EPCs与NSCs共移植对MCAO模型大鼠神经功能缺损恢复影响

目的：将体外培养的EPCs与NSCs共移植体移入MCAO模型大鼠脑内,观察缺血区血管新生和神经功能缺损修复情况。方法;选择240只SD大鼠随机分为假手术组、MCAO组、MCAO＋NSCs组、MCAO＋EPCs组、MCAO＋EPCs和NSCs共移值体组,在1d、3d、7d、14d、30d、60d各时间点观察各组脑缺血半暗区微血管密度和大鼠的电生理指标（运动诱发电位）及行为学（mNSS改良神经功能评分）。结果：MCAO＋NSCs组的微血管密度与MCAO组在各时间点无差别;MCAO＋EPCs组、MCAO＋EPCs和NSCs共移值体组的微血管密度除1d外其他各时间点均高于MCAO组。在7d后MCAO＋NSCs组、MCAO＋EPCs组、MCAO＋共移植体组运动诱发电位与缺血对照组有差异,MCAO＋共移植体组差异最大。MCAO＋EPCs组、MCAO＋共移值体组与MCAO照组相比在3d后有差异,MCAO＋共移植体组差异最大。结论：EPCs与NSCs共移植体移入MCAO模型大鼠脑内,可增加其缺血半暗区血管新生,促进神经功能的进一步恢复。     

丹参酮ⅡA增效大鼠骨髓源性内皮祖细胞VEGF、SDF-1表达

目的：研究在丹参酮ⅡA的辅助下,骨髓源性内皮祖细胞（EPCs）VEGF与SDF-1表达是否能增强,从而促进细胞归巢。方法：Percoll密度梯度离心法分离SD大鼠骨髓单个核细胞,血管内皮生长因子（VEGF）、表皮生长因子（（EGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）诱导培养,并进行形态学、免疫学（免疫细胞化学染色）、功能学（Dil-acLDL与FITC-UEA-1双荧光染色）鉴定。将鉴定为EPCs的细胞分为单纯EPCs组（对照组）、EPCs＋丹参酮ⅡA组（加药组）。细胞培养第9d,Western blot与实时荧光定量PCR检测各组VEGF、SDF-1基因与蛋白表达。结果：EPCs＋丹参酮IIA组VEGF、SDF-1基因与蛋白表达均高于EPCs组（p均〈0.05）。结论：丹参酮ⅡA可上调大鼠骨髓源性内皮祖细胞VEGF及SDF-1表达,从而可能在缺血环境中更好促进EPCs归巢,更有效促进血管修复与再生。     

酪氨酸蛋白激酶抑制兔角膜新生血管的实验研究

目的：探讨酪氨酸蛋白激酶抑制剂sunitinib对碱烧伤诱导的兔角膜新生血管的抑制作用。方法：采用碱烧伤法诱导兔角膜新生血管模型。将30只新西南大白兔随机分为3组,A组：给予0.5mg/ml sunitinib滴眼,B组：给予1mg/ml sunitinib滴眼,C组：给予生理盐水滴眼作为实验对照组。于碱烧伤后4d、7d、14d显微镜观测新生血管长度及面积。在4d、14d时各组处死4只兔,角膜作病理分析和免疫组织化学法测定血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的表达。结果A、B组的角膜新生血管长度及面积均显著少于C组（p〈0.01）;A、B组VEGF蛋白表达较C组弱,具有统计学差异（p〈0.01）;结论：酪氨酸蛋白酶抑制剂sunitinib能降低兔角膜碱烧伤后角膜VEGF的表达,有效抑制角膜新生血管的形成。     

