橄榄菜直投式乳酸菌发酵剂的研究

本研究以黄瓜汁为基础培养基,添加2%的葡萄糖、0.5%的蛋白胨等,对5株乳酸菌进行了生长性能和发酵性能研究。优选其中两株菌作为制备发酵剂的菌种,前期研究高密度细胞培养的条件、培养基成分,以培养过程中的pH值、活菌数为指标,后期研究制备发酵剂的最佳离心条件、筛选最适的冻干保护剂及浓度等进行了系统研究,研究表明,在接种量3%,培养温度30℃,初始pH6.6,装液量40mL(100mL三角瓶),振荡频率120r/min条件下培养,培养14h后补充营养物质继续培养,到20h时可使乳酸菌活菌数达到7.24×109cfu/mL。4℃、4000r/min离心30min为收集细胞的最佳条件,以10%的脱脂乳为冻干悬浮基质,对蔗糖、血清蛋白、甘油、海藻酸钠四种保护剂的保护效果进行了研究,结果表明,甘油的保护效果最佳,冻干后菌体的存活率最高,10%的脱脂乳保护效果次之。该研究旨在为直投式的乳酸菌发酵剂用于工业化发酵生产橄榄菜提供理论依据。     

嗜酸乳杆菌冻干影响因子的研究

传统的乳酸菌发酵剂因活化过程复杂,极易引起污染而影响发酵乳的质量。目前,多采用冷冻干燥技术制备直投式粉末状乳酸发酵剂。然而,菌种冻干时机的把握和冻干保护剂的选择,将直接影响乳酸菌在冷冻干燥前后的存活率以及存活期。本文研究了嗜酸乳杆菌的生长曲线,选用蔗糖、乳糖、甘油、VC、谷氨酸钠、麦芽糊精、脱脂乳粉等为嗜酸乳杆菌冻干保护剂进行了冻干研究。结果表明:①嗜酸乳杆菌发酵液培养至酸度为100°T、pH值4.8时,OD410nm=0.511为最大,是最佳发酵终止时间;②嗜酸乳杆菌冻干保护剂配方以5%麦芽糊精、2%VC、5%甘油为最佳冻干保护剂组合,此时嗜酸乳杆菌冻干菌粉活菌数为2.34×109cfu/g。     

冻干保护剂对复合低温乳酸菌发酵剂的影响

以青藏高原牧区分离筛选出的低温乳酸菌为研究对象,以活菌数为指标,比较了4种冻干保护剂对复合低温乳酸菌发酵剂的影响,并通过正交实验优化了其中3种较优冻干保护剂的复配配方。结果表明,复合低温乳酸菌冻干保护剂的最优组合为:甘油为8m L/L,蔗糖为10%(w/v),脱脂乳为15%(w/v),以此为保护剂冻干存活率达到了90.55%。与商业发酵剂相比,低温发酵剂发酵酸乳组织状态良好,滴定酸度为92°T,感官评分为95分,活菌含量(10.3lg CFU/m L)极显著高于商业发酵酸乳(p0.01)。实验结果为制备高活力直投式低温乳酸菌发酵剂的冻干菌粉提供理论支撑,对开发低温乳酸菌发酵剂具有重要意义。     

热休克预处理结合保护剂对嗜酸乳杆菌的冻干保护作用

研究热休克预处理结合添加保护剂对嗜酸乳杆菌冻干存活率的影响。结果表明:结合冷冻干燥之前的热休克处理,能显著提高单独使用冻干保护剂的嗜酸乳杆菌的存活率。比较热休克处理结合12种冻干保护剂,有10种能增加冻干菌体的存活率,其中以结合脱脂乳的冻干存活率最高,达71.98%;以葡萄糖为保护剂结合热休克处理的正向叠加效果最显著,菌株的存活率从34.42%提高到76.28%(P0.01)。对结合热休克处理保护效果较好的4种保护剂交互作用条件进行优化,得到嗜酸乳杆菌冻干存活率最高的试验条件为:菌培养18 h后,经45℃热休克处理30 min,加入10%脱脂乳,10%葡萄糖,1.5%甘油以及2.5%山梨糖醇为冻干保护剂,在此条件下嗜酸乳杆菌ATCC 4356的冻干存活率高达92.8%。     

