应用抗黄曲霉毒素单链抗体检测酱油中黄曲霉毒素B1

利用本实验室制备的抗黄曲霉毒素B1的单链抗体(ScFv),通过棋盘实验确定了抗原抗体的最适工作浓度,在此之上根据间接竞争酶联免疫法(ELISA)绘制标准曲线,检测酱油中AFB1的含量;通过改变样品的盐浓度及pH来确定其对ELISA检测结果的影响。研究结果表明,利用ScFv检测黄曲霉毒素的最小检测值为0.10ng/mL,平均加标回收率在84%～109%之间,本文建立的ELISA方法在pH5～8,盐浓度小于10%时较稳定。本文建立的利用抗AFB1的ScFv检测黄曲霉毒素含量的方法方便快捷,稳定性较好,并且成本较低,适合于食品中黄曲霉毒素的检测。     

应用抗黄曲霉毒素单链抗体检测酱油中黄曲霉毒素B1

利用本实验室制备的抗黄曲霉毒素B1的单链抗体(ScFv),通过棋盘实验确定了抗原抗体的最适工作浓度,在此之上根据间接竞争酶联免疫法(ELISA)绘制标准曲线,检测酱油中AFB1的含量;通过改变样品的盐浓度及pH来确定其对ELISA检测结果的影响。研究结果表明,利用ScFv检测黄曲霉毒素的最小检测值为0.10ng/mL,平均加标回收率在84%～109%之间,本文建立的ELISA方法在pH5～8,盐浓度小于10%时较稳定。本文建立的利用抗AFB1的ScFv检测黄曲霉毒素含量的方法方便快捷,稳定性较好,并且成本较低,适合于食品中黄曲霉毒素的检测。      

2021年泰安市粮油食品中黄曲霉毒素B1污染状况及膳食暴露风险评估

为降低泰安市居民黄曲霉毒素B₁(AFB₁)的膳食摄入风险,指导消费者购买安全食品提供依据,随机采集2021年泰安市各县市区内小麦粉、大米、谷物加工品、玉米粉、玉米油、花生油、坚果炒货等粮油食品共计553份,采用高效液相色谱-柱后衍生法对其AFB₁含量进行检测,并采用暴露限值(MOE)法和数学模型法对不同种类、不同来源、不同地区、不同人群粮油食品AFB₁膳食暴露水平进行评估。结果表明：泰安市粮油食品中AFB₁总检出率分别为2.53%,平均含量为0.73μg/kg,总不合格率为0.72%;高新区、新泰市、宁阳县3个县市区小作坊、小食杂店,餐饮店,小型超市购进的花生油与玉米粉中AFB₁检出率较高;泰安市粮油食品AFB₁暴露量为3.90 ng/(kg·d),MOE为103,AFB₁致肝癌发病风险为0.084 2例/(10万人·年);玉米粉、小麦粉、花生油中AFB₁膳食暴露风险较高,高新区、新泰市、宁...     

间接竞争ELISA检测试剂盒测定粮油食品中的 黄曲霉毒素B1

目的建立一套适用于食品中黄曲霉毒素B1的快速、简便、准确的检测方法,同时,进一步验证本公司研制的黄曲霉毒素ELISA检测试剂盒的检测效果。方法用酶联免疫法和高效液相色谱法分别对市售的食用油、花生、谷物样品中AFB1的污染程度进行检测分析。结果用ELISA法和HPLC法测定食用油样品的回收率分别为87.1%~92.7%和85.8%~100.8%;花生样品的回收率分别为76.0%~92.8%和76.3%~92.9%;谷物样品的回收率分别为82.6%~92.7%和82.7%~106.4%,花生加标样品6次平行测定的RSD分别为1.29%~2.46%和5.15%~8.70%,11份阳性样品测定结果表明2种方法具有很好的一致性(r2=0.995)。结论 ELISA法和HPLC法均有很好的线性关系,且测定结果相近。本公司研制的黄曲霉毒素ELISA试剂盒可以快速地检测食品中黄曲霉毒素B1,分析周期短,分析效率高。     

胶体金免疫层析法检测酱油中黄曲霉毒素B1

采用胶体金免疫层析法检测酱油中的黄曲霉毒素B1。加标的酱油样品经提取后,以胶体金免疫层析法对其进行黄曲霉毒素B1测定,并与酶联免疫吸附法进行比较。结果表明,当酱油中黄曲霉毒素含量超过国家限量标准(5μg/kg),胶体金免疫层析法检测结果为阳性,说明该方法能够满足酱油样品中黄曲霉毒素B1监控的要求。     

ELISA法检测五类食品中黄曲霉毒素B1前处理方法的改进研究

用酶联免疫吸附法（ELISA）检测五类食品（酱油、醋、面粉、大米、食用油）中黄曲霉毒素B₁（AFB₁）含量,关键在于样品的前处理。本文针对五类食品中AFB₁的前处理作了方法学研究。结果表明,改进后的前处理使检测灵敏度达0.1μg/kg,在0.1～10μg/kg之间呈良好线性关系,平均回收率在75%～170%之间。      

