酶水解-连续流动法测定烟草中的淀粉含量

建立了酶水解-连续流动法测定淀粉含量的方法,即先用5%乙酸水溶液除去烟草样品中的可溶性糖后,再经淀粉酶酶水解,然后用连续流动法测定样品中的淀粉含量。该法的回收率大于93%,RSD=4.37%,并用该法测定了22种烤烟烟叶和8种国产烤烟型卷烟的淀粉含量。      

高效液相色谱法测定烟草中的淀粉含量

研究了用高效液相色谱法测定烟草中的淀粉含量,即先用酸将烟草中的淀粉水解为葡萄糖,再以甘露醇为内标物,用WatersSugar Pak1钙型阳离子交换柱为固定相,0 05g/LEDTA钙钠水溶液为流动相,示差折光仪为检测器测定淀粉水解产生的葡萄糖含量,由葡萄糖含量换算为淀粉含量。该方法的检测限为1 0mg/L,相对标准偏差为1 6%～2 1%,标准回收率在95%～105%之间。并用该方法测定了几种烟草样品中的淀粉含量。     

连续流动法快速测定基因编辑素材中淀粉含量

为实现烟草中淀粉的高通量准确测定,设计了无需样品转移即可实现去除干扰成分、萃取和过滤的样品萃取瓶,并将其作为前处理装置,建立了一种连续流动法快速测定基因编辑素材中淀粉含量(质量分数)的方法。结果表明:①设计的样品萃取瓶可以集萃取、过滤和废液转移为一体,使样品前处理效率得到了有效提高。②淀粉含量具有较好的线性关系(相关系数r=0.999 6);不同添加水平下的平均回收率为96.40%～101.30%,日内和日间RSD均小于3.3%。③8个基因编辑素材样品中淀粉含量与行业标准方法检测结果基本一致。该方法前处理简单快捷,灵敏度高,重复性较好,可以满足烟草样品中淀粉的高通量检测要求。     

流动分析法测定烟草中的纤维素

建立了测定烟草中纤维素含量的流动分析法。采用纤维素酶酶解烟草中的纤维素,利用流动分析仪测定水解液中的葡萄糖。结果表明:①最优酶解条件为:烟粉0.25 g,缓冲溶液60 mL,酶用量0.25 g,水解温度37℃,水解时间24 h;②方法的相对标准偏差(RSD)为2.40%,回收率为96.7%～103.8%,检测限为0.11 mg/mL。该方法适合于烟草中纤维素含量的测定。     

酶解-连续流动分析法测定烟草中的淀粉

先采用耐高温淀粉酶于95℃下处理30min,再用糖化酶于55℃下处理30min,然后采用连续流动分析法测定了烟叶样品中的淀粉含量。方法的相对标准偏差(RSD)为2.0%,回收率在96%~100%之间。并采用该法测定了部分烟叶的淀粉含量。     

高氯酸超声萃取-连续流动法测定烟草中的淀粉

为了快速测定烟草中的淀粉,对比色法进行了3项改进:①用室温下超声萃取代替水浴加热萃取除去干扰物;②用室温下超声萃取代替静置萃取提取烟草中的淀粉;③用连续流动法代替分光光度法测定样品处理液中的淀粉,与比色法进行了对比,并采用改进法测定了15个国产烤烟烟叶和15个卷烟样品中的淀粉含量.结果表明:①改进法的回收率为97%～100%,变异系数为1.58%;②改进法的测定结果较比色法偏高,连续流动法的测定结果略高于分光光度法;③相同年度不同产地的K326的C3F烟叶中淀粉含量差异较大,国产烤烟型卷烟的淀粉含量差异不大,进口混合型卷烟的淀粉含量比其低约1百分点.该法适用于烟草中淀粉的快速分析.     

