碳-4植物糖超标蜂蜜样品的多维分析

本文从124份市面蜂蜜样品中筛选出21份C-4植物糖超标蜂蜜样品,应用元素分析-同位素质谱联用技术（EA-IRMS）、液相色谱-同位素质谱联用技术（LC-IRMS）、液相色谱测定蜂蜜还原糖含量等检测方法,对C-4植物糖超标蜂蜜样品进行多维分析。结果表明：C-4植物糖超标样品在市面上仍占有一定比例,本批次检出超标率为16.94%,且存在少量严重超标样品,最高达到82.35%。C-4植物糖超标蜂蜜样品大致可归纳为以下三类：一是源于生产操作不规范的轻微超标型,该类样品的碳-4植物糖含量为7~10%之间,△δ13CF-G、△δ13Cmax跟真实蜂蜜要求相差不远;二是人为掺入碳-4植物源淀粉转化产物型,该类样品寡糖含量较高,△δ13Cmax较大。三是人为掺入碳-4植物源果葡糖浆型,该类样品本身不含寡糖,δ13CF、δ13CG完成丧失碳-3植物特征。     

液相色谱/元素分析仪-同位素质谱法鉴定蜂蜜 掺假的方法改进

目的改进液相色谱/元素分析仪-同位素质谱法鉴别蜂蜜掺假的方法。方法对现有欧盟标准方法优化液相色谱条件,结合元素分析仪-同位素质谱法,将二糖分离为麦芽糖、蔗糖,提出一个新的参数—麦芽糖、蔗糖δ~(13)C值之差δ~(13)C_(M-S)。结果根据本研究检测113个国内外不同来源纯正蜂蜜样本的数据,提出纯正蜂蜜δ~(13)C值新要求:蜂蜜蛋白质与蜂蜜同位素差值δ~(13)C_(P-H)大于-0.97‰;果糖、葡萄糖δ~(13)C值之差δ~(13)C_(F-G)在-0.60‰至0.56‰范围内;麦芽糖、蔗糖δ~(13)C值之差δ~(13)C_(M-S)在-0.73‰至0.98‰范围内;各个组分δ~(13)C最大差值δ~(13)C_(max)小于2.05‰;根据上述4个参数来确认蜂蜜是否掺假。在日常检测和市场销售的160个样品中,原方法阳性检出率为16.2%,而新方法阳性检出率达21.9%。结论本研究提升了蜂蜜掺假检测能力,此方法的建立更好、更精确打击掺假的同时,也维护消费者权益。     

碳同位素比率法检测分析市售蜂蜜碳-4糖浆的 掺假情况

目的优化稳定碳同位素比率法,分析蜂蜜市场质量状况。方法蜂蜜用水混匀后,利用钨酸钠溶液和硫酸溶液沉淀蛋白,多次洗涤后冷冻干燥获得蜜蛋白,利用同位素质谱仪同时检测蜜蛋白和蜂蜜δ~(13)C值,用两点标准漂移校准进行数据处理分析,测得碳-4植物糖浆含量。结果对来自19个省的137批样品进行检测,有15批蜂蜜不符合我国蜂蜜产品行业标准的真实性要求,检出碳-4植物糖浆掺假情况,不合格率10.95%。结论检测方法优化后,检测时间缩短,蛋白提取成功率提高。通过对实际样品的分析,发现目前市售蜂蜜质量不容乐观。     

多重qPCR法鉴定麦卢卡蜂蜜

目的运用新西兰政府初级产业部(Ministry of Primary Industry, MPI)提出的多重qPCR方法鉴定麦卢卡蜂蜜。方法参照MPI提出的多重qPCR方法,建立麦卢卡标准曲线,提取15个未知来源的蜂蜜样品样品中的花粉DNA,进行样品多重qPCR检测分析。结果建立麦卢卡标准曲线获得Manuka通道的阈值范围,可以用于今后蜂蜜样品的麦卢卡特异性分析。M2-4蜂蜜样品中的花粉DNA不来自麦卢卡树Leptospermum scoparium。结论本研究对MPI提出的鉴定麦卢卡蜂蜜方法起到很好的推动及指导作用。     

麦卢卡蜂蜜质量评价研究进展

麦卢卡蜂蜜是新西兰特有的一种珍贵蜜种。由于其具有独特的非过氧化抗菌活性,营养保健功能强大,在我国的进口蜂蜜中所占的比重越来越大。但是,目前国内对于麦卢卡蜂蜜的研究非常少,这对于进口麦卢卡蜂蜜的监督监管将造成很大影响。由于麦卢卡蜂蜜是根据其抗菌活性高低进行质量评价和分级的。不同级别的麦卢卡蜂蜜价格差异巨大。近来,虚假标示抗菌活性等级甚至完全没有抗菌活性的麦卢卡蜂蜜掺假现象时有报道,急需国内进行相关研究并制订标准以进行监管。本文针对麦卢卡蜂蜜两个关键性质量评价指标,非过氧化抗菌活性和甲基乙二醛的相关研究,以及利用碳4植物糖检测和筛选特征标志物方法用于麦卢卡蜂蜜掺假鉴别研究进行了综述。     