泡菜活性直投式乳酸菌发酵剂的研究

本试验以MRS为培养基,对5株乳酸菌进行了生长性能和发酵性能研究。优选其中两株菌作为制备发酵剂的菌种,前期研究高密度细胞培养的条件、培养基成分,以培养过程中的pH值、活菌数为指标,后期研究制备发酵剂的最佳离心条件、筛选最适的冻干保护剂及浓度等进行了系统研究,研究表明,在接种量2%,培养温度30℃,初始pH6.6,装液量40ml(100ml三角瓶),振荡频率120r/min条件下培养,培养14h后补充营养物质继续培养,到20h时可使乳酸菌活菌数达到7.24×109CFU/ml。4℃、4000r/min离心30min为收集细胞的最佳条件,以10%的脱脂乳为冻干悬浮基质,对蔗糖、血清蛋白、甘油、海藻酸钠四种保护剂的保护效果进行了研究,结果表明,甘油的保护效果最佳,冻干后菌体的存活率最高,但甘油的吸湿强,给真空冷冻干燥后的活性菌种的分装带来困难,综合考虑选用10%的脱脂乳和血清蛋白作为冷冻保护剂。该研究旨在为直投式的乳酸菌发酵剂工业化生产提供理论依据。     

乳酸菌发酵花粉活菌制剂的冻干保护研究

研究乳酸菌发酵花粉产物进行冷冻干燥时的保护策略。通过单一保护剂筛选和正交试验设计,得到最佳的复合保护剂:乳清蛋白粉5%、海藻糖6%、木糖醇1%。环境温度胁迫处理的影响研究表明,冷胁迫和热胁迫可提高乳酸菌的冻干存活率。优化后的综合保护工艺为:发酵结束后,加入上述复合保护剂,升温至45℃热处理30 min,然后降温至8℃冷处理90 min,真空冷冻干燥后乳酸菌存活率达到94.7%。冻干品在4℃下贮存60 d,存活率为81%。     

真空冷冻干燥乳酸菌的研究进展

乳酸菌的存活率在真空冷冻干燥过程中容易受到多种因素的影响,合理的冻干工艺以及保护剂的合理使用是有效提高乳酸菌真空冷冻干燥后存活率和储藏期的有效手段。本文介绍了真空冷冻干燥的原理、影响乳酸菌冻干存活率的因素,并对如何提高乳酸菌冻干存活率和储藏期进行了探讨,以期为制备高活性和耐储藏的乳酸菌发酵剂提供参考。     

hs-3、ws-3乳酸菌发酵剂冻干研究

通过研究冻干保护剂的冻干厚度、干燥时间与冻干发酵剂含水量的关系,确定hs-3、ws-3乳酸菌冷冻干燥时间为13h,冻干厚度为0.75cm。对不同复合冷冻保护剂进行筛选,确定10%胡萝卜汁 6%葡萄糖 1%琼脂 1%麦芽糊精 1%番茄汁为乳酸菌优良的冷冻复合保护剂。冻干混合菌种发酵剂经发酵活力检测性能优良。     

乳酸菌发酵剂冻干工艺优化及过程机理分析

为了提高泡菜用直投式乳酸菌发酵剂的生物活性,考察了冻干速度对冻干效果的影响;比较多种保护剂对乳酸菌冻干的保护效果,选择其中冻干效果较好的4种保护剂做正交试验;分析冻干工艺的机理,确定最佳的保护工艺和保护剂体系。     

