酶促交换法制备[γ-~(32)P]ATP

利用3-磷酸甘油酸激酶及甘油醛-3-磷酸脱氢酶催化,使~(32)中和ATP末端磷酸基进行交换制备[γ-~(32)P]ATP,产品经DEAE-SephadexA-25阴离子交换柱分离纯化。[γ-~(32)P]ATP比度>30 Ci/mM。放化纯度95%,酶促转化率50—60%。柱层析回收率～90%,放化收率>50%。     

酶法合成高比度[γ-~(32)P]ATP

本文介绍了用酶促合成制备高比度[γ-~(32)P]ATP的方法及其应用鉴定结果。该法原理是以1-α-甘油磷酸为底物,在其酶促转化为3-磷酸甘油酸过程中,ADP进行底物水平的磷酸化与外源的~(32)P合成[γ-~(32)P]ATP。反应中与酵解速率相适应的NAD~+的再生是由乳酸脱氢酶催化的反应来完成的。酶促合成转化率(相对投料的~(32)P强度)可达90％以上。经高压液相色谱分析,[γ-~(32)P]ATP的放化纯可达95％左右。与英国Amersham产品(>5000Ci/mM)在相同条件下进行比较,结果相同。本方法具有简便、高效,放射性操作少的特点。     

高比活度[α-~(32)P]ATP的酶法标记

以［γ－３２Ｐ］ＧＴＰ作磷酸供体通过四步酶反应制备了高比活度（＞１４８ＰＢｑ／ｍｏｌ）的［α－３２Ｐ］ＡＴＰ。用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）测定了［α－３２Ｐ］ＡＴＰ比活度，并对影响［α－３２Ｐ］ＡＴＰ比活度的诸因素作了分析。     

化学和酶促兼用的方法研制5''''-[α-~(32)P]脱氧三磷酸腺苷

本文采用化学和酶促合成兼用的方法,使用无载体~(32)P-正磷酸(或盐)标记5’-[α-~(32)P]脱氧三磷酸腺苷。产物的比活度达到20—160 Ci/m M,实际收率21—40%,放化纯度94—97%,化学合成中生成的~(32)P-脱氧单磷酸腺苷占总放射性量的69—86.7%。反应所需的二种激酶采用高速离心的方法除去抑制酶反应的硫酸铵。本工作还对影响化学合成的因素进行了一些研究。     

高效液体色谱法分析~(32)P-dATP

一、前言~(32)P-dATP(三磷酸脱氧腺苷)在生物化学中的应用日益增多,在遗传工程和酶学研究中起着重要作用。~(32)P-dATP的标记分两部分进行,首先是由H_3~(32)PO_4和dA(脱氧腺苷)缩合反应生成~(32)P-dAMP(一磷酸脱氧腺苷),然后由~(32)P-dAMP在酶的作用下生成~(32)P-dATP。对于核苷和核酸的分析有较多的报道,但对于放射性磷标记脱氧腺苷这一系列的分     

[2-~(15)N]-川芎哚的全合成

为研究川芎哚在动物体内的代谢转化,以１５Ｎ－甘氨酸为原料,铝镍合金作催化还原剂,首先合成［α－１５Ｎ］－ｄｌ－色氨酸,进而合成［２－１５Ｎ］－川芎哚。终产物经质谱（ＭＳ）、紫外光谱（ＵＶ）、薄层层析（ＴＬＣ）等方法表征。总产率为７．３％ ,１５Ｎ 丰度为９２％ ,化学纯度为９８％ 。结果表明,合成的［２－１５Ｎ］－川芎哚符合药理实验要求。     

高比活度脱氧腺苷5′-[α-~(35)S]硫代三磷酸的研究制备

~(35)S标记的脱氧腺苷硫代三磷酸化合物是开展分子生物学和基因工程研究的必不可少的。重要支撑物之一。 关于高比活dATP_α~(35)及前体~(35)S、dAMP~(35)S的制备流程未见报道,而在示踪量制备流程方面的报道仅限于从堆照KCl靶子物的湿法还原-氧化法得到[~(35)S]——元素硫,再制得~(35)SPCl_3,然后合成dAMP~(35)S及dATP_α~(35)S。在高比活及强辐射场下操作时可发现:①若不加载体的高强度~(35)S处在水相、有机相及有氧的条件下,它的化学态难以控制,总是以~(35)SO_4形式存在,故得不     