小麦颗粒宏量组分分层定向酶解的研究

采用高温α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、风味蛋白酶等在保持小麦颗粒完整的条件下,将其宏量组分淀粉和蛋白质逐层定向水解,分别收集各自的水解产物并分析其利用方向。试验结果显示高温α-淀粉酶可将麦粒淀粉完全水解为糊精及少量低分子糖类,进一步糖化得到的糖化液的葡萄糖当量(dextrose equivalent,DE)值为92.48%,残渣蛋白质回收率可达90.06%。剩余残渣使用风味蛋白酶继续水解后,可获得水解度(degree of hydrolysis,DH)为53.58%的蛋白质水解液,其中全氮利用率为80.29%,氨基酸态氮转化率为63.12%。最终酶解后剩余的残渣仍可呈颗粒状态,其中水不溶性膳食纤维含量为80.09%,灰分含量6.85%,脂肪含量6.24%。本研究为小麦的高值化全利用提供了一条新的技术途径。     

不同品种小米粉体外消化性的测定与分析

用α–淀粉酶和淀粉糖化酶酶解消化小米粉样品,采用3,5–二硝基水杨酸比色法(DNS)测定水解过程中产生的葡萄糖,对不同品种小米粉的体外消化特性进行比较,分析淀粉水解速率,快消化淀粉(RDS)、慢消化淀粉(SDS)和抗性淀粉(RS)含量,以及RDS、SDS、RS含量与直链淀粉含量的相关性。试验结果表明:复1、济12、市售的直链淀粉含量分别为1.96%、30.58%、35.58%;快消化淀粉(RDS)含量分别为87.18%、83.41%、80.73%;慢消化淀粉(SDS)含量分别为4.128 9%、8.72%、12.97%;抗性淀粉(RS)含量分别为8.69%、7.87%、6.31%。     

DART-MS/MS法测定烟草及烟草制品中的烟碱

为实时在线检测烟草及烟草制品中的烟碱,通过优化萃取溶剂种类、萃取溶剂用量、进样速率等参数,建立了基于实时直接分析(DART)新型原位电离技术和质谱(MS)技术测定烟草及烟草制品中烟碱含量(质量分数)的方法。采用该方法测定了5种成品卷烟及5种烟叶样品,并与连续流动法检测结果进行了对比。结果表明:(1)用30 mL超纯水萃取、进样速率为0.6 mm/s时效果较好,20 s即可完成样品检测。(2)方法线性范围为0.01~2.00 mg/mL,R2为0.999 1,回收率为98.5%~102.3%,检出限和定量限分别为6.05和20.17 ng/mL。(3)DART-MS/MS法与连续流动法测定结果相对偏差为0.24%~2.74%。该方法快速、可靠,适用于烟草及烟草制品中烟碱的实时在线检测。     

木薯渣中淀粉和纤维素酶解糖化规律的研究

木薯渣经α-淀粉酶、糖化酶和纤维素酶单独酶水解时,其最佳酶用量分别为:2500U/g淀粉、2000U/g淀粉和120U/g纤维素。当木薯渣用α-淀粉酶与糖化酶用量一定时,底物浓度(5%、10%、15%)的增加,最佳酶水解时间(葡萄糖浓度最高时所需要的水解时间)会延长,且糖化酶所需的最佳酶水解时间明显长于淀粉酶。当纤维素酶在酶用量为120U/g纤维素,底物浓度为5%时,来自木薯渣中纤维素全部转化为葡萄糖。α-淀粉酶与糖化酶对木薯渣酶解具有协同作用,可提高最终糖浓度。当α-淀粉酶的酶用量为2500U/g淀粉,糖化酶的用量为3000U/g淀粉时,木薯渣浓度为5%和15%时,酶水解产生的最终葡萄糖浓度为28.98g/L和62.04g/L,其水解效率(相对于原料中淀粉)分别为100%和78.7%。     

