不同栽培基质桑黄化学成分及抗氧化活性比较

目的 以杨树桑黄Sanghuangporus vaninii为研究对象,比较分析了应用段木和木屑栽培的桑黄子实体中 水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物、粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、总多糖、总黄酮、总三萜含量,麦角甾醇和麦角甾酮的含量差异,并研究了其乙醇提取物的体外抗氧化活性。方法 分别选取段木和木屑栽培的桑黄子实体,依据国家标准对其水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物、粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维的含量进行测定,通过紫外分光光度法、高效液相色谱法（HPLC）测定总多糖、总黄酮、总三萜、麦角甾醇、麦角甾酮含量,采用DPPH·自由基清除能力、ABTS+·自由基清除能力评价其乙醇提取物的抗氧化活性。结果 不同栽培基质对上述13个指标均具有影响。段木栽培的桑黄中水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物、粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、总多糖、总三萜、麦角甾酮含量均高于木屑栽培桑黄;木屑栽培的桑黄中总黄酮、麦角甾醇含量高于段木栽培的桑黄;段木栽培桑黄的抗氧化活性高于木屑栽培桑黄。结论 段木培养基更适宜桑黄子实体中各种化学成分的积累,从而提高其抗氧化活性,代料栽培产桑黄子实体的培养基需进一步优化,研究结果为桑黄栽培基质的优化和桑黄饮品质量评价提供了科学的参考。     

蜜环菌液体培养基配方优选及其活性成分和抗氧化活性研究

目的 从4种蜜环菌液体培养基配方中筛选出最佳液体培养基配方,并测量其菌丝提取物和发酵液提取物的活性成分含量及抗氧化活性。方法 采用目前4种较常用的液体培养基配方在相同温度、转速、时间条件下对蜜环菌进行液体发酵,制备菌丝提取物和发酵液提取物,通过紫外分光光度法测量其主要活性成分含量和抗氧化活性。结果 4种配方菌丝生物量、生物活性物质含量及抗氧化能力差异显著。其中配方1菌丝生物量最高,为1.21 g/L,显著高于其余3种配方(P<0.01, P<0.001)。4种配方菌丝提取物总黄酮、总三萜、总酚含量差异显著,均为配方2最高且显著高于子实体(P<0.001,P<0.01);发酵液提取物主要活性物质含量,配方4总黄酮和总酚含量最高,配方2总三萜含量最高,均显著高于子实体(P<0.01, P<0.001)。抗氧化能力方面,配方1菌丝提取物·OH清除率及总还原力最高;配方4发酵液提取物总还原能力表现最佳,且抗氧化能力表现更为稳定。结论 针对不同目标产物筛选出了具体的最佳蜜环菌液体培养基配方,对后续蜜环菌的研究提供参考借鉴意义,也为今后蜜环菌的开发利用奠定基础。     

蜜环菌水溶性多糖的分离鉴定与发酵条件优化

目的:筛选出产蜜环菌多糖和菌丝体生长的最适碳氮源,对蜜环菌水溶性多糖进行结构和组成分析。方法:改变蜜环菌发酵的不同种类碳氮源,测定多糖含量和菌体干重,经热水浸提、除蛋白等步骤分离纯化到水溶性多糖,利用紫外、红外光谱、气相衍生化法分析其基本结构信息。结果:红薯粉和豆粕的组合最适合产多糖,玉米浆和玉米粉的组合菌丝体得率最高;多糖结构由吡喃葡萄糖组成。结论:在富含天然类成分的培养基中,蜜环菌菌丝体生长和产多糖能力较高;提取到的水溶性多糖,成分单一;糖醇乙酸酯气相衍生化法可简便、准确地测出蜜环菌多糖中所含的各种单糖。     

"长林" 系列油茶籽中4种非油类主要功能性成分比较

对"长林" 系列10个品种油茶籽种仁中4种非油类主要功能性成分进行测定和分析,采用香草醛-冰醋酸-高氯酸比色法测定总三萜含量,采用亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定总黄酮含量,采用苯酚-浓硫酸比色法测定总多糖含量,采用Lowry法测定总蛋白含量。结果表明,总蛋白质量分数为12.96%～17.38%,总三萜为2.56%～5.37%,总多糖为0.65%～1.43%,总黄酮为0.53%～1.06%,4类功能性成分含量在油茶品种间均存在较大的差异。因此,针对油茶不同功效产品的开发应选择相应的品种。     

“长林”系列油茶籽中非油类主要功能性成分比较

对“长林”系列10个品种油荼籽种仁中4种非油类主要功能性成分进行测定和分析,采用香草醛-冰醋酸-高氯酸比色法测定总三萜含量,采用亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定总黄酮含量,采用苯酚-浓硫酸比色法测定总多糖含量,采用Lowry法测定总蛋白含量.结果表明,总蛋白质量分数为12.96％～17.38％,总三萜为2.56％～5.37％,总多糖为0.65％ ～ 1.43％,总黄酮为0.53％～1.06％,4类功能性成分含量在油荼品种间均存在较大的差异.因此,针对油茶不同功效产品的开发应选择相应的品种.     