高效液相色谱法测定[1,2,6,7-~3H]睾丸酮的放化纯度及比活度

高比活度、高纯度的氚标记睾丸酮经常应用于临床医学中的放射免疫测定,其纯度与比活度直接影响着放射免疫测定的结果。我们用日立638-50型HPLC结合自制流动式软β放射性连续测量装置及双笔记录仪,测定了10μl[1,2,6,7-~3H]睾丸酮样品,可同时得到其放射性色谱峰和紫外色谱峰,根据标准曲线可求得放化活度和化学量,立即得到[1,2,6,7-~3H]睾丸酮的比活度。本法具有取样量少、步骤简单、操作安全、能定量分离分析、数据准确度高、快速灵敏等优点。     

5′-脱氧腺苷[α-硫代]-三磷酸盐的~(31)P核磁共振测定

利用~(31)P核磁共振技术,对脱氧腺苷-[α-硫代]三磷酸盐的构型进行了研究。在~(31)P-NMR实验中观察到在δ43.1ppm处,有两个三重峰,根据其化学位移和偶合裂分提供的信息,确证了这化合物是5′-脱氧腺苷-[α-硫代]三磷酸盐。同时~(31)P-NMR图谱表明,此化合物是以单一的SP或RP异构体存在。     

应用同位素~(15)N和~(32)P研究作物对氮和磷的吸收作用

本文叙述了在1983～1986年间应用同位素~(15)N和~(32)P中研究作物对氮肥和磷肥的吸收利用。实验表明,在淹水条件下,水稻对(~(15)NH_4)_2SO_4和~(15)NH_4NO_3形式的铵态氮利用率分别为40.58％和33.80%;而对NH_4~(15)NO_3和K~(15)NO_3形式的硝态氮利用率分别为15.99％和15.30%,水稻对铵态氮的利用率显著高于硝态氮。在旱地条件下,谷子对(~(15)NH_4)_2SO_4 和~(15)NH_4NO_3的利用率分别为52.4%和42.2%,而对NH_4 ~(15)NO_3和K~(15)NO_3的硝态氮利用率分别为71.6%和59.5%,谷子对铵态氮的利用率明显低于硝态氮。用~(15)N、~(32)P作示踪剂研究表明:水稻对氮磷复合肥中氮的利用率分别是:尿素磷铵44.65%,氯磷铵45.54%,尿素44.12%,尿素+普钙40.51%,硝酸磷肥36.65%。水稻对上述几种肥料的肥磷利用率是:硝酸磷肥22.55%,氯磷铵22.36%,尿素磷铵21.08%,尿素+普钙20.74%,普钙11.87%。用放射性扫描和放射自显影方法研究了,肥料磷在土壤中经过20天的垂直移动距离。     

应用同位素~(15)N和~(32)P研究作物对氮和磷的吸收作用

本文叙述了在1983～1986年间应用同位素~(15)N和~(32)P研究作物对氮肥和磷肥的吸收利用。实验表明,在淹水条件上,水稻对(~(15)NH_4)_2SO_4和~(15)NH_4NO_3形式的铵态氮利用率分别为40.58％和33.8O％;而对NH_4~(15)NO_3和K~(15)NO_3形式的硝态氮利用率分别为15.99％和15.30％,水稻对铵态氮的利用率显著高于硝态氮。在旱地条件下,谷子对(~(15)NH_4)_2SO_4和~(15)NH_4NO_3的利用率分别为52.4％和42.2％,而对NH_4~(15)NO_3和K~(15)NO_3的硝态氮利用率分别为71.6％和59.5％,谷子对铵态氮的利用率明显低于硝态氮。 用~(15)N、~(32)P作示踪剂研究表明:水稻对氮磷复合肥中氮的利用率分别是:尿素磷铵44.65％,氯磷铵45.54％,尿素44.12％,尿素 普钙40.51％,硝酸磷肥36.65％。水稻对上述几种肥料的磷肥利用率是:硝酸磷肥22.55％,氯磷铵22.36％,尿素磷铵21.08％,尿素 普钙20.74％,普钙11.87％。 用放射性扫描和放射自显影方法研究表明,肥料磷在土壤中经过20天的垂直移动距离依次是:硝酸磷肥4.21cm>尿素磷铵4.20cm>氯磷铵4.0cm>尿素 普钙3.50cm>硫磷铵3.02cm>普钙3.0cm。     

[2-~(14)C]多菌灵的大鼠透皮吸收和放射自显影研究

用示踪及放射自显影技术研究了多菌灵的软膏和溶液在大鼠的透皮吸收,作用部位及其在皮肤中的分布。表明多菌灵软膏透入背部皮肤为5.7％,透皮常数为1.86×10~(-6)cm/h;多菌灵溶液透入尾部皮肤为9.8％,透皮带数为29.3×10~(-6)cm/h。该药透皮吸收主要在角质层,作用只局限于渗透部位。     