螺杆挤压对马铃薯淀粉消化性及血糖指数的影响

目的研究螺杆挤压对马铃薯淀粉消化特性的影响。方法马铃薯淀粉经过螺杆挤压后(过程中淀粉未膨化),采用酶重量法测定挤压后抗性淀粉的含量变化情况,并通过模拟体外消化和动物实验评价挤压后淀粉的消化性能和餐后血糖上升速率。结果螺杆挤压后马铃薯淀粉中抗性淀粉的含量增加了1.08%,酶解时间为0~1.5 h时,马铃薯淀粉快速消化淀粉的含量减少,酶解时间为1.5~6.5 h时,抗性淀粉和慢消化淀粉的含量增加。挤压后的马铃薯淀粉在一定程度上可以降低小鼠的餐后血糖指数。结论螺杆挤压技术可以提高抗性淀粉和慢消化淀粉的含量,减缓餐后血糖上升速率,为马铃薯食品的深度开发提供一定的参考。     

降解上部烟叶大分子物质的复合酶配制与条件优化

为降低上部烟叶中淀粉和蛋白质等大分子成分含量,提高其吸食品质,本研究在统一评价酶活力的基础上,选用4种酶制剂（淀粉酶IV、蛋白酶I、果胶酶I和纤维素酶II）配制复合酶制剂,采用单因素法和Box-Benhnken响应面分析法对影响酶解效果的复合酶量、缓冲液pH、含水量和酶解时间等因素进行优化。分析显示,4个因素对上部烟叶中淀粉和蛋白质降解率的影响顺序为：缓冲液pH > 酶解时间 > 含水量 > 复合酶量。响应面分析结果确定最优酶解条件为：复合酶量1.1单位（即淀粉酶IV 33 U/g烟叶,蛋白酶I 550 U/g烟叶,果胶酶I 220 U/g烟叶,纤维素酶II 220 U/g烟叶）、缓冲液pH 7.7、含水量54 %、酶解时间5.5 h,此时淀粉和蛋白质降解率分别为19.54%和20.03%。本研究中的复合酶制剂及酶解条件可以很好地结合于烟草打叶复烤工艺过程中,具有较好的应用前景。     

Critical study of a procedure for the assay of starch in ligneous plants

Ligneous plants offer a wide variety of matrices that interfere with the assay of starch, which is present at low levels which vary considerably depending on the tissues considered and the phenological stage. Because no reference technique is available, a critical study was developed to validate a method for the enzymatic assay of starch. Analyses were performed on 50 mg samples of plant powder obtained from different parts of peach trees. After the total elimination of soluble components (including glucose) in a water/methanol/chloroform mixture, the starch was extracted from the ligneous residue and solubilised either by autoclaving in an aqueous medium or using 4 M potassium hydroxide (KOH) solution (dispersion stage). After hydrolysis with amyloglucosidase, the starch content was determined indirectly by the enzymatic assay of released sugar. The precision (repeatability and reproducibility), linearity (addition of specified amounts of starch) and accuracy (high rate of starch recovery, 95%) of the method were excellent, whichever dispersion method was employed. The highly significant analogy of the results obtained using such diverse dispersion techniques (autoclaving and dissolution in KOH) was indicative of their specificity and efficacy. The reliability of the enzymatic stages was generally excellent. However, some plant matrices may, during dispersion, release soluble compounds which interfere with amyloglucosidase activity, and this may explain the incomplete recovery of starch. This moderate and unpredictable interference was, in principle, the only critical point concerning the method for the enzymatic assay of starch in ligneous plants with very low starch content, the reliability of which was clearly demonstrated. Copyright © 2003 Society of Chemical Industry     

A Flow Injection System for the Determination of Starch in Starch from Different Origins with Immobilized α-Amylase and Amyloglucosidase Reactors