血管内皮生长因子在激光诱导视网膜下新生血管形成中的作用及其抗体的影响

目的：探讨血管内皮细胞生长因子（vascular endothial growth factor,VEGF)在激光诱导兔视网膜下新生血管形成中的作用，观察其抗体对新生血管的影响。方法：高强度氪激光光凝有色家兔视网膜1、3、7、14d后，制备眼球冰冻切片检查眼底病理变化，用组织原位杂交法观察VEGFmRNA表达时相和部位的变化。VEGF抗体治疗组2只眼于光凝后10min玻璃体内注射5μgVEGF抗体，14d后行眼底荧光造影并与对侧眼对照观察荧光渗漏变化。结果（1）正常对照家兔视网膜中未见VEGFmRNA的表达；（2）激光光凝后1-3d，邻近伤口的视网膜节细胞层和内核层VEGFmRNA表达明显增加；（3）光凝后3d，光凝斑附近的视网膜下有新生血管样结构出现；（4）VEGF抗体治疗组荧光染料渗漏程度明显降低。结论：VEGFmRNA的在激光光凝后的视网膜中表达增多，且与光凝斑周围的新生血管化存在时空对应关系，提示VEGF在视网膜下新生血管形成过程中具有重要的作用。VEGF抗体对新生血管形成具有明显的抑制作用。     

低能量ALA-PDT对脑组织新生血管形成及胶质瘤生长的影响

观察了低能量5-氨基乙酰丙酸介导的光动力学疗法(ALA-PDT)对脑组织新生血管形成和胶质瘤生长的影响。用10J/cm2的ALA-PDT照射27只裸小鼠大脑皮层后第1、5、10天,利用二维、三维图像观察新生血管形成,western blot检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达。另将12只裸小鼠分为对照组(无特殊处理)和ALA-PDT预处置组(10J/cm2),ALA-PDT预处置后第10天,颅内接种U87胶质瘤细胞,21天检测肿瘤体积。结果发现,以照射区对侧大脑相应区域为对照,低能量ALA-PDT照射后第1和5天,血管形态无明显变化,第10天有新生血管形成;VEGF在照射后第5和10天显著增高;HIF-1α在照射后第1天即开始增高,随后越发明显。低能量ALA-PDT可通过HIF-1α诱导VEGF高表达和新生血管形成,这种微环境的改变有助于U87脑胶质瘤细胞的生长。     

雷帕霉素对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的：观察雷帕霉素对人脐静脉内皮细胞增殖的影响,探讨其可能的抑制新生血管的作用机制。方法：采用四唑盐比色试验（MTT）法检测不同浓度（0.1ng/ml,1ng/ml,10ng/ml,20ng/ml）的雷帕霉素对血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）诱导的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）增殖的抑制作用。结果：不同浓度的雷帕霉素均能抑制由VEGF诱导的HUVEC增殖。结论：雷帕霉素能抑制HUVEC的增殖,且呈剂量依赖。雷帕霉素通过抑制血管内皮细胞的增殖来抑制新生血管的形成。     

姜黄素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

目的：探讨姜黄素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制。方法：采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,随机分成假手术组、对照组、100mg/kg姜黄素组及300mg/kg姜黄素组及300mg/kg姜黄素组,分别在脑缺血再灌注后24h处死,观察大鼠神经功能缺失的评分,应用TTC染色观察梗死体积,尼氏染色观察神经元形态结构特征,TUNEL染色计数凋亡神经元,荧光免疫组化及Western-blot检测caspase-3蛋白的表达变化。结果：姜黄素能明显改善大鼠缺血再灌注后的神经功能缺损,缩小梗死体积,明显减少TUNEL染色阳性细胞数,下调caspase-3蛋白的表达。结论：姜黄素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有良好的神经保护作用,这可能与其减少caspase-3的表达,抑制缺钱神经元的凋亡密切相关。     

血管内皮生长因子与肿瘤生长的关系

近来对肿瘤生长的不断深入研究,发现血管生成对肿瘤的生长起着至关重要的作用。肿瘤血管生成由正负两方面调节,其中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）是重要的促血管生长因素,由不同肿瘤细胞分泌,也可在发育中的正常细胞及组织中表达,在体内调节血管的通透性,为血管形成过程中的多种细胞提供一个纤维网络;在体外能促进基质的降解以及内皮细胞的增殖、迁移、运动和血管腔样结构的形成,并可动员骨髓来源的内皮祖细胞。VEGF是诱导肿瘤血管形成的作用最强、特异性最高的血管生长因子。理论上来说,采用不同方法来干预或抑制血管内皮生长因子可以抑制肿瘤的生长。     