青春双歧杆菌冻干保护剂筛选及高密度冻干工艺优化

为了探究青春双歧杆菌最适冻干保护剂配方,提高工业化生产效率,作者对不同糖与蛋白质类保护剂对双歧杆菌冻干保护特性、不同结构的糖类保护剂复配及其与蛋白质复配的保护效果进行研究,同时测定复合保护剂添加其他小分子物质对冻干存活率的影响,最后优化冻干前菌泥干物质与冻干保护剂的比例,以实现高密度冻干。研究结果表明,糖（醇）类保护剂对青春双歧杆菌的保护效果普遍高于蛋白类冻干保护剂,且四糖以下小分子糖的冻干保护效果较好,其中山梨糖醇和棉籽糖效果最优,二者复配（质量比1∶1）后冻干存活率提高到56%左右;将其与蛋白质、抗坏血酸、谷胱甘肽、微量元素等小分子复配,不会提高对菌体的冻干保护效果;考虑到实际应用,将山梨糖醇、棉籽糖与乳清蛋白以质量比3∶3∶2复配以提高菌粉的疏松度;菌泥与保护剂以干物质质量比1∶1.2混合,样品干物质总质量分数为25%时,青春双歧杆菌的冻干存活率达到（77.08±5.20）%。     

盐诱导大豆蛋白冷凝胶对乳酸菌的抗酸保护作用

主要研究了盐诱导大豆分离蛋白(soy protein isolate,SPI)形成的冷凝胶对乳酸菌在胃酸pH下的保护作用。用CaCl2作为凝胶剂诱导大豆分离蛋白成胶,以30 min时乳酸菌在胃酸pH下的存活率作为评价指标,来评价冷凝胶对细菌的抗酸保护作用。变性温度为85℃、SPI浓度为9%以及CaCl2浓度为20 mmol/L时所形成的冷凝胶,在pH1.2的胃酸环境下对乳酸菌的保护性最好,活菌落的数量级由初始的107变为102,下降了5个数量级。说明大豆分离蛋白冷凝胶对乳酸菌有良好的保护性,并为益生菌在食品中的开发和应用提供了非常好的前景。     

具有α-葡萄糖苷酶抑制作用益生菌的筛选及特性分析

以实验室77 株益生菌为研究对象,从其菌体细胞代谢物（cell-free excretory supernatants,CFS）和细胞内容物（cell-free extracts,CFE）两方面分析菌株对α-葡萄糖苷酶的抑制活性;同时还从耐酸性、细胞黏附性等方面对具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的菌株进行了益生特性评价;最后利用主成分分析进行综合性评价,以期筛选出具有α-葡萄糖苷酶抑制作用的益生菌。结果表明,77?株益生菌的CFE对α-葡萄糖苷酶没有抑制作用;而CFS对α-葡萄糖苷酶具有一定的抑制作用,抑制率为2.53%～15.76%。选取抑制率明显高于其他益生菌（编号为ST-2、1.1881、GS-3和BLP12）菌株进行益生特性的研究。其中ST-2表现出很高的耐酸性和细胞黏附性;GS-3在模拟消化液中有很强的耐受性等,各菌株特性不一。主成分分析表明菌株BLP12的综合性能最好：其对α-葡萄糖苷酶的抑制率可达15.10%;于pH?2.0孵育3?h后,存活率能达到71.04%;于2.0%的胆盐条件下孵育24?h,存活率为0.70%;依次经模拟唾液、胃液、肠液消化后,存活率仍能达到88.27%,但对HT-29细胞的黏附率较低,仅为1.93%,总体上菌株BLP12对体外模拟胃肠环境的适应性很强。该菌株经过16S基因序列鉴定为植物乳杆菌,可作为降糖益生菌株应用于降糖食品的开发。     

叶绿体脱除亚硫酸盐效果研究

对从植物中提取的叶绿体应用于脱除食品中亚硫酸盐的效果进行研究,采用单因素试验和响应面分析法确定实验的最优条件。结果表明,叶绿体脱除NaHSO3 的最佳条件为pH8、反应时间3h、叶绿体和NaHSO3 质量比1:250,在此条件下,亚硫酸盐的清除率可达到94.85%。光照、氧气和振荡处理对亚硫酸盐的氧化反应具有促进作用。     