A heat stable α-amylase (Termamyl) was immobilized on controlled pore glass (CPG) with a pore size of 1 489Å and amyloglucosidase (AMG) was immobilized on a ceramic silica support (Micropil A) with a pore size of 300Å. These enzyme supports were packed into two separate immobilized enzyme reactors (IMERs) which together with a third reactor containing co-immobilized glucose dehydrogenase/mutarotase were incorporated into a flow injection (FI) system for the determination of the total glucose content of starch related poly- and oligosaccharides. Samples of maltose, a maltooligosaccharide mixture, three soluble starches, three amylopectins, two amyloses, glycogen, and native starches from different origins were injected. The degree of hydrolysis was determined by comparing the produced amount of glucose in the FI system with the calculated amount of glucose in the samples and with samples to which had been added and let to react for six hours soluble α-amylase and AMG before injected into the FI system also containing the IMERs. Virtually complete conversion to glucose was obtained for maltose, maltooligosaccharides, two soluble starches and native potato starch. Maximum enzymatic degradation by the starch hydrolyzing enzyme reactors was obtained in most instances except for glycogen (96%), native wheat (88%), rice (93%), and corn starch (83%).     

不同生态区烟叶淀粉生物合成动态比较研究

为解析生态环境对烟叶淀粉生物合成的影响,分别对河南、云南地区烤烟叶片不同发育时期的淀粉粒结构、淀粉含量、淀粉合成相关基因表达和酶活性进行了比较研究。结果表明:1)叶片发育过程中河南生态区烟叶中的淀粉含量较高,叶片成熟期云南烟叶中淀粉含量较高,烤后烟叶中,云南烟叶淀粉含量降低幅度较大;2)云南烟叶中淀粉粒积累丰富,GBSS I基因表达、酶活性水平明显较高,表明云南烟叶中颗粒性淀粉生物合成更为活跃。     

不同成熟度烟叶烘烤过程中生理生化变化研究

对不同成熟度的鲜烟叶在烘烤过程中主要生理生化变化规律及其烤后质量进行了系统的研究.结果表明,不同成熟度烟叶在烘烤过程中淀粉酶活性的变化规律均呈双峰曲线,变黄前、中期各处理烟叶淀粉酶活性的升高和淀粉相对降解量呈动态正相关,但后期相关性不高,说明淀粉的降解与多种因素有关,不仅仅受淀粉酶的影响.烟叶淀粉和色素的降解规律一致,均在变黄期(45℃以前,含水量30%以上)快速降解,特别是烘烤的前48 h降解量最大,之后变缓.淀粉和叶绿素含量随成熟度的提高而明显降低.在烘烤过程中,成熟度适宜的烟叶SOD和POD等保护酶活性较高,而PPO活性较低,棕色化发应不容易发生.适熟鲜烟叶淀粉含量较高,烘烤中降解较快,烤后烟叶外观质量较好,淀粉含量低而糖含量高,主要化学成分比较协调,感官评吸质量较理想.     

Determination of Starch in Tobacco with Iodine Colorimetry

Starchisanimportantcarbohydrate ,themajorityofstarchinfreshtobaccoconvertsintoreducingsugarduringcuring,theresidualstarchincuredtobaccohasnegativelyeffectsontobacco’ssmokingquality[1- 5] ,soitmakessensetodeterminethecontentofstarchincuredtobaccoandcigarettes However,thestarchintobaccohaslongbeenconsideredoneofthetobaccocomponentshardtobedeter minedduetoisolation Thecommonmethodsofdeterminingstarchinplantsarebasedonthehydrolysisofstarchbyacidorenzymeandmeasurereducingsugars[6 - 7] Nevertheles…     

碘显色法测定烟草中的淀粉含量

淀粉是较难测定的烟草组分之一。为了快速准确地测定烟草中的淀粉含量,借鉴食品中淀粉的测定,建立了碘显色法测定烟样中淀粉含量的方法。即在600nm处测定淀粉-碘反应液的吸光度,再根据淀粉标准曲线计算出烟草中的淀粉含量。该方法的平均回收率96 8%,CV=0 97%。与传统的酸解法和酶解法进行了比较,并采用该方法测定了18种烤烟烟叶和15种市售卷烟的淀粉含量。