拟南芥悬浮细胞中ERG437蛋白的细胞定位的初步观察

近来在大肠杆菌中新发现的Era蛋白（E.coli ras-like protein）是一类新的GTP结合蛋白,研究表明Era蛋白参与调节细胞分裂、细胞周期以及部分细胞代谢过程。植物中相关研究报道尚少,推测ERG蛋白可能定位在线粒体,并且与种子的正常发育相关。本实验通过构建植物表达载体初步观察了ERG437蛋白在拟南芥悬浮细胞中的定位情况,同时利用CoxⅣ蛋白初步观察到绝大部分ERG437蛋白定位于线粒体。     

Era蛋白（E.coli ras-like protein）-一个可能参与真、原细胞信号调控的新分子开关

充足的证据表明G蛋白作为真核细胞的重要分子开关参与细胞的增殖调控以及部分代谢调控过程。而近来在大肠杆菌中新发现的Era蛋白（E.coli ras-like protein）则是与已知的三聚体G蛋白和小分子G蛋白不同的一种新的GTP结合蛋白。进一步的研究发现该类GTP结合蛋白不仅存在于原核的大肠杆菌中,而且在高等植物、人类细胞中均含有该蛋白的同源蛋白。大肠杆菌的Era蛋白主要位于细胞膜的内侧,细胞质中也有一定的分布;一些证据表明,真核细胞ERA（ERG）蛋白来源于原核细胞,定位于线粒体或者叶绿体。近来的研究证据表明ERA或者ERG蛋白有可能担负着与其它两类G蛋白同样重要的分子开关功能。已有的研究表明Era蛋白参与调节原核生物的细胞分裂、细胞周期以及部分细胞代谢过程;在哺乳动物细胞中,同源蛋白ERA可能与细胞周期的G1期调控以及细胞凋亡有关;真核植物中相关研究报道尚少,推测该蛋白可能与种子的正常发育有关。本文主要介绍原核Era蛋白和真核ERA蛋白的结构特点以及功能研究进展。     

一种新的与渗调蛋白基因启动子结合的蛋白基因的分离

渗调蛋白基因可受多种外界环境因子的诱导表达,并与植物细胞的渗透调节、抗逆境及植物抗病性等重要的生理过程有着密切关系,通过寻找与渗调蛋白基因启动子中FA区域DNA结合的蛋白,克隆参与该基因表达调控的反式作用因子,有利于明确渗调蛋白基因在转录水平上的调控机制,揭示外界环境因子通过信号传导系统诱导渗调蛋白基因表达的过程利用近年来发展起的酵母单杂交系统,从适盐的烟草悬浮细胞的cDNA文库中分离到1个可与渗调蛋基因启动子中FA片段结合的蛋白因子的基因OPBP1.核酸序列分析表明OPBP1包含有一个完整的阅读框架,可编码277个氨基酸,氨基酸序列的比较分析表明该蛋白与近年来发现的一类新的DNA结合蛋白如EREBP,AP,ANT等具有相同的保守区,其中一些氨基酸完全相同,OPBP1与EREBP3最接近,同属该类新的DNA结合蛋白的第1组,仅有1个保守区.     

^13C-亮氨酸呼气实验与氨基酸吸收

食物蛋白是人体蛋白质的重要来源，人体通过口服摄入食物蛋白，食物蛋白在胃肠道内经酶的分解生成氨基酸，后者再经肠道被肠黏膜吸收入血液。因此，如果受检者患有蛋白质的吸收不良，则应该在两个环节上有问题，一是胃肠道中用于分解蛋白质变成氨基酸的酶缺乏或功能不足，二是肠黏膜上皮异常，导致氨基酸的吸收不良。     

动物脑蛋白水解液中游离氨基酸的测定

现代科技飞速发展,不断有新的肽类物质被发现并应用于临床,动物脑蛋白水解液就是目前最具代表性药物之一。采用L-8800型氨基酸自动分析仪测定动物脑蛋白水解液中游离氨基酸含量,具有简便,准确,重现性好等优点,有利于药厂确定动物脑蛋白水解液最佳工艺条件,严格控制药品质量。     