长白山地区蜜环菌菌种的分离与筛选

本文主要对从长白山地区采集到的天麻和蜜环菌的了实体分离鉴定，得到了16个蜜环菌菌株。通过固体培养和液体培养，开展了各菌株的菌丝和菌索萌发时间及其形态特征、荧光特性、液体培养时菌丝球的形态、大小，发酵液色泽，荧光强度，产物的生物量等方面的实验研究，进一步筛选出生长性状良好的8个菌株Ar-02，Ar-03，Ar-06，Ar-08，Ar-09，Ar-11，Ar-13，Ar-31。     

银杏蜜环保健饮料的研制

以银杏叶、蜜环菌提取液为主要原料,用单因素试验、正交试验法对银杏蜜环保健饮料的生产配方进行了优化,并测定了饮料的成分。结果表明,适宜配方为12%银杏叶提取液、15%蜜环菌提取液、12%白砂糖、0.20%柠檬酸和0.15%CMC-Na。依此配方制备的饮料总糖、可溶性固形物、总酸、蛋白质、黄酮和蜜环菌多糖含量分别为122.13 g/L,12.09%,2.05 g/L,0.12 g/100 g,6.10 mg/L和0.27 mg/L,pH为3.6~4.0;颜色为棕黄色、味美可口、状态稳定。     

蜜环菌抑菌作用的初步研究

采用滤纸片法、液体培养法和活菌计数法,研究了蜜环菌菌索提取液对常见微生物的抑制作用。通过测定MIC值,蜜环菌的抑菌能力依次为:大肠杆菌>金黄色葡萄球菌>枯草芽孢杆菌>啤酒酵母菌。15%的蜜环菌浸提液可抑制细菌生长,高于20%的蜜环菌浸提液可对霉菌和酵母菌产生抑制作用。     

蜜环菌多糖生产培养基的研究

进行了蜜环菌深层发酵产胞外多糖的培养基的研究,研究结果表明：以豆粕粉作氮源时,菌丝得率最高,以麸皮作氮源时,多糖产量最高;红薯粉为蜜环菌菌丝生长和多糖产量的最适碳源,最适培养基配方为：红薯粉3%,葡萄糖1%,豆粕粉1.5%,KH2PO40.15%,机械搅拌对菌丝的生长和多糖的产生都不利;接种后当即上摇床比接种后静置一段时间再上摇床的菌丝干重及多糖含量都多;培养基中加1%的乙醇对菌丝的生长和多糖的产生都不利;600ml发酵试验中,发酵液多糖含量可达0.485mg/ml,菌丝干重可达20.8g/L。当发酵液pH降为5.0左右,颜色开始变为棕褐色,菌丝亮光由强变弱时,即可终止发酵。     

鸡枞菌不同溶剂提取物成分分析及抗氧化作用研究

利用分光光度法和液相色谱法测定鸡枞菌8种不同极性溶剂提取物中总黄酮、总酚、麦角甾醇及腺苷含量;通过清除DPPH·、ABTS~+·、羟自由基以及总抗氧化和总还原能力来比较不同极性溶剂提取物的抗氧化活性。结果表明:不同极性溶剂提取物得率最高的为蒸馏水;蒸馏水提取物中还含有最高的总酚和腺苷;正乙烷提取物中总黄酮含量最高;甲醇提取物中麦角甾醇含量最高。蒸馏水和甲醇提取物具有更好的清除自由基效果;溶剂极性越大,抗氧化活性越强;综合抗氧化能力与总酚含量呈正相关。鸡枞菌中含有多种生物活性成分,具有很好的抗氧化作用。     

