另辟蹊径——串联质谱肽段断裂的

一种新型的串联质谱断裂方式——电子捕获解离,以其完全不同于其他串联质谱肽段断裂的机理,提供了全新的肽段序列标签。它集众多优点于一身:对蛋白质和多肽的主链断裂无偏好;高断裂覆盖度;优先断裂二硫键;保留翻译后修饰基团;中性丢失少、可区分亮氨酸和异亮氨酸等。这些特点使电子捕获解离充满魅力,特别在Top Down技术和翻译后修饰中具有广阔的应用前景。     

创新的蛋白质组学质谱应用新技术——SWATH技术

AB SCIEX公司在2011年美国第59届质谱年会上新推出了SWATH（Sequential Windowed Acquisition of all Theoretical fragment ions,SWATH）采集技术,该技术是与苏黎世联邦理工学院Ruedi Aebersold博士及其团队共同开发的。SWATH采集模式为研究蛋白质组学的用户带来了创新的技术,科学家利用该技术可以在一次进样分析中即可获得复杂蛋白质组样品中每个肽段的数据。SWATH采集模式是AB SCIEX的MS/MSALL技术的延伸,此功能只能在TripleTOFTM5600系统上完成,作为对MRMAtlas的完美补充,为未来蛋白质组学研究提供了一种全新的工作流程,预计将产生令人震撼的蛋白质组学新发现。     

离子迁移谱-质谱技术及其在蛋白质糖基化研究中的应用

糖基化是生物体内重要的蛋白质翻译后修饰（PTM）。基于质谱的检测技术,特别是液相色谱-质谱（LC-MS）联用技术是糖基化研究的常规手段。然而,由于糖基化存在复杂的异构现象,大多数基于质谱的分析技术在区分其异构体时存在困难。离子迁移谱（IM）是一种基于离子在气相中的形状和电荷进行分离的技术,能够为质谱分析提供新的分离维度。离子迁移谱-质谱（IM-MS）技术具有较强的区分异构体的能力,在蛋白质糖基化研究中的潜力越来越受到重视。本文总结了IM-MS技术的类型和基本原理,及其在蛋白质糖基化研究中的进展,如对完整糖蛋白、完整糖肽和聚糖的研究,并展望了其应用前景。     

生物质谱在蛋白质药物分析研究中的应用

生物制品药物已经成为近年来快速发展的一类新兴药物领域,包括人用预防药物和治疗药物。蛋白质和多肽是生物制品药物的重要活性物质之一。与化学药物不同,蛋白质药物具有分子量大、结构复杂多变的特殊性,因此其理化性质更加多样,杂质成份不确定性高,发生免疫反应的可能性大。为确保药物的安全性和有效性,针对蛋白质药物自身的特点,依据国内外相关标准,建立一系列配套齐全的蛋白质药物分析方法和质量控制技术具有非常重要的意义。本文对生物质谱技术（Bio-MS）在蛋白质药物结构鉴定和翻译后修饰分析中的应用进行了系统介绍,力图通过重组尿激酶原（rhProUK）、重组人促红细胞生成素（rhEPO）和凝血因子X激活剂（RVV-X）等药物分析实例,提供一些可以借鉴的蛋白质药物分析的生物质谱技术方法。     

纳升喷雾傅里叶变换离子回旋共振串联质谱在肽段断裂分析中的应用

A new sequence analysis of peptides by using nano-electrospray ionization fourier transform ion cyclotron resonance tandem mass spectrometry was demonstrated in the study, and the angiotensin II was chosen as an example. Combined with the collision induced dissociation, FT-MS provides precise mass/charge ratio, but also structure information of the selected peptide. The fragment ions were identified on the basis of the precise molecule weight and peptide sequence was determined successfully. Nano-ESI FT-ICR MSn was determined as useful tool for identification of the unknown peptides, especially for the trace peptides isolated from gel electrophoresis.     