蛋白组学方法应用于人肺癌组织蛋白表达的研究

采用蛋白组学方法,利用4例中国肺癌患者的切除肺癌组织测定了磷癌(SQCLC)的蛋白表达.从双向电泳(2-DE gel)切下53个点,49个蛋白与数据库搜索结果吻合.在鉴定的24个蛋白中,17个蛋白有报道是与肺癌相关的蛋白,其它7个蛋白与人类其它癌症相关.所建立的蛋白组学方法能够用于建立一种基于组织的化验方法,发现肺癌患者组织中表达的蛋白标记物以用于癌症的分子学诊断.     

海马提取物中氨基酸种类分析

实验测定海马的粗脂肪和蛋白含量，分析海马乙醇提取物和水提取物中所含氨基酸种类的异同。     

茶蛋白的提取方法及生物活性研究进展

茶渣是茶叶浸提加工后产生的废料,茶渣中含有18％～25％的蛋白质,研究发现茶蛋白具有抗氧化、降血脂及预防辐射等多种生物活性和良好的吸油性、乳化性及稳定性等功能特质.文章针对茶蛋白主要的提取方法与生物活性进行了归纳总结,并对存在的问题进行了讨论,以期为茶蛋白的研究和茶资源的高值化利用提供参考.     

~(13)C-亮氨酸呼气实验与氨基酸吸收

食物蛋白是人体蛋白质的重要来源,人体通过口服摄入食物蛋白,食物蛋白在胃肠道内经酶的分解生成氨基酸,后者再经肠道被肠黏膜吸收入血液。因此,如果受检者患有蛋白质的吸收不良,则应该在两个环节上有问题,一是胃肠道中用于分解蛋白质变成氨基酸的酶缺乏或功能不足,二是肠黏膜上皮异常,导致氨基酸的吸收不良。采用13C-亮氨酸呼气实验可以有助于判断氨基酸在肠道内的吸收是否异常,还可以判断通过给予一些病人口服氨基酸进行营养学治疗的可能性。 13C-亮氨酸呼气实验的原理是：亮氨酸是必需氨基酸,在人体内可通过代谢而分解为CO2, …     

免疫调节肽的概述

酪蛋白是乳中最主要的蛋白质,除了提供氨基酸和能量的营养功能外,酪蛋白还是生物活性肽的重要来源。在众多的增强机体免疫功能的措施巾,营养调控措施最切实可行,且处于核心地位。其中,通过多种途径从生物体和食物蛋白中获取具有免疫调节活性的小肽以增强机体免疫功能的一种策略。这些小肽本身以非活性状态存在于蛋白质氨基酸序列中,当用适当的蛋白酶进行体外水解或在胃肠道消化过程中以及食品加工过程中,它们的活性就被释放出来,并可作为生理功能的重要调节剂。到目前为止,已经发现了几十种具有不同生理功能的生物活性肽,免疫调节肽就是其中研究较多的一类生物活性肽,它能够增强人体的免疫功能,对人体特别是对新生儿正常生理功能发挥着不可替代的功能,它的开发利用和进一步深入研究具有重要意义。因此,本文对目前有关免疫调节肽的研究进展进行简要综述,重点对牛乳酪蛋白源免疫调节肽进行阐述。     

Probing protein structure by amino acid‐specific covalent labeling and mass spectrometry

For many years, amino acid‐specific covalent labeling has been a valuable tool to study protein structure and protein interactions, especially for systems that are difficult to study by other means. These covalent labeling methods typically map protein structure and interactions by measuring the differential reactivity of amino acid side chains. The reactivity of amino acids in proteins generally depends on the accessibility of the side chain to the reagent, the inherent reactivity of the label and the reactivity of the amino acid side chain. Peptide mass mapping with ESI‐ or MALDI‐MS and peptide sequencing with tandem MS are typically employed to identify modification sites to provide site‐specific structural information. In this review, we describe the reagents that are most commonly used in these residue‐specific modification reactions, details about the proper use of these covalent labeling reagents, and information about the specific biochemical problems that have been addressed with covalent labeling strategies. © 2008 Wiley Periodicals, Inc., Mass Spec Rev 28:785–815, 2009     