复凝聚法鼠李糖乳杆菌微胶囊工艺优化及储藏稳定性

为提高鼠李糖乳杆菌在贮藏过程中的稳定性,以明胶、阿拉伯胶为壁材,采用复凝聚法制备鼠李糖乳杆菌微胶囊。研究以湿态微胶囊的包埋率为指标,考察pH、壁材浓度、转速和菌添加量对复凝聚法微胶囊制备的影响,在单因素试验的基础上进行正交试验,优化最佳工艺。将最优条件下的湿微胶囊进行喷雾干燥和真空冷冻干燥,并在不同水分活度和不同温度条件下研究了喷雾干燥和真空冷冻干燥鼠李糖乳杆菌微胶囊的储藏稳定性。结果表明,pH 3.75、壁材浓度1.5%、转速200 r/min、菌添加量109 CFU,此条件下制备的鼠李糖乳杆菌微胶囊包埋率最高,为93.21%;复凝聚法制备的鼠李糖乳杆菌湿微胶囊干燥后,每克真空冷冻干燥微胶囊的活菌数比喷雾干燥微胶囊高1.9个对数值;储藏时水分活度越低,温度越低,鼠李糖乳杆菌微胶囊的储藏性越好;与喷雾干燥微胶囊相比,储藏时真空冷冻干燥微胶囊在高水分活度下较稳定,且在不同水分活度、不同温度条件下的活性均高于喷雾干燥微胶囊。因此复凝聚法制备的鼠李糖乳杆菌微胶囊真空冷冻干燥后能更好的保护鼠李糖乳杆菌,延长其储藏期。     

来宾酒糟酸菜中降胆固醇乳酸菌的筛选鉴定及发酵工艺研究

该研究采用钙溶圈法及MRS-胆固醇培养基从来宾酒糟酸菜汁中分离筛选具有降胆固醇能力的乳酸菌,通过形态观察及分子生物学技术对其进行菌种鉴定,同时对其耐酸性、耐胆盐性能进行研究,并以胆固醇去除率为考察指标,通过单因素试验及正交试验对其发酵条件进行优化。结果表明,筛选得1株具有去除胆固醇能力的乳酸菌,编号为XL-02,经鉴定,菌株XL-02为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）,其具有较好的耐酸能力和胆盐耐受性。在pH2.0的酸性环境下培养24 h,菌株存活率为3.14%;在胆盐含量为0.3%条件下培养24 h,菌株存活率为12.17%。菌株XL-02去除胆固醇的最优发酵条件为以MRS液体培养基为发酵培养基,初始pH值6.0,接种量4%,发酵温度39 ℃,发酵时间72 h。在此优化条件下,胆固醇去除率为（61.56±0.08）%。     

响应面法优化刺梨果多糖发酵工艺研究

为研究并提高刺梨果中多糖的抗氧化活性,选取产朊假丝酵母（Candida utilis）为发酵菌种,采用酵母粉麦芽糖（YM）培养基对刺梨果多糖进行发酵。在单因素试验的基础上,以接种量、发酵时间、初始pH值为影响因素,刺梨果多糖DPPH自由基清除率为响应值,采用Box-Behnken试验设计建立数学模型,利用响应面法优化刺梨果多糖发酵工艺。结果表明,影响刺梨果多糖DPPH自由基清除率的主次顺序为：发酵时间＞初始pH值＞接种量;最佳发酵工艺为发酵时间50 h、接种量2%、初始pH值为3。在此最佳工艺条件下,刺梨果多糖DPPH自由基清除率为86.56%。结果表明刺梨果多糖具有较强的抗氧化活性。     