榛蘑与菌丝体中蜜环菌素的超声波辅助提取条件优化及其提取物中化合物分析

目的:为分析榛蘑与菌丝体中化合物差异,本研究以东北野生榛蘑子实体和液态菌丝体为研究对象,探究蜜环菌素的最佳提取工艺条件,并对提取物中化合物进行分析。方法:以提取物得率和蜜环菌素含量为指标,采用超声波细胞破碎辅助石油醚进行萃取,通过单因素实验和正交试验对提取工艺参数进行优化;采用超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）技术,对液态菌丝体和榛蘑子实体中化合物进行分析和鉴定。结果:确定最佳提取工艺条件为料液比1:20 g/mL,超声波功率300 W,超声时间20 min,溶剂回流时间50 min,在该条件下液态菌丝体提取物得率为26.8%,蜜环菌素含量为0.74 mg/g;液态菌丝体和榛蘑子实体中化合物分别为305和592个。解析出16种蜜环菌素类和5种疑似蜜环菌素碎片物质,其中菌丝体中含有15种蜜环菌素和3种碎片,总含量分别为2.551和0.588 μg/mL;子实体中含有7种蜜环菌素和4种碎片,总含量分别为2.413和2.124 μg/mL。两者同有组分有6种蜜环菌素和2种碎片;液态菌丝体独有9种蜜环菌素和1种碎片为:10-dehydroxymelleoloede、蜜环菌辛素、Arnamiol、蜜环菌壬素、A52a、4-dehydroxyarmillarin、蜜环菌丙素、（4R,5S,7R,9S,13R）-2’,5-epoxy-4-dehydroxyarmillarin、4’-demethoxyarmillaribin以及碎片C;榛蘑子实体独有1种蜜环菌素和2种碎片为:Melledonal以及碎片D和E。结论:液态菌丝体蜜环菌素类化合物多于子实体中,为开发辅助功能食品及药物提供参考。     

响应面法优化酶法提取蜜环菌多肽及其抗疲劳活性

以蜜环菌子实体为原料,采用酶解法制备蜜环菌多肽。在单因素实验的基础上,根据Box-Behnken中心组合实验设计原理,以水解度为响应值,研究底物浓度、加酶量、酶解时间、酶解温度对响应值的影响。通过游泳实验建立小鼠疲劳模型,考察蜜环菌多肽对小鼠游泳时间、肝糖原、肌糖原、尿素氮（BUN）、乳酸（LA）、乳酸脱氢酶（LDH）等指标的影响。结果表明:酶解法提取蜜环菌多肽的最佳工艺为:底物浓度7.4%,加酶量2%,酶解温度51℃,酶解时间4.6 h,水解度为35.61%,与理论值接近。以中剂量组为例,相对于空白组,蜜环菌多肽可以使小鼠肝糖原和肌糖原的含量分别提高109.01%和58.33%,显著降低代谢产物尿素氮水平36.99%、乳酸水平30.33%,乳酸脱氢酶的活性提高9%,以上数值p<0.05。综上蜜环菌多肽具有提高抗疲劳能力的作用。      

榛蘑多糖对尼古丁诱导大鼠肺损伤的保护作用

目的:研究榛蘑多糖（Armillaria mellea polysaccharides）对尼古丁诱导的大鼠肺损伤的保护作用及其作用机制。方法:将SD大鼠随机分为对照组,模型组,榛蘑多糖低、高剂量组。造模时,除对照组,其余各组腹腔注射尼古丁2 mg/kg体质量,榛蘑多糖低、高剂量组分别以200、400 mg/kg体质量灌胃榛蘑多糖。苏木精-伊红染色（Hematoxylin and Eeosin staining,HE）观察肺组织形态学变化;酶联免疫吸附方法检测肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白介素-6（interleukin-6,IL-6）、白细胞介素-1β（Interleukin 1β,IL-1β）水平,TBA法检测丙二醛（malonaldehyde,MDA）水平,WST-1法检测超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力;蛋白免疫印迹方法观察肺组织核因子相关因子2（nuclear factor erythroid 2-relted factor,Nrf2）、血红素加氧酶（heme oxygenase 1,HO-1）蛋白表达情况以及核因子-κB（nuclear fator-kappa B,NF-κB）蛋白的磷酸化水平。结果:与对照组相比,尼古丁诱导后血浆TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA水平升高,SOD活力降低,肺组织NF-κB蛋白磷酸化表达水平升高,Nrf2、HO-1蛋白表达水平下降;与模型组相比,榛蘑多糖干预后减轻肺组织损伤程度,明显降低血浆TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA水平,提高SOD活力,明显下调肺组织NF-κB蛋白磷酸化表达水平,提高Nrf2、HO-1蛋白表达水平。结论:榛蘑多糖对尼古丁诱导的肺损伤有抑制作用,其作用机制可能与NF-κB、Nrf2/HO-1信号通路的调控有关。     