三氧化二砷对照射后人肺癌细胞MGMT和VEGF表达的影响

目的：本文探讨三氧化二砷（Arsenic trioxide,As2O3）对受照后人肺癌A2细胞株MGMT和VEGF表达的影响。方法：设立空白对照组、照射组（直线加速器X射线照射,2Gy）、As2O3组（1.0μmol/L As2O3）、As2O3＋照射组（1.0μmol/L As2O3＋X射线照射,2Gy）。平板克隆形成试验测定各实验组细胞集落形成率,用RT-PCR和免疫组化检测MGMT（甲基鸟嘌呤甲基转移酶）、VEGF（血管内皮生长因子）基因和蛋白水平的变化。结果：As2O3＋照射组细胞集落形成率较As2O3组及照射组明显下降,与As2O3组或照射组比较差异具有显著性（P〈0.01）。As2O3＋照射组细胞MGMT、VEGF基因表达明显减少,而且MGMT、VEGF蛋白的表达明显降低,与As2O3组或照射组比较差异具有显著性（P〈0.01）。结论：As2O3能使受照后人肺癌A2细胞MGMT、VEGF基因及蛋白表达水平明显下调,可能是As2O3对人肺癌细胞辐射增敏的机制之一。     

内皮抑制素与角膜新生血管

随着对角膜新生血管（comealneovascularization,CNV）研究的深入,许多有希望的抗血管生成药物出现。越来越多的研究发现内皮抑制（endostatin,ES）对新生血管内皮细胞增殖有特异的抑制作用,长期使用无毒副作用,是目前理想的抗新生血管形成的生物制剂。本文阐述了ES的结构、生物特性、作用机制及在CNV方面的研究进展。     

电针对局灶性脑梗死大鼠RhoA/ROCK表达的影响

目的:观察大鼠局灶性脑梗死后大脑皮质RhoA和ROCK(Rho-associated kinases)的表达以及电针刺激对其表达的影响。方法:将成年健康雄性SD大鼠40只,随机分为正常组,假手术组,模型组和电针组,每组十只。模型组和电针组利用改进后的Longa方法制作大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,电针组在大鼠麻醉苏醒后90min进行电针刺激,每天一次,连续针刺14天。每组分别在1d,3d,7d,14d四个时间点进行神经行为学评分。14天时运用免疫组织化学法观测缺血区大脑皮质中RhoA和ROCK的分布和表达,利用免疫印迹法检测缺血区侧大脑皮质RhoA和ROCK的蛋白表达。结果:模型组大鼠神经行为学评分明显高于正常组和假手术组(p0.01),14天后电针组的神经行为学评分明显低于同时段模型组(p0.05);免疫组化结果显示,电针组的RhoA和ROCK表达较模型组明显减少(p﹤0.05);Western blot检测结果显示,电针组RhoA蛋白和ROCK蛋白的表达量较模型组RhoA蛋白和ROCK蛋白明显减少(p0.05)结论:大鼠局灶性脑梗死后脑损区皮质RhoA与ROCK表明显上调,给予电针干预后可降低其表达,这可能是电针促进MCAO大鼠脑损区轴突再生的机制之一。     

NHE1siRNA对VEGF诱导HUVECs细胞迁移与Matrigel小管形成的影响

目的:本文探讨用小干扰RNA(siRNA)抑制钠氧交换体-1(NHEI)能否抑制血管内皮生长因子(VEGF)诱导的体外血管生成.方法:用阳离子脂质体方法将靶向抑制NHEI的小分子RNA(NHEI siRNA)及阴性对照的寡核苷酸片段(NHE1 siNC)转染到人脐静脉内皮细胞(HUVECs),荧光显微照相检测转染效率,...     