即食花蛤贮藏前后主要营养成分及氨基酸的比较

本文对即食花蛤贮藏前后的营养成分进行了测定,包括水分、粗脂肪、粗蛋白、灰分和游离氨基酸。试验结果表明:90d的贮藏降低了水分、粗蛋白和游离氨基酸的含量,粗脂肪和灰分的含量在贮藏前后无显著差异(p>0.05)。即食花蛤中粗蛋白、必需氨基酸和半必需氨基酸含量的降低表明其营养价值在贮藏后期降低,呈味氨基酸含量的降低引起了其在贮藏后期鲜味的下降和口感的降低。     

基于FPLC-LC-MS/MS分析嗜盐古菌Haloarcula hispanica胞内类泛素化底物

本研究结合SLIC克隆技术和快速蛋白质液相色谱-高效液相色谱-串联质谱(FPLC-LC-MS/MS)法,对嗜盐古菌Haloarcula hispanica类泛素蛋白ThiS的泛素化底物和缀合位点进行鉴定分析。采用SLIC克隆法构建类泛素蛋白ThiS表达质粒/整合质粒,经转染后的菌株在DMSO呼吸作用诱导下表达并纯化His6-ThiS蛋白缀合体。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,质粒型类泛素ThiS的表达远远高于基因型菌株的表达量,而通过定点突变,将ThiS的第89号位点突变成赖氨酸K和精氨酸R,进而使用胰蛋白酶对ThiS肽段上的赖氨酸残基-双甘氨肽标签进行酶切处理,采用LC-MS/MS法鉴定其底物和底物修饰位点。鉴定得到钼喋呤合成酶MoaE,蛋氨酸亚砜还原酶MsrA和其同系物MsrB,以及Fe-S簇组装蛋白SufB等4种底物蛋白。该方法通过结合蛋白位点突变和质谱检测,能够准确、有效地检测泛素/类泛素蛋白的修饰底物及其修饰位点,为深入泛素的生物性功能研究提供了切入点。     

纳升喷雾萃取电离源的研制及其在生物分析中的应用

A nano-extractive electrospray ionization (nanoEESI) source was developed and coupled to a commercially linear ion trap mass spectrometer for rapid detection of amino acids and protein in complex matrices, which were manually sprayed into the electrospray plume. The limit of determination is less than 10 ng•L^－1. Experimental data show that nano-EESI-MS is a simple, fast method for in situ applications in multiple disciplines.     

Biochrom专用自动氨基酸分析系统

本文介绍Biochrom专用自动氨基酸分析系统的组成。该系统是目前中国市场上唯一获美国FDA豁免验证并符合联邦药物、食品和化妆品条款510(k)的氨基酸分析系统,已与国际接轨。     

采用计算化学方法确定氨基酸的极化率

本文采用计算化学软件Gaussian03搭建了二十种氨基酸优化结构。采用Gaussian03计算出氨基酸及其离子的能量,并应用二级微扰理论计算了氨基酸的极化率。用简单纯计算方法得到人体必需的、半必需的以及非必需的氨基酸极化率,将它们与实验方法得到的极化率比较,多数符合较好,证明计算方法有一定可取性。此外,研究了极化率与必需和非必需氨基酸的关系。     

地理标志产品山西老陈醋中氨基酸研究

本研究通过氨基酸自动分析仪对地理标志产品山西老陈醋的氨基酸种类和含量进行测定分析,共检出16种氨基酸。通过与非地理标志醋进行比较分析表明,山西老陈醋的氨基酸普遍含量高于非地理标志醋,且其主要的氨基酸种类丙氨酸、亮氨酸、谷氨酸、缬氨酸、脯氨酸和天冬氨酸,与其独特的风味有密不可分的关系,同时山西老陈醋的陈酿年份对其氨基酸含量有复杂的影响。