酶联免疫法检测酱油中的黄曲霉毒素B1

目的建立酶联免疫法检测酱油中黄曲霉毒素B_1(Aflatoxin B_1,AFB_1)的分析方法。方法酱油样本经纯乙腈(料液比=1:2,V:V)提取,再做1:9稀释,通过酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定样本中AFB_1。结果当加标浓度为2μg/kg和5μg/kg时,纯乙腈对酱油中AFB_1的提取回收率结果分别为121.3%和106.5%;方法检出限为1μg/kg。与国标方法检测结果的相对标准偏差小于10%。结论本方法准确、灵敏度高,可适用于酱油中AFB_1的检测。     

微生物代谢黄曲霉毒素B1的研究进展

黄曲霉毒素是由黄曲霉、寄生曲霉等真菌产生的次级代谢产物,主要存在于谷类、花生、玉米等农作物中。在我国尤其是南方省份,受高温高湿环境的影响,黄曲霉毒素在农作物上的污染极易发生,造成巨大的经济损失。利用微生物代谢黄曲霉毒素,具有专一、高效、反应条件温和等诸多优点,是目前公认的理想脱毒方法。本文首先简要介绍了黄曲霉毒素B₁的形成过程、结构特征以及毒性基团,接着重点介绍了已报道的能代谢黄曲霉毒素B₁的微生物种类、关键酶以及代谢途径,最后列举了应用基础研究的例子。     

黄曲霉毒素B1直接竞争化学发光酶免疫分析法的建立

以鲁米诺-辣根过氧化物酶-过氧化氢为检测体系,建立一种检测黄曲霉毒素B1的直接竞争化学发光酶免疫法。经优化,该方法的最佳反应条件为抗体包被为0.0625μg/mL;黄曲霉毒素B1酶标抗原（1mg/mL）稀释10000倍;0.01mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.5）。本方法的IC50为0.062ng/mL;检出限为0.01ng/mL;线性范围0.017⁰.215ng/mL,批内和批间相对标准偏差均小于15%。食用油样品的添加回收率为88.7%⁹8%,通过对比实验证实,该方法与ELISA方法相关性良好,可用于实际样品中黄曲霉毒素B1的大规模快速筛查。      

云南省十县市粮油食品黄曲霉毒素B1污染调查

黄曲霉毒素B1是一种强烈的致癌物质,自20世纪60年代初在英国发现以来,全世界有不少食用霉变食品引起人类中毒的报道。流行病学调查发现肝癌发病率在地区上的分布与当地粮油食品受黄曲霉毒素污染程度有密切关系,在污染严重的地区,肝癌发病率较高。我站在我省十个县市采集花生、花生油、玉米等样品137件进行黄曲霉毒素B1的检测结果如下。     

食用植物油中黄曲霉毒素B1调查分析

调查了浙江省食用植物油中黄曲霉毒素B_1(AFB_1)的污染情况。根据浙江省食用植物油生产消费的实际情况,2016年9—12月,采用统计学方法采集151家食用植物油经销企业的花生油、玉米油、大豆油、菜籽油、油茶籽油、葵花籽油、芝麻油、调和油8大类散装油和定型包装油,共1 208个样品,高效液相色谱法测定AFB_1含量。结果表明:22个样品检出AFB_1,检出率为1.8%,超标率为0.0%;其中花生油、葵花籽油、玉米油和调和油检出AFB_1,浙江省特产的油茶籽油和菜籽油未检出AFB_1,散装油中AFB_1检出率(3.8%)是定型包装油(0.9%)的4.22倍,食用植物油样品中AFB_1含量均低于国家限量标准。     

酶联免疫吸附和免疫亲和微柱法快速检测粮油食品中黄曲霉毒素B1的比较分析

用酶联免疫吸附-酶标仪分析法和免疫亲和微柱-荧光仪分析法分别对粮油样品中黄曲霉毒素B1进行测定,对其检测条件和结果进行差异性分析比较,两种检测方法都比较适宜在广大基层实验室推广应用。酶联免疫吸附分析法适宜大批量样品快速筛选;免疫亲和微柱分析法适宜单一样品现场快速检测,特别适宜对食用植物油中AFB1快速检测。     

高效液相色谱法测定食品中的黄曲霉毒素B1

用甲醇-水（55:45）、三氯甲烷、苯-乙腈（98:2）等有机溶剂作为提取剂,用三氟乙酸作衍生剂,通过带荧光检测器的高效液相色谱仪测定食品中黄曲霉毒素B1的含量。结果表明,该方法的线性回归关系良好,方程为y=3.10x-0.63,相关系数r=0.9999。不同样品中黄曲霉毒素B1回收率为84.2%-86.9%,平均变异系数RSD=6.09%。在总共150份检测的玉米、大米和花生样品中,黄曲霉毒素B1总的检出率为82.0%,总的超标率仅为6%,但不同样品中黄曲霉毒素B1含量的变幅较大（0-485.34μg/kg）。      