蜂蜜和蜂蜜蛋白中碳同位素的质谱分析法

对蜂蜜和蜂蜜蛋白中碳同位素的质谱分析方法进行了研究,包括制样装置的设计、样品的制备,以及方法的准确性和重视性试验。方法所用仪器是美国Finnigan质谱公司生产的,Finnigan/MAT251型同位素质谱计,它对二氧化碳的测量精度保持在0．005‰左右。试验表明,本方法是分析蜂蜜和蜂蜜蛋白的碳同位素比值的可靠方法,对蜂蜜样品重复测定的偏差为0．08‰;蜂蜜蛋白重复测定的偏差为0．14‰。     

改良琼脂扩散法鉴定麦卢卡蜂蜜

目的改良Allen等提出的测定麦卢卡蜂蜜非过氧化氢抑菌活性的琼脂扩散法。方法参照Allen等提出的琼脂扩散法,研究以下3个方面对琼脂扩散法的影响:使用恒温箱或在杂交炉中混匀蜂蜜水溶液,使用不同代的金黄色葡萄球菌菌株和培养基的倾斜程度。结果麦卢卡蜂蜜样品溶液使用恒温箱和杂交炉静置法混匀,测得样品的独麦素(Unique Manuka Factor,)UMF值没有显著差异;随着金黄色葡萄球菌传代数的增加,样品的UMF值也没有显著差异;培养基倾斜后同一麦卢卡蜂蜜位于中间样孔的样品UMF值明显高于边际样孔。结论杂交炉混匀蜂蜜的方法操作简单,更有利于麦卢卡蜂蜜非过氧化氢活性的检测,25代以内的任何1代菌株均可用于测定麦卢卡蜂蜜样品的非过氧化氢活性,培养基倾倒时要尽量避免过度倾斜。     

利用稳定碳同位素的EA-IRMS分析法研究植物糖浆对蜂蜜的影响

通过稳定碳同位素质谱仪检测混合蜜中掺入蔗糖,混合蜂蜜、紫云英蜂蜜和洋槐蜂蜜等中掺入玉米高转化糖浆后的δ13C值的变化情况.结果表明,C4植物糖蔗糖和玉米糖浆的δ13C值偏离蜂蜜δ13C值较大;C3植物糖甜菜糖和大米麦芽糖的δ13C值与蜂蜜δ13C值较为接近.混合蜜中掺入蔗糖,混合蛮、紫云英蜂蜜和洋槐蜂蜜中掺入玉米高转化糖浆后,其δ13C值随掺入量的增加而增大.蜂蜜中蛋白质的δ13C值基本没有变化.存放2年,蜂蜜的δ13C值基本没有变化.     

同位素比率质谱技术对蜂蜜掺假的鉴别

本文扩展了同位素比率质谱联用技术的应用,完善了液相色谱联用同位素比率质谱（LC-IRMS）测定蜂蜜中多种糖组分δ13C值的方法。通过对3种糖浆、3种掺糖蜜和纯正蜂蜜测定结果和图谱的多重比较,发现单纯的使用元素分析联用同位素比率质谱(HT-IRMS)进行测定,无法完全鉴别出掺糖蜜,但是结合LC-IRMS的测定结果则能有效的对以上3种方式的掺假进行鉴别。对6种特制蜂蜜进行测定并判定,判定结论与实际制样情况相符。该技术手段丰富了鉴别掺假蜂蜜的方法,具有较强的应用价值。     

高效液相色谱-荧光检测法测定麦卢卡蜂蜜中的特征标志物

目的 建立高效液相色谱-荧光检测法(high performance liquid chromatography with fluorescence detector, HPLC-FLD)测定麦卢卡蜂蜜中特征标识物3,5-二甲氧基苯甲酸甲酯-4-双葡萄糖糖苷(leptosperin)的方法。方法 以Platisil ODS色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5 μm)为分析柱, 甲醇-水为流动相进行等度洗脱, 使用荧光检测器, 外标法定量。结果 在0.5~100 mg/L范围内目标化合物的线性关系良好, 相关系数为0.9999, 方法的检出限(limit of detection LOD, S/N≥3)和定量限(limit of quantitation, LOQ, S/N≥10)分别为2 mg/kg和 8 mg/kg。在10、20、50 mg/kg浓度水平下平均回收率为82.2%~108.9%, 相对标准偏差为1.3%~7.5%(n=6)。结论 该方法前处理方法简单快速, 测定结果准确可靠, 可为麦卢卡蜂蜜真伪鉴别提供参考。     