耐酸性布拉氏酵母的筛选及高密度培养条件优化

布拉氏酵母菌（Saccharomyces boulardii）是临床上作为益生菌药物治疗肠道疾病使用的唯一一株酵母菌,作为微生态制剂,要保证其生物效果,必须能够在胃肠道中保持一定的活菌数,研究发现影响布拉氏酵母菌在胃肠道中存活的最主要因素是低pH,为提高布拉氏酵母菌在低pH条件下的存活率,该研究采用常压室温等离子体（ARTP）诱变技术对S. boulardii 进行诱变,最终筛选出3株对低pH值耐受性较好的突变株。对突变株耐低pH稳定性的研究结果表明,在传代20次后,突变株YB-3具有较好的遗传稳定性,其存活率为51.79%。在5 L发酵罐中,对突变株YB-3高密度培养条件进行优化,最终所得布拉氏酵母菌体干质量为58.79 g/L,比原始菌株提高了55.52%。 关键词：中图分类号：Q815 文章编号：0254-5071（20１6）07-0015-05 doi:     

几种丁酸梭菌的性能研究

选择7种丁酸梭菌（编号为D1～D7）,分别从贮存稳定性、耐热特性、人工胃液耐受性、抗生素抗性以及丁酸产量等方面对丁酸梭菌特性进行了比较研究。结果显示,7种丁酸梭菌室温及-20 ℃存放240 d后,存活率分别为50.00%和59.00%,高于其他菌粉;在70～100 ℃热处理10 min后,菌株D2存活率均为100.00%,110 ℃处理10 min存活率为48.49%,120 ℃处理10 min存活率为37.00%,耐热性最好;耐人工胃液试验中,pH 2.0处理2 h后,菌株D2耐受性最好,存活率为100.00%;抗生素抗性试验中,7种丁酸梭菌均对链霉素、甲氧嘧啶表现出抗性。此外,菌株D2在发酵24 h和48 h后,其丁酸含量分别为8.31 g/L和8.26 g/L,含量显著高于其他菌粉（P＜0.05）。7种菌粉相比较,菌株D2性能更为优良,为丁酸梭菌的贮存及性能评价提供参考依据。     

一株降解恩诺沙星菌株的筛选鉴定及其降解条件的优化

从长期处理含恩诺沙星猪粪的黑水虻肠道中,筛选出可降解恩诺沙星的菌株,并对菌株降解过程中的环境因素进行优化,获得较优的降解条件,为研究恩诺沙星生物降解的途径提供理论基础。将黑水虻肠液加入含有恩诺沙星的培养基中培养,经过两次筛选,从若干株具有降解恩诺沙星能力的菌种中挑选降解能力最强的一株菌株,通过单因素实验确定该菌株最适降解条件:温度、初始pH、接种量、摇床转速,根据单因素实验结果运用响应面分析得出最佳降解条件。结果表明,初筛获得17株对恩诺沙星具有降解作用的菌株,在进一步复筛中发现3株能以恩诺沙星为唯一碳源的菌株,对三株进行分子生物学鉴定,鉴定BSFL-1和BSFL-3为粪肠球菌（Enterococcus faecalis）和BSFL-2为奇异变形杆菌（Proteus mirabilis）。其中降解率最高的菌株为BSFL-3。经响应面分析各因素交互作用后,最佳降解条件为:温度33.6℃、初始pH5.8、接种量为4%、摇床转速155 r/min。在此条件下,恩诺沙星的降解率为77.83%±0.53%。降解条件优化后的菌株具有较高的降解率,拓宽了生物法降解恩诺沙星的研究领域,为利用细菌降解率恩诺沙星应用研究提供帮助。     

刺葡萄皮色素动态吸附解吸纯化工艺研究

对HP-20大孔树脂纯化刺葡萄皮色素的特性进行了研究,得到刺葡萄皮色素动态吸附及解吸适宜的工艺参数。结果表明,上样液pH3,流速4.5BV/h,色素液浓度1.5891～3.1377mg/ml可获得较好的吸附效果;80%乙醇(含0.05%盐酸)是刺葡萄皮色素适宜的洗脱剂,洗脱速度控制为3BV/h,洗脱剂用量8BV可获得最佳解吸效果。在以上优化动态吸附解吸工艺条件下,HP-20树脂对刺葡萄皮色素动态饱和吸附量达到39.0mg/ml湿树脂,解吸率达到92%以上,色素液经纯化后,其色价为原来的5.93倍,取得理想的纯化效果。