生物质谱技术及其在RNA检测中的应用

生命科学的需求促进质谱技术的发展,现代的质谱技术为生命科学研究提供丰富的检测手段,本文重点介绍生物质谱技术的特点、性能以及质谱技术的进展;及质谱技术在RNA研究领域的方法学,包括核酸的纯化方法、核酸的离子化技术、核酸的分子量检测技术和核酸质谱数据的解析方法及其软件;以及质谱在核酸领域的具体应用,包括质谱在测序、定量、转录后修饰、核酸的指纹识别、蛋白和核酸相互作用等方面的应用。     

超电荷试剂在蛋白质紫外激光解离质谱表征中的应用研究

本文采用193 nm紫外激光解离质谱(UVPD-MS)研究非变性电喷雾条件下,超电荷试剂环丁砜对蛋白质序列、结构表征的影响。UVPD可在5 ns内对保持高级结构和非共价相互作用的不同价态碳酸酐酶进行快速激发解离,解离序列覆盖率达79.8%,具有较高的解离结构选择性。超电荷试剂环丁砜的引入可显著增加非变性电喷雾产生的碳酸酐酶离子的电荷数目,UVPD解离序列覆盖率提升至87.2%,实现对难解离区域的位点覆盖和序列、结构表征。加入环丁砜后,碳酸酐酶仍能保持高级结构谱学特征及与锌离子的非共价结合,锌离子结合区域等大部分结构区域的UVPD位点解离效率未见显著变化。但是,电荷数目的增加存在引起蛋白质局部结构变化的风险。     

线性离子阱-傅立叶变换离子回旋共振质谱的结构原理及在蛋白质组学研究中的应用

介绍了线性离子阱-傅立叶变换离子回旋共振质谱(LTQ-FT-MS)的结构和特点,并以美国热电集团的LTQ-FT-MS为例,介绍了该仪器在蛋白质组学研究中的应用。LTQ-FT-MS将液相色谱-质谱技术联用,将测量精度提高到1~2μg/g,可以显著提高全新肽链测序的确定性。FT-MS可通过电子捕获解离技术对天然蛋白质的结构进行鉴定;还可用于蛋白质分子的“由上而下”的多级质谱分析,对高度同源的蛋白质序列进行鉴定。     

虚拟仪器技术及其在电子及物理实验中的应用

介绍了虚拟仪器的基本概念及其在国内外的发展状况,并在分析其结构特点的基础上,时其在电子及物理实验中的应用的开发作了有益的探讨.     

碰撞诱导解离和高能碰撞解离方式进行蛋白质组学分析的比较

为了比较碰撞诱导解离（collision induced dissociation,CID）和高能碰撞解离（high energy collision dissociation,HCD）两种离子裂解模式在蛋白质组学分析方面的差异,分别应用这两种模式对牛血清白蛋白和细胞裂解物进行分析。通过比较所鉴定到的多肽和蛋白数目,发现在牛血清白蛋白中,HCD碎裂方法所得的谱图匹配率和多肽Mascot得分均较高,表明其质谱图质量较好。在复杂样品细胞裂解物分析中,CID碎裂方法鉴定到的谱图数、多肽数和蛋白数目均较多,表明该模式的灵敏度较高;HCD碎裂方法所得的谱图匹配率和Mascot得分均较高,表明其质谱图质量较好。因此,这两种模式均可用于大规模蛋白质组学分析,CID模式可提供更高的灵敏度,而HCD模式则可获得更高质量的质谱谱图。     

碰撞诱导解离和高能碰撞解离方式在褐藻胶寡糖结构分析中的比较和应用

利用组合式高分辨质谱仪（LTQ Orbitrap XL）对均一褐藻胶寡糖,包括甘露糖醛酸寡糖和古洛糖醛酸寡糖进行二级质谱分析,比较了常规的碰撞诱导解离（CID）和高能碰撞解离（HCD）在寡糖结构分析中的差异,并应用HCD技术分析甘露糖醛酸寡糖和古洛糖醛酸寡糖的结构差异。研究发现,HCD可避免CID中的1/3效应,而且可以提供更多的糖环断裂碎片信息,如^2,5A₂（m/z291）、^2,4A（m/z 235、411）、^2,5A脱水（m/z 101、277、453）以及Z₂脱羧碎片（m/z 307、483、659）等,进一步验证了Z₂脱羧碎片是区别甘露糖醛酸与古洛糖醛酸的特征碎片。同时,HCD能够提供丰富的裂解碎片信息,这为褐藻胶寡糖的结构解析提供了依据。     