高效液相色谱-串联质谱法测定蜂蜜中的甲基乙二醛

目的建立一种蜂蜜中甲基乙二醛的高效液相色谱-串联质谱法的测定方法。方法采用高效液相色谱-串联质谱法测定蜂蜜中的甲基乙二醛,蜂蜜样品直接用水提取,2,3-二氨基萘为衍生化试剂,常温下避光反应8 h以上,以0.1%甲酸水-乙腈为流动相,色谱柱分离,通过质谱电喷雾离子源,正离子模式进行定性和定量分析。结果甲基乙二醛的线性范围为0.05~1.0μg/m L,相关系数0.999以上,线性良好,检出限为0.2 mg/kg,定量限为0.5 mg/kg。回收率92.4%~97.5%之间,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于1.3%。结论该方法的精密度、回收率均满足要求,适用于大批量样品的快速检测。     

Study on distribution pattern of stable carbon isotope ratio of Chinese honeys by isotope ratio mass spectrometry

The δ ¹³C values of 26 varieties of Chinese pure single‐flower honeys, 323 census samples of six varieties of single‐flower honeys and one multi‐flower honey as well as 20 888 commercial honey samples from 135 honey‐related enterprises in 25 provinces of China were analysed by stable carbon isotope ratio mass spectrometry between 1998 and 2004. It was found that the δ ¹³C values of different Chinese honeys fell within the ranges of values proposed by JW White. This shows that White's theory of the stable carbon isotope ratio of honeys is applicable to Chinese honeys and further demonstrates that the theory is universal to honeys from all over the world. The study also confirmed that the δ ¹³C values of honeys do not bear much relation to the environment in which the honey plants are grown, e.g. geographical area, water and soil, climate, etc., but do vary slightly with the honey plant species. Copyright © 2005 Society of Chemical Industry     

稳定同位素质谱法鉴别芝麻油中掺杂大豆油、玉米油的研究

利用稳定同位素质谱法进行芝麻油掺杂鉴别的研究。选定C3植物油大豆油、C4植物油玉米油作为掺杂油,测定了芝麻油掺入质量分数分别为5%、10%、15%、20%、30%、50%、80%掺杂油的δ¹³C、δ²H、δ¹⁸O值。结果表明:用δ¹³C、δ²H二维稳定同位素比值对大豆油掺杂油样品进行判别,比仅依靠单一δ¹³C值或δ²H值进行判别的灵敏度有所提升,同时发现δ¹⁸O值与掺杂油的比例没有明显的线性关系。二元回归模型可以对芝麻油中掺杂10%大豆油或5%玉米油定量判别。     

元素分析/液相色谱-碳同位素比值质谱法在纯正 苹果汁掺假鉴别中的应用

目的建立一种鉴别检测苹果汁掺假情况的元素分析/液相色谱-同位素比值质谱法(elemental analysis/liquid chromatography-isotope ratio mass spectrometry,EA/LC-IRMS)。方法通过对不同产区不同种类118个纯正苹果汁的糖、有机酸、果糖、葡萄糖、二糖、寡糖碳同位素比值(δ~(13)C值)的测定,建立纯正苹果汁同位素数据库进而提出纯正苹果汁应满足的δ~(13)C值要求。结果有机酸和糖差值Δδ~(13)CO-S在-1.38‰至1.09‰范围内,果糖和葡萄糖差值Δδ~(13)CF-G在-0.70‰至0.57‰范围内,而各组分最大差值Δδ~(13)Cmax4.36‰。对市售105个苹果汁进行检测,采用本方法检出32个阳性样品,而采用本实验室的糖浆标志物法仅检出12个阳性样品。结论本方法大大提高了苹果汁的掺假鉴别,有很大的实际应用潜力。     

砷含量测定在蜂蜜掺假鉴别中的应用

目的建立一种通过检测蜂蜜中砷的含量来鉴别大米糖浆掺假的方法。方法检测并比较大量不同来源的大米糖浆和纯正蜂蜜中砷的含量,同时优化了蜂蜜中砷的检测方法,样品以硝酸-微波消解,电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)测定,内标法定量。结果在0~5.0μg/L范围内线性良好,定量限为10μg/kg,10、15和30μg/kg的添加水平的回收率均在83.7%~109.6%之间,相对标准偏差小于5.9%,并确定了蜂蜜中大米糖浆的阳性判定限,砷含量在15μg/kg以上的蜂蜜为大米糖浆掺假蜂蜜。结论该方法前处理简单,结果准确度和精密度高,纯蜂蜜和大米糖浆的中砷的含量差别明显,可用于蜂蜜中大米糖浆的掺假鉴别。