HS-SPME/GC-MS法测定榛蘑中挥发性成分

为分析干品榛磨的挥发性成分,本文选用PDMS/DVB萃取头,应用顶空固相微萃取技术(HS-SPME),结合气相色谱-质谱检测方法(GC-MS),鉴定榛蘑中的挥发性成分,并以化合物匹配度≥90%为定性标准,采用峰面积归一化法计算各化学成分的相对质量分数。结果表明,SPME-GC-MS法可以较好的分离鉴定榛蘑中的挥发性成分。从榛蘑中鉴定出39种香气成分,占其总香气成分的88.74%,其中含酯类物质15种,含量为54.9%,酸类物质8种,含量为12.97%,芳香类物质4种,含量为7.25%。含量最高的三种化合物为顺-9-十八碳烯酸甲酯,9,12-十八碳二烯酸甲酯和油酸乙酯,含量分别为13.93%、12.7%和8.74%。研究证明弱极性的大分子酯类成分是干燥榛蘑的主要挥发性成分,为榛蘑干品的品质评价提供依据。     

蜜环菌的活性成分研究及其在功能性食品中的应用

蜜环菌(Armillariamellea)是一种与传统中药天麻(GastrodiaelataBlume)共生的著名的药用真菌。经国内外多年的研究,分离得到了蜜环菌多糖、倍半萜类化合物和嘌呤类化合物等多种活性成分并对其理化特性和生物活性进行了研究。经功能性实验证明,蜜环菌具有较强的神经调节功能,有明显的镇静作用,抗惊厥作用等,并可提高机体免疫功能。现已开发了大量的蜜环菌产品,包括脑心舒口服液、蜜环菌浸膏、蜜环菌片、蜜环菌糖浆等。本文主要介绍了蜜环菌的研究近况以及蜜环菌在功能性食品中的应用前景。     

固态发酵生产蜜环菌饮料

以蜜环菌固态发酵物为原料制得一种蜜环菌饮料。以蜜环菌固态发酵物为原料,提取其中的多糖等营养和药效成分,进行风味调配,通过正交试验和感官评价的方法确定蜜环菌饮料的配方。该发酵饮料的培养基配方为:白砂糖1.5%,大米80%,黄豆1%,麸皮10%,红薯7.5%;饮料配方为:蜜环菌发酵液添加比例为30%、白砂糖为20 g/L、柠檬酸0.6 g/L、黄原胶0.2 g/L,测得成品饮料中各成分的含量为:多糖0.049 mg/mL,还原糖0.042 mg/mL,蛋白质53.0 mg/mL,氨基酸1.226 mg/mL。饮料的感官指标、理化指标和微生物指标均达国家标准。     

超声-微波协同提取蝉花虫草腺苷条件优化及不同产地腺苷测定

以野生蝉花虫草子实体为材料,采用超声-微波协同法提取蝉花虫草腺苷并对其提取条件进行优化,经单因素及正交实验,确定优化的提取条件:微波功率150 W、超声-微波协同提取时间120 s、料液比为1∶30、甲醇体积分数为20%,蝉花虫草腺苷提取率为（0.53±0.02）mg/g;并利用高效液相色谱法测定不同产地蝉花虫草菌丝体腺苷含量,结果表明:测得4个产地的蝉花虫草菌丝体腺苷含量为0.14⁰.40 mg/g,其中井冈山分离获得JJS0017菌株的菌丝体腺苷含量最高（0.40 mg/g）,其次为九江市莲花镇莲花林场分离获得JJS0007菌株,江西省鄱阳县饶埠镇分离获得JJS0032菌株的菌丝体腺苷最低（0.14 mg/g）。本文可为蝉花虫草的开发利用提供一定的理论依据。      

珊瑚菌子实体和菌丝体营养成分与抗氧化活性的比较

采用国标及常规分析方法对珊瑚菌子实体和菌丝体中营养成分和活性物质多糖、多酚含量及其抗氧化活性进行分析,结果表明:珊瑚菌子实体与菌丝体碳水化合物含量分别为38.74±1.27%和63.55±3.17%;脂肪含量分别为2.52±0.14%和3.21±0.19%;蛋白含量分别为11.02±1.21%和22.30±1.18%;灰分含量分别为5.77±0.14%和5.98±0.11%。子实体矿质元素含量普遍高于其菌丝体,Mg元素除外;必须氨基酸,菌丝体含量(7.08±0.15)g/100 g高于其子实体(2.55±0.24)g/100 g。子实体多糖含量(23.22±1.60)mg/g低于其菌丝体(35.51±1.78)mg/g,多酚含量(6.85±0.41)mg/g高于其菌丝体(3.66±0.29)mg/g。比较珊瑚菌多糖、多酚体外抗氧化活性强弱依次为子实体多酚菌丝体多酚菌丝体多糖子实体多糖。研究表明对于珊瑚菌菌丝体多糖,有望代替子实体应用于食药产品,而菌丝体多酚仍有待进一步开发利用。