基于生物质谱技术的磺酸化修

对近几年报道的磺化修饰策略及其应用进行了评述。通过磺化修饰在肽段上引入带负电荷的磺酸基,不仅可以诱导肽段离子的质谱裂解,得到以y系列离子为主的序列信息丰富的串联质谱图,有利于肽段从头测序,还可以改变被修饰肽段的电荷分布,通过离子交换色谱法分离富集磺化修饰的肽段,有助于蛋白质鉴定。     

介质阻挡放电电离技术及其应用研究进展

介质阻挡放电电离源是一种非表面接触型的常压敞开式电离源,借助大气压下惰性气体的介质阻挡放电产生稳定的低温等离子体,可在几秒钟内实现液态、固态和气态样品的解吸附离子化,将其用于质谱检测,无需复杂的样品前处理,在常温、常压环境下即可对样品进行原位、实时、快速和无损检测。介质阻挡放电电离源自提出以来发展迅速,现已被广泛应用于食品安全、公共安全、药物分析、环境监测、生命科学等诸多领域。本文综述了介质阻挡放电电离源的发展历程、电离机理、结构分类、影响因素及应用进展,并对其发展趋势进行了展望。     

含芳香氨基酸三肽及其衍生物自由基离子的形成和解离机理研究

铜-配体(L)-三肽组成的三元复合物[Cu(L)M]²⁺,其中,L表示4′-氯-2,2′:6′,2″-三联吡啶(缩写为4Cl-tpy);M表示酪氨酰-甘氨酰-色氨酸(YGW)及其修饰型三肽(CH₃CO-YGW-OCH₃,缩写Ac-YGW-OMe)。使用该复合物,通过碰撞诱导解离(collision-induced dissociation, CID)产生两种自由基离子([YGW]^·+和[Ac-YGW-OMe]^·+)。采用串联质谱结合密度泛函理论(density functional theory, DFT)得到气相稳定结构,并研究其气相解离行为。研究结果表明,[YGW]^·+和[Ac-YGW-OMe]^·+的气相解离行为截然不同,[YGW]^·+主要产生[M-CO₂-116]⁺和[M-CO₂]^·+碎片离子;而[Ac-YGW-OMe]...     

CR技术在超薄焊接结构件中的研究与应用

目前材料厚度1mm以下的超薄壁焊接承压结构件产品越来越多,且这种产品在民用和航天领域内都应用广泛.该类产品由于其使用环境的特殊性,其安全性和可靠性要求极高.如果超薄承压结构件的焊接接头熔深不够或存在缺陷,就可能失效导致严重后果.因此必须通过有效的无损检测控制,确保焊接接头品质.由于超薄承压结构件特殊,又要求很高的绝对灵敏度,欲检出的缺陷尺寸已接近或超过宏观无损检测技术的极限,现有常规无损检测方法均不能满足其要求.经过工艺攻关,应用CR技术,配合一系列特殊工艺措施和大量工艺试验,实现了该产品结构件焊缝无损伤的品质控制.本项技术研究与应用的意义十分重大.     

特丁基对苯二酚的电子轰击质谱研究

本工作研究了食品添加剂特丁基对苯二酚（TBHQ）的电子轰击质谱,结合其结构特征总结出一些裂解规律,并推导了在EI-MS中碎片离子的裂解机理。结果表明,特丁基对苯二酚的电子轰击质谱图中的主要特征离子有3个：分子离子峰 m/z 166、丢失一个甲基的碎片离子峰 m/z 151和丢失一个甲基和中性碎片CO的碎片离子峰 m/z 123。另外,结合相关质谱图,探讨了主要碎片离子的裂解机理。     

基于BBS的知识获取方法及其在质量管理中的应用

提出在BBS环境下综合运用语义网络、本体论和专家评分等技术来获取和整理员工中的质量管理知识的构架，包括借助于语义模型指导BBS版面设置，采用九元组描述语义对象的内部结构和外部联系，通过结构映射建立语义对象之间的关系等，从而为散乱信息的收集、知识整理、知识的结构化与同构化、知识共享等提供新的思路。