尿中~(32)P的测定

本文介绍了尿中~(32)P 的测定方法。尿样经预处理后,用丁醇萃取、NH_4Cl-NH_4OH 反萃,将反萃液制成乳状液用切仑科夫法测量。方法的回收率为74.5±7.3%,对主要干扰核素的去污系数在10~3以上,当取样100ml,仪器本底为30cpm。仪器探测效率约为0.3,按本底计数率标准差三倍计算的探测下限为1.5Bq/L。     

放射反相高效液相色谱法研究邻碘马尿酸钠(~(131)I)注射液

本文把“高效液相色谱法分析邻碘苯甲酸含量”的方法发展为放射反相高效液相色谱法,适用于分析邻碘马尿酸钠(~(131)I)注射液的放化纯度,借助于数据处理机等能同时方便地得到化学纯度和比放射性。此法采用1mmol·1~(-1)(NH_4)H_2PO_4:CH_3OH(25:3,V/V)pH7为流动相,色谱柱为μ Bondapak C18,流速为0.8ml/min,放射性流通池的体积为200μl,分离时间为7min,     

fac-[Μ(CO)_3]~+(Μ=~(188/186)Re,~(99)Tc~m)化合物的生物标记及应用

fac-[Μ(CO)_3]~+(Μ=~(188/186)Re,~(99)Tc~m)具有良好的放射生物学特性,是一种很有发展前途的标99记前体。本文综述了fac-[Μ(CO)3]+(Μ=188/186Re,Tcm)核标记生物小分子(生物素、雌激素……)、大分子蛋99白及多肽的研究进展,并探讨了其今后发展的方向。     

鸡烟碱样胆碱能受体与[~(125)I]-α-银环蛇毒素结合动力学的研究

从鸡脑及骨骼肌中分离提取烟碱样胆碱能受体,用[~(125)I]-α一银环蛇毒素进行受体-配体结合动力学研究。结果表明,这种结合呈二级动力学反应性质。脑视叶中提纯的受体和骨骼肌中分离的受体,K_D值分别为129pM及4pM(25℃)。烟碱、箭毒碱等可抑制受体-配体的结合反应并测得各自的抑制常数及Hill系数。     

[3-~3H]-4β,15-二乙酰氧基-8α-(3-甲基丁酰氧基)-3α-羟基-12,13-环氧单端孢霉-9-烯的合成

4β,15-二乙酰氧基-8α-(3-甲基丁酰氧基)-3α-羟基-12,13-环氧单端孢霉-9-烯(简称T-2毒素,分子式见反应式中I)属于一种真菌毒素,人畜中毒后可引起呕吐、大量出血、皮肤奇痒、痉挛、抽搐等各种症状,严重者可致死亡。为了建立放射免疫测定法和进行皮肤毒理学的研究,制备了[~3H]-T-2毒素。     

NiSO4和K4[Fe(CN)6]预处理对模拟高放废液碱矿渣水泥固化体力学性能的影响

研究了模拟高放废液加入NiSO4和K4[Fe(CN)6]对碱矿渣水泥固化体抗压强度的影响。实验结果表明：NiSO4和K4[Fe(CN)6]的引入使得固化体凝结时间变慢、抗压强度下降;调整激发剂掺量到2％(NaOH提供的Na2O量) 3％(Na2SiO3提供的Na2O量)时(以Na2O占矿渣质量比例计),沸石掺量为15％,采用加压成型工艺,可有效提高固化体抗压强度。     

O-(2-[18F]氟乙基)-5-羟基-L-色氨酸(5-18FEHTP)的合成动物体内分布及MicroPET显像

通过对现有CTI公司计算机控制的化学合成模块(CPCU) 进行改造,首次合成了L-5-羟基色氨酸类似物(5-18FEHTP),并用高效液相(HPLC) 检测其放化纯度,所得的产品用于昆明小鼠的S180肉瘤模型显像。结果显示,采用改进方法合成5-18FEHTP的总时间是45min,纯化时间是20min,放化收率为12-16%(n=15),产品的放化纯度大于98%。MicroPET显像结果表明,5-18FEHTP在S180肉瘤浓集程度明显高于周围其它组织。以上结果提示利用CPCU半自动合成5-18FEHTP,方法简便、稳定、产品纯度较高。动物生物分布和显像结果表明5-18FEHTP可能成为一种新的PET显像剂。     

α-Al2O3:C的光释光和LiF(Mg,Cu,P)的热释光比较研究

LiF(Mg,Cu,P)热释光探测器是最理想的热释光探测器.光释光(OSL)是新世纪发光剂量学的前沿,是辐射监测的一个新的发展方向.α-Al2O3:C是目前研究最深入的材料,也是目前唯一商用的光释光剂量材料.论文就光释光和热释光的基本原理、α-Al2O3:C和LiF(Mg,Cu,P)的发光灵敏度、动态范围、剂量响应、探...