胸腺五肽对产科危重症患者免疫调理治疗的随机对照研究

目的：研究产科危重病人CD3^＋、CD4^＋,CD8^＋、NK细胞记数、CD4^＋／CD8^＋、α白细胞介紊-6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF—α）的变化,探讨胸腺五肽（Thymopentin,TP-5）对产科重症病人的免疫调理作用。方法．2005年1月至2007年12月71例收住重庆医科大学附属第一医院中心ICU的产科重症病人随机分为对照组和治疗组,两组分别于治疗后1、5、10d检测CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋和NK细胞数;于治疗前和治疗后1、5d测定病人血清IL-6和TNF—α的动态变化。结果：TP-5免疫调理治疗后两组病人T淋巴细胞总数和亚群在第5d开始有显著性差异,治疗组CD8^＋低于对照组,CD4^＋、NK细胞和CD4^＋／CD8^＋比值高于对照组（P〈0．05）。第10d治疗组CD3^＋、CD4^＋、NK细胞和CD4^＋／CD8^＋比值高于对照组,CD8^＋细胞低于对照组（P〈0．05）。治疗组血清IL-6在第5d下降（P〈0．05）。TNF—α在第1d开始低于对照组（P〈0．03）,下降在第5d显著下降（P〈0．05）。结论：TP-5能明显调节产科危重病人免疫功能,使之趋于平衡,并最终获得改善预后的效果。且副反应少,可作为良好免疫调节剂用于产科危重病人综合治疗。     

As2O3联合H22源exosome的抗肿瘤作用研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）联合小鼠肝癌（H22）源exosome对小鼠皮下种植性肝癌（H22）模型的抗瘤作用。方法：超速离心及密度梯度离心法提取exosome,Bradford法蛋白定量;建立BALB／c小鼠皮下荷瘤模型．实验分4组：空白成瘤对照组、As2O3组、As2O3联合exoeome组和exosome组。观察As2O3、exosome、及其联合应用的体内抗瘤效应;监测在体肿瘤的生长情况;计算抑瘤率、生存率：免疫组织化学法检测肿瘤组织中浸润的CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞。结果：与空白成瘤对照组比较,As2O3组、及其与exosome联合组的肿瘤生长明显放缓（P〈0．05）。其抑瘤率分别为44．58％、66．27％。As2O3组及As2O3联合exosome组肿瘤组织中浸润的CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞明显增加（P〈0．05）。结论：As2O3与exosome联合应用对小鼠皮下种植性实体性肝癌（H22）有协同治疗效应。     

孕期微量染镉对雄性胎鼠性腺分化发育影响的研究

目的：探讨孕期微量染镉对胎鼠睾丸分化发育的影响及作用机制。方法：SD孕鼠16只,随机分为镉组（A组）、己烯雌酚组（B组）、镉加他莫静酚组（C组）和正常对照组（D组）,每组4只。A组于孕期第9、11、13天腹腔注射氯化镉1．5H影（kg．d）,B组于妊娠第9至17天皮下注射已烯雌酚10％g／（kg．d）,C组注射氯化镉的同时给予雌激素受体拮抗剂他莫昔酚50mg／（kg．d）,D组注射与镉等体积生理盐水。妊娠第18天,削商产取雄性胎鼠睾丸作光、电镜观察;免疫组化测定各组胎鼠睾丸间质细胞类固醇激素合成急性调节蛋白（StAR）表达水平;RT—PCR法测定曲勒氏管抑制物（MIS）表达量。结果：光镜下A组和B组睾丸生精小管内支持细胞排列紊乱,间质成分增生,C组未见明显的形态学改变;电镜下A组和B组均可见支持细胞、生殖母细胞及间质细胞线粒体肿胀、内质网扩张以及间质细胞内脂滴堆积,C组超微结构退变轻于A组和B组;A组和B组间质细胞中StAR阳性产物表达均显著低于D组（P〈0．01）,C组StAR阳性产物表达虽低于D组,其差异没有统计学意义（P〉0．05）,但却明明显高于A组（P〈0．05）;各组间MIS表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：孕期微量镉暴露可影响雄性胎鼠性腺的分化与发育,且镉具有雌激素样作用．     

系统性红斑狼疮患者血液中PRDM1和CD138＋浆细胞表达的研究

目的;探讨系统性红斑狼疮（SiE）患者和正常人之间PRDM1和CD138＋浆细胞的差异。方法：40例SLE患者血液标本,30例健康体检血液标本,抽取RNA、利用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术研究PRDM1基因表达;收集外周血单个核细胞,利用流式细胞技术研究CD138＋浆细胞量的差异。结果：SLE患者组血液中的P...