生物技术对黄曲霉毒素B1的脱除及机制研究进展

黄曲霉毒素是危害最大的真菌毒素之一,而黄曲霉毒素B₁(AFB₁)是黄曲霉毒素中毒性最大的一种,具有高毒性、致癌、致畸和致突变的作用,对动物和人类健康造成危害。为了有效脱除AFB₁,综述了近年来研究的具有解毒作用的微生物,介绍了采用生物技术脱除AFB₁的方法,重点探讨了生物脱除AFB₁机制。用于脱除AFB₁的菌株有芽孢杆菌、假单胞菌、乳酸菌、非产毒曲霉等,可采用单菌种发酵、多菌种协同发酵和菌-酶协同作用脱除AFB₁。生物脱除AFB₁机制主要为降解脱除和吸附脱除。可进一步筛选具有高优良能力的菌株以及更深层次地研究微生物脱毒的机制,探索微生物制剂对AFB₁的降解作用。     

山东临沂部分县区花生收获前后黄曲霉毒素B1污染情况研究﹡

目的了解花生从收获前到收获、储存期间黄曲霉毒素B1(AFB1)污染的环节,为预防花生AFB1的污染提供科学依据。方法 2014年,在山东临沂市选择花生种植范围较广的5个县,分别于收获前1~2周、收获时、收获晾干后1个月和储存3个月采集花生样本共260份,酶联免疫法(ELISA)检测花生AFB1的污染情况,并对结果进行分析。结果 260份花生样品中,收获前、收获时样品中AFB1均小于2μg/kg,收获晾干后1个月和储存3个月各有1份样品AFB1含量严重超标,分别是81.07μg/kg和为254.27μg/kg,阳性率均为1.27%;总阳性率为0.77%。结论 2014年临沂部分地区花生中AFB1阳性率较低,污染主要发生在收获后的晾晒和储存期,提示科学晾晒和储存是预防花生AFB1污染的重要措施之一。     

黄曲霉毒素B1的生物脱毒研究进展

简要介绍了黄曲霉毒素的分子结构、理化性质、对人体健康的危害及黄曲霉毒素B1在食品中的限量标准。重点阐述了近几年黄曲霉毒素B1生物脱毒方面的进展,其中微生物主要通过吸附和降解两方面去除黄曲霉毒素B1。     

酶联免疫法测定干红辣椒中的黄曲霉毒素B1

本实验采用酶联免疫法对干辣椒中的黄曲霉毒素B1 进行检测,并对黄曲霉毒素的防控措施进行讨论。结果显示,检测灵敏度为0.1μg/kg,相对标准偏差小于3%,平均回收率达97%,说明本法稳定性好,测定准确,重现性好,能有效的应用于干辣椒中黄曲霉毒素B1 的检测。     

花生油中黄曲霉毒素B1检测能力验证研究

目的 为了解和评价国内相关实验室在黄曲霉毒素检测领域的整体水平和能力,了解和掌握实验室间检测存在的差异,国家认证认可监督管理委员会(CNCA)组织了花生油中黄曲霉毒素B1检测能力验证.方法 依据ISO 13528:2005、CNAS-GL02:2006、CNAS-GL03:2006等规定的程序,对本次能力验证活动进行了实施和评价.待测样品均匀性测试采用F检验和Ss≤0.3σρ检验法,稳定性测试采用t检验法,采用Z比分数评价各实验室的测试结果.结果 共有91家实验室参加本次能力验证,初次结果不满意的实验室有一次补测机会,最终有88家实验室结果“满意”,2家实验室结果“可疑”,1家实验室结果“不满意”.结论 绝大多数国内相关实验室黄曲霉毒素检测能力整体水平良好,符合相关国际能力验证标准的要求.     

酶联免疫法测定绿豆沙中黄曲霉毒素B1实验

依据GB/T17480-2008《饲料中黄曲霉毒素B1的测定酶联免疫吸附法》测定绿豆沙中黄曲霉毒素B1含量,绿豆沙由颗粒状变为半固体豆沙状,实验验证该方法对绿豆沙中黄曲霉毒素B1检测的适用性,并对方法的检出限、准确性进行验证,确定酶联免疫法适用于绿豆沙中黄曲霉毒素B1的检测,规范检测细节及注意事项。     

几种传统食品中黄曲霉毒素B1的检测与安全评价

采用酶联免疫法检测月饼、花生油、花生糖和豌豆酱等传统食品中的黄曲霉毒素B1（简称AFT B1）含量，分析AFT B1超标的原因及其安全性，结果表明：大部分传统食品中AFT B1在安全限量之内，少数几类产品存在安全隐患。