欢迎的蔬菜在日常鲜食食品中具有重要的地位。但是,生菜在种植、采摘、流通、销售等环节都可能会被细菌污染,这些细菌甚至包括金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、蜡样芽孢杆菌、大肠杆菌O157:H7等致病菌。一方面,细菌性腐败菌的大量污染会对生菜货架期造成影响;另一方面,致病菌的污染会造成消费者食物中毒。目前,已有大量消除生菜中细菌污染方法的研究,包括物理清洗、消毒剂杀菌、物理杀菌等。本文对这些细菌消除方法的使用以及优缺点进行系统综述,以期为后续研究或应用提供理论参考。     

磁性纳米材料在食源性致病菌分离中应用的研究进展

食源性致病菌是影响食品安全的主要因素之一。食品中污染的致病菌数量通常较少,加上其基质复杂,常规分析方法常无法直接对致病菌进行高灵敏、高特异的检测。经过生物学修饰和功能化的磁性纳米材料,可特异性地识别食品基质中少量的致病菌,并通过磁场对靶细菌进行快速及高特异性的选择性分离,实现了食品样品中少量致病菌的特异性分离富集,达到了后续分析检测的纯度和数量。本文综述了磁性纳米材料在食源性致病菌分离富集中的研究进展。     

Promising strategies to control persistent enemies: Some new technologies to combat biofilm in the food industry—A review

Biofilm is an advanced form of protection that allows bacterial cells to withstand adverse environmental conditions. The complex structure of biofilm results from genetic-related mechanisms besides other factors such as bacterial morphology or substratum properties. Inhibition of biofilm formation of harmful bacteria (spoilage and pathogenic bacteria) is a critical task in the food industry because of the enhanced resistance of biofilm bacteria to stress, such as cleaning and disinfection methods traditionally used in food processing plants, and the increased food safety risks threatening consumer health caused by recurrent contamination and rapid deterioration of food by biofilm cells. Therefore, it is urgent to find methods and strategies for effectively combating bacterial biofilm formation and eradicating mature biofilms. Innovative and promising approaches to control bacteria and their biofilms are emerging. These new approaches range from methods based on natural ingredients to the use of nanoparticles. This literature review aims to describe the efficacy of these strategies and provide an overview of recent promising biofilm control technologies in the food processing sector.     

提高乳酸菌细菌素合成量方法的研究进展

细菌素是某些细菌通过核糖体合成机制产生的蛋白质或多肽,能够抑制与其亲源关系相同或相近的微生物,某些细菌素在食品加工和发酵过程中能抑制致病菌和腐败菌。乳酸菌被认为是一般公认安全,其细菌素具有安全性高、稳定性好、抑菌谱广等优点,作为一种新型食品防腐剂备受关注,但商品化的乳酸菌细菌素十分有限,仅限于Nisin和Pediocin PA-1等少数几种,合成量低是细菌素在食品中应用受限的主要原因之一。从不同原料中筛选高产菌株、发酵培养基和发酵条件优化、诱变育种、原生质体融合、基因工程方法、群体感应系统调控六个方面,论述了增加乳酸菌细菌素合成量的方法,以期为实现乳酸菌细菌素的工业化生产提供一定的借鉴。     

Application of proteomics to the characterisation of milk and dairy products

The use of proteomic tools allows a global and dynamic view of proteins that are expressed by bacteria. As an increasing number of bacterial genomes is currently available for homology searches, it is now possible to use such techniques to screen proteins expressed by microorganisms used in various fermented foods. Proteomic tools are also useful to investigate protein heterogeneity in protein-rich foods. In this paper the use of proteomic tools for the characterisation of milk proteins and in the study of protein expression of lactic acid bacteria used for manufacture of dairy products is reviewed; particular attention is given applied to advances in proteomic techniques available. The particular case of proteomics applied to cheese as an example of a complex food matrix [a mixture of animal (milk) and microbial proteins] is discussed, focusing on a novel strategy that allows the study of the enzymatic machinery found in situ in cheese.